多肽体外抗氧化总还原力的测定
抗氧化能力指数测定原理及应用
抗氧化能力指数测定原理及应用随着人们健康意识的提高，抗氧化能力成为的焦点。
抗氧化能力是指机体在面对氧化应激时，消除和降低氧化压力的能力。
为了更好地了解机体的抗氧化能力，抗氧化能力指数的测定变得越来越重要。
本文将详细介绍抗氧化能力指数测定的原理、方法及应用。
抗氧化能力指数测定主要基于氧化还原反应的原理，通过测定样品对自由基的清除能力来评价其抗氧化能力。
一般情况下，测定的指标包括总抗氧化能力、还原力、氧自由基清除能力等。
总抗氧化能力：总抗氧化能力是指机体对氧化应激的综合防御能力，包括酶类和非酶类抗氧化物质。
测定总抗氧化能力的方法主要是基于比色或荧光法，通过检测样品对自由基的清除率来计算总抗氧化能力。
还原力：还原力是指样品对氧化剂的还原能力，通过测定样品在特定条件下的还原能力，可以评估其抗氧化能力。
常用的测定方法包括邻苯三酚自氧化法和铁离子还原法。
氧自由基清除能力：氧自由基是导致氧化应激的主要因素之一，通过测定样品对氧自由基的清除能力，可以了解其抗氧化能力。
常用的测定方法包括电子自旋共振法和化学发光法。
抗氧化能力指数测定在多个领域均有应用，如生物学、医学、营养学等。
以下是几个具体应用的例子。
生物学：在生物学领域，抗氧化能力指数测定被广泛应用于研究物种演化、生物衰老、药物筛选等方面。
通过测定不同物种或不同组织的抗氧化能力，有助于深入了解生物体的抗氧化机制和衰老过程。
医学：在医学领域，抗氧化能力指数测定可以帮助医生评估患者的抗氧化状态，预测其对疾病的易感性。
例如，某些疾病如癌症、糖尿病等与机体的抗氧化能力密切相关，通过测定患者的抗氧化能力，可以为疾病的预防和治疗提供参考。
营养学：在营养学领域，抗氧化能力指数测定可以评价食品的营养价值。
机体的抗氧化系统需要多种营养素的支持，如维生素C、维生素E、硒等。
通过测定食品中的抗氧化物质含量，可以为膳食营养推荐提供依据。
抗氧化能力指数测定对于评价机体的抗氧化状态具有重要意义，它不仅有助于了解个体的健康状况，还可为疾病的预防和治疗提供指导。
西兰花多肽的提取及其抗氧化活性分析
西兰花多肽的提取及其抗氧化活性分析
徐俊杰;赵伟;朱文赫;裴亚萍;吕士杰
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2017(038)011
【摘要】采用丙酮沉淀法提取西兰花花蕾粗多肽,并利用凝胶过滤层析对提取物进行分离纯化,制备西兰花多肽组分;采用超氧阴离子、DPPH自由基的清除及还原力测定实验研究多肽组分的抗氧化活性.结果表明:利用丙酮沉淀法、凝胶过滤层析等方法可分离获得3个组分,其中组分II在0.01 mg/mL和0.1 mg/mL浓度时,其超氧阴离子自由基清除率分别为23.38%、45.19%,高于同浓度维生素C;还原力分别为同浓度维生素C的1.37倍和1.6倍,表现出了良好的抗氧化活性,为进一步开展活性研究及西兰花多肽功能产品开发提供了参考.
【总页数】4页(P44-47)
【作者】徐俊杰;赵伟;朱文赫;裴亚萍;吕士杰
【作者单位】吉林医药学院基础医学院,吉林吉林 132013;中国医科大学小儿外科,辽宁沈阳 110001;吉林医药学院基础医学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院临床医学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院基础医学院,吉林吉林 132013
【正文语种】中文
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1.桃仁多肽的酶法制备及其抗氧化活性分析 [J], 杨玉蓉;李安平;钟政昌;李刚
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体外抗氧化功能评价方法研究进展
体外抗氧化功能评价方法研究进展傅裕【摘要】体外抗氧化功能评价发展至今,已形成一个比较系统的体系.本文概述了一些常见的体外抗氧化功能评价方法和国内外新的研究进展,并对其优点、局限性做了简要归纳总结,同时对抗氧化功能评价未来发展进行展望.以期为抗氧化功能评价研究提供有益参考.【期刊名称】《肉类研究》【年(卷),期】2010(000)011【总页数】6页(P41-46)【关键词】体外抗氧化功能评价;化学评价法;生物活性评价法【作者】傅裕【作者单位】西南大学,食品科学学院,重庆,400715【正文语种】中文【中图分类】TS201一般而言，人体的抗氧化防御系统是平衡的,体内自由基的产生和清除也是平衡的。
然而一旦自由基产生过多或抗氧化防御体系出现故障,体内自由基代谢就会失衡,从而导致脂质过氧化、细胞损伤、DNA断裂等。
现代医学研究表明，衰老、癌症、心血管疾病、炎症的产生与发展等都可由自由基及其代谢产物诱发[1],化妆品中的自由基还会直接攻击人的皮肤，从表皮细胞中抢夺电子，使皮肤失去弹性，粗糙老化[2]，因而研究抗氧化功能评价极其重要。
抗氧化功能评价方法包括了体内评价和体外评价。
但体内抗氧化方法涉及到动物模型和人体实验，费用昂贵、周期过长，不适用于食品或添加剂抗氧化性的初筛工作。
所以，对于样品量很大或只是进行初筛样品的抗氧化功能评价时都采用体外抗氧化功能评价。
体外抗氧化功能评价发展至今，已经形成了一个比较系统的体系了，包括很多评价方法，我们将这些方法划分为两类[3]：即化学评价方法和生物活性评价方法。
其涉及营养学，保健食品，功能食品，药学，毒理学，生物化学等多个学科。
1 化学评价方法1.1 体外总抗氧化能力的测定（TAC测定）体外总抗氧化能力可以通过测定还原力[4，7,8]的大小来表示。
目前已有许多研究证实抗氧化能力同还原力是密切相关的[5]，抗氧化剂通过自身的还原作用提供电子清除自由基，还原力越强，其抗氧化能力也就越强。
抗氧化实验方法
1还原力的测定样品2ml加到2ml L磷酸盐缓冲液和2ml 1%的铁氰化钾溶液的混合液中;混合物在50℃保温20min,然后在反应混合物中加入2ml 10%的TCA,混合后以3000rpm离心10min,取上清液2ml与2ml蒸馏水以及%氯化铁在反应试管中反应,10min后测定其在700nm处的吸光值;吸光值越大表明还原力越强;注意：建议蛋白浓度以5mg/ml左右变化,例如,5之类变化;但具体情况应根据吸光值大小而定;L 的磷酸盐缓冲液的配制见附表;铁氰化钾溶液应盛装在棕色瓶中;比色皿的用法：可见光>400nm用玻璃比色皿即没有标字母或者标G的比色皿,紫外光时<400nm用石英比色皿即标Q字比色皿;2 DPPH自由基清除活性的测定将样品液添加到含mmol/L DPPH的95％乙醇中,混合,振荡,在室温下放置30min,然后在波长517nm处检测Ai;清除率计算公式为：空白为ml 95%的乙醇加入ml蒸馏水调零;式中：Ac——对照为ml DPPH溶液加上ml蒸馏水在517nm处的吸光值；Aj——样品液加上ml 95%的乙醇在517nm处的吸光值；Ai——样品液加上ml DPPH溶液在517nm处的吸光值；注意：建议酶解液蛋白浓度以2mg/ml 左右变化,如,1,2,之类变化,但是具体情况应视清除率而定,最终结果应有清除率大于50%和小于50%的情况;DPPH样品有毒,需戴口罩和手套进行操作;而且DPPH试剂很昂贵,用时注意节约;mol/L DPPH 乙醇溶液的配制：准确称取,用95%的乙醇溶液溶解并定容到100ml;3 在卵黄磷脂体系中抗氧化能力的测定以卵黄脂蛋白为底物的LPO模型反应体系包括:体积比为1:25稀释的卵黄悬液卵黄用等体积的,LPBS配成,使用前磁力搅拌10min mL、一定浓度的样品溶液、25m moll/LFeSO4溶液,用PBS缓冲液补足至;对照管除不加样液外其他试剂同前;将上述2种试管同时置37℃恒温水浴锅中保温培养1h;取出后,加入20%,静置10 min后,与对照管于3500r/min离心10min,取上清液,分别加入质量分数为%硫代巴比妥酸TBA溶液,加塞于100℃水浴15min,取出冷却;空白管以溶液代替,在532nm下测定吸光度,样品对卵黄脂蛋白LPO的抑制率表示为:SA%=Ac一AS/A C×100式中:Ac一不加样品的吸光度As一加入样品的吸光度注意：卵黄溶液不用时应放置冰箱保存;酶解液蛋白浓度以5mg/ml左右调整,但具体应视清除率大小而定,对酶解液蛋白浓度进行调整;硫代巴比妥酸溶液需放置于棕色瓶内保存;并以50m mol/L NaOH溶液配制;再在50℃水浴溶解;FeSO4溶液应以棕色瓶盛装;4 过氧化值的测定参照本食品学院林华娟等老师主编的食品分析实验讲义一书;5 超氧阴离子自由基清除率的测定邻苯三酚自氧化速率V对照：对照组和空白对照组加入4ml 蒸馏水去离子水和, mol/LTris-HCl缓冲溶液,在25℃水浴20min后,样品组加入或3m Mol/L邻苯三酚溶液,空白组以相同体积蒸馏水去离子水代替;震匀后马上在320nm处测定吸光值;迅速混匀并开始计时,每隔30 s读取吸光值,4 min后结束,以空白对照管调零;作吸光度随时间变化的回归方程,其斜率为邻苯三酚自氧化速率V对照;V对照在min~min之间,否则应调整邻苯三酚加入量样品自氧化速率V样品：样品组和空白组均加入一定浓度的样品溶液4ml, mol/LTris-HCl缓冲溶液,在25℃水浴20min后,样品组加入或3m Mol/L邻苯三酚溶液,空白组以相同体积蒸馏水去离子水代替;震匀后马上在320nm处测定吸光值;迅速混匀并开始计时,每隔30 s读取吸光值,4 min后结束,以空白管调零;作吸光度随时间变化的回归方程,其斜率为邻苯三酚自氧化速率V样品,按下式计算样品对超氧阴离子的抑制率：式中：抑制率%=V对照-V样品/V对照×100V对照－对照组邻苯三酚自氧化速率ΔA/minV样品－样品组邻苯三酚自氧化速率ΔA/min动物实验资料：摘自鹰嘴豆:抗氧化剂的抗氧化效果受到多种因素的影响,只有在生物体内具有抗氧化作用的物质才能有效的清除体内产生的自由基,才能表现出一定的生物活性;由于体外抗氧化测定方法容易操作,周期短,因此评价一种物质的抗氧化效果往往首先采用体外抗氧化体系;但体外抗氧化体系往往与人体内的生理环境相差太大,许多研究结果表明采用体外方法评价有效的抗氧化剂进入人体后却表现不出应有的抗氧化效果,因此抗氧化剂的抗氧化效果在采用体外方法进行初步评价后应采用动物实验进行体内评价;人体在正常生理代谢过程中会产生少量的含氧自由基,如超氧阴离子、羟自由基、过氧化氢等,这些自由基通过自然存在于体内的抗氧化酶如超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶及抗氧化剂如抗坏血酸、维生素E组成的抗氧化系统来消除;因此,在正常状态下,体内自由基维持在一定水平并处于动态平衡中,正常量的自由基对细胞的生长、分裂、解毒等具有有益的作用,在杀菌、免疫调节等方面具有积极而重要的意义;然而,随着增龄或在某些病理状态下以及机体受到创伤时,体内抗氧化酶活性下降,从而导致机体代谢异常而骤然产生大量活性氧自由基；或由于机体抗氧化物质不足,使促氧化剂与抗氧化剂之间的平衡失常,致使自由基与机的一些生物大分子,如蛋白质、核酸、脂质等发生反应,生成大量氧化物或过氧化物,并进一步引起细胞死亡和组织损伤;业已证明,氧化损伤与衰老、肿瘤、糖尿病、动脉硬化、神经退行性病变以及人类免疫缺陷病毒HIV感染等均有密切关系;D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型是按照衰老的代谢学说建立的,其机制与糖代谢紊乱6、D-半乳糖醇中毒7和活性氧自由基过剩有关；众多研究表明是生物体内含有半乳糖氧化酶,在催化D-半乳糖时可产生超氧阴离子自由基O2·-和H2O2；如果长期人为地给予过量D-半乳糖,使机体和细胞内自由基产生过量,除了造成组织细胞直接损伤外,还导致抗氧化酶活力下降和过氧化产物积累,从而表现出与人类自然衰老相似的生化变化、免疫功能低下、基因表达与调控异常细胞繁殖力下降及细胞退化性衰变等;有研究表明,D-半乳糖可降低人胚肺二倍体成纤维细胞HBS,从而使该细胞SOD活力降低和过氧化产物MDA增多,从而起到加速细胞老化的作用;本文在前述章节已经表明,鹰嘴豆蛋白酶解物具有体外抗氧化活性,但其在生物体内的作用效果尚不清楚;为此本章采用D-半乳糖诱导致衰老小鼠作为模型,分别以小鼠的血清、肝脏和心脏组织中的丙二醛MDA含量、超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活性作为评价指标,探讨鹰嘴豆蛋白酶解物在生物体内的作用,为揭示鹰嘴豆蛋白酶解物对体内过氧化状态的影响,明确其物质基础和相关机制提供证据;。
木薯叶片多肽的制备与抗氧化功能研究
木薯叶片多肽的制备与抗氧化功能研究张作达;王琴飞;吴若娜;牛晓磊;张振文【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2022(48)7【摘要】以木薯叶片为材料,采用碱溶酸沉法对木薯叶片蛋白质进行提取,通过正交法优化提取工艺,采用响应面法优化3种蛋白酶酶解条件,并对酶解所得多肽进行抗氧化功能验证。
结果表明,木薯叶片蛋白质最佳提取条件为:温度60℃、碱溶pH 11.0、提取时间2 h;酸沉pH 4.6,每克叶片鲜样的蛋白质最高得率为11.73%,所得蛋白质的纯度为92.57%。
响应曲面分析结果表明,利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶酶解木薯叶片蛋白质,其酶解最佳条件分别为:酶解温度36.74、35.00、36.45℃,pH值8.76、6.31、8.00,反应时间2.44、2.18、3.82 h,其中胰蛋白酶多肽得率最高,为41.89%。
酶解所得多肽溶液中游离氨基酸含量均极低,仅检测到酪氨酸,其质量浓度为9.90μg/mL。
抗氧化功能分析发现,中性蛋白酶酶解所得多肽抗氧化活性均较高,在其多肽质量浓度为1.5 mg/mL时,其DPPH自由基清除率、·OH清除率和总还原力分别为91.83%、79.3%、0.558。
因此,中性蛋白酶酶解所得多肽抗氧化活性最强,最适合制备木薯叶抗氧化肽。
【总页数】8页(P146-153)【作者】张作达;王琴飞;吴若娜;牛晓磊;张振文【作者单位】海南大学热带作物学院;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.核桃多肽-苦荞-藜麦复合粉制备工艺及体外消化和抗氧化功能特性分析2.黑龙江小麦麦胚多肽的制备及抗氧化功能研究Ⅱ．超滤法精制抗氧化麦胚多肽工艺条件的优化3.小米多肽的制备及其抗氧化功能研究4.酶法制备多肽-Fe的体内抗氧化功能研究5.菜籽多肽的制备及酶水解菜籽多肽抗氧化活性研究进展因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
化学发光法对花生多肽的体外抗氧化活性和对DNA损伤的保护作用的研究
体 外多 种活 性 氧 自由基 的清 除作 用 ， 首 次 研 究 了 并 花 生多 肽对 Ｄ Ａ损 伤 的保护 作用 。 Ｎ
基 金项 目 ： 益性 行 业 （ 业 ） 研 专 项 （ ０ ９３ ４ ） 农 业 部 科 公 农 科 ２０ ０ ０ ３ ， 技成果转化项 目（０ ９ ６ ００） 山东省 自主创新 成果 ２０Ｃ ０５ ， 转 化 重 大 专 项 （０ ９ Ｈ Ｘ１ １０ ） ２ ０ Ｚ Ｚ Ａ ３３ 收 稿 日期 ：０ ０— ４— ８ ２ １ ０ ２ 作 者 简 介 ： 丽娜 ， ，９ ８年 出 生 ， 士 ， 产 品加 工 刘 女 １７ 博 农 通 讯作 者 ： 岭 ， ，９２年 出 生 ， 究员 ， 产 品加 工 杜方 男 １７ 研 农
１．ｌ ， 品得率 ８ ．９ ， ９６ ％ 产 ６７ ％ 多肽 中相对 分 子 质 量低 于 １００的组 分 高 达 ９ ．３ ＿ 。 现 代 营 养 研 究 表 ０ ０５％ ２ Ｊ
明 ： 对分 子质量 低 于 １ ０ 相 ０的短肽 具有 较 强 的生 物 ０ 活性 。Ｊａ ｅｎ—Ｙ ｗ ｎ ｕ Ｈ ａ ｇ等 研 究 发 现 ， ． ／ Ｌ １ ０ｍｇ ｍ 花生 多肽 的还 原力 与 ０ ０ ／ Ｌ Ｂ Ａ 或生 育 酚相 ． ２ｍｇ ｍ Ｈ 当 ；．５ｍｇ ｍ ０ ０ ／ Ｌ花生 多肽 清 除 自由基 的能力 与 ０ ０ ．１
花生 也 称 落 花 生 ， 豆科 植 物 花 生 的种 子 。因 为 香脆 味美 ， 养 丰 富 ， 有 补 虚 、 寿 、 衰 老 、 容 营 具 益 抗 美
等功 效 ， 称 为 “ 生 果 ” 。研 究 采 用 碱 性 蛋 白酶 被 长 （ ｌａ ｓ） Ａｃｌ ｅ 水解 花生 冷榨 粕 制 备 花生 多 肽 ， 制备 过 ａ 在
功能性食品在体外模型中的抗氧化性评估
功能性食品在体外模型中的抗氧化性评估近年来，随着人们对健康生活的追求，功能性食品在市场上的需求不断增加。
功能性食品是指具有一定保健功能或能对人体机能产生积极影响的食品。
其中，抗氧化性作为一个重要的功能，备受人们关注。
本文将从体外模型的角度探讨功能性食品在抗氧化性评估中的应用。
首先，我们来简单介绍一下功能性食品的概念和抗氧化作用的重要性。
功能性食品是在食品的基础上添加特定的功能成分，如维生素、矿物质、膳食纤维等，以达到促进健康的目的。
而抗氧化作用则是指食物中的抗氧化物质可以减少或抑制自由基的产生，从而保护人体细胞免受氧化损伤。
抗氧化作用的重要性在于，自由基的过度生成会导致氧化应激，进而引起各种疾病的发生。
为了评估功能性食品的抗氧化性，研究人员通常会使用体外模型进行实验。
体外模型是指在体外环境下，使用细胞、组织或原代培养物等模拟人体生物过程的方法。
相比于动物实验和人体试验，体外模型具有成本低、快速、方便等优势，因此在抗氧化性评估中得到了广泛应用。
在体外模型中，常用的抗氧化性评估方法有多种，如DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、还原力能力测定法等。
以DPPH自由基清除法为例，该方法通过将DPPH自由基与样品反应，观察其颜色的变化来评估样品的抗氧化能力。
这种方法简便易行，且结果可靠，被广泛应用于功能性食品的抗氧化性评估中。
同时，体外模型还可以通过检测抗氧化物质在人体内的吸收、分布和代谢等方面的指标来评估功能性食品的抗氧化性。
例如，可以通过检测细胞中的抗氧化酶活性、检测血液中的抗氧化物质浓度以及测量氧化损伤标志物的含量等方式，间接评估功能性食品的抗氧化性能。
这些指标的变化可以提供关于功能性食品抗氧化性的重要信息。
然而，需要指出的是，体外模型只能部分模拟人体内的生物过程，其结果仅供参考。
而且，虽然功能性食品在体外模型中表现出良好的抗氧化性能，但并不能完全保证其在人体内也能发挥同样的效果。
因此，在功能性食品开发过程中，还需要进行动物实验和人体试验，以全面评估其保健功能。
体外抗氧化清除自由基能力测定方法总结
体外抗氧化清除自由基能力测定方法总结1 总还原力的测定采用Lee等[14]方法,略修改.取1.0 mL浓度为25μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL, 150μg/mL和200μg/mL的样液,加入2.5 mL磷酸缓冲液(0.2 mol/L,pH 6.6),然后加入2.5 mL 1%六氰合铁酸钾(K3Fe(CN)6), 50℃水浴30 min后加入2.5 mL 10%的三氯乙酸,混匀1 500 g离心10 min,取上清液2.5 mL加2.5 mL水和0.5 mL 0.1%的三氯化铁混匀,于700 nm处比色测定.以25~200μg/mL维生素C为标准溶液做标准曲线,以维生素C相当含量(mg/g)表示样品总还原力.2 DPPH·自由基清除率的测定采用Yamaguchi等[15]方法,取0.2 mL浓度分别为25μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL, 150μg/mL和200μg/mL的样液同1.0 mL 95%的DPPH乙醇溶液混匀,于37℃反应60 min后在517 nm处比色.DPPH自由基清除率用以下方程式计算: Y= [(OD517对照-OD517样品)/OD517对照]×100式中:Y为清除率,%;OD517对照为517 nm下对照品的吸光度值;OD517样品为517 nm下不同浓度样品的吸光度值.3 羟基自由基(·OH)清除率的测定桦褐孔菌多酚的羟基自由基(·OH)清除率由改动后的Nicholas Smirnoff[11]法测得。
反应体系(4 mL)包括:1 mL H2O2(8.8 mmol/L),1 mL FeSO4(9 mmol/L),1 mL水杨酸(9 mmol/L),1 mL多酚溶液(0.4mg/mL)。
H2O2最后加入以启动整个反应。
反应体系在37℃条件下温育60 min,在15 000×g条件下离心6 min。
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3.自认为有点靠谱的
综上所述，自认为多肽浓度暂时设置成0、1、2、4、8、20、40mg/ml 但pH 值对多肽总还原力的影响，酶与底物比对多肽总还原力的影响， 温度对多肽总还原力的影响。以及参考文献中多肽结构含量等与蝇蛆 多肽不一致等因素的影响，此浓度设置肯定存在不足。
三.试剂的配置
四.实验步骤
2.5ml样品+2.5ml1%铁氰化钾+2.5mlPH6.6磷酸盐缓冲液 （0.2mol/l）
50℃水浴加热 20min
2.5ml10%TCA
4000r/min 10min
上清液5ml+5ml水+1ml0.1%三氯化铁 于700nm处测吸光度值，Vc作对照
注意： 配置不同浓度的样品溶液梯度，依次加入一定量磷酸缓冲 液（保证溶液反应的PH环境，如2.5ml pH=6.6）、一定量 浓度的铁氰化钾溶液（2.5ml 1%），混合均匀，将该体系 置于一定温度下（比如：50℃,不能过高，不然会使物质 失活，适当加热可以保证反应程度和时间）恒温水浴放置 一定时间（如20min，以反应充分为宜），取出加入三氯 乙酸溶液混匀，置于离心机内3000转离心10min（离心机 使用时一定保证对侧样品等重），取一定量上清液于另一 试管中，加入蒸馏水和三氯化铁溶液（3K4Fe(CN)6 + 4FeCl3 → Fe4[Fe(CN)6]3 + 12KCl ，黄色晶体亚铁氰化钾放 进三氯化铁的溶液中，产生颜色很鲜艳的蓝色沉淀，即普 鲁士蓝，测定吸光度时要摇匀，且普鲁士蓝耐热性在 140℃，光照下较稳定，不用避光），混匀后用分光光度 计在700nm下测定溶液吸光度。
多肽体外抗氧化——铁氰化钾还原法 一．实验原理： 样品（蝇蛆多肽提取物）将铁氰化钾（K3Fe(CN)6）还 原成亚铁氰化钾(K4Fe(CN)6)，亚铁氰化钾再与三氯化铁 反应生成普鲁士蓝（亚铁氰化铁Fe4[Fe(CN)6]3），在 700nm测吸光度值，通过测定吸光度来判断受试物还原 力的强弱。 铁氰化钾溶液为黄色，猜测用三氯乙酸（CCL3COOH） 与反应剩余的铁氰化钾生成沉淀，离心除去，排除对吸 光度数值的影响。
二．查阅文献以确定多肽浓度
1．多肽浓度与吸光度完全成直线关系的
①
②
③
④
2.多肽浓度与吸光度关系不是成直线的（有一点弧度的）
① 此试验浓度太小，担心结果出 不来
② 因 此实验浓度梯度太大，槲 皮素出现了抛物线式图形， 建议在设置我们的实验时浓 度梯度大点，可明显，即在0.3与0.2相同后有 出现上升