手指、物表、空气采样方法
环境卫生学监测采样方法
布点：依据《医院洁净手术部建筑技术规范》
采样方法 将普通营养琼脂平皿放在室内手术区和周边区各采 样点，距地面 0.8—1.5m 高度，在手术区检测时应 无手术台。当手术台已固定，测定高度在台面之上
0.25m。暴露30min。
采样要求 提出选择室内消毒后或规定的通风换气后与
医疗活动前进行空气标本的采样，或怀疑与 医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼 脂平板采样。（注意：采样前，关闭门、窗， 在无人走动的情况下，静止10min后采样。）
采样高度（沉降法） 平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m处。
布点方法 室内面积≤30㎡，设一条对角线上取3点采样，即中 心一点，两端各距离墙1m处各取一点；室内面积 ＞30㎡，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、 南、西、北点距离墙1m。采样高度距地面0.8— 1.5m。
采样方法 将直径9cm普通营养琼脂平板放置各采样点， 将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时
间（Ⅱ类环境 15min 、 Ⅲ类环境 5min ）后
盖上平皿盖及时送检。
采样方法
检测培养 将送检平皿置 36 ℃±1 ℃恒温箱培养 48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴 发有关时，进行目标微生物的鉴定。 结果处理 计算所有平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌， 则挑取可疑菌落进行鉴定。 计算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿．暴露时间） 报告: 沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿．暴露时间） 例如： 2cfu/(5min· 直径9cm平皿) 。
１.洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总 数要求应遵循ＧＢ50333．
２.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新 生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空 气中的细菌菌落总数≤４cfu／（１５ｍｉｎ· 直径９ｃｍ平皿）。
医院环境微生物采样方法
我院使用的
正视结果，不要盲目 的重复采样
细菌学数据超标
回忆采样过程 是否存在污染
到一线去查看设施和 每个操作环节，询问 相关人员的日常操作 方法，检查操作记录
判断是否存在问题
重复采样
否
采取措施改进操作流程
是
否
是
环境卫生学监测结果分析流程
空气微生物消毒方法
紫外线灯照射 静电吸附 空气过滤 ……
采样时间：在消毒处理后进行采样。 采样面积：被采面积＜100cｍ2取全部表面；采样面积≥100 cｍ2，取100cｍ2 采样方法：棉拭子法：用5×5cm的标准灭菌规格版，放在被检物体表面，用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在规格板内横竖往返均匀涂抹5次，并随之转动棉拭子，可连续采样1～4个规格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭子放入装有10ml含相应中和剂的试管内，立即送检。
医院环境微生物采样方法及注意事项
院感科
卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》 第三十一条 环境卫生学监测：包括对空气、物体表面和医护人员手的监测。 医院应每月对手术室、重症监护病房／室（ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素有关时，应及时进行监测。
添加标题
护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤
添加标题
医疗机构应每季度对手术室、产房、导管室、层流
添加标题
病房、 感染疾病科、口腔科等部门工作的医务人员
添加标题
手进行消毒效果的监测；当怀疑医院感染暴发与医
添加标题
务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相
环境卫生学消毒效果采样方法
面积,采集后放在一个试管中送检)。 • 剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中送检。 • 门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。 • 采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。
中混匀送检。
消毒液染菌量采样方法
注意事项
• 1.采样前做好物品准备，规范洗手或手消毒（七步洗手 法）；
• 2.用无菌注射器抽吸1ml被检消毒剂，直接送检验科微生物 实验室；
• 3.采样后1小时之内送检。
消毒液染菌量采样方法
结果判定
• 1.灭菌用消毒液必须无菌； • 2.使用中消毒剂细菌菌落总数应≤100cfu/ml，致病微生物
内
外
夹
弓
大
立
腕
医务人员手卫生检查方法
医务人员手卫生检查方法
医务人员手卫生检查方法
卫生手消毒效果监测流程
医务人员手卫生检查方法
外科手消毒效果监测流程
医务人员手卫生检查方法
卫生手消毒:
手
监测的细菌菌落总数应≤10cfu/cm2
的
监
测
外科手消毒:
正
监测的细菌菌落总数应≤5cfu/cm2
常
值
不能检出致病性微生物
Ⅳ类 普通门急诊及其检查、治疗室，感染性 疾病科门诊和病区
标准：物体表面cfu/皿 ≤4（30min） ≤4（15min） ≤4（5min）
≤4（5min）
空气检查方法
空气采样中常见的误区
• 采样时开启循环风消毒机时间不足及开着消毒机进行采样； • 室间未清洁消毒，开着门进行采样； • 采样时培养皿放置位置及高度不符合要求； • 采样时有人员走动； • 采样者未洗手，衣帽不整齐，未戴口罩； • 培养皿受到污染。
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测
曲阜市中医医院医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、层流洁净病房、重症监护病房、母婴同室、供应室等的空气净化与消毒质量进行监测。
2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。
房间面积＞10m2者，每增加10m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
手指、物表、空气采样方法
脚卫死效验的监测要领之阳早格格创做1．采样时间正在交触患者、举止诊疗活动前采样.2．采样要领被检者五指并拢，用浸有含相映中战剂的无菌洗脱火液浸干的棉拭子正在单脚指直里从指跟到指端往返涂揩2次，一只脚涂揩里积约30cm2，涂揩历程中共时转化棉拭子；将棉试子搁进拆有10ml含相映中战剂的无菌洗脱液试管内，即时收检.细菌菌降数总数估计要领：细菌菌降总数（cfu/cm2）=仄板上菌降数×密释倍数/采样里积（cm2）3．脚消毒效验应达到如下相映央供：a）卫死脚浑毒，监测的细菌菌降总数应≤10cfu/㎝2b）中科脚消毒，监测的细菌菌降总数应≤5cfu/㎝2气氛消毒效验的监测要领1、采样时间：消毒处理后与举止调理活动前采样.2、要领：室内里积≤30M3，设一条对于角线上与3面，即核心一面、二端距墙1M处与一面；室内里积＞30 M3，设、东、北、西、北、中、5面，其中东、北、西、北布面部位均距墙1m处.中面加搁一只尺度皿（即灭菌培植皿没有挨启）.物体表面采样监测要领(1).采样时间：正在浑净或者消毒处理后举止采样.(2).采样里积：被采样原表面积＜100cm2 与局部表面；被采样原表面积≥100cm2，与100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个分歧部位）(3).采样要领：用5cm×5cm尺度灭菌规格板，搁正在被检物体表面，采样里积≥100cm2，连绝采样4个.用浸有含相映中战剂的无菌洗脱液的棉拭子1收，正在规格板内横横往返匀称涂揩各5次，并随之转化棉拭子，连绝采样4个面，将棉试子搁进拆有10ml含相映中战剂的无菌洗脱液试管内，将试管心战瓶塞搁正在火焰上烧，并坐将要瓶塞塞紧.采样后坐时收检.菌降数估计公式：仄板上菌降数×采样液密释倍数细菌菌降总数(cfu/cm2)＝—————————————————采样里积(cm2)表1百般环境物体表面细菌菌降总数卫死尺度致病性微死物：没有得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其余致病性微死物.母婴共室、早产女室、婴女室、新死女室、及女科病房的物体表面没有得检出沙门氏菌.。
空气、物体表面、医务人员手的监测方法
空气、物体表面、医务人员手的监测方法采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不﹥24小时。
一、空气监测：1、采样时间：消毒处理后，操作前2、采样方法：平板沉降法（1）布点方法：室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。
洁净手术室9个点。
（2）采样方法：将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8--1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5、15、30分钟，盖好立即送检。
( 3)注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。
二、医务人员手的监测：1、采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。
2、采样面积及方法：放被检人（五指并拢），用浸有无菌盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦各 2 次(双手涂擦面积约60平方厘米），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入 5ml 无菌盐水试管内，立即送检。
三、物体表面监测1、.采样时间：在消毒处理后4小时内进行采样。
2、.采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，连续采样4个，采样面积100cm2剪去手接触部位后，将棉拭子投入5ml含无菌盐水试管内，立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样4.注意事项：采集样本要有足够的数量且具有代表性，如层流洁净手术室，选择具有代表性采样地点（如手术台、治疗车、无影灯把手等）；采样时，棉拭子处于湿润状态，如处于饱和状态可将多余的采样液在采样管壁上挤压去除。
禁止使用干棉拭子采样。
四、消毒液的监测1、常用消毒液有效成分含量测定2、使用中消毒液细菌监测：1ml使用中消毒液+9ml中和剂3、结果判定：使用中的灭菌用消毒液、无细菌生长。
手指物表空气采样方法
手指物表空气采样方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】手卫生效果的监测方法1．采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。
2．采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
细菌菌落数总数计算方法：细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）3．手消毒效果应达到如下相应要求：a）卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2b）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2空气消毒效果的监测方法1、采样时间：消毒处理后与进行医疗活动前采样。
2、方法：室内面积≤30M3，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端距墙1M处取一点；室内面积＞30 M3，设、东、南、西、北、中、5点，其中东、南、西、北布点部位均距墙1m处。
中点加放一只标准皿（即灭菌培养皿不打开）。
物体表面采样监测方法(1).采样时间：在清洁或消毒处理后进行采样。
(2).采样面积：被采样本表面积＜100cm2 取全部表面；被采样本表面积≥100cm2，取100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个不同部位）(3).采样方法：用5cm×5cm标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个。
用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个点，将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，将试管口和瓶塞放在火焰上烧，并立即将瓶塞塞紧。
采样后立即送检。
菌落数计算公式：平板上菌落数×采样液稀释倍数细菌菌落总数(cfu/cm2)＝—————————————————采样面积(cm2)致病性微生物：不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其它致病性微生物。
院感项目与抽样方法
六、医院环境卫生学监测卫生标准
类别 I类区域 II类区域 III类区域
范围
空气 Cfu/皿
物体表面 Cfu/cm2
洁净手术室或层流手术室（分为特别洁净，标准洁净，一般洁净， 准洁净四个等级）。
≤4（30min）
≤5
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、消 毒供应中心洁净区、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等。
≤4（15min） ≤5
血透室、儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、 消毒供应中心清洁区、急诊室、化验室、各普通病房等。
≤4（5min） ≤10
手卫生 cfu/cm2
卫生手消毒： ≤10cfu/cm2
外科手消毒： ≤5cfu/cm2
IV类区域 感染性疾病科及病房。
消毒液
灭菌用消毒液的菌落计数：0 cfu/ml; 皮肤黏膜消毒液菌落计数应符合相应标准； 其它使用中消毒液菌落计数：≤100cfu/ml，不得检出致病菌
③采样后应尽快对样品进行相应的检测，不能及时送检时可保存 在0-4℃，不超过24小时。
谢谢！
医疗用品 无菌医疗用品，无菌或0； （ Cfu/g 接触粘膜医疗用品≤20，不得检出致性微生物； 或100cm2） ห้องสมุดไป่ตู้触皮肤医疗用品≤200。
≤4（5min） ≤10
注意事项
①客户收到本中心发配的耗材（琼脂平板、盐水管等）后，可保 存在2-8℃环境下，在有效期内进行使用。
②采集样品前，先将耗材在室温中平行20-30分钟，观察耗材表面 是否有破损或其它状态的改变后再使用，如有问题不可使用。
临床常用微生物检测 项目与抽样方法
一、采样物品准备
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手卫生效果的监测方法
1．采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。
2．采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
细菌菌落数总数计算方法：
细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）3．手消毒效果应达到如下相应要求：
a）卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2
b）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2
空气消毒效果的监测方法
1、采样时间：消毒处理后与进行医疗活动前采样。
2、方法：室内面积≤30M3，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端距墙1M处取一点；室内面积＞30 M3，设、东、南、西、北、中、5点，其中东、南、西、北布点部位均距墙1m处。
中点加放一只标准皿（即灭菌培养皿不打开）。
物体表面采样监测方法
(1).采样时间：在清洁或消毒处理后进行采样。
(2).采样面积：被采样本表面积＜100cm2 取全部表面；被采样本表面积≥
100cm2，取100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个不同部位）(3).采样方法：
用5cm×5cm标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，
连续采样4个。
用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规
格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个点，
将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，将试管口
和瓶塞放在火焰上烧，并立即将瓶塞塞紧。
采样后立即送检。
菌落数计算公式：
平板上菌落数×采样液稀释倍数
细菌菌落总数(cfu/cm2)＝—————————————————
采样面积(cm2)
致病性微生物：
不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其它致病性微生物。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室、及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。