现代液相色谱技术导论自动进样器
自动进样器的优点
自动进样器在生化分析仪器，色谱分析仪器中有着广泛应用，它的运行可靠性和性直接影响着分析结果。
液相色谱系统大多使用自动进样器引入样品，正确使用自动进样器是液相色谱系统分离度的基本条件，用自动进样器注入适当体积的标准样品可为峰高和峰面积的测量提供小于1%的标准偏差。
对于液相色谱而言，无论是手动进样器或是自动进样器都是用六通阀进样的，只是自动进样的较手动进样器的死体积较大，多了计量泵和一部分联接管线。
自动进样器可以减少体力劳动，增加样品处理量，提高日常工作精度。
此外，今天还为大家搜集整理了常见的三种自动进样器设计，下面一起来看看它们各自的优缺点吧。
一、吸入式自动进样器这种自动进样器中样品是被注射器产生的吸力吸入样品环，早期这种设计因其简单可靠而非常流行，后来随着另两种设计的出现而走向没落。
注射器连在废液排出口，采样针和相应的管路连在进样口，针进入样品瓶中，接着，注射器回吸直到样品充满样品环，转子旋转将样品进样。
这种设计非常简单，只有针沿一个轴运动(上/下)，通过旋转样品盘将所需样品瓶置于针下。
有一种简化设计更加简单——将一个密封的瓶盖压入瓶里以使样品进入样品环，取消了另一端的注射器。
如果简单是吸入式自动进样器的优点，那么浪费样品就是其缺点。
样品在进入样品环之前，首先必须充满采样针和相连的管路，就造成10-100ul的样品被浪费，这种情况的影响取决于总的样品量。
由于简单的设计，多数此类自动进样器都使用可旋转的样品盘按固定序列进样，同时需要在样品瓶之间放置一个清洗瓶或加装分离的清洗装置。
二、推入式自动进样器推入式设计的自动进样器更为常见，这种技术和手动进样极为相似。
注射器移至样品瓶，吸入预定量的样品，再移至进样口，将样品注入样品环。
这种设计需要的样品量远小于吸入式设计。
注射器的吸取和排出都是在步进马达控制下完成的，可以达到很高的精密度和度，正常情况下装液法和部分装液法的结果偏差都小于0.5%。
推入式自动进样器通常都在吸入式设计的基础上增加了一些功能，比如：任意样品序列、更多的清洗功能、程控进样等。
自动进样器的原理及流程
自动进样器的原理及流程
自动进样器是一种用于实现自动化样品进样的仪器设备，其原理及流程如下：
原理：
自动进样器通常由进样器、进样针、载样器、样品输送系统、样品盖、控制系统等组成。
其工作原理主要是通过控制系统的指令驱动进样器执行进样操作。
流程：
1. 准备样品：将待分析的样品按照要求制备好，通常是液体或固体样品。
2. 载样：将样品放置在载样器或样品盖内。
3. 进样器定位：根据实际需要，将进样器定位到相应位置。
4. 进样针操作：通过控制系统的指令，进样针向载样器或样品盖中下降，接触到样品。
5. 吸取样品：进样针通过负压吸取样品，通常使用活塞泵、气动泵等方式。
6. 进样针提起：进样针提起，使样品离开载样器或样品盖，并将进样针定位到进样器的进样孔口。
7. 进样：进样针将样品注入分析设备中，通常通过注射器或阀门进行控制。
8. 清洗：完成进样后，进样器需进行清洗操作，以防止污染和交叉污染。
9. 下一个样品：重复上述操作，继续进行下一个样品的进样。
需要注意的是，不同的自动进样器可能在具体的原理和流程上有所差异，但总体来说，自动进样器的工作原理都是通过控制系统对样品进行自动进样操作，提高
实验的自动化程度和效率。
解决液相色谱仪自动进样器故障的方法
解决液相色谱仪自动进样器故障的方法自动进样器的故障容易被发现，有时液相色谱仪系统出了故障而不能确定是否是进样器故障，可以用手动进样几次，或用一台好的自动进样器代替，如排除了故障，说明自动进样器有了问题。
本文主要讲了三种常见的液相色谱仪自动进样器故障，如何解决。
一、进针深度的调节样品量足够多时，不必考虑这一问题。
但对于痕量分析而言，进针深度的调节问题将较为突出。
理想的情况下可以使进针深入到接近样品瓶底部，这样可以最大限度地利用样品。
当可用的样品体积有限时，可以采用微量样品瓶以增加给定体积样品的相对深度。
如果进针过深，可能插入样品瓶的底部，甚至导致针尖阻塞。
如果进针深度不足，样品只及针尖部分，针将不能抽取足够量的样品，部分空气取而代之。
对于进针深度的调节，一般采用机械或电动的方法，目前大部分厂商可以在液相色谱仪色谱工作站上设置。
无论采用哪种方法，实验之前都必须认真调节，更换样品瓶类型时还需要重新调整。
二、样品瓶过满如果样品瓶过满，在瓶盖较紧、进样量较大的情况下，可能会导致进样重复性变差。
其原因为样品瓶中的样品被抽出时，盖紧的瓶盖不能使空气及时进入，造成部分真空。
由于这种真空作用，注射器不能够吸取足够量的样品体积。
在极端的情况下，对于挥发性稀溶液样品，针内甚至会出现气泡，影响分析工作的正常进行。
有些自动进样器采用加排空针的方法克服这一问题，但这种方法并不常用。
最简单的解决办法为不要使样品瓶过满。
一般装样量在样品瓶的1／2到3／4之间较为适宜。
三、滞后体积高效液相色谱仪中滞后体积是指流动相混合器到柱头的体积，包括溶剂混合器和混合器到柱头之间连接管的体积，对于低压混合系统，也包括泵体积。
滞后体积较大可能导致实验的重复性差、方法移植困难。
通常的HPLC系统中，滞后体积一般在0.2mL～5mL之间，主要取决于装置的设计。
滞后体积中最重要的部分为自动进样器的定量环体积。
只有定量环体积小于100μL时，其对滞后体积的影响才可以近似不计。
液相进样器结构
高效液相色谱仪进样器的种类较多，不同类型的进样器具有不同的结构和特点。
以下是几种常见液相进样器的结构介绍：
- 隔膜进样：将样品注入专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可将样品直接送到柱头填充床的中心，死体积几乎等于零，可以获得较佳的柱效，但不能在高压下使用，隔膜容易吸附样品产生记忆效应，使进样重复性较差。
- 停流进样：可避免在高压下进样，但在 HPLC 中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”，保留时间也可能不准。
- 阀进样：一般 HPLC 分析常用六通进样阀，其关键部件由圆形密封垫（转子）和固定底座（定子）组成。
六通阀的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。
- 部分装液法进样：进样量应不大于定量环体积的50%（最多75%），并要求每次进样体积准确、相同。
此法进样的准确度和重复性取决于注射器取样的熟练程度，而且易产生由进样引起的峰展宽。
- 完全装液法进样：进样量应不小于定量环体积的5~10倍（最少3倍），这样才能完全置换定量环内的流动相，消除管壁效应，确保进样的准确度及重复性。
不同的液相进样器具有不同的优点和适用范围，在实际应用中，应根据具体的分析需求和条件选择合适的进样器。
液相色谱仪进样操作介绍课件
数据可视化：将处理后 的数据以图表或图形的
形式展示
数据分析：对数据进行 分析，得出结论和结果
数据存储：将处理后的数 据存储到数据库中，方便
后续查询和调用
液相色谱仪进样操作注意 事项
样品处理
01
样品的预处理： 包括样品的溶解、
过滤、稀释等
02
样品的保存：需 要低温保存的样 品，应提前取出
并恢复至室温
03
样品的称量：根 据仪器要求，精
确称量样品
04
样品的溶解：根 据仪器要求，选 择合适的溶剂溶
解样品
05
样品的过滤：根 据仪器要求，选 择合适的滤膜过
滤样品
06
样品的稀释：根 据仪器要求，选 择合适的稀释液
稀释样品
07
样品的注射：根 据仪器要求，选 择合适的注射器
注射样品
进样器维护
定期清洁进样 器，保持进样 器内部清洁
特点：高效、快速、准确、灵敏， 可同时分析多种组分
进样原理
液相色谱仪进样操作原理是基于色谱分离技术，利用不同物质在流动相和固 定相之间的分配系数差异进行分离。
进样操作过程中，样品被注入到色谱柱中，在流动相的推动下，样品中的各 组分在色谱柱中分离，然后依次流出色谱柱进入检测器进行检测。
进样操作过程中，需要控制进样量、进样速度、进样时间等参数，以保证样 品的准确分离和检测。
进样操作完成后，需要对色谱数据进行处理和分析，以获得样品中各组分的 含量和性质等信息。
进样方式
01
手动进样：通过手动操作进样阀，将样品注入色谱柱
02
自动进样：通过自动进样器，实现样品的自动注入
03
气动进样：利用气体压力将样品注入色谱柱
自动进样器技术参数及要求
自动进样器技术参数及要求一、技术参数：1.体积精度：自动进样器应具有较高的进样精度，能够控制样品的体积在较小的误差范围内，一般要求体积精度在0.1%以内。
2.进样速度：自动进样器的进样速度需要满足用户的需求和实验要求，常见的进样速度为每秒1-10毫升。
3.进样模式：自动进样器可以具有多种进样模式，包括微量进样、柱前进样、分割进样等，可以根据实验需求选择适当的进样模式。
4.样品保存：自动进样器需要具有样品保存功能，能够在进样过程中保持样品的稳定性和完整性。
5.温度控制：对于一些热敏样品，自动进样器需要具有温度控制功能，能够控制样品的温度在一定的范围内，以避免样品的损失和分解。
6.进样管道：自动进样器的进样管道需要具备良好的化学稳定性和耐腐蚀性，以确保样品不会受到污染和变质。
7.进样容量：自动进样器的进样容量需要满足不同实验的需求，一般为几微升至几毫升。
8.进样方式：自动进样器可以根据实验需求采用不同的进样方式，包括液体进样、气体进样、固体进样等。
9.进样精度：进样精度是自动进样器的重要指标之一，它与体积精度密切相关，一般要求进样精度在1%以内。
二、技术要求：1.准确性和可靠性：自动进样器需要具有较高的准确性和可靠性，能够准确地控制进样体积，避免样品的损失和变化。
2.稳定性：自动进样器需要具有较好的稳定性，能够在长时间的使用过程中保持稳定的工作状态。
3.灵敏性：自动进样器需要具有较高的灵敏性，能够对样品的微小变化做出快速响应。
4.易操作性：自动进样器应具有简单易操作的特点，能够方便用户进行使用和调节。
5.易维护性：自动进样器应具备易维护性，能够方便用户进行清洗、维修和更换部件。
6.安全性：自动进样器需要具有较高的安全性，能够保证操作人员和实验样品的安全。
7.兼容性：自动进样器应具有较好的兼容性，能够适用于不同类型的分析仪器和实验方法。
总结起来，自动进样器的技术参数和要求对于保证实验的准确性和可靠性非常重要。
现代液相色谱技术导论
现代液相色谱技术导论
现代液相色谱技术是一种高效、灵敏、准确的分析技术，它可以
用来分离、鉴定和定量分析混合物中的各种成分。
它是一种综合
性的分析技术，可以用来分析复杂的混合物，并且可以在短时间
内完成分析。
现代液相色谱技术的基本原理是将混合物中的各种成分分离出来，然后用检测器测量每个成分的浓度。
液相色谱技术的基本组成部
分包括柱、检测器、泵和计算机。
柱是液相色谱技术的核心部分，它由一种吸附剂组成，可以将混合物中的各种成分分离出来。
检
测器是用来测量每个成分的浓度的，它可以根据每个成分的特性
来测量它们的浓度。
泵是用来将混合物送入柱中的，它可以控制
混合物的流速，从而控制分离的效果。
计算机是用来控制整个液
相色谱系统的，它可以控制柱、检测器和泵的运行，并且可以将
测量的数据进行处理和分析。
现代液相色谱技术的应用非常广泛，它可以用来分析各种混合物，如药物、食品、环境样品等。
它可以用来分离、鉴定和定量分析
混合物中的各种成分，并且可以在短时间内完成分析。
此外，它
还可以用来检测混合物中的有毒物质，从而为食品安全提供可靠
的保障。
现代液相色谱技术的发展也受到了许多因素的影响，如柱材料、
检测器、软件等。
柱材料的发展使得液相色谱技术可以分离更复
杂的混合物，检测器的发展使得液相色谱技术可以检测更灵敏的
成分，软件的发展使得液相色谱技术可以更快地完成分析。
综上所述，现代液相色谱技术是一种高效、灵敏、准确的分析技术，它可以用来分离、鉴定和定量分析混合物中的各种成分，并且可以在短时间内完成分析。
液相色谱仪技术参数
液相色谱仪（紫外检测器）1．应用范围：广泛用于制药、食品、环保、化工行业的研发及各种常规分析2．配置要求：2.1四元梯度泵（内置脱气系统）1台2.2自动进样器1台2.3柱温箱1个2.4紫外检测器1台2.5变色龙色谱软件1套2.6色谱柱（规格C18,5UM,4.6x250MM）1根2.7保护柱1个2.8保护柱芯2个2.9样品瓶200个2.10品牌电脑工作站1套2.11激光打印机1台3、技术要求3.1四元泵3.1.1流量范围：0.001~10.000 mL/min，步进0.001 mL/min★3.1.2最大压力62Mpa3.1.3流量准确度：<0.1%★3.1.4流量精密度：<0.05%3.1.5 梯度混合精确度：< 0.15%3.1.6 溶剂种类：4种3.1.7泵清洗系统：主动式单独流路清洗柱塞3.1.8液滴计数器：自动监控泵漏液情况和泵清洗液情况3.2 自动进样器：★3.2.1 兼容孔板及常规样品瓶3.2.2 进样方式：无样品损失，无残留3.2.3 进样体积：0.01~100μL3.2.4 进样体积准确度：≧0.5%★3.2.5 交叉污染：0.004%★3.2.6自动防沉淀振摇及侧移功能3.2.7 在线稀释和在线衍生功能3.3 柱温箱3.3.1安全性能：具备防止误开门功能，内置温度、湿度、气体传感器，在线监测泄露情况。
3.3.2温控范围：5~80℃3.3.3温度准确度：优于±0.5℃3.3.4温度稳定性优于±0.5℃3.3.5温度精度：优于±0.5℃★3.3.6容量：最多12支色谱柱★3.3.7预留额外的六通阀或十通阀位置，可用于在线样品前处理等应用3.4 紫外检测器3.4.1频带宽度：6 nm at 254 nm3.4.2 波长范围：190-900 nm★3.4.3 波长精确度：±0.1 nm3.4.4灯：氘灯、钨灯（可选配），均具温度监控功能，自动识别包括序列号在内的所有信息★3.4.5 数据采集频率：100HZ★3.4.6 自动校正：D-alpha线法自校正，氧化钬滤光器验证★3.4.7 流通池具备自动温度调节功能3.5 软件:3.5.1操作系统:可兼容Windows XP和windows Vista★3.5.2色谱控制分析数据库:通过高性能USB方式和电脑进行数字信号传输,可编制分析方式和顺序，兼容Microsoft Access、Oracle、Microsoft SQL Server多种数据库平台。
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现代液相色谱技术导论•自动进样器六通口进样阀六通口(SiX-PortinjeCtiOnVa1Ves)、回转阀是最常见的进样器类型。
阀门处在载样(1oad)的位置时，样品和废液的口分别与进样环(1oop)的两端连接，而泵和柱子则连接在一起。
为了进样样品，回转阀要移到进样(inject)的位置，此时进样环里所含的物质就被送入柱子中；同时，样品的入口和废液的出口连接在一起用于冲洗的目的，若有必要的话。
一个聚合物制成的同转密封垫圈用来连接三对接头。
阀门的回转密封垫圈通常是用含氟聚合物或者PEEK制成的，同时也包含其他额外的物质来提高结构的完整性。
用于制造回转密封垫圈的PEEK 混合材料与用在挤压PEEK管线的不同,所以不存在任何与四氢吠喃和氯化溶剂的兼容问题。
填充•进样环进样填充-进样环进样模式下，进样样品的体积是由样品进样环的体积来控制的。
假如样品的进样环被校正过而且能够被样品溶液装满，那么填充-进样环的进样方式就能非常准确和精确。
更换样品进样环非常不方便，因此如果进样的样品体积需要经常更换，那么填充-进样的进样操式一般就不适用了。
部分进样环进样这个操作的操作和填充-进样的模式是一样的，除了进样环的体积要比进样体积大，并且测量的样品量必须全部放在进样环之外。
在进入柱子之前，如果样品要流过进样环的大部分体积，就会出现不想要的谱带加宽的问题。
如果样品的吸取和进样环的注满是精确和准确的，而假如只有少于一半的进样环体积被使用了，那么部分进样环的进样也能非常精确和准确。
对于手动进样来说，最好能保持进样体积恒定不变，以进样W50%或者2200%进样环体积的样品来最大化准确度。
自动进样器的设计很多自动进样器能达到样品进样体积25μ1时峰面积的RSD<0.5%的效果。
进样-体积的准确度可能会低于这个水平，原因是样品进样器或者进样环的校正出现偏差。
由于层流效应导致的进样环填充不完全也可以引入体积差。
通常进样的精确度要比准确度重要，因为可以使用标准品或者校正品来弥补这个准确度的误差。
对于所有的方法，自动进样器最好能在恒定体积的进样模式里应用，这样每次进样的样品体积都会相同(虽然未必是准确的)，包括校正标准品和样品。
按照这个程序操作，进样的准确度就显得不那么重要，而极好的精确度就能给出令人满意分析结果。
在样品进样之后进行空白溶液的进样，假如空白溶液的色谱图中出现小的色谱峰，那么就表明分离中存在样品转移(carryover)的问题。
样品转移是前一次分离完成后由样品保留在HP1C系统内而造成的。
进样一个高浓度的样品之后紧接着进样低浓度样品，就尤其容易会发生这种问题。
很多自动进样器都具有在两次进样之间,清洗针头和样品接触通路的功能(为了避免成样品转移)。
使用清洗溶剂时，这些功能的范围包括了静态清洗样品瓶到主动冲洗的能力，清洗溶剂应能很容易溶解样品，而且和流动相也兼容。
样品的吸取主要是通过进样针在xyz轴方向上往样品瓶移动来实现的。
循环时间指的是自动进样器完成一次进样所需的时间，从它被给予开始信号的那一刻算起。
最少来讲，循环时包括捡起样品瓶的时间以及把样品进样到柱子的时间。
除此之外的清洗步骤或者其他程序会增加循环时间。
只要自动进样器的循环时间对样品的处理量没有显著的影响，那么它就不是什么重要的问题。
循环时间W5%的分离时间，通常被认为是可以接受的。
减少自动进样器循环时间的负面影响的其中一个方法是，使用某些系统的“提前-载样”功能。
使用这种功能时，自动进样器在前一个样品洗脱的过程中执行清洗循环和选定下一个样品的任务。
分离实验一旦完成后，自动进样器就可以执行进样，这样就能缩短有效的循环时间至几秒钟之短。
目前常用的三种自动进样器设计如下：・拉式填充拉式一注满自动进样器只有当样品量非常充裕的时候才最适合使用这种装置，比如用于监视生产过程的实验中。
这种设计非常简单和可靠，因为它使用一个填充过量而体积固定的进样环，能具有非常好精确度和准确度。
图3・20拉式-填充自动进样器的设计（a）把样乩从样品瓶内转移到进样环;（b）进样p∙来自家的流动相;小流往柱子・推式填充推式一注满填充进样器推式•填充自动进样器可以用在填充-进样环或者部分填充-进样环的模式里。
在部分填充的模式里，精确度取决于注射器控制器的精确度。
因为几乎所有的样品都可以进样（到系统中），推式•填充自动进样器并不浪费很多样品，可能只有10μ1的品留在针头和连接的管线里。
推式-填充自动进样器设中使用了一个压力较低的针头密封垫，它很少带来麻烦。
密封垫图3∙21推式•填充自动进样器的设计.(a)把样品力样品瓶内转移至进样针头和注射器;(b)样品进样环的填充;(C)进样。
P，来自泵的流动相;以流往柱子;叫到废液池・进样针置于进样环之内(need1e-in-1oop)进样针-置于-进样环内的自动进样器因为针头的顶尖在液流里，并且进样针-置于一进样环内的自动进样器把从样品瓶里抽取的所有样品都进样到子里，所以这种进样技术不会浪费样品。
这也使得进样针-置于-进样环内的自动进样器最适合用在样品量非常小的情况里。
这种自动进样器通常使用一个IoOμ∣的样品头•进样环，对于大多数分析要求来说已足够。
如果需要较大的进样体积，必须装配体积更大的针头-进样环；这种类型的针头-进样环要比常规的样品进样环昂贵得多。
这种自动进样器依赖于样品针头和进样阀之间的高压密封,对于使用这种设计的某些装置来说这是一个弱点。
这种自动进样器是非常流行的设计，因为样品浪费比较少，而样品转移也很少。
图3-22进样针■宜于■进样环内的自动进样器的设计(a)把样品自样他瓶转移至进样针头-进样环里;(b)进样p∙来自泵的流动相小流往柱子;叫到废液池进样量大小的影响样品进样量的大小会影响色谱图的外观，不仅仅会表在峰高或者峰面积上，也会影响到保留时间和峰形。
谱带展宽受样品进样体积和进样溶剂相对于流动相的强度等影响。
进样体积进样体积对峰宽的影响：匕尸（[4∕3]V：+%严（2-27）式中.匕是观察到的峰体积,心是由于柱子内谱带扩展而产生的峰体积,匕是在等度分离中把流动相用作进样溶剂时的进样体积等式（2-27）可以用来计算对于一个给定的峰体积的增加量,最多可以进样的样品量是多少;如果我们能接受分离度损失5%,那么峰宽增加5%也能够被容表3-3中记载的各种可允许的进样体积，这些值是在不同的柱子和保留因子的基础上，以峰宽增加5%来计算的。
当柱子的体积较小，能给出较大的塔板数和（或）存在较早洗脱的色谱峰时，样品的进样体积也应较小，这些情况都能产生较窄的色谱峰。
大多数自动进样器在进样体积25μ∣时，产生的非精确度RSDWO.5%。
表3-3滑带加宽的限度为5%时所允许的进样体积柱子特征峰体积（选择体积）'（u∣）1(mm)⅛(mm)4(μm)Λ∕(h-3)fc=0.5k=2fc=2015() 4.6 5.0IOO(X)90^(107180(20)1270(130)150 2.1 5.0IO(MN)20(2)40(4)265(25)1∞ 4.6 3.0I1IOO6()(6)IIS(IS)KOO(<NnIOO 2.1 3.0I110012(2)25(15)170(20)I(M)11 1.8185009(1)20(2)130(15)50 1.0 1.8IR5002(<1)5(<1>30(3)50 4.6 3.0550040(4)MI(IO)565(60)50 2.1 3.055008(1)20(2)120(80)50 1.0 3.055002(<1)S(<1)25(3)50 4.6 1.8920030(4)M(7)44O<5O)50 2.1IX92007(1)IS(2)90(10)50 1.0 1.892002(<1)3(<1)20(2)•等式（2-27）."4,=却.”>;注■金遗祥体机工后寿（理论上）的值已拄械除以了I5.这是把样品女子,先迫徉坏时的犷散也计算&内的此果'球体枳（μj）进样体较（川）对于内径W2.1mm,填充颗粒大小23μm的柱子，自动进样器必须能够精确地进样体积非常小的样品。
在所有等度洗脱的例子里，峰宽随保留时间的增加而增加，因此保留时间较长的样品能够承受更大体积的样品进样量。
通过改良方法来增加样品的保留时间有助于最小化柱外的谐带展宽,但是这种方法较少采用这是因为以峰宽的减少和保留时间的增加作为交换条件往往是不值得的。
进样溶剂当进样溶剂和流动相不配时，等式（2-27）就不再有效。
如果进样溶剂比流动相弱很多，样品就会浓缩在柱子的头部（入口）。
由于流动B溶剂每改变10%,k值就会改变大约2.5倍，因此比流动相中的B溶剂弱10%的进样溶剂就应该能延迟样品进入色谱柱；溶剂-强度的差别越大越有效。
当样品的进样体积较大，用水稀释样品有助于进样更大量的样品。
使用比流动相强的进样溶剂会对较早洗脱的峰有负面应向，而对保留时间较强烈的峰的影响就比较小。
而且一定要确保标准品和样品的进样溶剂能互相匹配。
进样溶剂强于流动相就会倾向于把样品“冲洗”到柱子里，直到样品在流动相里完全被稀释。
当进样体积较大和（或）者柱子体积较小时，为了能了解结果是否可以被接受，最好的办法是把它与样品溶解在流动相里并且进样体积比较小的情况下所得的保留间和峰形相比较。
对于B溶剂＜50%的流动相来说，稀释溶解在1:1的100%B:水或者缓冲剂里的样品通常可增大样品的进样量而不会产生负面的结果。
阀门的其他应用自动进样阀门在自动进样器里使用最广泛，但是同样的阀门也有其他方面的应用。
这些应用包括・柱切换；二位阀（可用于样品富集）和多位阀（从三根色谱柱中选择一根）・样品片段的收集；分部收集器（制备色谱中常用）：以时间收集为基础运行或者只有当色谱峰被洗脱出来的时候样品片段的收集才会开始。
・废液导流。
用来保护检测器，以及在等度洗脱中用于流动相的循环使用。