植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒
植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)说明书
植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)说明书
本产品仅供体外研究使用，不得用于临床诊断
产品简介：
植物组织或果实中存在花青素、叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮、酚类等物质，这些物质与果实等样品衰老过程密切相关，对其加工性能、存储、营养价值等都有重要影响。
植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
植物总酚检测试剂盒(比色法)检测原理是总酚(Total Phenol)溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提总酚，根据提取液的吸收光谱特性，可利用分光光度计在特定波长(280nm)处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出总酚含量，该试剂盒主要用于植物组织或果实中总酚的提取以及定量检测总酚含量。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
产品名称规格保存条件说明书有效期
植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)50T RT1份1年
试剂(A):总酚标准(1mg/ml)5ml4℃避光1份1年
试剂(B):TP Assay Buffer500ml RT1份1年。
食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒
9． 可以使用比色皿检测 10．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低， 建议稀释或增加样品容量或浓度 11．如果测试样品很多，建议使用排枪移液 12．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定 2． 本产品经鉴定检测敏感
4
2、液态食品处理 1． 移取 5 毫升待测液态食品到 15 毫升锥形离心管 2． 放进台式离心机离心 10 分钟，速度为 1500g 3． 移取上清液到新的 15 毫升锥形离心管 4． （选择步骤）可以加入适量的清理液（Reagent A） 5． （选择步骤）过滤纸过滤（如果离心处理，样品仍然不清澈） 6． 置于冰槽里备用或放进-20 冰箱里保存
二、标准液准备
1． 准备好 5 个 1.5 毫升离心管，标记为 1 至 5 号管 2． 移取 xx 微升标准液（Reagent D）到 1 号管 3． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 2 号管，混匀 4． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 3 号管，混匀 5． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 4 号管，混匀 6． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 5 号管 7． 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表
实验开始前，将－20 冰箱里的试剂置于室温下融化，实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化， 移取 xx 毫升染色液 B（Reagent C2）到 xx 瓶染色液 A（Reagent C1）里，混匀，置于暗室里，标记为染 色工作液，避免光照。然后进行下列操作。
1． 准备 1 个 96 孔板，做好标记：空白对照孔、标准对照孔、样品孔 2． 分别移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 96 孔板里的每个孔里 3． 分别加入 xx 微升染色工作液 4． 加入 xx 微升缓冲液（Reagent B）到空白对照孔 5． 加入 xx 微升上述配制的标准液（Reagent D）到相应标准对照孔里 6． 加入 20 微升裂解样品（100 微克食品总量）到样品孔里 7． 轻轻摇动 96 孔板，使其混匀 8． 室温下孵育 15 分钟 9． 即刻放进酶标仪里测读：515nm 波长 10． 分析结果：
抗氧化剂总状态测定试剂盒(ABTS法)产品技术要求九强
抗氧化剂总状态测定试剂盒（ABTS法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆中总抗氧化能力。
1.1包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 组成成分组成成分见表2。
表2 组成成分2. 性能指标2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂3为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度A600nm下测定空白吸光度应≤ 1.0000。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验：在[0.10，2.50] mmol/L区间内，相关系数r≥0.975，在[0.10，1.00] mmol/L区间内测定的偏差应不超过±0.10mmol/L，在（1.00，2.50] mmol/L区间内测定的偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为2.3mmol/L时，其吸光度变化在0.1000～0.6000之间。
2.6 线性区间在[0.10，2.50] mmol/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[0.10，1.00]mmol/L 区间内测定的线性偏差应不超过±0.1mmol/L，在（1.00，2.50] mmol/L区间内测定的线性偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 瓶间差试剂2、校准品、质控品的瓶间差应≤10%。
总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)
用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。
检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。
抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。
检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。
Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。
例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。
本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。
Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。
仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。
所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。
试剂盒中部分试剂含有危险性物质。
禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。
使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。
安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。
实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。
总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒
大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒名称】大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中总抗氧化能力(T-AOC)的含量。
【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠总抗氧化能力(T-AOC)单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)含量。
【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒组成】备注：标准品(1号→6号)浓度依次为：1600、800、400、200、100、50 U/L.【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
S0121 总抗氧化能力检测试剂盒_ABTS快速法_
细胞或组织裂解液等，例如某裂解液样品的蛋白浓度为0.15mg/ml，测定获得的抑制率和0.3mM Trolox相同，则该裂
解液样品的总抗氧化能力为0.3mM/0.15mg/ml，即为2mmol/g。对于植物或中草药抽提物，例如某样品的浓度为
0.1mg/ml，测定获得的抑制率和0.5mM Trolox相同，则该样品的总抗氧化能力为0.5mM/0.1mg/ml，即为5mmol/g。对
1/1000 过氧化氢溶液
8微升
40微升
80微升
160微升
ABTS工作微升
3400微升
注意：ABTS工作液配制后，室温避光保存，宜在30分钟内使用完毕。
2. 待测样品的准备：
(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品的准备：
血清、血浆、唾液或尿液样品每个样品需要10微升，都可以直接用于测定。血清、血浆、唾液或尿液样品都可以使
用新鲜样品进行测定，也可以-80℃冻存后再进行测定。-80℃冻存的样品至少在一个月内所测定获得的数据没有显
著变化。注意：血浆制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝。根据文献报道，人血清或血浆中
的总抗氧化能力为0.5-2mM，人唾液中的总抗氧化能力为0.3-1mM，人尿液中的总抗氧化能力为0.2-3mM。
Antioxidant ABTS·+ ——————> ABTS
抗氧化剂总状态测定试剂盒产品技术要求baiding
抗氧化剂总状态测定试剂盒产品技术要求baiding抗氧化剂总状态测定试剂盒是一种用于测定食品、药物、化妆品等样品中抗氧化剂总状态的试剂盒，采用比色法进行测定。
该产品的技术要求非常重要，对于保证试剂盒的准确性和可靠性至关重要。
以下是对抗氧化剂总状态测定试剂盒的产品技术要求的详细介绍。
1.试剂成分：2.试剂盒的稳定性：试剂盒的试剂成分应具有良好的稳定性，在储存过程中不易发生分解、氧化、聚集等反应，确保试剂盒的有效期。
3.检测灵敏度：试剂盒应具有较高的检测灵敏度，能够准确检测样品中较低浓度的抗氧化剂。
4.试剂盒的选择性：试剂盒应具有较好的选择性，能够排除样品中其他可能干扰的成分，确保测定结果的准确性。
5.试剂盒的线性范围：试剂盒应具有较宽的线性范围，能够适应不同浓度范围内抗氧化剂总状态的测定。
6.操作简便性：试剂盒的操作步骤应简单明了，试剂的配制和操作过程应尽量简化，使用户能够方便、快速地完成测定。
7.结果可视化：试剂盒应具有直观的结果显示方式，例如颜色变化或光谱图等，方便用户对测定结果进行判断。
8.试剂盒的准确性和重复性：试剂盒应具有较高的准确性和重复性，确保多次测定结果的一致性。
9.试剂盒的耐久性：试剂盒的试剂和材料应具有良好的耐久性，能够在储存和使用过程中保持稳定性和活性。
10.试剂盒的包装和储存：试剂盒应具有合适的包装形式，能够有效保护试剂的稳定性和活性。
同时，应提供适当的储存条件和有效期限。
以上是对抗氧化剂总状态测定试剂盒产品技术要求的简要介绍。
对于保证试剂盒的准确性和可靠性非常重要，只有符合这些技术要求，才能够确保试剂盒在实际应用中能够得到准确和可靠的测定结果。
ABTS法体外测定果蔬类总抗氧化能力的研究进展
以也把该方法称为 T EAC( T rolox equivalent ant iox-i dant capacity ) 法[ 2] , 也有研究者提出用抗坏血酸作为 对照标准, 将该方法称为 V CEA C 或者 A EA C 法[ 3] 。
相对于抗氧化能力测定的体内方法( 主要是动物 实验和流行病学调查) , ABT S 法这种体外测定方法
物质抗氧化能力测定的根本标准和目的就是最 高限度地、客观地反映被测物质的抗氧化作用, 测定 方法在抗氧化物质的抗氧化能力研究中有 3 个要素: ( 1) 是以什么作为基质体系来测定, ( 2) 是以什么方式 来加速, ( 3) 是用什么来指示反应终点[ 33] , 这 3 要素 中的任何一要素改变都会使测定结果发生变化, 要针 对不同用途和目的的抗氧化剂, 选择相适应的测定方 法, 在对抗氧化剂的抗氧化活性下结论时, 要限定其 应用范围。ABT S 法作为近几年兴起的一种相对简 便的用于体外测定物质总抗氧化能力的方法就上述 3 点而言已有了一定的基础, 关键还在于建立一个相 对完善的标准, 尽可能地与一些相对成熟的新技术连 用, 以求该方法更为广阔、灵活的应用。
稳定的 ABT S#+ , 进一步 简便了 操作 步骤。Campos 等人[ 29] 提出事先加热 ABT S2- 和不耐热的含氮物质 A BAP 产生 A BT S#- 再加入测试物质, 可避免中间产
78 2005 Vol1 31 No1 8 ( Total 212)
物的 干 扰。 Cano 等 人[ 30] 建 立 使 用 HRP / ABT S/ H2O 2 体系, 为避免 外来物质 的干扰, 选 择在 400~ 750 nm 间的一个波长来检测。最近 O zcan[ 25] 提出用 H2O 2/ A BT S/ 醋酸缓冲液体系, 其测定结果与 F RAP
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植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。
在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。
通过过硫酸钾（potassium persulfate）氧化2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-
6-sulfonic acid)，diammonium salt；ABTS）产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基或者消耗抗氧化剂的能力，在分光光度仪（730nm波长）的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。
产品内容
缓冲液（Reagent A）毫升
染色液A（Reagent B1）管
染色液B（Reagent B2）毫升
氧化液（Reagent C）毫升
标准液（Reagent D）微升
产品说明书1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品存放和标准品配制的容器
4℃微型台式离心机：用于样品处理
96孔板：用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪：用于比色变化
实验步骤
一、样品准备
选择一：血浆样品
1．准备好肝素或ACD抗凝管（注意：避免使用EDTA抗凝管）
2．抽取1毫升血液，置于抗凝管里
3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存
6．移取10微升上述制备的血浆到新的1.5毫升离心管
7．加入xx微升缓冲液（Reagent A），混匀
8．放在冰槽里待测
选择二：血清样品
1．准备好不含抗凝剂的储存管
2．抽取1毫升血液，置于储存管里
3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结
4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为2000g（或5000RPM，例如eppendorf 5415）5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存
7．移取10微升上述制备的血清到新的1.5毫升离心管
8．加入xx微升缓冲液（Reagent A），混匀
9．放在冰槽里待测
选择三：尿液/脑脊液/唾液/精液样品
1．准备好1.5毫升离心管
2．移取1毫升液体到离心管
3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）4．小心移取上清液到新的1.5毫升离心管
5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存
6．移取10微升到新的1.5毫升离心管
7．加入xx微升缓冲液（Reagent A），混匀
8．放在冰槽里待测
二、标准液准备
1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管
2．移取xx微升标准液（Reagent D）到1号管
3．小心移取xx微升缓冲液（Reagent A）和xx微升标准液（Reagent D）到2号管，混匀4．小心移取xx微升缓冲液（Reagent A）和xx微升标准液（Reagent D）到3号管，混匀
5．小心移取xx微升缓冲液（Reagent A）和xx微升标准液（Reagent D）到4号管，混匀
6．小心移取xx微升缓冲液（Reagent A）到5号管
7．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表
管号缓冲液（Reagent A）标准液（Reagent D）测定体系
标准Trolox浓度
1 xx微升xx微升xx微摩尔/升
2 xx微升xx微升xx微摩尔/升
3 xx微升xx微升xx微摩尔/升
4 xx微升xx微升xx微摩尔/升
5 xx微升0 0
三、样品测读
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化，移取xx毫升染色液B（Reagent B2）到1管染色液A（Reagent B1）里，混匀，置于暗室里室温下孵育过夜（16小时）后，标记为染色工作液，避免光照。
然后进行下列操作。
1．准备1个96孔板，做好标记：空白对照孔、标准对照孔、样品孔
2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent A）到96孔板里的每个孔里
3．分别加入xx微升染色工作液
4．分别加入xx微升氧化液（Reagent C）
5．加入xx微升缓冲液（Reagent A）到空白对照孔
6．加入xx微升上述配制的标准液（Reagent D）到相应标准对照孔里
7．加入10微升体液样品到样品孔里
8．轻轻摇动96孔板，使其混匀
9．室温下孵育1分钟
10．即刻放进酶标仪里测读：730nm波长
11．分析结果：
1）构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光单位（OD730nm）；横座标（X轴）为标准Trolox浓度（微摩尔/升）
2）空白对照孔为最大吸光单位（OD730nm）读数
3）标准对照孔和样品孔为实际吸光单位（OD730nm）读数
4）根据标准曲线获得样品对应Trolox浓度（微摩尔/升）
5）计算样品实际总抗氧化能力
6）根据下列公式计算测定体系中样品量的总抗氧化能力（实际抑制百分率）
7）IC50：50％抑制率所需的样品单位：TROLOX等值或样品蛋白浓度（毫克/毫升）或样品容量（微升）
注意事项
1．本产品为50次操作
2．本产品测试范围为高浓度30至150微摩尔
3．操作时，须戴手套
4．体液制备的所有操作均须在4℃状态下进行
5．测试前，样品须处于新鲜收集
6．样品须清澈
7．样品避免含有Tris、EDTA和还原剂等
8．空白对照孔的吸光读数应为2.0以上，如果低于1.5，不能用于高浓度检测，须增加染色工作液的室温孵育时间
9．染色工作液避免反复在室温空气中久置。
如果空白对照孔的吸光读数为3.5以上，建议使用无离子水稀释到2.5至3.0则可
10．样品读数越低，抗氧化能力越高
11．样本量不宜超过20微升
12．可以使用比色皿检测
13．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低，建议稀释或增加样品浓度
14．如果测试样品很多，建议使用排枪移液
15．如果用户没有730nm波长滤波器，可以使用640nm至810nm之间的任一波长替代；或者使用405nm 波长替代
16．人体体液的总抗氧化能力在0.2至2毫摩尔标准水溶性生育酚Trolox的浓度
17．本公司提供低浓度测试试剂产品
18．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定检测敏感。