BacT3D 60全自动血培养
血液及骨髓液标本细菌学检验
血液及骨髓液标本细菌学检验标准操作程序1.检验目的规范血液及骨髓标本细菌学检验，确保检验结果准确可靠。
2.适用范围血液及骨髓液培养3. 标本采集与运送3.1 标本采集3.1.1 无菌操作采集静脉血标本无需更换针头直接注入血培养瓶中。
3.1.2 釆血时间3.1.2.1 发热初期或高峰期时抽血；3.1.2.2 使用抗生素之前。
已使用抗生素者，下一次使用之前。
3.1.3 采血频率3.1.3.1 急性脓毒症：10min内从不同部位采集2-3套。
3.1.3.2 急性心内膜炎：1-2h内从3个不同体位采集3套。
3.1.3.2 亚急性心内膜炎：从3个分离部位采3套，间隔≥15min，如24h为阴性，要再采3套。
3.1.3.3 原因不明发热：从不同体位采2-3套，间隔≥60min，如24h为阴性，要再采3套。
3. 1.4 采血量以培养基的1/10-1/5为宜,新生儿一次采血0.5m1，儿童1-5ml，成人8-10m1。
3.1.5 骨髓标本严格无菌操作，对穿刺一侧部位准备同外科切口，用骨髓穿刺针从髂骨采集。
采集量一般为1-2ml。
3.2 标本运送3.2.1 采集标本后立即送到细菌室，不能及时送检可置室温，切勿放于冰箱。
3.2.2 冬季血培养瓶送检过程应采取一定的保温措施。
3.2.3 在细菌室下班时间，标本应送急诊化验室进行标本保温。
4. 检验步骤4.1 培养：扫描血培养瓶的条码，将血培养瓶置BACT／Alert 3D全自动血培养系统中培养。
4.2 阳性血培养瓶转种：当有菌生长时，仪器发出阳性报警，立即在生物安全柜中用无菌注射器抽取瓶内培养液直接涂片革兰染色，镜检，以电话方式告知临床医生镜检结果并登记危急值登记本。
同时转种血平板。
4.3 培养：血平板置于35℃培养箱培养18一48h。
4.4 培养结果观察：正常人的血液是无菌的，有菌落形成即为可疑致病菌，从琼脂平板上挑取可疑致病菌落进行涂片染色镜检。
除极少引起感染的微球菌和需氧芽孢杆菌外，均需要进行细菌鉴定和药敏。
全自动血液细菌培养分析仪校准规范(实验报告)
国家计量技术规范规程制修订《全自动血液细菌培养分析仪校准规范》实验报告2019年7月实验报告一、实验目的验证《全自动血液细菌培养分析仪校准规范》的适用性和可行性。
二、实验地点验证实验均在不同客户实验室完成。
三、环境条件实验过程中环境温度均在（10~30） C，相对湿度（10～90）%。
四、实验仪器与实验设计在验证实验中，对BD、BioMérieux、SIEMENS、山东鑫科、珠海迪尔等公司生产的11台全自动血液细菌培养分析仪进行了验证实验，覆盖了国内医院检验科微生物室、出入境检验检疫实验室及第三方医学检验微生物实验室常用的全自动血液细菌培养分析仪类型。
五、校准设备和试剂使用的全自动血液细菌培养仪校准装置，测量范围温度测量范围满足(20～50)℃，最大允许误差±0.1℃，光强度测量范围满足（0~10000）lx，最大允许误差±5.0%，经过计量校准。
六、实验结果6.1 BD BACTEC 9050验证实验根据校准规范的要求，采用全自动血液细菌培养仪校准装置对南京明基医院的BD BACTEC 9050进行验证实验。
（1）温度示值误差、温度波动度和温度均匀度采用全自动血液细菌培养仪校准装置对该型号仪器进行验证，结果如表1所示。
表1BD BACTEC 9050温度示值误差、波动度和均匀度校准结果（2）光源照度均匀度和重复性采用全自动血液细菌培养仪全自动血液细菌培养仪校准装置对该型号仪器进行验证，结果如表2所示。
表2 BD BACTEC 9050光源照度均匀度和重复性校准结果6.2 BD BACTEC 9120验证实验根据校准规范的要求，采用全自动血液细菌培养仪校准装置对南京医科大学附属逸夫医院的BD BACTEC 9120进行验证实验。
（1）温度示值误差、温度波动度和温度均匀度采用全自动血液细菌培养仪校准装置对该型号仪器进行验证，结果如表3所示。
表5BD BACTEC 9120温度示值误差、波动度和均匀度校准结果（2）光源照度均匀度和重复性采用全自动血液细菌培养仪校准装置对该型号仪器进行验证，结果如表4所示。
BacTALER3D-blood-bank
Becton Dickinson（BD）同意支付欧嘉隆公司（现 为生物梅里埃公司）专利费，所涵盖仪器和培养瓶， 包括应用於临床诊断的所有BacTec 960, 9240, 9120, 9050, 9240 MB, 9120 MB 和 MGIT。
Becton Dickinson（BD）承 认欧嘉隆公司（现生物梅里 埃公司）就BacT/ALERT所取 得有关专利的有效性和执行 性，并且同意在全球范围内 不再在任何专利注册局或法 庭进行针对以上专利的司法 程序。
• 温度 32~37°C • 中央数据处理器, 打
印机, 条码扫描器
4
以人为本的精心设计 以菌为标的可操作性 以全为捷的报告功能
引领“鱼和熊掌”两者兼得的时代潮流 3D--真正兼容血液/体液，细菌/结核杆菌培养的仪器
5
• 操控器和培养箱分离
• 体积小
– 240 个培养瓶/孵育组件
• 培养基选择
–所有血培养
建立反应曲线
14
判断和分析
• 判读方法
- 和培养基种类无关
–即时侦测阳性标本
–临界值判断功能提供 卓越的处理延迟进入 培养瓶能力
R eflectance U nits
6000
5000
3 4000
3000
2000
2
1 Sustained acceleration 2 Rate 3 Initial threshold
18
网罗各种细菌的 BacT/Alert分离细菌俱乐部
Abiotrophia adiacens
Candida sake
Actinobacillus actinomycetemcomitans Capnocytophaga canimorsus
医院检验科微生物检验仪器标准操作规程
医院检验科微生物检验仪器标准操作规程微生物检验实验室CO2培养箱标准操作规程 (48)微生物检验实验室生物安全柜标准操作规程 (50)微生物检验实验室普通冰箱标准操作规程 (52)微生物检验实验室低温冰箱标准操作规程 (53)微生物检验实验室普通离心机标准操作规程 (55)微生物检验实验室电热恒温水浴箱标准操作规程 (57)微生物检验实验室压力蒸汽灭菌效果检测标准操作规程 (58)PREVI 全自动革兰染色仪标准操作规程 (60)Bact/Alert 3D型自动血培养分析仪准操作规程 (62)Autobact全自动微生物分离培养仪标准操作规程 (66)VITEK 2 COMPACT全自动鉴定药敏分析仪标准操作规程 (67)DNP电热恒温培养箱标准操作规程 (75)OL YMPUS显微镜标准操作规程 (77)电热灼烧器标准操作规程 (78)旋涡混合器标准操作规程 (79)移液器标准操作规程 (80)VITEK比浊仪标准操作规程 (82)紫外线消毒车标准操作规程 (85)MI-01恒温金属浴标准操作规程 (87)MB-80微生物快速动态检测系统标准操作规程 (89)5.3.4 仪器将自动启动AUTO-START功能。
5.3.5 建议AUTO-START状态时不要开门，等待18～24小时。
6. 质量控制（不需要）7. 维护及保养7.1 每日由专人负责观察和记录培养箱温度、CO2浓度及CO2钢瓶压力。
7.2 每周做1次紫外线消毒，参见“5.2 AUTO-START的启动”。
8. 校正8.1 例行校正包括温度和CO2浓度，至少每年1次。
8.2 故障校正质控失控或仪器监测指标失控、仪器移位后及仪器因故障进行维修后需要校正。
8.3 校正后验收仪器校正后，微生物负责人对各项指标进行核实，指标达到要求方可。
9. 应急处理9.1 外接电源、电压必须匹配，并要求有良好的接地。
9.2 出现影响检验质量的故障，应立即转移内容物，放入备用CO2培养箱。
全自动血培养介绍
Vigano et al, New Microbiologica 27, 2004
头孢噻肟 Cefotaxime
金黄色葡萄球菌 89442
TTD (hrs) 30 25 20 15 10 5 0
0 µg/ml
5 µg/ml
10 µg/ml 20 µg/ml
BTA FAN Aer BACTEC Aer Plus
药物去除速度比较
万古霉素的定量免疫测定
• 培养瓶中接种10ml血液(来自健康的近期没有经过抗生 素治疗的患者)和不同浓度的万古霉素。立即从培养瓶 中抽取2ml液体，1400rpm，离心10分钟。将培养瓶放 入仪器中，培养1小时。再次从培养瓶内抽出2ml液体 并离心。用EMIT2000万古霉素分析法对万古霉素的含 量进行测定。该方法是同源酶免测定技术，用于定量 分析人血清或血浆中的万古霉素。
BD BACTECTM 安全性：使用一次性 持针器的重要意义
BD BACTECTM 9000 培养瓶可与BD VacutainerTM 持针器配套使用，无需采 集器费用：节约费用
*Study from Dr Weinstein (Health and Safety Consultant, Sudbury, MA) and R.Shannon, Epidemiologist Boston VA Hospital
其它种类的血培养系统的采集器和针尚未 在病区常规使用：BD BACTECTM无安全 性风险
BD提供一次性使用的持针器，并证实这 样可以减少针刺伤的风险和血中病原菌污 染的机会*
BD BACTECTM 安全性
血液采集过程中的安全性操作
• BD VacutainerTM System • 安全血液采集装置
3D血培养 2
Chapter title
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.18
Chapter title
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.19
Chapter title
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.20
Chapter title
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.14
Chapter title
培养时间
80%的瓶子第一天报阳 90%的瓶子第二天报阳 设置5天时间结果报阴 分支杆菌结果42天 储存1920个结果信息 仪器每隔10分钟读数一次
Chapter title
3D240UPS是内置 在控制模块之内的。 打开之后如右下图 注：在仪器关机后 再开机时还需要按 下UPS右上角电源 开关键
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.8
Chapter title
UPS打开之后的外观 如图所示红色的线需要 我们插进去然后盖上 白色盖子
C 是 230V
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.6
Chapter title
各部位连线
此图为控制模块背后的连线处
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.7
Chapter title
GCS - TM - 0351 - 2009/02/11 - chap 1.1 - p.24
血培养双侧双瓶送检对病原菌和污染菌判断的应用价值探讨
血培养双侧双瓶送检对病原菌和污染菌判断的应用价值探讨摘要】目的：探讨血培养双侧双瓶送检对病原菌和污染菌判断的应用价值。
方法：对该院2019年1—12月的1000份血培养标本进行回顾性分析，了解其病原菌分布，对部分患者开展双侧双瓶采血检测，以血培养中最常见的污染菌凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）为例，评价该方法对血培养污染菌判定的价值。
结果：1000份血培养病例中，奠定病原菌共109株，检出率是12.23%。
21份的最终检查结果是病原菌，而接受双侧双瓶血液样本采集的样本共90份，因此检出率是30.43%，明显高于单瓶血培养样本。
阳性血培养内，凝固酶阴性葡萄球菌检出率为22.7%，而单瓶报警检出率为18.1%，相对于双瓶报警方式而言明显较高。
结论：血培养检出病原菌种类仍以大肠埃希菌为最高，同往年相似。
开展采用双侧双瓶采血方法对判定CNS,是否为污染菌有一定作用，可提示临床结合患者具体情况综合判断，减少不合理用药。
【关键词】凝固酶；血培养；污染；双侧采血【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2020）21-0220-03血培养是临床上诊断血流微生物感染的关键性指标，也是重症感染、败血症等病症确诊的常用实验室检测技术。
血培养阳性样本内微生物的检测数据是临床疾病诊断的参考性参数，会对医生的诊断产生极大影响，并因此影响患者治疗效果[1]。
通常来说，能够由血培养内进行分离，并因此获得真正菌血症或真菌血症的病原菌。
但是在实际检测过程中，血培养污染菌的比重相对较大，这就会使得实验室检测的成本提升，极大地影响诊断质量。
凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）是临床上一种常见的病原菌，可是因为其是皮肤的正常菌群，在采样期间，被污染的几率相对较高，因此也是一种出现几率相对较高的血培养污染菌。
现今，学界并未研究出有效的方法来鉴别CNS是否为致病菌，或是污染菌[2]。
鉴于此，本研究以本院近12个月内血培养病原菌为例，采取回顾性分析的方式，分析污染菌有关实验检测技术的可实施性与实际运用效果。
3D全自动血培养仪标准化操作规程
全自动血培养仪标准化操作规程
【原理】
培养瓶内的各种营养物是微生物生长的物质基础，微生物生长过程中的代谢产物之一CO2将激活瓶内底部荧光感应物质而发出荧光，荧光信号变化与CO2变化成正比。
如果CO2持续增加，高于初始浓度和/或不同寻常的高CO2产生率，此标本即为阳性。
如果在最适条件下经过一定的时间培养后CO2水平没有显著变化，此标本即为阴性。
【操作步骤】
1. 放入培养瓶
点击放瓶键，使用条码扫描器将培养瓶上的条码输入进去。
打开抽屉，将培养瓶放入到抽屉中有指示灯亮起的任何空位即可，关闭抽屉，点击确认
图标。
2. 取出培养瓶
A. 阳性标本
当有阳性标本出现时，仪器会发出报警提示，屏幕相背景相应变成黄色，同
时取阳性瓶键会亮起，点击取阳性瓶键，打开抽屉，其抽屉内相应有阳性瓶位置的指示灯会亮起，可依次取出，然后关闭抽屉。
B. 阴性标本
当有阴性标本出现时，取阴性标本键会亮起，点击阴性瓶键，打开抽屉，其抽屉内相应有阴性瓶位置的指示灯会亮起，可依次取出，然后关闭抽屉。
3．开机
打开仪器的UPS电源，然后打开仪器的电源开关（仪器开关在仪器的背面）,程序会正常启动，出现710报警信息几十秒钟后即可正常工作。
4．关机
首先按键盘左上边的Esc键，然后输入YES命令，几十秒钟之后程序自动退出到MS-DOS状态（即C:\>状态），然后关闭一起电源，关闭UPS电源。