甲型溶血性链球菌【专业知识文档】
溶血性链球菌讲义
溶血性链球菌检测流程（GB/T4789.11）
25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水
葡萄糖肉浸液肉汤 或匹克氏肉汤
36+1 ℃ 24h
血平板 36+1℃ 24h
血平板(分纯培养)
36+1 ℃ 24h
链激酶试验
杆菌肽敏感试验
观察溶血 革兰氏染色
报告
鉴定步骤
❖ 溶血及菌落形态的观察 ❖ 革兰氏染色 ❖ 链激酶试验 ❖ 杆菌肽敏感试验
杆菌肽敏感试验
❖ 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上， 用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽 纸片置于上述平板上，36℃培养18-24h，如 有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株 做对照
结果报告
在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性 链球菌
谢谢
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生化反应
❖ 分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、 水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的 分解能力因不同菌株而异
❖ 般不分解菊糖，不被胆汁溶解 ❖ 触酶阴性(与葡萄球菌相区别)
毒素及侵袭性酶
❖ 链球菌溶血素 ❖ 致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素
❖ 透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细胞间质 ❖ 链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶
溶血性链球菌检验
分布
❖ 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于 水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口 腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气 飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污 染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类 进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性 感染部位常成为食品污染的污染源。引起化 脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病
溶血性链球菌的检验
(三)生化特性
1、均分解葡萄糖产酸，产酸不产气。
2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。 3、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶 4、A群菌对杆菌肽敏感 5、一般不分解菊糖，不被胆汁或 1% 去氧胆酸钠所溶解。这两 种特性用来鉴定甲型溶血型链球菌和肺炎球菌。 6、链球菌与葡萄球菌不同，不产生过氧化氢酶。
溶血性链球菌的检验
溶血性链球菌在自然界分布较广，可存在于水、空气、 尘埃、牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中，按其在血平板 上溶血能力分类，可分为甲型溶血性链球菌、乙型溶血 性链球菌、丙型溶血性链球菌和亚甲型溶血性链球菌。 与人类疾病有关的大多属于乙型溶血性链球菌，其血清 型90%属于A族链球菌，常可引起皮肤和皮下组织的化脓 性炎症及呼吸道感染，还可通过食品引起猩红热、流行
对氧稳定链球菌溶血素“S”，是一种小分子的糖肽，无抗原 性。对氧稳定，对热和酸敏感。血平板所见透明溶血是由“S” 所引起，能破坏白细胞和血小板，给动物静注可迅速致死。注 射小鼠腹腔，引起肾小管坏死。
2、致热外毒素 曾称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性 物质，会引起局部或全身红疹、发热、疼痛、恶心、呕吐、
周身不适。
该毒素是蛋白质，对热稳定，具有抗原性，则产生的毒 素能中和该毒素的活性。但可分为A、B、C三种不同抗原
性的毒素。无交叉保护作用。该毒素还有内毒素样的致热 作用，对细胞或组织有损害作用。
3、透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明 质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩散。 4、链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维
蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散
作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 5、脂磷壁酸（LTA）：与细菌粘附于宿主细胞表面有关， 大多数LAT位于细胞膜和肽聚糖之间，通过肽聚糖孔伸展 至细菌细胞表面，人类口腔粘膜和皮肤上皮细胞、血细胞 等细胞膜上均有LAT的结合位点。
什么是溶血性链球菌
什么是溶血性链球菌*导读：什么是溶血性链球菌？？你知道吗？……您知道引起扁桃体炎、猩红热以及产褥热共同的元凶是什么吗？它就是溶血性链球菌，一种可以引起人体发炎的细菌。
它在空气中其实分布是很广泛的，很容易通过呼吸道、口鼻等处入侵人体。
溶血性链球菌又叫做沙培林，是一种比较常见的引发炎症的细菌，它通常存在于空气、灰尘、水等物体以及人体的口腔、粪便以及化脓的伤口中。
这些细菌一旦遇到了可以入侵的伤口，就会乘虚而入造成人体的感染，不仅会引起呼吸道感染还会诱发一些比较严重的脏器感染例如肾小球肾炎等。
那么它是怎么来的呢？通常情况之下，这些病菌主要是通过伤口、口腔黏膜、不洁食品等入侵人体。
而食品中的细菌可能又是由于在包装或者生产过程中卫生情况不达标而导致的污染。
一些有伤口死亡的家禽肉和牛羊肉也是传播途径之一。
在日常生活中要避免它的侵袭，就要注意饮食的卫生以及勤洗手等细节。
对于生产食品的工厂来说，一定要注意食品卫生情况的检测，保证食品不受外界细菌的污染，工作人员应当佩戴口罩和手套，在患病或者受伤的情况下不应接触食品。
牲畜屠宰行业在对肉制品进行检测时，一定要看是否受到感染或者是有化脓的伤口未剔除干净。
只有在食品的源头上保证质量，才可以为消费者的健康建立保障。
了解了以上信息，大家一定要记住在平时注意饮食卫生，“病从口入”，溶血性链球菌也是如此，一旦侵入人体，就会对您的健康产生一些威胁，为生活也增添了不少的麻烦。
大家一定要注意防范哦。
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细菌三种溶血状态
(1)甲型(α)溶血:菌落周围出现较窄的草绿色溶血环,习惯上称这类菌为甲型溶血性链球菌,即草绿色链球菌。
(2)乙型(β)溶血:菌落周围出现较宽的透明溶血环,这类菌被称为乙型溶血性链球菌,能产生溶血素O 等毒素,致病性强。
(3)丙型(r)溶血:菌落周围无溶血环
血平板制作: 先无菌采血, 脱纤。
将普通培养基加热溶化, 待冷却至50-55℃时, 以5%-10%比例, 无菌加入新鲜脱纤血, 无菌术倒铺平双碟平皿,冷却即成。
大肠杆菌培养特性：麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产生黑色金属闪光的菌落；在SS琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。
一些致病性菌株在绵羊血平板上可产生β溶血。
在营养琼脂上生长24 h后，形成圆形突起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，直径2-3 mm，S型菌株在肉汤中培养18-24 h，呈均匀浑浊，管底有粘性沉淀，液面管壁有菌环。
沙门氏菌培养特性：麦康凯琼脂培养时形成无色透明或半透明的菌落。
血琼脂平板（BA）
制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。
用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。
2．尿液，脓液
3．分离细菌标本用。
溶血性链球菌及检验
溶血性链球菌及检验一、生物学特性1、形态与染色链球菌呈球形或椭圆形，直径0.6-1.0μm，呈链状排列，长短不一，从4-8个至20-30个菌细胞组成不等，链的长短与细菌的种类及生长环境有关。
在液体培养基中易呈长链，固体培养基中常呈短链，由于链球菌能产生脱链酶，所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。
多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜，继续培养后消失。
该菌不形成芽胞，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，老龄培养或被中性粒细胞吞噬后，转为革兰氏阴性。
2、培养特征需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。
最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。
在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。
在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，不同菌株溶血不一。
3、生化反应分解葡萄糖，产酸不产气，对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异。
一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，触酶阴性。
4、抗原结构链球菌的抗原构造较复杂，主要有三种：（1）核蛋白抗原或称P抗原，无特异性，各种链球菌均相同。
（2）多糖抗原或称C抗原，系群特异性抗原，是细胞壁的多糖组分，可用稀盐酸等提取。
（3）蛋白质抗原或称表面抗原，具有型特异性，位于C抗原外层，其中可分为M、T、R、S四种不同性质的抗原成分，与致病性有关的是M抗原。
5、分类根据链球菌在血液培养基上生长繁殖后是否溶血及其溶血性质分为三类。
（1）α-溶血性链球菌：菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环，也称甲型溶血，这类链球菌多为条件致病菌。
（2）β-溶血性链球菌：菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。
肺炎、甲型链球菌
肺炎链球菌挑取一个菌落做胆汁溶菌试验（1）原理：胆汁可激活肺炎链球菌的自溶酶从而加速了菌体自溶。
（2）方法-试管法：将细菌接种于试管内，加入10%去氧胆酸钠或纯牛胆汁，37℃，10分钟后观察试管内细菌状态。
（3）结果：若观察到试管内溶液变清则结果为阳性。
将菌液涂布做Optochin试验（1）原理：肺炎链球菌对Optochin敏感，而Optochin对其他链球菌则无抑制作用。
（2）方法：将2～3个待检菌菌落密集划线接种于羊血琼脂平板，用镊子贴放Optochin纸片（5ug/每片）于平板上，35℃5％CO2环境中孵育18～24小时，观察抑菌环大小。
（3）结果：抑菌环直径≥14mm为敏感，＜14mm时，参照胆汁溶菌试验判断是肺炎链球菌还是草绿色链球菌，无抑菌圈出现为耐药。
甲型链球菌甲型溶血性链球菌：菌落呈灰色针尖状，菌落周围有2~4mm透明溶血环触酶试验阴性，分解葡萄糖产酸不产气。
对Optochin耐药，不被胆汁溶解，不分解菊糖草绿色链球菌（Viridans Streptococci）又称为甲型（α）溶血性链球菌，是人体的重要正常菌群之一，分布于上呼吸道、胃肠道和女性生殖道，以口腔分布为最多。
性质：革兰阳性球菌该菌可致败肺炎链球菌胶乳凝集测定法1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。
2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidex pneumo-kit)于室温。
3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。
4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。
5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。
注：R3为阳性对照。
药敏纸片的选择细菌鉴别要点1、革兰阳性球菌所有革兰阳性球菌第一步为触酶试验。
通常触酶阳性为葡萄球菌和微球菌，阴性为链球菌科。
但不排除例外，气球菌为弱阳性。
粪肠球菌偶有阳性。
操作触酶试验应尽量避免用铂金取菌环（针）在H2O2 上涂菌，而应先涂菌，在滴H2O2，步骤不能颠倒。
链球菌属及其检验「微生物检验」
链球菌属及其检验「微生物检验」链球菌属(Streptococcus)细菌，呈链状排列的革兰阳性球菌，个别种成双排列。
广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人鼻咽部，大多数不致病，致病菌可引起各种化脓性炎症、猩红热、新生儿败血症、细菌性心内膜炎以及风湿热、肾小球肾炎等超敏反应性疾病。
下面是yjbys店铺为大家带来的关于链球菌属细菌的知识，欢迎阅读。
⒈分类链球菌的分类方法尚未统一。
常用下列两种方法。
⑴根据溶血现象：分为3类。
①甲型溶血性链球菌(α-hemolytic streptococcus)：菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，该类菌又称草绿色链球菌，为条件致病菌。
②乙型溶血性链球菌(β-hemolytic streptococcus)：菌落周围有2～4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血，该类菌又称溶血性链球菌，致病性强，常引起人和动物多种疾病。
③丙型链球菌(γ-streptococcus)：菌落周围无溶血环，因而又称不溶血性链球菌，一般不致病。
⑵根据抗原结构：按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成A、B、C、D …等20个群。
同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同又分若干型。
如A群根据其M抗原不同，可分成约100个型;B群分4个型。
对人致病的链球菌菌株，主要是 A群，多数呈现乙型溶血。
⒉细菌特性⑴链球菌① 形态染色球形或椭圆形，直径0.5～1.0μm，链状排列，链的长短与细菌的种类和生长环境有关，在液体培养基中形成的链较长。
无芽胞，无鞭毛。
多数菌株在培养早期(2～4h)形成透明质酸的荚膜。
革兰染色阳性。
②分离培养要求较高，培养基中需加入血液或血清、葡萄糖、氨基酸、维生素等物质。
多数菌株兼性厌氧，少数为专性厌氧。
在液体培养基中呈沉淀生长，在血平板上，37℃18～24h后可形成灰白色、圆形、凸起、光滑、直径为0.5mm～0.75mm的细小菌落，菌落周围出现不同类型的溶血环。
③生化反应触酶阴性、一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。
溶血性链球菌讲义
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杆菌肽敏感试验
❖ 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上， 用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽 纸片置于上述平板上，36℃培养18-24h，如 有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株 做对照
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结果报告
在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性 链球菌
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生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．分类 4．生化反应 5. 抵抗力
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形态与染色
❖ 球形或卵圆形，直径0.5～ 1 μm，链状排列， 链长短不一，短者4～8个细胞组成，长者 20～30个
❖ 无芽胞，无鞭毛，培养早期（2~4h）形成透 明质酸的荚膜
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生化反应
❖ 分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、 水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的 分解能力因不同菌株而异
❖ 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解 ❖ 触酶阴性(与葡萄球菌相区别)
பைடு நூலகம்
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毒素及侵袭性酶
❖ 链球菌溶血素 ❖ 致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素
❖ 透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细胞间质 ❖ 链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶
谢谢
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原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该 酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 ❖ 链道酶：又称链球菌DNA酶 ❖ 杀白细胞素：能使白细胞失去动力
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抵抗力
❖ 该菌抵抗力一般不强，60℃30min即被杀死 ❖ 对常用消毒剂敏感 ❖ 在干燥尘埃中生存数月 ❖ 乙型链球菌很少有耐药性
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甲型溶血性链球菌【专业知识文档】
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文章导读
空气当中存在许多各种类型的病菌，有些病菌致病性极强，有些则相对弱些。
有的人在与人群接触后，出现了扁桃体炎、咽部红肿、牙龈脓肿等不适症状，上医院一检查，医生说是感染了甲型溶血性链球菌。
那么这是一种什么样的病菌呢？接下来，就让我们通过下文一起来了解一下这种病菌吧。
一、
二、概念
溶血性链球菌又称沙培林,对热和化学清毒剂均敏感，常引起扁桃体、咽部、中耳等感染。
亦为肾盂肾炎、产褥热、猩红热的病原体。
可分为三种不同类型，其中，甲型（α）溶血性链球菌就是其中之一，它又称草绿色链球菌，也称甲型溶血。
菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环，环内红细胞未溶解，通常寄居在人的口咽腔、呼吸道及肠道中。
三、症状
具有牙周炎及扁桃体炎、咽部红肿、牙龈脓肿等呼吸道疾病发病时的典型特征。
四、诊断
采用微生物学检查法，根据链球菌所致疾病不同，可通过脓汁、咽拭、血液等标本送检。
甲型溶血性链球菌的菌落呈灰色针尖状，菌落周围有2mm左右透明溶血环。
四、危害
此类细菌致病力不强，多为条件致病菌。
在人类呼吸道及肠道中有α型溶血链球菌正常寄生，但有时也可引起亚急性心内膜炎等症。
五、治疗
对急性咽峡炎和扁桃体炎儿童患者须治疗彻底，以防止急性肾小球肾炎，风湿热及亚急性细菌性心内膜炎的发生。
及时治疗病人和带菌者，以减少传染源。
六、预防
1.溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，因而我们在与他人接触时，应注意保持适应距离，
2.在食用食物，特别是熟食制品时，一定要从正规市场或超市购买。
2.平时应多吃能各种蔬菜及水果，并加强体育锻炼，增强抵御病毒的能力。
3.节假日时，尽可能不去那些人口密集的场所。
4.要注意与患者的隔离，以防被传染上疾病。