血培养污染及判定
血培养的临床应用
血培养标本的采集
从静脉取血。
不宜从静脉导管或静脉留置口取血。 若导管设施取血（不要弃去初段血，不用抗凝剂 冲洗），必须同时静脉取血，以求对比和解释。 不推荐使用真空采血针（蝴蝶针）将静脉血直接 入瓶。 不主张换针头入瓶 有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存。
血培养的时机
• 根据研究表明：细菌通常在病人寒战和发烧前1小时进入 血流
血培养的临床应用
血培养的适应症
一过性菌血症
常常是由于其它病因导致的并发症。通常是自愈性的，持续几分钟到几小时。对感染 组织的处理：如：脓肿、疖、蜂窝组织炎；污染粘膜表面的创伤性操作：牙齿修复、 膀胱镜检、尿道扩张术各种插管、引产、结肠镜检查;污染的外科手术：经尿道的前列 腺切除、烧伤感染清创术。
间歇性菌血症
• • • • • • • • • 大肠 肺链 金葡 肠杆菌科菌 脑膜炎奈瑟菌 乙链 伤寒杆菌 布氏杆菌 淋球菌
医院获得性菌血症：
• • • • • • • • • 凝固酶阴性葡萄球菌 大肠 金葡 肠杆菌科菌 绿脓杆菌 肠球菌 厌氧菌 肺链 酵母菌
儿童菌血症的分类
儿童：
• • • • 肺链 脑膜炎奈瑟菌 金葡菌 大肠杆菌
葡萄球菌心内膜炎
Staphylococcus Endocarditis
革兰氏阴性菌血症
Gram Negative Bacteremia
革兰氏阳性菌血症
Gram Positive Bacteremia
• 幼儿病人：
革兰氏阴性菌血症
Gram Negative Bacteremia 5 to 1000 cfu / mL
肿瘤
白血病 淋巴瘤 恶组 胰腺炎 骨髓发育不良综合征 肉瘤 良性心房粘液瘤 直肠癌 肝肿瘤
血培养病原菌分布及污染菌判定的实验室检查
摘 要 ： 目的 通 过 回顾 该 院 的血 培 养病 原 菌检 出情 况 以 及 污 染 茵 的判 定 分 析 ， 了解 该 院血 流 感 染 的 主 要 病 原 茵 构 成 比 ， 并 证 实 开展 双侧 双瓶 采血 检 测 等 实 验 室 检 查 方 法 ， 有 效 提 高 阳性 率 和 血 培 养 污 染 菌 的 判 定 。方 法 对 该 院 ２ １ 能 ０ ０年 ７ １ ～ ２月 的
的 安 危 。在 大 多 数 情 况 下 ， 可从 血 培 养 中分 离 得 到 代 表 着 真 正 菌 血 症 或 真 菌 血 症 的病 原 菌 （ 黄 色 葡 萄 球 菌 、 肠 埃 希 菌 、 金 大 铜
１２ 仪 器 与 材 料 Ｂ ＴＥ ９ ２ ． ＡＣ Ｃ １０全 自 动 血 培 养 仪 （ Ｄ， Ｂ 美
ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ａ ｔ ｒ ．Ｔｏ ｓｄ ｓ ａ ｄ ｔ ｗ— ｏ ｔ ｓ ｃ ｌ ｃ ｉｎ ｏ ｌ ｏ ｐ ｃｍｅ ｓ ｗｅ ｅｐ ｒｏ ｍｅ ｎ ｐ ｒ ｆｐ ｔｅ ｔ ｏ ｅ ａ ｕ ｔ ｈ ｌ — ａ ｈ ｇ ｎ ｃｂ ｃ ｅ ｉ ａ ｗ— ｉｅ ｎ ｏ ｂ ｔｌ ｏ ｌ ｔｏ ｆ ｏ ｄ ｓ ｅ ｉ ｎ ｒ ｅ ｆ ｒ ｄ ｉ ａ ｔｏ ａ ｉ ｎ ｓｔ ｖ ｌ ａ ｅｔ ｅｃ ｉ ｅ ｅ ｂ ｎ ｉａ ｉ ｎ ｆ ａ ｃ ｆ ｈ ｓｍｅ ｈ ｄ ｆ ｒｔ ｅ ｉ ｅ ｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｏ ｔ ｍｉ ａ ｔ ，ｔ ｋ ｎ ｏ ｇ ｌ ｓ ｅ ａ ｉ ｅＳ ａ ｈ ｌ ｃ ｃ ｕ （ ｃ ｌ ｇ ｉ ｃ ｎ ｅｏ ｉ ｔ ｏ ｏ ｈ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔ ｆｃ ｎ ａ ｎ ｎ ｓ ａ ｉ ｇ ｃ ａ ｕａ ｅ ｎ ｇ ｔ ｔ ｐ ｙｏ ０ ｃ ｓ ＣＮＳ ｏ ｘ ｍ ｐ ｅ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｖ ）ｆ ｒｅ ａ ｌ ．
血液成分细菌污染和细菌检测方法
7.4使用快速检测方法间接检测PC中的细菌与储存或晚期取样中的连续采样相结合
（1）血小板聚集（2）非侵入性pH测量（3）氧气测量
这些间接检测方法需要评估其在常规筛选中的适用性及其对不同细菌菌株的表现，但连续无创的方法监测避免了抽样错误的风险。
7.2培养与晚期抽样策略相结合
使用培养与晚期抽样策略相结合目前正在讨论中。Sireis等人提出了利用BacT / Alert作为可能的快速筛选方法。但基本上所有其他基于培养的方法也是适用的[13]。
自动化培养是提高血液成分细菌安全性的里程碑，但是到目前为止，培养方法一直与早期抽样结合，因此呈现出高抽样误差的风险。解决这个风险，只有进行晚期采样，快速方法可以推迟取样并最小化采样误差，所以快速检测方法是细菌筛选的重点。
表2常用的细菌筛选方法
7.1使用培养与早期抽样策略相结合，遵循“到期阴性”的原则
（1）全自动培养系统：许多国家应用全自动培养系统来筛选PCs细菌污染（到期阴性原则）细菌培养需要时间，所以要在PCs保存期早期取样（一般在采血后24小时内）。培养7天，如果阴性，PCs发出，但是继续进行培养。如果结果状态从阴性转为阳性，则必须立即通知产品需要召回。早期取样的抽样误差很（1：14，000–1：50，000），这是由于污染的细菌量很少，特别是生长缓慢的细菌。随着PCs的保存，抽检误差逐渐减少。检出率从第一天的14.9%到第七天的100%。一般培养法有着最高的灵敏度（<10CFU/ml）但是到期阴性的原则使得灵敏度降低，因为有一定百分比的PCs在阳性检出时已经被输注。目前三种自动化培养方法已经在日常使用中或已经验证了血小板质量控制：BacT /ALERT系统（法国BioMérieux），Bactec（BD Diagnostics，USA）和VersaTrek系统（Trek Diagnostics，USA）[10-11]。
血培养的污染问题及其鉴别——检验科日常培训
血培养的污染问题及其鉴别要求：为了将血培养污染最小化，每个实验室必须具有以下措施：a 注重血培养标本采集技术的培训提高，减少污染的发生b 采集合适的血培养套数以便有效检出病原微生物，并能正确区分血培养污染；c 结合医院血培养开展状况，建立能客观、准确评估血培养阳性菌株是病原菌还是污染菌的标准化程序。
血培养污染的鉴别：1．48小时内仅有这一瓶血培养，则实验室人员需调取患者资料并与临床医生讨论可能的临床价值：病原菌/污染菌/不能确定。
除非临床要求，不做药敏试验。
2．48小时内还有另一套或另一瓶血培养，但结果为阴性，则作为污染菌通知临床，除非临床要求，不做药敏试验。
3．48小时内还有另一套或另一瓶血培养，结果为阳性，如果鉴定结果均为草绿色链球菌，则认为是病原菌，做药敏试验并将结果报告临床；如果鉴定结果均为同一种其他潜在污染菌，则其临床意义不能确定，需与临床医生讨论其可能的临床价值：病原菌/污染菌/不能确定。
除非临床要求，不做药敏试验。
说明：污染导致的血培养假阳性是一个较为普遍的问题，即使采用最好的血培养标本采集方法也很难将污染率降至2%以下。
血培养假阳性结果将导致不必要的抗生素治疗，延长住院时间，增加患者负担和细菌耐药性的选择性压力。
准确辨别污染能极大减少相应的花费，并有利于降低以后的污染率。
但就目前来说，判断血培养污染的金标准并不存在，比如凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）既是最常见的污染菌，也是现在常见的菌血症病原菌之一，其临床意义的判定仍是一个世界性难题，需要临床医生和实验室人员相互沟通，综合分析。
血培养污染的鉴别主要依靠以下几个方面：微生物鉴定、阳性检出时间、重复培养结果以及临床特征等。
微生物菌种鉴定对判断血培养污染的价值：当分离出的微生物为金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌以及其他肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、白色假丝酵母菌时，90%以上是血流感染病原菌。
分离出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、脆弱拟杆菌、其它假丝酵母菌和新型隐球菌时污染的可能性更低。
预防新生儿科血培养污染的护理干预研究进展
预防新生儿科血培养污染的护理干预研究进展摘要：本文从新生儿科血培养污染的研究现状污染来源以及血培养污染的预防措施等方面进行综述。
建议从无菌采样技术，污染细菌分析、血培养标本采集期间的污染问题的产生原因以及血培养标本污染问题的解决对策等方面降低新生儿科血培养污染率。
关键词：新生儿;血培养污染；护理干预新生儿血流感染是造成低出生体重儿和早产儿死亡的最常见原因之 .。
在检测新生儿血流感染的方法中，血培养依然是分离和验证微生物病原体的金标准。
然而,临床上因血标本受到污染而出现假阳性的情况时有发生。
近来,新生儿重症监护室(NICU)越来越多地使用中心静脉导管和其他留置血管通路的装置,增加了新生儿血流感染的发生风险,导致该问题进一步复杂化。
国内外大量研究表明,血培养污染(BCC)会导致更多不必要的检查和治疗.加大了出现耐药菌的可能性,延长了患者的住院时间,加重了医疗负担。
目前,大部分关于 BCC的研究围绕成人或儿科急诊科室开展,对于新生儿BCC 的研究少之又少,因此有必要重视新生儿BCC 问题。
1标准采血法的定义本文涉及的标准采血法包括了如下几个环节：操作前的准备工作、皮肤的消毒程序、穿刺方法与培养瓶的接种，以及标本的运送等，而其含义指的是根据相关的规范程序进行采血操作，并以此来获取血样采集的一种过程。
国外的一些报道显示，严格按照标准采血法能有效降低血培养中的污染，值得借鉴。
随着我国血培养检测技术逐渐成熟，在2002年制定出台了《血培养操作规范》，从而为我国采血提供了相关标准。
在标准中提到：若选定了拥有采血指征的病患后，应首先选定好穿刺部位，然后根据皮肤消毒三步法操作。
2对血培养中常见的污染细菌分析国内对血培养中常见的污染细菌研究过少，通过查阅国外相关文献可知，其报道[3]常见的污染细菌有革兰阳性芽孢杆菌、痤疮丙酸杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌及棒状杆菌等。
进一步对相关文献分析可知，常见的四类污染细菌主要寄生在皮脂腺深部及皮肤毛囊中，而它们若在肘部、腹股沟及会阴部等处则会更易于生长。
血培养中污染菌和致病菌的判断课件
环境因素
空气、水、土壤等环境中 的微生物可能污染血培养 瓶。
实验室操作
实验室操作过程中，如皮 肤接触、仪器污染等也可 能导致血培养瓶的污染。
致病菌的来源
感染病灶
致病菌通常来自感染病灶 ，如肺部感染、尿路感染 等。
肠道菌群
肠道中的某些细菌在特定 条件下可能进入血液，引 起败血症。
免疫系统受损
免疫系统受损或疾病导致 身体对致病菌的抵抗力下 降，容易引发感染。
污染菌与致病菌的鉴别
培养时间
污染菌通常在培养初期出现， 而致病菌需要较长时间才能生
长。
菌落特征
污染菌通常是单一菌落，而致 病菌可能形成多种菌落。
临床表现
致病菌引起的感染通常有明显 的临床症状，如发热、寒战等 ，而污染菌通常没有明显症状 。
抗生素敏感性
致病菌对抗生素敏感度较高， 而污染菌可能对抗生素不敏感
重要性
血培养是诊断血液感染的金标准 ，对于指导临床治疗、评估病情 和预后具有重要意义。
血培养的采集和运
采集
血培养的采集通常选择在患者发热或 寒战时进行，采血量一般为10-20ml ，采集部位为肘静脉或股静脉。
运输
采集后的血液样本应尽快送至实验室 进行培养，运输过程中需保持温度和 避免剧烈震荡，以确保样本质量。
04
在治疗过程中，需要密 切监测患者的病情变化 ，及时调整治疗方案。
05
血培养中污染菌和致病菌的预防 与控制
提高采血技术
采血前准备
确保采血环境清洁、无菌，采血 人员手部消毒，选择合适的采血
器材和容器。
采血操作规范
掌握正确的采血技巧，避免反复 穿刺和过度挤压，减少皮肤表面
细菌进入血液的机会。
血培养的污染问题及其鉴别——检验科日常培训
血培养的污染问题及其鉴别要求：为了将血培养污染最小化，每个实验室必须具有以下措施：a 注重血培养标本采集技术的培训提高，减少污染的发生b 采集合适的血培养套数以便有效检出病原微生物，并能正确区分血培养污染；c 结合医院血培养开展状况，建立能客观、准确评估血培养阳性菌株是病原菌还是污染菌的标准化程序。
血培养污染的鉴别：1．48小时内仅有这一瓶血培养，则实验室人员需调取患者资料并与临床医生讨论可能的临床价值：病原菌/污染菌/不能确定。
除非临床要求，不做药敏试验。
2．48小时内还有另一套或另一瓶血培养，但结果为阴性，则作为污染菌通知临床，除非临床要求，不做药敏试验。
3．48小时内还有另一套或另一瓶血培养，结果为阳性，如果鉴定结果均为草绿色链球菌，则认为是病原菌，做药敏试验并将结果报告临床；如果鉴定结果均为同一种其他潜在污染菌，则其临床意义不能确定，需与临床医生讨论其可能的临床价值：病原菌/污染菌/不能确定。
除非临床要求，不做药敏试验。
说明：污染导致的血培养假阳性是一个较为普遍的问题，即使采用最好的血培养标本采集方法也很难将污染率降至2%以下。
血培养假阳性结果将导致不必要的抗生素治疗，延长住院时间，增加患者负担和细菌耐药性的选择性压力。
准确辨别污染能极大减少相应的花费，并有利于降低以后的污染率。
但就目前来说，判断血培养污染的金标准并不存在，比如凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）既是最常见的污染菌，也是现在常见的菌血症病原菌之一，其临床意义的判定仍是一个世界性难题，需要临床医生和实验室人员相互沟通，综合分析。
血培养污染的鉴别主要依靠以下几个方面：微生物鉴定、阳性检出时间、重复培养结果以及临床特征等。
微生物菌种鉴定对判断血培养污染的价值：当分离出的微生物为金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌以及其他肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、白色假丝酵母菌时，90%以上是血流感染病原菌。
分离出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、脆弱拟杆菌、其它假丝酵母菌和新型隐球菌时污染的可能性更低。
血培养污染判断(实验室对血培养法污染的评估方案)
实验室对血培养法污染的评估方案近年来，医生和实验室人员充分认识到血培养的重要性，血培养成为诊断严重系统感染的最重要的实验室方法之一。
在全球范围内进行血培养的数量不断增加，但是大家也清楚，近年来的血培养污染问题十分普遍，它浪费了大量的财力和物力，使实验室付出大量的额外工作，进行了许多不必要的试验和药敏测试，也经常误导临床医生和诊断和治疗工作，可能增加了病人的住院时间及医疗费用，并影响了医院病床的周转率，虽然确定血培养分离菌有无致病性较困难。
但是如果能准确的区分离菌有无致病性较困难，但是如果准确地区分致病菌和污染菌，将减少实验室和医院的浪费，并为病人节约医疗支出，目前关于菌血症的各种临床研究，已经为区别病原微生物的污染菌提供了一些指导性方案，[1]但是，还没有一个区别病原微生物和污染细菌的金标准，对于血培养的分离菌的致病性的认识，近年来也发生很大的变化，例如凝固酶阴性葡萄球球在过到几十年时间内，总是认为是血液污染菌，但是目前认为它经常是病原菌，因此对于这些细菌在血兴高采烈中的临床意义的判断，是一棘手的问题，本文章的焦点是如何判断病原菌和污染菌。
我们建立一个实验室评估血培养污染的方案，并通过病例的回顾性调查，验证方案的可行性和准确性。
材料和方法一、材料1．仪器：阿克苏全自动血培养系统（BacT/Alert 120）2．菌株：从1999年10月到2003年9月，北京天坛医院共进行血培养和其它无菌部位的体液培养9139次（接种阿克苏需氧瓶和厌氧瓶），分离出的细菌总当选为1995株，其中对近一年的凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）89株，革兰阳性棒状杆菌15株，细菌菌23株，芽胞杆菌10株，绿色溶血链球菌（VGS）12株，按我室拟定的方案进行致病菌与污染菌的分析，并用临床病历回顾性调查进行临床符合性判断。
二、方法1．常规血培养的操作按仪器厂家的说明书进行，培养温度为36℃，培养到第5天，如未出现阳性结果，发培养阴性报告，当血培养仪显示为阳性时，进行涂片革兰氏染色，并接种固体培养皿进行亚培养。
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血培养污染及判定
【摘要】本文探讨了血培养的污染问题及判定方法。
血培养污染主要由于皮肤消毒的不彻底和采血技术不当所致,CNS等菌一直是血培养污染最常见的菌种,虽然到目前为止还没有判读假阳性血培养的金标准,但是可以通过静脉穿刺而不是静脉导管抽取血标本、采用双针头技术、采用正确的消毒方法及由受过培训的静脉采血医师或其他专业人员采血等一些方法来降低血培养污染率。
【关键词】血培养;假阳性;判定
血培养是用来确立诊断菌血症最为直接、也是最明确的方法,血液培养结果直接影响临床医师评估患者状态、是否应该用抗生素治疗,以及选择治疗抗生素种类。
在对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。
1 血培养污染的主要原因
血培养的污染可能发生于血培养操作的任何阶段,但大量的证据表明,皮肤的正常菌群是血培养污染的最常见细菌,这说明皮肤消毒的不彻底和采血操作的技术不当是假菌血症的主要原因。
采血过程中,血液易受到皮肤表面菌丛污染,常导致血液培养结果与患者感染状态无法判别的情形。
根据Weinstein等发现,在所有血液培养结果报告中,有将近一半(42.9%)被认为是污染。
2 血培养污染菌的主要来源
2.1 在外周静脉穿刺时,因局部皮肤消毒不全,细菌随针刺带入被检血液而被培养出来。
2.2 长期留置血管导管的患者,其导管长期暴露于皮肤外界,而造成这些菌丛的移生。
这些患者的血液培养也常常由这些导管处采血,经常会在采血过程中将导管内移生的细菌带走而培养出来。
3 常见的血培养污染菌
3.1 造成血液培养污染的菌丛绝大多数为革兰氏阳性菌,以及少数的厌氧菌。
3.2 革兰氏阳性菌中,造成污染的机率远大于感染者,包括:CNS、Bacillus species、Corynebacterium species及其它革兰阳性杆菌。
3.3 厌氧菌中造成污染的机率远大于感染者,包括Clostridium perfringens 、Propionibacterium species[2]。
根据我们的调查中,CNS、革兰阳性棒状杆菌、细球菌、芽胞杆菌、绿色溶血链球菌占血培养分离菌总数的52.4%。
其中可能污染的细菌占56%,即污染的细菌占整体分离细菌的约29%。
CNS从过去以来一直是所有血液培养中CNS亦是最常出现菌种,也是血液培养污染最为常见菌种。
4 判断阳性血培养临床意义的指导方案
4.1 判读方法
4.1.1 阳性套数:1985年Kichhoff认为两套血液培养中,仅单一一套呈CNS阳性为污染外,也首度提出两套血液培养皆呈阳性,但两套血液培养采血时间超过10天者,也应该被归类为污染。
他们认为血液培养结果呈CNS族群中有85%为污染,其中包含83%单一一套血液培养呈阳性,以及2%两套血液培养阳性但间隔超过10天者。
在比较被认为是感染及污染患者族群特征,作者发现感染族群所作的血液培养中阳性套数比例明显较高(70.7% vs. 34.3%,P90%)下,从血培养中分离出的代表着真正菌血症或真菌血症的病原菌包括:金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌以及其它一些肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌。
尽管尚缺乏大量的实验研究,但某些研究已经发现其它一些病原菌也总是代表着真正的感染,这些病原菌包括:化脓链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、脆弱拟杆菌、其它念珠菌和新生隐球菌。
相反,棒状杆菌属、除炭疽杆菌以外的芽胞杆菌属以及痤疮丙酸杆菌引起菌血症的可能性非常小。
最容易引起混淆的是血培养中最常见的CNS。
这类细菌通常属于污染菌,但它们在因导尿和血管修复术引起的菌血症中已成为日渐重要的病原菌。
所以,在判断由血培养分离出的CNS时,已经不能再将其简单地归结为污染菌了。
同样,对其它微生物临床意义的判断也不能单凭菌种本身的鉴定。
例如,一项新近研究发现,78%的肠球菌和38%的绿色链球菌为致病菌;77%的产气夹膜梭菌为污染菌,而其它梭菌属为致病菌的比例达80%。
4.2.2 血液培养呈阳性所需天数:阳性报告时间与接种的标本中细菌的原始量呈反比关系。
有菌血症时,血中病原菌的数量一般较多,因此血培养瓶中接种的菌量也相应比较大,所以生长时间较快;而污染菌多为皮肤污染,一般较少,因此接种的量也少,相应的生长时间会较病原菌慢。
虽然这种方法有一定效果,但由于病
原菌和污染菌生长时间存在着交迭,其程度难以判断,因此这一方法不能作为判断真正血培养阳性的预测指标。
此外,随着血培养系统的广泛应用,微生物的生长时间已被相应缩短,这样也导致更难以通过病原菌和污染菌的相应生长时间对两者进行辨别。
4.2.3 第一次培养呈多套单一菌株阳性:出现微生物生长的血培养瓶的数目有助于诠释阳性血培养的临床意义。
患心内膜炎或其它血液感染的病人其一份血标本被接种到两个或两个以上的培养瓶中进行培养时,这些培养瓶几乎全部或大部呈阳性结果;与之不同的是,如果是因污染造成的血培养阳性,一般只会引起所接种的两个或多个培养瓶中的一个阳性。
当然如果一份血标本只接种到一个培养瓶中,这种判断方法就没有什么价值。
所以采用这种方法应将标本至少接种到两个血培养瓶中。
观察一组血培养瓶中的阳性瓶数目、并以此来判定是病原菌还是污染菌,这种方法也已被一些微生物学家和临床医生所采用。
但已公布的数据显示至少对CNS而言,这种方法的临床应用价值不大。
虽然具有临床意义的CNS有可能在被接种的血培养瓶中的多个瓶内生长,而属于污染菌的CNS更可能只在所接种的多个瓶中的一个内生长,但由于这种情况存在着很大的不确定性,因此该方法的可信度不高。