中药何首乌中二苯乙烯苷的含量测定(HPLC法)(精)
85%以上）溶液冲洗，约30～60分钟（注：不能直
接用有机溶剂冲洗，盐类易析出，堵塞色谱柱，
造成色谱柱永久性损坏；所用水最好是重蒸馏的
水。必须抽滤和脱气）。 最后用纯甲醇冲洗约10 分钟，以保存色谱柱。
（2）不含盐的流动相的冲洗方法：操作结束
后，先用流动相冲洗约10～15分钟，再用
泵”电源、检测器电源和工作站。
2.稳定柱压：换上流动相，将滤头放入流动相中，
开始下列操作：脱气、清洗、调流速。
（1）脱气：打开放空阀，按仪器前面板的[冲洗]
功能键，用大流量冲洗系统，直到流出的液体连
续，证明气泡已经排除；按[冲洗]功能键，关闭
放空阀。
（2）调流速：根据检品要求调“流速”，未
明确“流速”的检品，调流速使柱压在适 宜范围内（不得超过40MPa）。 具体操纵：按“△”或“▽”键，屏幕 显示“MENU1”后按“△”或“▽”输进数
对照品溶液的制备：取2，3，5，4’-四羟基二苯 乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷对照品适量，精密称定， 加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约 0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀 乙醇25m1，称定重量，加热回流30分钟，放冷，
再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，
流动相的配制
1. 根据各药品项下规定的配制方
法，配制各种流动相，用微孔滤
膜（φ0.45μm）过滤。水系溶 液用水膜过滤，有机溶剂（或混 合溶剂）用有机膜过滤。 2. 脱气：配好的流动相需要洗脱 排气泡。方法：用超声波清洗器 超声排气泡，时间约10～20分钟。
开
机
1.打开电源，待电压稳定后，依次打开“高压输液
字至所需流速和最高和最低压力,再按“确
认”键。然后启动泵看压力是否超过范围。
（3） 调波长：根据检品要求调“波长”。 方法：打开“检测器”电源，按“操纵菜 单”键,屏幕显示 “MENU1”后按“△”或 “▽”键进行波长设定,设定是按数字键后 按 “确认”。
打开色谱工作站[ONLINE]
1.设置分析方法：根据检品所需设置分析方法（或直接调出 本检品已保存的方法）等待进样。 2.进样：待色谱工作站中的基线平稳后，进样。用仪器配备 的进样器，或用一次性注射器（进样器使用之前要用纯化 水及供试品润洗2-3次），吸取一定量的待检液（不少于 20ul。因进样器定量环自动控制在20ul。），进样阀处于
含5%甲醇的水冲洗10～20分钟。最后用高
浓度甲醇（含甲醇85%以上）溶液或纯甲醇 冲洗，时间约20～30分钟（注：不能直接 用纯水冲洗，易造成压力过高，活动停止。 所用水最好是重蒸馏的水。必须抽滤和脱 气）。
关闭计算机和检测器
实验完毕及时关闭检测器（便于保护检测
器，甚至可延长检测器的寿命）；根据提 示依次关闭桌面，最后关闭工作站，泵系
用流动相或样品的溶剂，3～5次，再用甲
醇冲洗，3～5次；再旋动进样阀按上法冲
洗，3～5次；最后把进样器上的进样针拔
掉，安上配备的冲洗头（白色的圆形配件） 用甲醇冲洗3～5次，即可。将进样针插到 进样器上保存，盖好红色保护盖。
2.色谱柱的冲洗
（1）含盐的流动相的冲洗方法：操纵结束后，先用
纯化水或含甲醇5%（最高浓度不超过20%）的水冲
静置，上清液滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定， 即得。
注：本品按干燥品计算，含2，3，5，4’四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷
(C20H22O9)不得少于1.0％。
依利特 P230/UV230+/EC2000型效 液相色谱仪操作规程
2．试药：何首乌、2，3，5，4’-四羟基二苯 乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷对照品、乙腈、稀 乙醇。
三、实验内容
避光操作。照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键
合硅胶为填充剂；以乙腈一水(25：75)为流动相；
检测波长为320nm。理论板数按2，3，5，4’-四羟 基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷峰计算应不低于 2000。
LODE处，进样，然后快速扳动进样阀手柄，到INJECT状态，
仪器自动启动数据采集。 注意：进样前基线要走平稳，且检测器已预热半个小时。
3.等样品分析完毕后基线平稳，方能结束数
据采集。
4.打印结果：点“报告”项下的打印信息设 置选项，进行信息设置后。点击“文件” 菜单先预览，再打印。
冲
洗
1.进样阀的冲洗：将进样针插进进样器，先
统。
清
理
每次操作完毕后，应及时清理所用物品，
废液倒到废液容器内，所用的玻璃仪器及
时送到洗刷池。实验台面、仪器表面用柔
软的抹布擦拭干净，时刻保持实验台和仪
器的整洁。
药物分析与检验技术 实训讲义
实训十六
中药何首乌中二苯乙烯苷 的含量测定（HPLC法）
一、目的要求
1．掌握中药有效成分的HPLC法测定方法及一
般操作规程。
2．熟悉高效液相色谱仪的使用方法及其操作
注意点。
二、仪器与试药
1．仪器：高效液相色谱仪、容量瓶、具塞
锥形瓶、移液管、电子分析天平、球形冷凝
管、电热套。
关于制何首乌的提取工艺
关于制何首乌的提取工艺作者：牛志刚于海丽来源：《健康必读·下旬刊》2010年第11期【中图分类号】R932 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2010）11-0117-01【摘要】目的:以制首乌中二苯乙烯苷的含量为考察指标，优选出最佳且适合大生产的工艺条件。
方法:采用高效液相色谱(HPLC)法检测样品中的二苯乙烯苷含量，对提取、浓缩及干燥工艺条件进行比较，使二苯乙烯苷尽可能少地被破坏。
结果:采用70%的乙醇回流提取3次，第1次10倍量提取2 h，第2次8倍量提取2 h，第3次8倍量提取1 h，在碱性条件真空浓缩后喷雾干燥即可。
结论该工艺科学、可行、稳定，适合大生产。
【关键词】制何首乌;干燥;工艺制何首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨之功效，制首乌颗粒具有增强免疫功能、抗氧化作用、延缓大脑衰老、提高 DNA修复功能、延长寿命、能促进肠蠕动、抑制甘油三酰(TG)及胆固醇在肠道中的吸收,从而降低血脂，降低胆固醇,改善脂肪代谢等多项功能，其有效成分为二苯乙烯苷类化合物。
临床用于血虚萎黄，眩晕耳鸣，须发早白，腰膝酸软，肢体麻木，崩漏带下，高血脂等。
本实验主要对制首乌的提取、浓缩及干燥工艺进行了筛选。
1 仪器与试药Agilent 1100 型高效液相色谱仪。
制何首乌药材，购于河北安国市场，经鉴定为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根炮制加工品;流动相所用甲醇为色谱纯试剂,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯;二苯乙烯苷对照品：购自中国药品生物制品检定所(批号：110844-200404)。
2 方法与结果2.1 二苯乙烯苷含量测定方法(１）色谱条件与系统适用性试验色谱柱：C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(22∶78);柱温30℃，流速1.0 ml/min;检测器为紫外检测器;检测波长320 nm。
(2）对照品溶液的制备精密称二苯乙烯苷对照品15.20 mg，置50 ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.304 mg/ml的二苯乙烯苷对照品溶液。
RP-HPLC法测定生、制首乌中二苯乙烯苷和大黄素的含量
为 Ｍ ｉｉ 纯 化 水 。 ｌ－ ｌＱ
Ｈ ＰＬＣ． Ｍ ｅ ｈｏ Ｔｈｅ ｃ ｎｔ ｎ ｓ ｏ ｔ ｕ ｅ ｎｄ ｒ ｈｅ ｎ ｏｌ ｏｎｕ ｕｌｉｌ ｕｍ ｅ ｅ ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｅ ｂ Ｈ ＰＬＣ． Ｒｅ ｕ ｔ ｔ ｄ ｏ ｅ ｔ ｆ ｏｌ ｙｌｎｅ ａ ａ ｃ ｎ ｉ ｐ ｙｇ ｍ ｍ ｔｆｏｒ ｗ ｒ ｔｒ ｎ ｄ ｙ ｓ ｌｓ
【中 图分 类号 】 Ｒ ３ ． ； ８ ． ９１６Ｒ２２６ 【 献 标 识 码 】 Ａ 文 【 章 编 号】 １ ７ — ５ １ ２ １ ） ６１ ０ — ３ 文 ６ ２３ １ （ ０ ０ ０ —０ １０
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｆ ｔ ｌ ｙ ｅ ｎｄ ａ ｃ ｅ ｎ ｐ ｌ ｇ ｎ ｍ ｕ ｔｆ ｏ ｕ ｔ ｒ ｎａ ｉ ｎ ｏ ｏ ｕ ｌ ｎｅ ａ ｒ ｈ ｎ ｉ ｏ ｙ ｏ ｕ ｍ ｌｉ ｌ ｒ ｍ ｔ ｗｉｈ ＲＰ— ＰＬＣ Ｈ
西部 医 学 ２ １ ０ ０年 ６月 第 ２ ２卷 第 ６期 Ｍｅ ｓ Ｃ ｉａ Ｊ ｎ ０ ０ Ｖ １ ２ ， ｏ ６ ｄＪ Ｗｅ ｔ ｈ ｎ ， ｕ ｅ２ １ ， ｏ． ２ Ｎ ．
HPLC法测定何首乌中二苯乙烯苷的含量
［ ｙ ｗ ｒ ｓ Ｒａｉ ｏｙｏ ｉ ｈｆ ｒ ； ， ， ， ＂ｔｔ ｈｄｏｙｔｂ ｎ － － － ｇｕ ｏｉｅ Ｈ Ｌ ； ｓｓｍｅ ｔ Ｋｅ ｏ ｄ ］ ｄｘｐ ｌｇ ｎ ｍｕ ｉｏｉ ２ ３ ５ ４－ｅｒ ｙ ｒｘ ｓ ｌｅ ｅ Ｏ １ Ｄ— ｌｃｓ ； Ｐ Ｃ Ａｓｅｓ ｎ ｌ ａ ｉ ３ ｄ
ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｏ ｔｎ ｆ２ ３ ５ ４ －ｅｒ ｈ ｄ ｏ ｙｔ ｂ ｎ － １－ ｇｕ ｏ ｅｅｍｉａｉ ｆｃ ｎ ｅ ｔｏ ， ， ， ｔｔａ ｙ ｒ ｘ ｓｉ ｅ ｅ Ｏ－３ Ｄ－ ｌｃ － ｏ ｌ
ｓ ｄ ｎ ｒ ｄｉ ｏ ｙ ｏ ｕｌｉ ｏ ｉ ｉ ｅ ｉ ａ ｘ ｐ ｌ ｇ ｎｉｍ ｔｆ ｒ ｌ
ａ ｅ ｒ ｃ ｖ ｒ ｎ ｅ ｉｉ ｎ ｗｅ ｅ ９ ９ ％ ．Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ：Ｔｈ ｔ ｏ ｓ ｓｍｐ ｅ ｃ ｕ ａ ｅ ａ ｄ ｃ ｎ ｂ ｆ ｃ ｉ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｔ ｇ ｅ ｏ ｅ ｙ ａ ｄ ｒ ｃ ｓｏ ｒ ９。６ ｎ ｌ ｓｏ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｉ ｉ Ｌ ，ａ ｃ ｒ ｔ ， ｎ ａ ｅ ａ ｅ ｆ ｔ ｔ ｏ ｏ ｅ ｖ
［ 章编 号】１ ７ — ７ １２ １ ）６ ｃ一 ４ — ２ 文 ６ ４ ４ ２ （０ ０ ０ （ ）０ １ ０
ＨＰＬＣ ｔ ｒ ｉ ｔｏ ｏ ｔｌ ｎｅ ｇ ｕｃ ｓｄｅ ｉ ｌ ｇ ｎ Ｄｅ ｅ ｍ ｎａ ｉ ｎ ｆｓｉ ｂｅ ｌ ｏ ｉ ｎ ｐｏ ｙ ｏ ｕｍ ｕｌｉ ｏ ｕｍ ｏ ｔ ｎｔ ｍ ｔｆ ｒ ｌ ｃ ｎｅ
３ ５ｎ Ｔ ｅｆｏ ｒｔ ｓ １０ ｍｌ ｎ ａ ｄ ｔ ｅｃ ｌｍｎ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ｓ３ ２ ｍ． ｈ ｗ ａｅ ｗａ ． ／ ｎ ｈ ｏｕ ｅ ｅａｕ ｅｗａ ０℃ ．Ｒｅ ｕｔ ：Ｔ ｅ ｍｅｈ ｄ ｐ ｏ ｅ ｏ ｂ ｉ ｅ ｒｉ ｌ ｍｉ ｓｌ ｓ ｈ ｔｏ ｒ ｖ ｄ ｔ ｅｌｎ ａ ｎ ｔｅ ｒｎ ｅ ａ ．０ — ．０ ｇｗｉ ｏｒｌｔｏ ｏ ｆ ｃｅ ｔｏ ．９ ． ｈ ｉｅ ｒｆｒ ｌ ｓ Ｙ＝１ ２９ Ｘ＋ ５６ ． ｅａ ｅ－ ｈ ａ ｇ ｔ０２ ０ ４０ ０ Ｉ ｔ ｃ ｒｅａｉｎ ｃ ｅ ｉｎ ｆ０９ ９ ７ Ｔ ｅ ｌ ａ ｏｍｕａ ｗａ ｘ ｈ ｉ ｎ ５ ．２ ４ ．７ Ｔｈ ｖ ｒ
野生与栽培何首乌中二苯乙烯苷含量测定
（ ．５ ０４ ｍ） 滤过 ， 即得供试溶液 。
２４ 标准 曲线绘制 ． 精 密吸取 对照 品溶 液 ０ ５２ ０ ３ ５ ． ，． ，． ， ５０ ６ ５ ８０，０ ｌ置于 １ｍｌ 量瓶 中 ， ． ，． ，． １ ｍ ， ０ 容 用稀 乙醇稀 释 至
为探索何 首乌 的栽培条件及栽培技术提供参考依据 。
（ ．９４ ／ １ 。 ０２ ６ ｍｇｍ ）
２ ３ 供试 品溶 液 的制 备 取何 首 乌粉 末 （ 四 号筛 ） ． 过 约
０２ ， 密称 定 ， ． ｇ精 置于烧 瓶 中 ， 密加 入稀 乙醇 ２ ｍ ， 密 精 ５ ｌ精 称定重量 ， 加热 回流 ３ ｍ ｎ 放 冷。再精 密称 定重 量 ， ０ ｉ， 用稀 乙醇 补 足 减 失 的 重 量 ， 匀 ， 上 清 液 用 微 孔 滤 膜 摇 取
１３ 对 照品 ． １４ 药 材 ．
制 品检定所 ， 批号为 ０ ４ －２ ０ ０ ） ８４ ００ ３ 。
栽培 品由贵州省 中药材种植指导 中心、 施秉县 中药材办公室提供 ， 生品 由作 者 自己采集 。何 首乌野 生 野 品和栽 培品各 ４种样品 ， 贵 阳中医学 院药学 系生药教 研 经 室杨锦纲 副教授鉴定 ， 为蓼科 植物何 首乌 （ ｏ ｇｎ ｍ ｍｕ Ｐ ｌ ｏｕ ｌ ｙ — ｔ ｏｕ ｈｎ ． 的干燥块根 。 ｌ ｆ ｉ ｒｍ Ｔ ｕ ｂ ） 本 实验所用 药材在 ４ ℃ 一 ０ ０ ５ ℃条件下干燥 ４ ， ｈ 粉碎过 ４号筛备用 。 ２ 实验方法与结果 Ｊ ２ １ 色谱条件与系统 ． 用十 八烷基硅 烷键合 硅胶 为填充 剂 ： 腈一 水 （ ５： ７ ）为 流 动 相 ＷＧ — Ｃ８ 谱 柱 乙 ２ ５ Ｙ 。色
１０ ．４ １０ ．８ ｘ＝１０ ． １ Ｒ Ｄ＝ ．５ （ ５ 。 １８ ５ ，１７ ２ ： １６ ０ ； Ｓ ０ ７ ％ ｎ： ）
何首乌不同部位二苯乙烯苷含量测定
２ １２ 对 照 品溶 液 的制备 ．．
Ａ ｉｎｌ０ ｇｅｔ１０高效 液 相 色 谱 仪 （ 国 Ａ ｉｎ 公 ｌ 美 ｇｌ ｔ ｅ
２ １３ 系统 适用 性试 验 ． ．
Байду номын сангаас
司 ） ｅ ｏ ｈｌ 转蒸 发仪 （ 国 Ｈ ｉｏ ｈ公 、Ｈ ｉ ｌ ｂ２旋 ｄｐ ａ 德 ｅ ｌ ｄｐ 司 ） Ｓ一１２０ 、Ｈ ０６ Ｄ超 声 波 清 洗 器 （ 津 市 恒 奥 科 天
技发 展有 限公 司 ） Ｚ 、Ｄ Ｆ一６ ５ Ｂ真 空 干 燥 箱 （ ００ 上
羟基二 苯 乙烯一一 — 一 萄 糖 苷 （ ， ， ，’ｅ ａ ２Ｏ ＢＤ 葡 ２ ３ ５ ４一 ｔ— ｔｒ
ｈ ｄｏ ｙｓｌｅ ｅ２Ｏ ＢＤ ｇ ｃｓ ｅ ｙ ｒｘ—ｔｂ ｎ 一一 — — —ｌ ｏｉ ，简 称 Ｔ Ｇ） 自 ｉ ｕ ｄ Ｓ
分析纯 ，甲醇 、乙腈 为色谱 纯 （ ｉ ｅ 公 司产 ） Ｆ ｈｒ ｓ ，
地上部分二苯 乙烯苷含量较低不能作为提 取二苯 乙烯苷 的原料开 发利用 。认 为在 中医临床 上将何 首乌与何 首乌 藤分别使用有一定依据 。 关键词 ：何首乌 ；不 同部位 ；二苯 乙烯苷 ；含量测定
中 图分 类 号 ：Ｒ ８ ２４ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １０ － ２ ２ （０ ８ 叭 —０ Ｏ — ３ ０ ０ ７３ ２０ ） ｏ７
基 金 项 目 ：国 家 自然 科 学 基 金 资 助 （ Ｏ ：３ ７０ １ ） Ｎ ０ ６ ３ ２
收稿 日期 ：２ｏ — １—２ ０７ ０ ２
《中药学专业知识(一)》基础习题
《中药学专业知识（一）》基础习题1.在七情配伍中，黄芪与茯苓同用的配伍关系是 [单选题] *A.相须B.相使(正确答案)C.相畏D.相杀E.相恶答案解析：相使即性能功效有某种共性的两药同用，一药为主，一药为辅，辅药能增强主药的疗效。
如以补气利水的黄芪为主，配以利水健脾的茯苓为辅，茯苓能增强黄芪的补气利水效果等。
故选B。
2.根据方剂的组方原则，关于佐药在方中所起作用的说法，错误的是 [单选题] *A.协助君、臣药加强治疗B.消除或减缓君、臣药的毒性或烈性C.直接治疗次要兼证D.与君药药性相反而又能在治疗中起相成作用E.针对兼病或兼证起治疗作用(正确答案)答案解析：佐药意义有三：一为佐助药，即协助君、臣药加强治疗作用，或直接治疗次要兼证的药物；二为佐制药，即用以消除或减缓君、臣药的毒性或烈性的药物；三为反佐药，即根据病情需要，使用与君药药性相反而又能在治疗中起相成作用的药物。
佐药的药力小于臣药，一般用量较轻。
故选E。
3.采用炒黄法炮制时，宜用中火炒制的饮片是 [单选题] *A.炒王不留行(正确答案)B.炒牛蒡子C.炒槐花D.炒芥子E.炒莱菔子答案解析：取净王不留行，投入预热容器内，中火拌炒至大部分爆花即可得炒王不留行。
故选A4.含有吡咯里西啶类生物碱，具有肝、肾毒性和胚胎毒性的中药是 [单选题] *A.雷公藤B.防己C.千里光(正确答案)D.苦参E.王不留行答案解析：解析：千里光中所含有的生物碱主要为吡咯里西啶类生物碱，主要化学成分有千里光宁碱、千里光菲宁碱及痕量的阿多尼弗林碱等；同时含有黄酮苷等成分。
千里光具有肝、肾毒性和胚胎毒性，在使用时应该严格注意。
故选C。
5.以下不属于氧苷的是 [单选题] *A.酚苷B.氮苷(正确答案)C.酯苷D.醇苷E.吲哚苷答案解析：解析：氧苷根据苷元的不同可以分为醇苷、酚苷、氰苷、酯苷和吲哚苷。
氮苷的苷键原子为N，不属于氧苷。
故选B。
6.主要含醌类化合物的是 [单选题] *A.人参B.紫草(正确答案)C.细辛D.斑蝥E.蟾酥答案解析：紫草的主要化学成分为萘醌类化合物，包括乙酰紫草素、欧紫草素、紫草素等；人参中含有皂苷、多糖和挥发油等多种化学成分；细辛中的主要化学成分为挥发油、木脂素类和黄酮类；斑蝥中主要含单萜类成分：斑蝥素，还含脂肪、树脂、蚁酸及多种微量元素等。
HPLC法测定生发乌发口服液中二苯乙烯苷的含量
关键词
生发鸟发 口服液； 二苯 乙ｏ ７ １ ９ （ ２ ０ １ ２ ） ０ ｌ 一 ０ ０ ５ ７ — ０ ３
中图分类号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． １
Ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｓ ｔ ｉ ｌ ｂ ｅ ｎ ｅ Ｇ ｌ ｕ ｃ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ｉ ｎ Ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ ｆ ａ Ｗ ｕ ｆ ａ Ｏ ｒ ａ ｌ Ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ Ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ
Ａ ｇ ｏ ｏ ｄ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ ｒ ｓ ｔ ｉ ｌ ｂ ｅ ｎ ｅ ｇ ｌ ｙ ｃ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ ｗ ａ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ １ ． ５ ２ ￣ ７ ５ ． ７ ６ ｇ ／ ｈ ｄ ， ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ ， ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｆ ｏ ｉ ｔ ｗ ａ ｓ ９ ９ ． ２ ３ ％ｗ ｉ ｔ ｈ ＲＳ Ｄ ｆ ｏ １ ． ９ ８ ％（ ｎ ＝ ６ ） ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ： ｅ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ｆ ｏ ｓ ｔ ｉ ｌ ｂ ｅ ｎ ｅ
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 法测定生发乌发 口服液中 二苯 乙烯苷 的含量
刘 倩 黄权芳 广西 中医药大学第一附属 医院 ５ ３ ０ ０ ２ ３ 南宁市东葛路８ ９ — ９ 号 摘 要 目的 ： 建立生发乌发 口 服液 中二苯乙烯苷含量测定 的方 法。方法 ： 采用Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 法进行测定 ， 色谱柱 为Ｄ ｉ ａ ｍ ｏ ｎ ｓ ｉ ｌ Ｃ 。 ８ 柱（ ４ ． ６ ｍ ｍ ｘ ２ ５ ０ ａ ｒ ｍ ． ， ５ ｍ ） ， 流动相为乙腈一 水（ １ ６： ８ ４ ） ， 柱温为室温， 检测波长为３ ２ ０ ｎ ｍ 。 结果： 二苯 乙烯 苷在１ ． ５ ２ — ７ ５ ． ７ ６ Ｉ Ｔ ｌ ｌ 的范 围内有 良好 的线性关 系 （ ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ ） ，平 均加样 回收率为９ ９ ． ２ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ 为 １ ． ９ ８ ％（ ｎ ＝ ６ ） 。结论 ： 本实验建立的二苯 乙烯苷含量测定方法简便 ， 准确 ， 重复性好， 可用于生发乌发 口服液的质
近红外漫反射光谱法快速测定首乌丸中二苯乙烯苷的含量
中国药房2017年第28卷第18期China Pharmacy 2017V ol.28No.18首乌丸由制何首乌、熟地黄、桑椹等中药组成，具有补肝肾、益精血、乌须发的功效，可用于治疗肝肾两虚、头晕目花、耳鸣、腰酸肢麻、须发早白、高血脂等症[1]。
该制剂现收载于2015年版《中国药典》（一部），采用高效液相色谱法（HPLC ）作为测定首乌丸中二苯乙烯苷含量的标准方法，但该方法操作较为烦琐，不仅费时费力，而且易破坏样品[2]。
近红外漫反射光谱法（Near infrared diff-use reflectance spectroscopy ，NIDRS ）作为一门绿色分析技术，通过扫描样品的近红外光谱，可以得到样品中有机分子含氢基团的特征信息[3]，在药物的定性、定量分析方面具有广泛的应用前景[4-7]。
鉴于此，本课题组采用NIDRS 法建立了快速测定首乌丸中二苯乙烯苷含量的方法，以期为完善该制剂的质量标准提供参考。
1材料1.1仪器1120型全自动HPLC 仪，配备SIL-20A 自动进样器、SPD-20A 紫外检测器、LC solution 工作站（日本Shim-adzu 公司）；Nicolet 6700型傅里叶变换近红外光谱仪，配有漫反射积分球、样品旋转器和石英样品杯、OMNIC 光谱采集软件和TQ 8.0分析软件（美国Thermo 公司）；BIY 211b 型万分之一电子分析天平和AY 120型十万分Δ基金项目：广东省科技计划项目（No.2009B 030801044）＊硕士研究生。
研究方向：中药资源与质量。
E-mail ：xila_1990@#通信作者：教授，博士。
研究方向：中药资源、中药质量标准及中药新药研究。
E-mail ：shengguo_ji@ 近红外漫反射光谱法快速测定首乌丸中二苯乙烯苷的含量Δ刘喜乐＊，贾灿潮，姬生国#（广东药科大学中药学院，广州510006）中图分类号R 917文献标志码A 文章编号1001-0408（2017）18-2539-04DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2017.18.26摘要目的：建立快速测定首乌丸中二苯乙烯苷含量的方法。
中药何首乌中二苯乙烯苷的含量测定(HPLC法)(精)
再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，
静置，上清液滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定， 即得。
注：本品按干燥品计算，含2，3，5，4’四羟基二苯乙烯-2-O-β-D一葡萄糖苷
(C20H22O9)不得少于1.0％。
依利特 P230/UV230+/EC2000型效 液相色谱仪操作规程
统。
清
理
每次操作完毕后，应及时清理所用物品，
废液倒到废液容器内，所用的玻璃仪器及
时送到洗刷池。实验台面、仪器表面用柔
软的抹布擦拭干净，时刻保持实验台和仪
器的整洁。
洗时间约20～30分钟。再用高浓度甲醇（含甲醇
85%以上）溶液冲洗，约30～60分钟（注：不能直
接用有机溶剂冲洗，盐类易析出，堵塞色谱柱，
造成色谱柱永久性损坏；所用水最好是重蒸馏的
水。必须抽滤和脱气）。 最后用纯甲醇冲洗约10 分钟，以保存色谱柱。
（2）不含盐的流动相的冲洗方法：操作结束
后，先用流动相冲洗约10～15分钟，再用
字至所需流速和最高和最低压力,再按“确
认”键。然后启动泵看压力是否超过范围。
（3） 调波长：根据检品要求调“波长”。 方法：打开“检测器”电源，按“操纵菜 单”键,屏幕显示 “MENU1”后按“△”或 “▽”键进行波长设定,设定是按数字键后 按 “确认”。
打开色谱工作站[ONLINE]
1.设置分析方法：根据检品所需设置分析方法（或直接调出 本检品已保存的方法）等待进样。 2.进样：待色谱工作站中的基线平稳后，进样。用仪器配备 的进样器，或用一次性注射器（进样器使用之前要用纯化 水及供试品润洗2-3次），吸取一定量的待检液（不少于 20ul。因进样器定量环自动控制在20ul。），进样阀处于
何首乌药效成分3种提取方法比较
何首乌药效成分3种提取方法比较杨劝生【摘要】目的:研究中药材何首乌的不同提取方法,比较所提取的成分,探索优化何首乌的提取工艺.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)分析测定何首乌渗漉提取、75℃回流提取、89℃回流提取的提取液的二苯乙烯苷、蒽醌类化合物含量,并进行3种不同提取方法的提取液化学成分指纹图谱相似度及所得干物质考察.结果:3种提取方法提取的二苯乙烯苷、蒽醌类化合物的含量基本接近.结合蒽醌的含量89℃回流提取略高于渗漉提取;75℃回流提取略低于渗漉提取.何首乌3种不同提取方法制备的供试品溶液的特征指纹图谱与共有模式的相似度均大于0.95,符合国家对药材指纹图谱研究的技术要求(大于0.9).结论:3种不同提取方法制备的指纹图谱相似程度高,其提取液化学成分差异不大.%Objective: To study the different extract methods of herb HeShouWu' compare extracted components,and explore as well as optimize the extraction process of HeShouWu. Methods: The HPLC method was used to analyze and determine the contents of stilbene glycoside, anthraquinones in HeShouWu extract by percolation extraction, reflux extraction at the tempera tures of 75℃and 89℃. The similarities and dry matters of the fingerprint of chemical components from extracts by three different extract methods were investigated. Results: The contents of stilbene glycoside and anthraquinones extracted by three extract methods were approximately equal. Contents of combined anthraquinones by89℃reflux extraction were slightly superior to percolation extraction; Contents of combined anthraquinones by 75℃reflux extraction were slightly lower than percolation extraction. The characteristic fingerprint andsimilarity of common patterns of HeShouWu test solution prepared by three different extract methods were all greater than 0.95 which satisfied the technical requirements for the research of the fingerprint of Chinese medicinal herbs(> 0.9). Conclusion: The similarity degree of fingerprints prepared by three different extract methods is high and there is not an obvious difference in the chemical components from its extract.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2016(029)008【总页数】3页(P35-37)【关键词】何首乌;高效液相色谱法;渗漉;回流;指纹图谱【作者】杨劝生【作者单位】甘肃天水岐黄药业有限责任公司,甘肃天水 741018【正文语种】中文【中图分类】R284.2苁蓉通便口服液是甘肃天水岐黄药业有限责任公司独家研制的专利产品，以肉苁蓉、何首乌、枳实、蜂蜜科学组方，具有滋阴补肾，润肠通便的功效。