用碘显色法测定烟叶中的淀粉含量
碘显色法测定烟叶淀粉含量

碘显色法测定烟叶淀粉含量实验原理:为了快速准确地测定烟草中的淀粉含量,借鉴食品中淀粉的测定,建立了碘显色法测定烟样中淀粉含量的方法。
即在600nm处测定淀粉一碘反应液的吸光度,再根据淀粉标准曲线计算出烟草中的淀粉含量。
实验仪器和试剂:仪器:分光光度计、电子天平试剂:可溶性淀粉(标样)、碘和碘化钾(AR)、蒸馏水实验方法:一、溶液配制1 碘-碘化钾溶液:精确称取0.5000gI2和5.000gKI于烧杯中,用蒸馏水溶解后转入到250mL容量瓶中,定容。
2 淀粉标准储备液:精确称取0.1500g直链淀粉和0.6000g支链淀粉于烧杯中,用沸水完全溶解、冷却后,分别转入500mL容量瓶中,定容摇匀后各取30mL移入到同一个100mL容量瓶中,定容后得到了淀粉混合标准溶液。
3 40%高氯酸溶液:市售的高氯酸如果要配置精确就必须先标定下它的具体浓度,这个浓度是质量分数的。
如果要求不精确就可以用70%做为它的浓度了,然后进行稀释就好了。
4 80%乙醇-氯化钠饱和溶液:加入过量的氯化钠于80%的乙醇中,超声搅拌溶解后,直到溶液里还有没有溶解的氯化钠或者有氯化钠析出,此时转移上清液即可。
二、标准曲线的制作分别移取淀粉混合标准工作液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.O ml 置于50ml容量瓶中,加入5ml 40%高氯酸溶液,用蒸馏水定容,再取10ml定容后的溶液加1ml碘一碘化钾溶液使其显色,选定600nm为吸光波长,利用分光光度计检测。
根据所测数值作出淀粉的标准曲线。
其中x代表溶液中的溶液质量(单位为mg),Y代表吸光度值,R2=0.999要在以上。
三、样品测定准确称取磨碎的烟叶(过40目筛)O.2000g置于具塞三角瓶中,加入25 mL 80%的乙醇-氯化钠饱和溶液,50℃条件下振荡20min后过滤,再向滤渣中加入10 mL 40%高氯酸溶液,室温下振荡25 min,然后加入10 mL蒸馏水过滤,并将滤液置于100 mL容量瓶中,定容摇匀后即成待测液。
高氯酸萃取连续流动法测定烟草中的淀粉含量

1.01
4.82
4.61
4.68
4.20
4.09
4.11
0.26
0.24
0.30
0.42
0.43
0.45
3.31
3.37
3.35
5.09
4.93
4.82
变异来源
Source of variation 处理 A 间 处理 B 间 AXB 互作 误差 总变异
自由度
df 3 3 9 32 47
表 2 方差分析表
116
烟草农业科学
第1卷
2 结果与分析
2.1 样品处理的条件选择 不同提取条件下烟草淀粉测试结果见表 1;由表
2 可看出,烟草样品前处理实验中加入高氯酸的量和 加入酒精的量对淀粉的测定值的影响均达到极显著差 异,同时二者又存在着极显著的互作关系,两个实验 因素的 4 个不同水平的 SSR 测试结果表明差异均为 极显著(见表 3)。两个因素不同水平的实验组合的 淀粉测定结果的多重比较见表 4,其中实验编号 6 和 16 处理与其他处理的测试结果差异达到了极显著水
1ml
3.6ml
2ml
3.6ml
3ml
测定值 Found(%)
1
2
3
4.63
4.87
4.61
3.99
3.87
3.69
1.07
1.06
1.12
0.21
0.27
0.26
2.01
1.96
2.01
5.04
4.95
5.12
4.32
4.12
4.25
1.79
1.65
1.69
0.32
0.29
分光光度法测试卷烟用纸中淀粉的含量

34 第40卷第16期 2019年8月 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
Байду номын сангаас R & D 研究开发
淀粉是造纸工业重要的添加剂,以造纸 原料消耗 计,其用 量 居 纤 维、填 料后 的 第 三位 。在 北 美 与 西 欧 的 纸 张增 强 剂中,淀 粉占 9 5 %左 右。淀 粉被 作为助 剂 广 泛 应 用于 造 纸 工业中,湿 部 添 加 用于 提 高填 料、细 小 纤 维 的留着率和改善 纸 张的强度,表面施 胶用于改善 纸 张 的 表面 性 能 及 印刷 适印 性 能 等 [1] 。我们 近年来 对 国外 卷 烟用纸分析发现都有淀粉存在。但由于淀粉分离比较困 难,长期以来被认为是较 难 进行定量检测的造纸添加 剂 之一,国内未见 相 关 检 测 标 准。目前纸中淀 粉 含 量 测 试 多采用传 统 的 酸 水解 法 [2]。但 此方 法 操 作 过 程 繁 琐, 测 试 时间较 长,检出限 差,难 以满 足 卷 烟 用纸中淀 粉 含 量检测的要求。徐 嵘等利用碘与淀粉能产生 蓝色络合 物 的原 理,研 究了分 光 光度法 测定 纸 品中淀 粉 含 量 的 方 法 [3] 。本 课 题在 其 研 究 基 础 上 进 一 步 细 化,提 出了 更 好 的试样萃取方法,考虑了不同类型淀粉对测试的影响, 建 立了一种 操 作 简便、分 析 快 速、测 试 结 果 准确可靠 的 卷烟用纸中淀粉含量的测试方法。
1 实验部分 1.1 仪器与试剂
T 6紫外 分 光 光度 计(北 京普析 通用公司);卤素 水分 测 定仪(瑞 士梅 特 勒 公司);实 验 室 用 水为 超 纯 水 (18.2MΩ.c m),浓盐酸(优级纯,德国默克),稀盐酸 (1∶1),碘显色剂(0.01mol/l),L S-2氧化淀粉(广西 明阳生物科技有限公司),C S-8型阳离子淀粉(广西明 阳生物科技有限公司)。 1.2 试样处理
烟草中淀粉测定方法研究现状与探讨

烟草中淀粉测定方法研究现状与探讨许冬青1,3 彭黔荣*2杨敏3 王玉平4周淑平1张婕 1(1.贵州省烟草科学研究所分析检测研究中心,贵州贵阳 550081;2. 贵州中烟工业有限责任公司贵阳卷烟厂,贵州贵阳550003,3. 贵州大学化学与化工学院,贵州贵阳5500034.贵州中烟技术中心)摘要:烟叶经过调制烘烤后,其所含的淀粉转化为还原糖、果糖、蔗糖等,能参与调节烟气酸碱平衡,对烟气醇和性与芳香性具有重要作用的小分子化合物。
因此,精确测定不同时期,不同环节烟叶中淀粉的含量,有益于控制烟叶的品质。
本文介绍、比较了食品领域和烟草行业中淀粉测定的方法,认为伴刀豆球蛋白法可使烟叶中淀粉的检测工作更精准。
关键词:烟草;淀粉;检测方法;Research Status and Discussion on the determination of starch in tobaccoXu Dong-Qing1,Peng Qian-rong*2,Yang Min3,Wang Yu-ping4,Zhou Shu-ping1,Zhang Jie1(1 Tobacco Research Institute of Guizhou Province,Guiyang,550003)(2Guiyang Cigarettes Factory,China Tobacco Guizhou Industrial Co. Ltd.,Guiyang, 550003)(3 School of Chemistry and Chemical Engineering,Guizhou University,Guiyang,550003)(4 Guizhou ZhongYan technology center,Guiyang,550003)Abstract: During flue-curing starch in the primed leaf of tobacco was transformed into free reducing sugars, levulose,and sucrose etc. These small molecular compounds participate in acid-base equilibrium of smoking and play an important role in flavor of smoking. These compounds participated in acid-base equilibrium of smoking and play an inportant role in flavor of smoking. Therefore,the accurate determination of starch in tobacco leaf will beneficial to the收稿日期: 2011- 5-26 -基金资助: 贵州省科技厅工业攻关项目(黔科合GY字[2008]3036).作者简介:许冬青(1982-10),女,贵州,在读研究生,从事烟草成分分析研究。
碘量法测定淀粉含量实验报告

碘量法测定淀粉含量实验报告实验六:碘-淀粉比色法测淀粉含量一、实验原理对于淀粉含量较少的植株样品,也可采用碘–淀粉比色法。
淀粉在加热情况下能溶于硝酸钙溶液中,当碘化钾和硝酸钙共存时,碘能以碘–淀粉蓝色化合物沉淀全部淀粉。
将此沉淀溶于碱液,并在酸性条件下与碘作用形成蓝色溶液进行比色。
二、试剂1.0%硝酸钙溶液。
2.0.5%碘液:称5.00g结晶碘和10.00g 碘化钾,放入研钵混合干研,然后加10mL蒸馏水研至全部碘溶解,将溶液全部转入1000mL容量瓶定容后,贮于磨口试剂瓶。
3.5%含碘硝酸钙溶液:取10mL 0%的硝酸钙溶液,加入160mL水再加入3mL 0.5%的碘液混匀,现用现配。
4.标准淀粉溶液:称取纯淀粉50mg于研钵中,加3mL 0%硝酸钙溶液,研细并转移到100mL的三角瓶中,用15mL 0%的硝酸钙溶液冲洗研钵,无损地收集于三角瓶中。
将三角瓶置于沸水浴中煮沸5min,冷却后全部转入50mL容量瓶中并定容。
此液为1mg/mL的淀粉标准液。
5.0.1mol/L NaOH。
6.0.1mol/L HCl。
三、材料与方法绘制标准曲线取标准淀粉溶液:取7支管,编号,按下表顺序加入各试剂,混匀静置15min后离心,其他操作同样品测定步骤,显色后在590nm波长下测定光密度。
以光密度为横坐标,淀粉含量为纵坐标绘制标准曲线。
管号 1 2 3 4 5 6 7 标准淀粉溶液(ml) 0 0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 0%硝酸钙溶液(ml) 5.0 4..0 2.0 1.0 0 0.5%碘液(ml) 2 每管淀粉含量(mg) 0 0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 称取1~3g叶片,剪碎放入研钵,加5mL 0%的硝酸钙溶液,研磨成糊状移入100mL的三角瓶中,用10mL 0%的硝酸钙冲洗研钵,无损地收集于三角瓶中,瓶口盖上小漏斗,在沸水浴上煮沸3~5min(叶片含淀粉少的3min,含淀粉多的5min),使样品中淀粉转变为胶体溶液。
碘比色法测定淀粉含量

碘比色法测定淀粉含量
碘比色法是一种常用的测定淀粉含量的方法。
淀粉与碘形成复合物时,会呈现深蓝色的颜色,根据颜色的深浅可以推测淀粉的含量。
测定步骤如下:
1. 准备样品:将待测的样品(如食物、植物组织等)制成适当的浓度,使其能够被较为准确地测定。
2. 提取淀粉:采用热酸提取法或酶解法将样品中的淀粉提取出来。
其中热酸提取法是将样品加入盐酸或硫酸中,加热至淀粉糊状后进行提取。
酶解法则是使用淀粉酶将样品中的淀粉分解为葡萄糖后进行提取。
3. 碘溶液制备:制备适量的碘溶液,一般是用碘酸钾和碘化钾制备。
4. 反应:将提取的淀粉溶液与碘溶液混合,等反应一段时间后,观察溶液的颜色变化。
颜色越深,说明淀粉含量越高。
5. 分光光度计测定:使用分光光度计,将混合溶液置于光管中,通过比较混合溶液的吸光度与已知浓度淀粉溶液的吸光度,可以得出待测样品中淀粉的含量。
需要注意的是,测定淀粉含量时需保证操作准确,并根据测定
的样品选择适当的提取方法。
此外,测定时要排除其他物质对测定结果的干扰,如物质的颜色、光散射等。
检验淀粉的方法
检验淀粉的方法
首先,最常见的检验淀粉的方法之一就是使用碘液。
碘液是一
种常见的化学试剂,它在检验淀粉时会呈现出特殊的反应。
当碘液
与淀粉接触时,如果样品中含有淀粉,碘液会由无色变为蓝色或黑色。
这是因为淀粉分子结构中的螺旋状分子会与碘形成夹心化合物,从而呈现出这种特殊的颜色。
因此,我们可以通过观察样品颜色的
变化来判断其中是否含有淀粉。
其次,还可以利用酶的作用来检验淀粉。
淀粉在酶的作用下会
被分解成葡萄糖,因此我们可以利用这一特性来检验淀粉的存在。
一种常用的方法是利用淀粉酶,将待检样品与淀粉酶混合,经过一
段时间后,再加入碘液。
如果样品中含有淀粉,碘液会呈现出蓝色
或黑色;如果样品中不含淀粉,碘液则不会发生颜色变化。
通过观
察碘液的颜色变化,我们可以判断样品中是否含有淀粉。
此外,还可以利用光学显微镜来检验淀粉。
淀粉颗粒在光学显
微镜下呈现出特殊的形态,这可以帮助我们判断样品中是否含有淀粉。
通过观察样品的显微结构,我们可以看到淀粉颗粒的特征,从
而判断样品中是否含有淀粉。
总的来说,检验淀粉的方法有很多种,我们可以根据实际情况选择合适的方法进行检验。
无论是使用碘液、酶的作用还是光学显微镜,都能够帮助我们准确地判断样品中是否含有淀粉。
希望本文介绍的方法能够对大家有所帮助,让大家在日常生活中更加便捷地检验淀粉。
用碘显色法测定烟叶中的淀粉含量
用碘显色法测定烟叶中的淀粉含量一、实验原理:直链淀粉遇碘呈蓝色, 支链淀粉遇碘呈紫红色。
直链淀粉能吸附碘,使碘吸收的可见光的波长向短的波长方向移动,而显蓝色;碘和淀粉的显色除吸附的原因外,主要是由于生成“淀粉——碘包合物”的缘故。
该包合物改变了吸收光的性能而变色, 能均匀吸收除蓝光以外波长范围为400—750nm的可见光, 淀粉液即呈现出蓝色。
同理,支链淀粉和糊精也能吸附碘,但由于吸附的程度不同, 因此呈现的颜色不同。
淀粉遇碘究竟显什么颜色, 取决于该淀粉中直链淀粉与支链淀粉的比例。
该反应灵敏度高,所以常用来检验淀粉含量或碘的存在。
二、显色条件的确定:1.PH:淀粉与碘反应出现蓝色的环境可以是中性,也可以是酸性,但不能是碱性。
实验表明在不同的值溶液中淀粉与碘呈现颜色反应的显色情况是不同的, 在PH=3—5的弱酸性溶液中淀粉与碘的蓝色反应最灵敏,在弱碱性溶液中次之;在强酸性溶液中,反应呈现蓝紫色,在强碱性溶液中不显色。
因此,实验在遇到难以避免的碱性条件,用碘无法检验淀粉时,可先将碱性条件下的淀粉液加酸中和后再滴加碘液进行检验。
2.温度:对比实验表明, 在70℃以上时, 淀粉液遇碘不变蓝或变蓝, 但瞬间颜色消失;50℃—60℃时,变蓝,颜色消失也很快;只有在45℃以下时,淀粉液遇碘变蓝后蓝色不消失;在常温下将碘液加入淀粉液中显蓝色,但加热至50℃时蓝色也会褪掉。
因此,实验用碘测定淀粉时,要注意控制好加碘液时的温度,待检测的样品温度降到40℃以下时再滴加碘液检测。
3.时间:配好的淀粉溶液不宜放置时间过长,淀粉溶液越新鲜,与碘作用呈蓝色反应越明显,淀粉液存放时间越长,部分淀粉液会缓慢地水解为糊精等,降低反应的灵敏度,反应呈蓝紫色,甚至紫红色。
因此,实验所用淀粉液最好临时配制以保持其新鲜程度。
三、试剂:(1) 碘—碘化钾溶液。
称取2.6g 碘和5.0g 碘化钾,由于碘呈颗粒状,需先放入研钵中研磨,之后与碘化钾一起放入小烧杯中,加蒸馏水不断搅拌溶解,时间较长,应耐心搅拌直至完全溶解为止。
烤烟中直链-支链淀粉含量测定方法优化
烤烟中直链-支链淀粉含量测定方法优化罗丹;全学军;吴俊;戴亚;马扩彦【期刊名称】《中国烟草科学》【年(卷),期】2016(37)4【摘要】为了建立烤烟中直链-支链淀粉的快速高效测定方法,以云烟85为原料,考察了高氯酸浓度、超声时间、超声功率和液固比4个因素对高氯酸超声提取-碘显色-双波长法测定烤烟中淀粉含量的影响。
采用响应面Box-Benhnken实验设计原理及响应面分析方法优化了淀粉提取测定工艺。
结果表明,烤烟中淀粉提取测定最佳工艺为:高氯酸质量浓度为49.00%,超声功率为400 W,超声时间为8.50 min,液固比为27 mL/g。
在此条件下,加标回收率直链淀粉为104.45%~107.48%,支链淀粉为96.42%~100.51%,相对标准偏差RSD(n=3)<3.5%。
说明Box-Behnken 设计结合响应面分析法优化所得的淀粉测定方法具有较好的精密度及准确度,适合于烤烟淀粉含量测定。
【总页数】6页(P74-79)【关键词】烟草;淀粉;超声提取;响应面法【作者】罗丹;全学军;吴俊;戴亚;马扩彦【作者单位】重庆理工大学化学化工学院;重庆中烟工业有限责任公司【正文语种】中文【中图分类】TS411【相关文献】1.马铃薯中直链淀粉和支链淀粉含量测定方法的优化 [J], 王丽;罗红霞;李淑荣;刘小飞;潘妍;徐毓谦2.双波长法测定冰温贮藏西洋参中直链淀粉和支链淀粉的含量 [J], 李家磊; 管立军; 王崑仑; 高扬; 严松; 张志宏; 卢淑雯; 周野3.比较三种玉米在不同熟化条件下直链淀粉和支链淀粉含量的影响 [J], 杨万进4.比较三种玉米在不同熟化条件下直链淀粉和支链淀粉含量的影响 [J], 杨万进5.西洋参直链淀粉与支链淀粉的分离纯化与含量检测 [J], 陈德经;罗敏;苏文因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
碘显色法测定烟草中的淀粉含量
总之,通过不断完善和改进测定方法,有望为烟草品质评价和卷烟生产提供 更加准确和可靠的数据支持。
参考内容
摘要:
本研究采用高效液相色谱法测定烟草中的淀粉和果胶含量。实验结果表明, 该方法具有较高的准确性和灵敏度,为烟草成分分析提供了有效手段。
引言:
烟草是一种重要的经济作物,其品质和成分对卷烟的感官质量和健康危害具 有重要影响。淀粉和果胶是烟草中的重要成分,对于烟草的生长、加工和卷烟的 品质都有一定的影响。因此,准确测定烟草中的淀粉和果胶含量具有重要的实际 应用价值。
五、结论
本次演示介绍了碘显色法测定烟草中淀粉含量的方法,通过实验验证了其准 确性和可靠性。实验结果表明,不同品种的烟草样品中淀粉含量存在差异,这一 结果对于烟草品质评价和卷烟生产具有重要意义。与其它测定方法相比,碘显色 法具有操作简便、准确度高、重现性好等优点,因此具有广泛的应用前景。
展望未来,碘显色法测定烟草中淀粉含量仍需进一步研究和改进。例如,可 以研究不同提取条件对淀粉提取效果的影响,以提高测定的准确度;同时可以探 讨烟草中其他成分对淀粉测定的干扰因素,以便更好地纯化实验步骤。此外,随 着科学技术的发展,还可以将先进的分析仪器和方法引入到淀粉含量的测定中, 从而进一步减小误差和偶然因素的影响。
四、实验结果和分析
通过实验,我们得到了不同烟草样品中的淀粉含量数据(表1)。从表中可 以看出,不同品种的烟草样品中淀粉含量存在一定差异。其中,品种A的淀粉含 量最高,达到25.8%;品种B的淀粉含量最低,仅为17.4%。这些数据表明,不同 品种的烟草在生长过程中合结果的可靠性和准确性较高。实验中采 用了标准曲线法来提高测定的准确度,并且通过多次重复实验来减小误差和偶然 因素的影响。此外,我们还对实验过程中的关键步骤进行了检查和控制,以确保 实验数据的稳定性和可重复性。
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用碘显色法测定烟叶中的淀粉含量
一、实验原理:
直链淀粉遇碘呈蓝色, 支链淀粉遇碘呈紫红色。
直链淀粉能吸附碘,使碘吸收的可见光的波长向短的波长方向移动,而显蓝色;碘和淀粉的显色除吸附的原因外,主要是由于生成“淀粉——碘包合物”的缘故。
该包合物改变了吸收光的性能而变色, 能均匀吸收除蓝光以外波长范围为400—750nm的可见光, 淀粉液即呈现出蓝色。
同理,支链淀粉和糊精也能吸附碘,但由于吸附的程度不同, 因此呈现的颜色不同。
淀粉遇碘究竟显什么颜色, 取决于该淀粉中直链淀粉与支链淀粉的比例。
该反应灵敏度高,所以常用来检验淀粉含量或碘的存在。
二、显色条件的确定:
1.PH:淀粉与碘反应出现蓝色的环境可以是中性,也可以是酸性,但不能是碱性。
实验表明在不同的值溶液中淀粉与碘呈现颜色反应的显色情况是不同的, 在PH=3—5的弱酸性溶液中淀粉与碘的蓝色反应最灵敏,在弱碱性溶液中次之;在强酸性溶液中,反应呈现蓝紫色,在强碱性溶液中不显色。
因此,实验在遇到难以避免的碱性条件,用碘无法检验淀粉时,可先将碱性条件下的淀粉液加酸中和后再滴加碘液进行检验。
2.温度:对比实验表明, 在70℃以上时, 淀粉液遇碘不变蓝或变蓝, 但瞬间颜色消失;50℃—60℃时,变蓝,颜色消失也很快;只有在45℃以下时,淀粉液遇碘变蓝后蓝色不消失;在常温下将碘液加入淀粉液中显蓝色,但加热至50℃时蓝色也会褪掉。
因此,实验用碘测定淀粉时,要注意控制好加碘液时的温度,待检测的样品温度降到40℃以下时再滴加碘液检测。
3.时间:配好的淀粉溶液不宜放置时间过长,淀粉溶液越新鲜,与碘作用呈蓝色反应越明显,淀粉液存放时间越长,部分淀粉液会缓慢地水解为糊精等,降低反应的灵敏度,反应呈蓝紫色,甚至紫红色。
因此,实验所用淀粉液最好临时配制以保持其新鲜程度。
三、试剂:
(1) 碘—碘化钾溶液。
称取2.6g 碘和5.0g 碘化钾,由于碘呈颗粒状,需先
放入研钵中研磨,之后与碘化钾一起放入小烧杯中,加蒸馏水不断搅拌溶解,时间较长,应耐心搅拌直至完全溶解为止。
之后转移至1000mL容量瓶中,烧杯、玻璃棒用蒸馏水润洗两次,最后用蒸馏水定容, 摇匀。
放棕色瓶保存。
(2) 1mg/ml淀粉标准液。
称取0.1g可溶性淀粉,先用5ml蒸馏水悬浮,慢慢倒入60ml沸腾的蒸馏水中,搅拌下加热至沸,保持5min,冷却至室温后转入100mL 容量瓶中,用蒸馏水定容、摇匀。
溶液放4度冰箱里储存,放置超过一个星期要重配。
四、吸收波长的确定:
取1mg/mL淀粉标准溶液1ml,用蒸馏水定容至10ml,加入0.5ml碘-碘化钾溶液显色后,以空白(蒸馏水)为参比,测定光谱,仪器上显示在580nm处有最大吸收峰,但是为了排除干扰,并根据文献上所给参考,决定将测定波长选择在600nm 处。
五、标准曲线:
准确吸取1mg/mL淀粉标准溶液各0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.0mL,与蒸馏水分别配制10mL溶液。
加入0.5ml碘—碘化钾溶液,于600nm处测定各淀粉标准溶液的吸光度,每个浓度测定三次吸光度以取平均值,以吸光度均值对淀粉浓度作图,得淀粉工作曲线,得出线性回归方程及相关系数。
六、烟样中淀粉含量的测定:
(1)随机剪取一片烟叶的不同部位,总共称量0.1g。
在研钵中剪碎后待用。
(2)先往研钵中加入5ml热蒸馏水,将烟叶进行初步研磨;再加入5ml热蒸馏水,冲洗研钵壁上剩余的残渣,继续研磨一段时间直至研磨液无明显块状物。
(3)将研磨液转移至玻璃匀浆器,仔细研磨匀浆,直至匀浆器壁上无看到任何明显的丝状或块状物;之后用5ml热蒸馏水洗研钵两次,洗脱液也转移到匀浆器中进行研磨,合并匀浆液于100ml烧杯中。
可适当补充蒸馏水至体积足够研磨超声波变幅杆。
(4)用超声波细胞破碎仪400W,超声时间5s、间歇时间5s,破碎处理5min,此时发现容易产生大量的热。
(5)加热水至烧杯70—80ml刻度处,置电炉上不断搅拌加热5min。
(6)趁热进行抽滤。
残渣用热蒸馏水洗涤5mL×3,弃去残渣,合并滤液。
滤液再加热至沸腾,保持10 min,冷却至室温,转入100mL容量瓶中,用蒸馏水定容、摇匀。
(7)取10mL烟样淀粉样品液(样品原液体积可根据烟叶的淀粉含量而定),加入0.5mL碘—碘化钾溶液,以空白(10mL蒸馏水+0.5mL碘—碘化钾溶液)为参比,于600nm处测定样品液的吸光度,根据标准曲线计算烟样的淀粉含量。
七、重要注意事项:
(1)研磨、匀浆全程保持热处理。
由于淀粉主要存在于胞浆当中,并且以颗粒形式存在,用热水处理能使淀粉颗粒吸水、吸热而膨胀破裂,之后释放出来的淀粉能溶于热水形成胶体。
(2)匀浆时要仔细,尽量研磨到用肉眼看不到壁上的残渣。
(3)第一次加热时要保持不断地搅拌,使淀粉能够充分释放并且均匀分布形成胶体。
(4)抽滤洗涤时,先将真空泵关闭,待热水浸没残渣后再次开启。
(5)鲜烟叶及烘烤1天的样品,原液取用5ml,用蒸馏水补充体积至10ml。
(6)由于样品在比色时褪色速度较快,所以在用仪器对样品的淀粉含量进行测定之前才加入碘液;加入碘液后倒入比色皿的操作速度要较快,尽量测得最大的吸光值,准确率较高。
八、计算公式:
W
V V V c g /mg 21
⨯⨯⨯=
t )淀粉含量(
干重烟叶淀粉含量(mg/g )=淀粉含量÷G
式中:
C ——标准曲线上测得的样品淀粉浓度(mg /m1); V t ——样品定容后总体积(ml );
V 1——测定试管不加碘液前的总体积(ml ); V 2——加入样品原液的体积(ml ); W ——样品质量(g ); G ——水分校正系数;
水分校正系数查阅表:。