试验十七烟草原生质体融合

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烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究近年来,烟草作物的发展速度越来越快,它是植物群体中最重要的种类之一,全球烟草的消费量在不断上升,这给烟草的种植带来了巨大的挑战。

然而,由于烟草作物的育种周期较长,多样性较低,遗传改良的速度慢,基因的转移率低,现有的育种方法难以满足市场的需求。

为了提高烟草作物的抗逆性和适应性,改善叶肉质量,提高烟草的抗病性,人们需要更有效地研究育种方法。

烟草种间叶肉原生质体融合是一种新型的育种方法,能够有效地增加遗传多样性,改善烟草的叶肉质量。

烟草种间叶肉原生质体融合是指用特定药剂将来自不同烟草链球菌属的细菌株分离出来,以融合其原两细菌株,从而得到新的融合细菌株,从而改变原烟草品种的遗传性状。

烟草种间叶肉原生质体融合是一种廉价而简单的育种方法。

它可以在不引起突变或染色体重组的情况下,实现遗传信息的平衡。

在烟草原生质体融合的过程中,可以实现柔和的遗传变异,避免基因的失真。

同时,它也是一种有益的育种方法,可以提高新品种的抗病性、抗旱性、产量和质量等。

烟草种间叶肉原生质体融合的研究主要包括以下几个方面:首先,进行系统的研究和分析,以探索烟草原生质体融合的可能性及其影响,其次,从基因水平上分析融合后烟草叶肉原生质体中的基因差异,进一步确定烟草种间因子之间的关系,第三,建立详细的烟草原生质体融合方法,并进行实验验证。

以上分析表明,烟草种间叶肉原生质体融合是一种有效的、可行的育种方法,可以帮助烟草育种者获得新的品种,满足市场的需求。

因此,烟草育种者应该加大对烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究力度,以促进植物品种改良和提高烟草质量。

综上所述,烟草种间叶肉原生质体融合是一种有效的烟草育种技术,可以提高烟草品种的多样性,为植物育种提供有效的手段。

然而,目前有关烟草种间叶肉原生质体融合的研究仍然十分有限,未来应该加大烟草种间叶肉原生质体融合方法研究的力度。

只有通过更多的实验,深入的研究,才能找到适合自己情况的有效的烟草育种方法,最终实现烟草品种改良与提高。

植物细胞融合(实验)

植物细胞融合(实验)
On cell division nuclear material condenses together and hybrids cells are formed that contain DNA from both parental lines.
Potato plants growing in a test tube
Phenotype of intraspecific diploids of S. tuberosum
US-W9310.3 Somatic hybrid US-W9545.99
在原生质体细胞膜与膜紧密接触的部 位,膜内蛋白质颗粒易位并凝聚。接着可 能是相邻的剥去蛋白质的细胞膜间的类脂 质与类脂质反应。继之,类脂质分子的扰 动和重排导致接触的细胞膜局部发生融合, 形成很小的细胞质桥,之后它逐渐扩大, 两个原生质体最终融合。
使用化学促融剂时,Ca2+是必需的。 关于Ca2+的作用机理,有的认为是Ca2+和 PO43-形成不溶于水的配合物,成为细胞间 的钙桥,由此引起融合。也有解释为Ca2+ 结合到带负电磷脂的电离基上,使磷脂分 子在膜上相互分离,由此引起融合。
Putative somatic hybrid plants
A fertile somatic hybrid
Phenotype of somatic hybrids clearly shows characteristics of both parents
S. brevidens somatic hybrid S. tuberosum
电融合法原生质体的融合结果
原生质体成串(40×)
原生质体融合(图1)
电融合法原生质体的融合结果
原生质体融合(图2) 原生质体融合(图3)

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究烟草(NicotianatabacumL.)是众多烟草品种中最重要的一种,在植物学上它以高产量、易于栽培和高品质等特点被广泛应用。

烟草叶肉原生质体(NT-L-protoplasts)被认为是一种重要的转基因工具,可以用来引入预定遗传物质到植物,从而调控和定向改变植物形态和性状。

最近研究发现,不同烟草品种之间的叶肉原生质体融合技术可用于合成叶肉原生质体和类似细胞,可用于植物转基因研究以及开发植物新品种。

一般来说,烟草种间叶肉原生质体融合分为三个步骤,即叶肉原生质体浓缩分离、原生质体融合、重组叶肉原生质体复制并诱导逆境基因表达。

首先,在烟草叶片表皮层下细胞悬浮液中,可以通过低温及抗菌剂(如多甲唑酮)的处理,制备能够分离的烟草叶肉原生质体。

在处理过程中,悬浮液中的植物细胞会受到压力,细胞膜上的抗压蛋白会被激活,促使细胞膜发生融合,从而得到原生质体。

其次,利用浓缩后的原生质体和不同品种烟草叶肉细胞悬液,进行叶肉原生质体融合,从而获得重组叶肉原生质体。

最后,利用原生质体复制系统,可得到大量细胞复制物,即原生质体复制体,用以实现烟草种间叶肉原生质体的快速复制和广泛应用。

烟草种间叶肉原生质体融合技术可以获得新的烟草品种,它可以实现新品种的调控、改良和识别,为烟草科植物遗传改良提供了新方法。

因此,为了探索烟草种间叶肉原生质体融合技术的机理,并有效地应用烟草叶肉原生质体技术,未来研究将继续探究叶肉原生质体融合的机制,并且通过这些方法持续改良烟草种间叶肉原生质体的性能,期望获得更高品质的烟草新品种。

因此,研究烟草种间叶肉原生质体融合技术,将有助于提高烟草品种的品质和产量,为烟草科植物遗传改良、生物质能利用及烟草品种改良等提供新的途径。

未来,可以通过进一步开展烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究,以及开发新方法和技术,以改善烟草品种品质,为烟草行业发展带来新的变化。

综上所述,烟草种间叶肉原生质体融合技术的研究具有重大的意义,它不仅可以提高烟草品种的品质和产量,而且还可以为烟草科植物遗传改良、生物质能利用和烟草品种改良提供新的方法。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究烟草种间叶肉原生质体(cytoplasmic hybridization, CH)融合技术是一种添加一种新新基因到一个原有种类上,从而使烟草获得更优良性状的一种技术。

烟草种间叶肉原生质体融合技术是基于遗传资源优化利用及烟草新品种选择,它能够极大地改善烟草品质,以及使种质资源有效地优化充沛,这种技术的应用具有重要的经济价值,是烟草育种技术的重要方向之一。

烟草原生质体融合方法包括原生质克隆和原生质两步双链复制聚合。

原生质克隆方法主要利用受器原生质体和源原生质体物质进行大量同源内涵体重组,将源原生质体遗传信息带入到受器原生质体中,实现定向的基因组修饰,最终形成兼容受器原生质体的原生质克隆。

原生质两步双链复制聚合,是利用受者原生质体作为双链复制的受体,将源原生质体的信息带入到受者原生质体中,实现定向的修饰,最终形成融合原生质体群。

融合原生质体群不仅表现出受器原生质体特征,也表现出源原生质体特征,从而达到优化烟草种质资源的目的。

烟草种间叶肉原生质体融合技术,可以极大改善烟草品质,解决烟草种质资源优化利用及烟草新品种选择上所出现的问题,从而获得优良性状较多的新烟草品种,提高烟草生产产量和收益,实现烟草的经济价值。

但是,烟草种间叶肉原生质体融合技术背后的机理较为复杂,需要大量的基础研究和实践证明,从而使这项技术的应用更加广泛。

此外,烟草种间叶肉原生质体融合技术也必须考虑烟草营养要素和香气物质的改变,以及生物安全等问题,以免带来不良影响。

总之,烟草种间叶肉原生质体融合技术为解决烟草品质优化及新品种获取上的困难提供了新的思路和途径,但其背后的机制的了解和实践应用仍有许多欠缺,需要继续深入开展研究与实践,并且考虑到烟草营养要素和香气物质的改变,以及生物安全方面的影响,从而使这项技术的应用更加完善。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究烟草作为一种重要的经济作物,世界各地都有烟草的种植和加工。

烟草叶肉原生质体是研究烟草发育和分子遗传育种重要组成部分,目前正在快速发展中,它在烟草遗传育种过程中起着重要作用。

现有方法主要是利用烟草的一些特性,如长稻、短稻和水稻的离体叶肉,利用逆熵融合的方法融合不同类烟草原生质体,以获得烟草新的优良性状。

烟草的叶肉原生质体融合是一种重要的技术,其技术有效性决定了育种的成败。

目前,烟草叶肉原生质体融合技术主要包括电解质融合、穿透和渗析融合、逆熵融合和烟草低温冻存原生质体融合等方法,每种方法都有其特定的优势和局限性。

本研究以烟草种间叶肉原生质体融合技术为研究对象,以确定其可行性为目标。

为了实现该目标,首先采用了烟草品种进行烟草叶肉原生质体融合的实验。

其次,本研究在此基础上,采用下列方法对叶肉原生质体进行融合:烟草电解质融合、烟草穿透和渗析融合、烟草逆熵融合以及烟草低温冻存原生质体融合;最后,本文着重研究了融合后的烟草叶片和植株的形态和生理特性。

实验结果表明,烟草叶肉原生质体融合方法均能够有效融合原生质体。

当以电解质方法融合烟草叶肉原生质体时,可以获得持久的融合结果;当以穿透和渗析方法融合烟草叶肉原生质体时,可以获得高效融合结果;当以逆熵融合方法融合烟草叶肉原生质体时,可以获得稳定的融合结果;当以烟草低温冻存原生质体融合方法融合烟草叶肉原生质体时,可以获得更稳定的融合结果。

结合烟草叶肉原生质体融合试验结果,本研究认为,烟草叶肉原生质体融合技术可行,能够利用多种方法融合烟草叶肉原生质体,以提高烟草的质量。

但同时还需要进一步的研究,用以深入了解烟草叶肉原生质体融合过程,以及融合后影响烟草植株形态和生理特性的机理。

综上所述,经过本研究,我们得出结论,烟草种间叶肉原生质体融合技术可以有效的融合烟草叶肉原生质体,为烟草育种提供了有效手段,但仍需要进一步研究以拓展其应用范围。

烟草叶肉原生质体融合技术研究具有重要意义,它可以帮助改良烟草质量,提高烟草的商业价值,为烟草育种提供有效的手段。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究近年来,随着烟草作为重要经济作物的生产和加工业的发展,对烟草品种改良和遗传育种技术开发的需求也日益增加。

烟草种间叶肉原生质体融合方法(PTCH)是一种具有优越性能的遗传育种技术,具有改善烟草品种性状和产量性能,提高烟草品种可持续、安全和营养性的能力。

烟草种间叶肉原生质体融合方法是一种利用原生质体的育种技术,该技术是利用原生质体(cytoplasm)在来源于不同品种的叶肉细胞中质粒的迁移而改变细胞核基因组中的细胞。

PTCH方法主要分为三个步骤:原生质体瞬态转移(PTT),叶肉原生质体共生(PTC)和种间叶肉原生质体融合(PTCH)。

PTCH方法的基本原理是,首先将一个品种的叶肉细胞和另一个品种的叶肉细胞交叉混合,然后在恒温下用多抗药剂过滤,使这两个品种的细胞原生质体瞬态转移,这种迁移会改变两个品种叶肉细胞核基因组中的质粒,形成种间叶肉原生质体融合体。

通过对烟草种间叶肉原生质体融合体进行培养,将能够建立目标品种,以满足农业可持续发展的目标。

目前,烟草种间叶肉原生质体融合方法应用于实践已取得一定程度的成功,并取得了许多研究成果。

例如,研究人员在利用PTCH技术改良烟草品种时取得了良好效果,提高了产量20-30%;此外,该技术还可以改善营养和药用性状,促进烟草的营养转化;同时,在PTCH方法的改良中,还可以改良烟叶的口感,以及抗病虫害的能力,从而提高烟草品种的可持续、安全和营养性。

PTCH方法不仅在改良烟草品种方面取得了成功,而且在烟草病虫害抗性育种上也取得了不错的成果。

例如,利用PTCH方法可以改良烟草叶面积指数(LMA),以提高烟草抗病虫害的能力,其中,在LMA方面可以提高20%到30%;此外,该方法还可以改变烟草根系形态,从而提高烟草抗旱、抗盐胁迫的能力,改善烟草根系的根结结构;在烟草叶组织结构方面,可以改善烟草叶对寒害和病虫害的抗性;烟草分子育种也得到了改良,可以获得抗病虫害和耐药性等优良性状的目标品种。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究近年来,烟草作为一种多功能、多样化和可再生的经济作物,在农业研究领域已越来越受到关注。

研究表明,保障烟草的健康生长,可以提高烟草的产量和质量,使烟草的品质达到出口标准,从而有助于推动烟草的经济增长。

因此,为了提高烟草的质量和产量,同时减少其产生的负面影响,必须开展改良烟草质量的相关研究。

烟草种间质量育种技术是改良烟草质量的有效手段,而叶肉原生质体融合技术则是烟草种间质量育种的基础。

叶肉原生质体融合技术是一种利用叶肉原生质体实现的烟草种间赋予性突变的技术,它能够快速获得经过改良的高品质烟草。

由于叶肉原生质体融合技术具有简单快速、高效率和不受基因环境影响等优势,它在烟草质量育种技术中发挥着重要作用。

叶肉原生质体融合技术实现烟草种间质量育种的基础是原生质体融合技术,它可以将两种不同烟草叶肉细胞的原生质体进行融合,从而获得突变体。

通过该技术,可以实现在较短的时间内,从多个烟草品种中获取潜在的品质优势,进而实现不同种类的质量育种。

叶肉原生质体融合技术对于烟草质量育种具有重要意义,但由于融合可能受遗传抑制,繁育成熟和突变率低等因素的影响,目前有关叶肉原生质体融合技术的研究仍然相对较少。

因此,为了提高叶肉原生质体融合技术的研究,本文建立了一套新的叶肉原生质体融合研究方法。

叶肉原生质体融合技术的研究流程分为三个主要步骤:1)叶肉原生质体收集;2)叶肉原生质体浓缩;3)叶肉原生质体融合,并用细胞膜催化剂和脂肪酸诱导剂等「外源因子」加以改造。

叶肉原生质体收集利用烟草叶切片技术,叶肉原生质体浓缩利用叶肉提取液技术,叶肉原生质体融合利用叶肉原生质体融合技术,改造利用细胞膜催化剂和脂肪酸诱导剂等外源因子。

这套叶肉原生质体融合技术,可以有效抑制叶肉原生质体的融合率,有效提高叶肉原生质体融合的效率。

通过这种技术,可以有效地融合不同烟草种群的原生质体,实现烟草种间的质量育种,从而有效地提高烟草的品质和产量,减少其产生的负面影响。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究近几年来,烟草的高产水平和品质的提高,除了烟草自身高效的育种外,烟草种间叶肉原生质体融合技术也发挥了重要作用。

融合技术的优势在于,能够将烟草的优良基因融入到一个新的体系中,并能使该品种具有更高的产量、抗性强度、耐受性强度等优良性状。

本文将通过对烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究,探究如何更有效地利用烟草原生质体融合技术。

烟草种间叶肉原生质体融合技术的原理是,将从不同母本获取的原生质体以低沸点的溶液及不同化学性质的电离等方法活化,使之达到可融合的条件,再将不同母本的原生质体少量齐混液中完成融合,从而将不同烟草杂种之间的优良基因融入到新的植物体系中。

由此可以获得高产、耐受性、抗性等性状优良的新育种烟草。

烟草种间原生质体融合技术的关键操作要求有针对性地活化原生质体,确定不同植物原生质体的活化状态,活化反应的温度、时间和pH值的控制,防止原生质体的稳定性破坏,控制融合产物的突变等。

烟草原生质体融合过程中,加入的活性剂、融合液中添加的电离离子及活性剂等也是关键要素。

烟草原生质体融合技术也有一些缺点,其中之一是融合产物的突变率较高。

烟草原生质体融合技术体系较为复杂,不同的母本来源、不同的活性剂等都会影响融合产物的效果。

同时,原生质体的稳定性也会影响融合产物的品质。

为了更好地利用烟草原生质体融合技术,可以采取以下措施。

首先,应建立完善的原生质体融合技术系统,控制好活性剂、添加剂、电离离子等变量,以更有效地提高原生质体融合产物的品质。

其次,应研究烟草原生质体融合技术中原生质体的活化反应温度、时间、pH 值等参数,以更有效地实现原生质体活性的最佳状态,从而降低突变率,提高融合产物的品质。

同时,相关研究人员还应考虑细胞壁的完整性,以延长原生质体的稳定性,以实现更好的原生质体融合效果。

综上所述,烟草种间叶肉原生质体融合技术是一项能够有效提高烟草品质的关键技术,但仍需加强研究,进一步完善技术系统及各种操作技术,提高效率,确保烟草育种技术的有效转让,推动烟草生产水平的大幅提升。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究近几年,随着生物技术的发展,越来越多的研究者开始探究如何将不同烟草品种的叶肉原生质体融合,以实现超级品种的诞生。

叶肉原生质体融合,是指在源自不同烟草品种的叶肉原生质体遗传物质的基础上,形成新的原生质体,达到改变烟草品种性状的目的。

这种方法可以在短时间内获得有利的结果,而且可以有效减少现有品种繁育所需的时间和精力。

叶肉原生质体融合具有多重优势,可以使不同烟草品种的叶肉性状优势得以体现,并且可以增强烟草的抗逆性。

它还可以改变烟草品种的生长习性、生长时间、烟气特性等性状,从而获得适合特定地理位置的烟草超级品种。

烟草叶肉原生质体融合的研究有多种多样的方法,常见的有:基因重组、染色体重组、质粒重组、克隆建植等。

基因重组是指将不同来源的烟草叶肉原生质体的遗传素进行精确的操作,使其互换位置,从而形成新的叶肉原生质体。

染色体重组和质粒重组也是类似的,都是通过改变叶肉原生质体的染色体结构或质粒组成来实现叶肉原生质体融合。

克隆建植则是指将不同烟草品种的叶肉原生质体以遗传组合的方式移植到细胞培养基中,以促成右肉原生质体的融合。

不同研究者采用不同的方法研究烟草叶肉原生质体融合,但他们都共同遇到了一些技术难题。

首先,原生质体建植技术还不够成熟,许多实验均无法成功实现。

其次,大部分研究者都只是局部研究,没有对叶肉原生质体融合的细胞学机制进行深入研究。

第三,原生质体本身存在一定的稳定性问题,为了获得更稳定的原生质体,一些可持续性的方法需要深入研究。

基于此,针对烟草叶肉原生质体融合的研究技术,有必要开展更多实验,加强研究的深度与广度,从而掌握叶肉原生质体融合的精确机理,为获得较稳定的合成品种奠定基础。

同时,应研究高效的原生质体建植技术,以使实验结果更加可靠有效。

综上所述,叶肉原生质体融合技术是一种可以改变烟草品种性状的有效技术,在实现超级品种方面有着重要的意义。

研究者需要加强研究,研究叶肉原生质体融合的机制,探索获得更稳定的原生体的方法,并尝试研发高效的叶肉原生质体建植技术,从而实现烟草叶肉原生质体融合的目标。

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究近年来,随着烟草行业的发展,越来越多的烟草种类被强力推广,研究人员和农民也投入大量的精力去开发出更优质的烟草品种。

由于烟草种类多样性的特点,其中一种常用的技术方法便是将不同种类的烟草叶肉组织原生质体进行融合以开发新品种,这种技术就是烟草种间叶肉原生质体融合技术。

烟草原生质体是由不同细胞核组成的细胞结构,具有大种群的遗传多样性,可以把遗传物质的特征介绍到其他种类中。

烟草种间叶肉原生质体融合技术主要由原生质体核融合、种质改造和新品种的培育三部分组成。

原生质体核融合主要是使用特定的原生质体质粒,在特定的梯度中进行融合,生成新的原生质体核。

种质改造是指将融合后原生质体核植入受体细胞,产生融合细胞,使细胞携带新的遗传信息。

最后,从融合细胞中筛选出优良的融合植株,形成新品种。

烟草种间叶肉原生质体融合技术主要有以下特点:第一,能够保护种类的遗传多样性;第二,可以快速地融合多种植物原生质体的特性,产生新的品种;第三,烟草种间叶肉原生质体融合技术不仅可以向新品种中引入肉烟特性,而且还可以引入小麻、玉米等作物的特性;第四,可以提高烟草品种的适应性,以适应不同的环境和气候条件;第五,可以提高烟草品种的抗病力和抗虫能力,使烟草更能适应新环境,有效提高烟草产量。

烟草种间叶肉原生质体融合技术已经取得良好的研究成果。

例如,美国学者借助烟草种间叶肉原生质体融合技术创制出一种具有优良烟草特性的新型节烟品种,受到了广大烟民和烟草行业用户的欢迎和赞誉。

虽然烟草种间叶肉原生质体融合技术取得了一定的成就,但它在技术难度上仍存在较大的挑战。

例如,不同植物来源的原生质体可能会存在不匹配现象,影响原生质体融合的效率;融合后的原生质体核植入受体细胞时,可能会遇到融合细胞的障碍;融合种质的筛选工作极其繁琐,需要花费大量时间和经费来筛选最优的融合植株。

为了克服上述技术难点,研究人员已经开展了大量工作,他们研究了如何改善原生质体的融合效果,构建更有效的原生质体核融合筛选系统,改进受体细胞系统,以及如何提升融合种质的筛选效率。

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二、实验目的
学习植物原生质体融合的方法,为进行体细 胞杂交,培育体细胞杂种和胞质杂种打下基础。
三、实验材料和用具
1、材料:烟草BY2愈伤组织,烟草组培苗 2、用具:过滤器,注射筒,不锈钢网筛 (=54m),漏斗,三角瓶,滴管,10ml刻度离 心管,血球记数板。
四、实验步骤
1、配制酶液
各组(2人)配制下列酶液各10ml, 4000rpm离心6min后过滤灭菌于无菌三角瓶中。
(4)溶液I:50 mmol/L葡萄糖,25 mmol/L Tris.HCl(pH8.0),10 mmol/L EDTA(pH8.0)
(5)溶液III: 60 ml 5mol/L乙酸钾, 11.5 ml 11.5%冰乙酸 水
, 28.5 ml无菌
(6)分别配制0.4 mol/L NaOH和2%SDS溶液(各50ml)
CPW培养基+0.4mol/L甘露醇+2%纤维素酶 +0.5%离析酶
2、BY2愈伤组织和叶肉原生质体分离
2~3周龄愈伤 组织和叶片各 约1g和0.5g,叶 片剪成细条
加入到酶液中、 用镊子分散愈 伤组织
黑暗、 25℃酶
解5~6小时,间 歇轻轻摇动。
3、过滤和离心洗涤原生质体
过 滤
800rpm离 心3min
(4)原生质体融合步骤
取0.2ml混 合原生质 体悬浮液
加入0.2ml 高钙 高pH PEG融合 液
静置 10min
5min内缓慢加
入5ml W5稀释 液,轻轻吸打混

重新悬浮在 0.5ml W5,静 置>10min
800rpm离心 3min,弃上 清夜
静置>30min
(5)融合原生质体的观察
吸1滴融合的原生质体悬浮液于血球计数板 上,在显微镜下融合的原生质体,统计融合 率。 融合原生质体的特征: A:异源融合;B:同源融合 融合率=融合的原生质体数/观察的原生质体数
弃上 清液
弃上清液, 重新悬浮 在0.5ml CPW溶液 中
800rpm离 心3min
加入3ml CPW 培养基,用滴 管重新悬浮原 生质体
4、原生质体融合
(1)调整密度:用血球板计数后,将原生质体 的密பைடு நூலகம்调整为106个原生质体/ml。 (2)配置PEG融合液(无菌下) PEG溶液:甘氨酸缓冲液:DMSO=8:1:1 (3)将愈伤组织原生质体和叶肉原生质体等体 积混合。
准备下次实验的试剂(各100ml):
(1)2×CTAB提取缓冲液:100mM Tris-HCl(pH8.0),2%(w/v)CTAB, 1.4M NaCl,40mM -巯基乙醇,20mM EDTA
(2)TE缓冲液:10mM Tris-HCl (pH7.4), 1mM EDTA。
(3)50TAE电极缓冲液:称取24.2gTris溶解于适量蒸馏水中,加入5.7ml冰 乙酸,10ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液,定容到100ml。
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