微生物碳氮的测定方法——熏蒸提取法

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土壤微生物生物量的测定方法

土壤微生物生物量的测定方法

土壤微生物生物量的测定方法1土壤微生物碳的测定方法(熏蒸提取----仪器分析法)基本原理新鲜土样经氯仿熏蒸后(24h),土壤微生物死亡细胞发生裂解,释放出微生物生物量碳,用一定体积的LK2SO4溶液提取土壤,借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。

根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数(K EC),从而计算土壤微生物生物量碳。

实验仪器自动总有机碳(TOC)分析仪(Shimadzu Model TOC—500,JANPAN)、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等。

实验试剂1)无乙醇氯仿(CHCL3);2)L硫酸钾溶液:称取87g K2SO4溶于1L蒸馏水中3)工作曲线的配制:用L硫酸钾溶液配制10ugC/L、30ugC/L、50ugC/L、70ugC/L、100ugC/L系列标准碳溶液。

(其实一般情况下,仪器会自带的标曲,一般不用自己做的)操作步骤土壤的前处理(过筛和水分调节略)熏蒸称取新鲜(相当于干土,这个可以根据自己土样的情况而定)3份分别放入25ml小烧杯中。

将烧杯放入真空干燥器中,并放置盛有无乙醇氯仿(约2/3)的15ml烧杯2或3只,烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠,同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯,以吸收熏蒸过程中释放出来的CO2,干燥器底部加入少量水以保持容器湿度。

盖上真空干燥器盖子,用真空泵抽真空,使氯仿沸腾5分钟。

关闭真空干燥器阀门,于25℃黑暗条件下培养24小时。

抽真空处理熏蒸结束后,打开真空干燥器阀门(应听到空气进入的声音,否则熏蒸不完全,重做),取出盛有氯仿(可重复利用)和稀NaOH溶液的小烧杯,清洁干燥器,反复抽真空(5或6次,每次3min,每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子),直到土壤无氯仿味道为止。

同时,另称等量的3份土壤,置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理。

(注意:熏蒸后不可久放,应该快速浸提)※浸提过滤从干燥器中取出熏蒸和未熏蒸土样,将土样完全转移到80ml聚乙烯离心管中,加入40ml L硫酸钾溶液(土水比为1:4,考虑到土样的原因,此部分熏蒸和不熏蒸土均为4g,即,4g土:16ml的硫酸钾溶液,当然这个加入量要根据TOC仪器的进入量决定)300r/min振荡30min,用中速定量滤纸过滤。

生物量碳氮测定方法(熏蒸提取法)

生物量碳氮测定方法(熏蒸提取法)

一、土壤微生物生物量碳测定方法(熏蒸提取-碳自动仪器法)1、试剂配制去乙醇氯仿制备:普通氯仿试剂一般含有少量乙醇作为稳定剂,使用前需除去。

将氯仿试剂按1 : 2(v : v)的比例与去离子水或蒸馏水一起放入分液漏斗中,充分摇动1min,慢慢放出底层氯仿于烧杯中,如此洗涤3次。

得到的无乙醇氯仿加入无水氯化钙,以除去氯仿中的水分。

纯化后的氯仿置于暗色试剂瓶中,在低温(4℃)、黑暗状态下保存(Williamss等,1995)。

注意氯仿具有致癌作用,必须在通风橱中进行操作。

硫酸钾提取剂[c(K2SO4)= 0.5mol L-1]:87.12分析纯硫酸钾,溶于1L去离子水。

六偏磷酸钠溶液[ρ( NaPO3)6 = 5g 100ml-1,pH2.0]:50.0g分析纯六偏磷酸钠缓慢加入盛有800ml 去离子水的烧杯中(注意:六偏磷酸钠溶解速度很慢,且易粘于烧杯底部结块,加热易使烧杯破裂),缓慢加热(或置于超声波水浴器中)至完全溶化,用分析纯浓磷酸调节至pH2.0,冷却后定容至1L。

过硫酸钾溶液[ρ(K2S2O8)= 2g 100ml-1]:20.0g分析纯过硫酸钾溶于去离子水,定容至1L,避光存放,使用期最多为7d。

磷酸溶液[ρ(H3PO4)= 21 g 100ml-1]:37ml 85%分析纯浓磷酸(H3PO4,ρ= 1.70g ml-1)与188ml 去离子水混合。

邻苯二甲酸氢钾标准溶液[ρ(C6H4CO2HCO2K)= 1000mg C L-1]:2.1254g分析纯邻苯二甲酸氢钾(称量前105℃烘2~3h),溶于去离子水,定容至1L。

2、仪器设备土壤筛(孔经2mm)、真空干燥器(直径22cm)、水泵抽真空装置(图6–1)或无油真空泵、pH–自动滴定仪、塑料桶(带螺旋盖可密封,体积50L)、可密封螺纹广口塑料瓶(容积1.1L)、高温真空绝缘酯(MIST–3)、烧杯(25、50、80ml)。

碳–自动分析仪(Phoenix 8000)、容量瓶(100ml)、样品瓶(40ml)。

氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮

氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮

氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮
采用氯仿熏蒸0.5 mol/L K2SO4浸提法测定土壤微生物量碳、氮。

首先将土样在25℃下密封培养7d 左右,然后称取预处理土样6 份放入烧杯中,将 3 份其置于底部有少量Na OH、200 m L 水和去乙醇氯仿的真空干燥器中,抽真空后保持氯仿沸腾3~5 min,然后,将干燥器移置在黑暗条件下25℃熏蒸土壤24 h,再次抽真空完全去除土壤中的氯仿。

将熏蒸好的土壤转移到200 m L 提取瓶中,加入0.5 mol/L K2SO4浸提液(水∶土质量比为4∶1)。

另外3 份做未熏蒸空白试验,每份重复3 次,分别测定浸提液中的有机碳和全氮含量。

其中浸提液中的可溶性有机碳采用总有机碳分析仪(Phoenix 8000,美国)测定,由熏蒸与未熏蒸土样有机碳的差值除以转换系数,计算得到微生物量碳。

浸提液中土壤可溶性全氮采用碱性过硫酸钾氧化法测定,浸提液中无机氮采用流动分析仪测定,土壤可溶性有机氮是可溶性全氮和无机氮的差值。

熏蒸与未熏蒸土样的全氮的差值除以转换系数,计算得到微生物量氮。

微生物量碳、氮的转换系数为0.45。

土壤的有机质、全氮、全磷、有效磷、速效钾、NO3--N、NH4+-N、pH 值采用常规的土壤农化分析方法测定。

土壤微生物生物量的测定方法氯仿熏蒸

土壤微生物生物量的测定方法氯仿熏蒸

土壤微生物生物量的测定方法1土壤微生物碳的测定方法(熏蒸提取----仪器分析法)1.1 基本原理新鲜土样经氯仿熏蒸后(24h),土壤微生物死亡细胞发生裂解,释放出微生物生物量碳,用一定体积的0.5mol/LK2SO4溶液提取土壤,借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。

根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数(K EC),从而计算土壤微生物生物量碳。

1.2 实验仪器自动总有机碳(TOC)分析仪(Shimadzu Model TOC—500,JANPAN)、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等。

1.3 实验试剂1)无乙醇氯仿(CHCL3);2)0.5mol/L硫酸钾溶液:称取87g K2SO4溶于1L蒸馏水中3)工作曲线的配制:用0.5mol/L硫酸钾溶液配制10ugC/L、30ugC/L、50ugC/L、70ugC/L、100ugC/L系列标准碳溶液。

(其实一般情况下,仪器会自带的标曲,一般不用自己做的)1.4 操作步骤1.4.1 土壤的前处理(过筛和水分调节略)1.4.2 熏蒸称取新鲜(相当于干土10.0g,这个可以根据自己土样的情况而定)3份分别放入25ml 小烧杯中。

将烧杯放入真空干燥器中,并放置盛有无乙醇氯仿(约2/3)的15ml烧杯2或3只,烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠,同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯,以吸收熏蒸过程中释放出来的CO2,干燥器底部加入少量水以保持容器湿度。

盖上真空干燥器盖子,用真空泵抽真空,使氯仿沸腾5分钟。

关闭真空干燥器阀门,于25℃黑暗条件下培养24小时。

1.4.2 抽真空处理熏蒸结束后,打开真空干燥器阀门(应听到空气进入的声音,否则熏蒸不完全,重做),取出盛有氯仿(可重复利用)和稀NaOH溶液的小烧杯,清洁干燥器,反复抽真空(5或6次,每次3min,每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子),直到土壤无氯仿味道为止。

同时,另称等量的3份土壤,置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理。

土壤微生物量碳测定方法

土壤微生物量碳测定方法

土壤微生物量碳测定方法及应用土壤微生物量碳( Soil microbial biomass )不仅对土壤有机质和养分的循环起着主要作用,同时是一个重要活性养分库,直接调控着土壤养分(如氮、磷和硫等)的保持和释放及其植物有效性。

近40 年来,土壤微生物生物量的研究已成为土壤学研究热点之一。

由于土壤微生物的碳含量通常是恒定的,因此采用土壤微生物碳(Microbial biomass carbon, Bc) 来表示土壤微生物生物量的大小。

测定土壤微生物碳的主要方法为熏蒸培养法 (Fumigation-incubation, FI )和熏蒸提取法( Fumigation-extraction, FE )。

熏蒸提取法(FE法)由于熏蒸培养法测定土壤微生物量碳不仅需要较长的时间而且不适合于强酸性土壤、加入新鲜有机底物的土壤以及水田土壤。

Voroney (1983)发现熏蒸土壤用0.5mol • L-1K2SQ提取液提取的碳量与生物微生物量有很好的相关性。

Vance 等(1987) 建立了熏蒸提取法测定土壤微生物碳的基本方法:该方法用0.5mol ・L-1&SQ提取剂(水土比1: 4)直接提取熏蒸和不熏蒸土壤,提取液中有机碳含量用重铬酸钾氧化法测定;以熏蒸与不熏蒸土壤提取的有机碳增加量除以转换系数K EC(取值0.38)来计算土壤微生物碳。

Wu等( 1990)通过采用熏蒸培养法和熏蒸提取法比较研究,建立了熏蒸提取一一碳自动一起法测定土壤微生物碳。

该方法大幅度提高提取液中有机碳的测定速度和测定结果的准确度。

林启美等(1999)对熏蒸提取- 重铬酸钾氧化法中提取液的水土比以及氧化剂进行了改进,以提高该方法的测定结果的重复性和准确性。

对于熏蒸提取法测定土壤微生物生物碳的转换系数K EC的取值,有很多研究进行了大量的研究。

测定K EC值的实验方法有:直接法(加入培养微生物、用14C底物标记土壤微生物)和间接法(与熏蒸培养法、显微镜观测法、ATP法及底物诱导呼吸法比较)。

生物量碳氮测定方法(熏蒸提取法)

生物量碳氮测定方法(熏蒸提取法)

一、土壤微生物生物量碳测定方法(熏蒸提取-碳自动仪器法)1、试剂配制去乙醇氯仿制备:普通氯仿试剂一般含有少量乙醇作为稳定剂,使用前需除去。

将氯仿试剂按1 : 2(v : v)的比例与去离子水或蒸馏水一起放入分液漏斗中,充分摇动1min,慢慢放出底层氯仿于烧杯中,如此洗涤3次。

得到的无乙醇氯仿加入无水氯化钙,以除去氯仿中的水分。

纯化后的氯仿置于暗色试剂瓶中,在低温(4℃)、黑暗状态下保存(Williamss等,1995)。

注意氯仿具有致癌作用,必须在通风橱中进行操作。

硫酸钾提取剂[c(K2SO4)= 0.5mol L-1]:87.12分析纯硫酸钾,溶于1L去离子水。

六偏磷酸钠溶液[ρ( NaPO3)6 = 5g 100ml-1,pH2.0]:50.0g分析纯六偏磷酸钠缓慢加入盛有800ml 去离子水的烧杯中(注意:六偏磷酸钠溶解速度很慢,且易粘于烧杯底部结块,加热易使烧杯破裂),缓慢加热(或置于超声波水浴器中)至完全溶化,用分析纯浓磷酸调节至pH2.0,冷却后定容至1L。

过硫酸钾溶液[ρ(K2S2O8)= 2g 100ml-1]:20.0g分析纯过硫酸钾溶于去离子水,定容至1L,避光存放,使用期最多为7d。

磷酸溶液[ρ(H3PO4)= 21 g 100ml-1]:37ml 85%分析纯浓磷酸(H3PO4,ρ= 1.70g ml-1)与188ml 去离子水混合。

邻苯二甲酸氢钾标准溶液[ρ(C6H4CO2HCO2K)= 1000mg C L-1]:2.1254g分析纯邻苯二甲酸氢钾(称量前105℃烘2~3h),溶于去离子水,定容至1L。

2、仪器设备土壤筛(孔经2mm)、真空干燥器(直径22cm)、水泵抽真空装置(图6–1)或无油真空泵、pH–自动滴定仪、塑料桶(带螺旋盖可密封,体积50L)、可密封螺纹广口塑料瓶(容积1.1L)、高温真空绝缘酯(MIST–3)、烧杯(25、50、80ml)。

碳–自动分析仪(Phoenix 8000)、容量瓶(100ml)、样品瓶(40ml)。

生物量碳氮测定方法

生物量碳氮测定方法

生物量碳氮测定方法
熏蒸提取法首先需要标定氯仿和浓硝酸的用量。

氯仿用于提取生物样品中的有机碳,而硝酸用于氧化有机物质并释放出氮。

实验过程中,首先将称量好的生物样品放入一个带有砂浴和回流装置的烧瓶中,并加入适量的硝酸和氯仿。

然后,用火焰加热烧瓶,使溶液进行蒸发和浓缩。

随着溶液的蒸发,有机物质被转化为气体,并被冷凝在装有冷冻剂的收集瓶中。

在冷凝过程中,氯仿中的有机碳会沉积在冷凝瓶底部。

完成冷凝后,将氯仿从冷凝瓶中转移到预先称量的烧瓶中,然后再进行蒸发和浓缩,直到氯仿蒸发殆尽。

最后,将烧瓶中残余的有机物质转移到燃烧船中,放入燃烧炉中进行燃烧。

燃烧后,生成的CO2和N2通过吸收器中的饱和硫酸被捕获,并被转移到室外的装有碱液的收集瓶中。

碱液中的CO2被氢氧化钠中和,并转化为氢氧化钠。

通过在吸收瓶中加入酚酞指示剂,可以测定CO2的体积。

测定氮的过程与测定碳类似,只是在蒸发过程中释放的气体被洗涤瓶中的含硼酸溶液捕集。

然后将含硼酸溶液转移至定容瓶中,用碱液进行中和,再用氯化亚铁标准溶液滴定,从而可以测定氮的含量。

通过测定生物样品中CO2和N2的体积,以及标定剂量和无机碳和氮的含量,可以计算出生物样品中的有机碳和氮的含量。

总的来说,熏蒸提取法是一种通过加热蒸发和燃烧的方法,将生物样品中的有机物质转化为气体或溶液,并通过捕集和测定气体体积的方式,来测定生物体内的碳和氮含量。

土壤微生物生物量的测定方法(氯仿熏蒸)

土壤微生物生物量的测定方法(氯仿熏蒸)

土壤微生物生物量的测定方法1土壤微生物碳的测定方法(熏蒸提取----仪器分析法)1.1 基本原理新鲜土样经氯仿熏蒸后(24h),土壤微生物死亡细胞发生裂解,释放出微生物生物量碳,用一定体积的0.5mol/LK2SO4溶液提取土壤,借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。

根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数(K EC),从而计算土壤微生物生物量碳。

1.2 实验仪器自动总有机碳(TOC)分析仪(Shimadzu Model TOC—500,JANPAN)、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等。

1.3 实验试剂1)无乙醇氯仿(CHCL3);2)0.5mol/L硫酸钾溶液:称取87g K2SO4溶于1L蒸馏水中3)工作曲线的配制:用0.5mol/L硫酸钾溶液配制10ugC/L、30ugC/L、50ugC/L、70ugC/L、100ugC/L系列标准碳溶液。

(其实一般情况下,仪器会自带的标曲,一般不用自己做的)1.4 操作步骤1.4.1 土壤的前处理(过筛和水分调节略)1.4.2 熏蒸称取新鲜(相当于干土10.0g,这个可以根据自己土样的情况而定)3份分别放入25ml小烧杯中。

将烧杯放入真空干燥器中,并放置盛有无乙醇氯仿(约2/3)的15ml烧杯2或3只,烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠,同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯,以吸收熏蒸过程中释放出来的CO2,干燥器底部加入少量水以保持容器湿度。

盖上真空干燥器盖子,用真空泵抽真空,使氯仿沸腾5分钟。

关闭真空干燥器阀门,于25℃黑暗条件下培养24小时。

1.4.2 抽真空处理熏蒸结束后,打开真空干燥器阀门(应听到空气进入的声音,否则熏蒸不完全,重做),取出盛有氯仿(可重复利用)和稀NaOH溶液的小烧杯,清洁干燥器,反复抽真空(5或6次,每次3min,每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子),直到土壤无氯仿味道为止。

同时,另称等量的3份土壤,置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理。

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二、土壤微生物量碳、氮的测定方法—熏蒸提取法
1.主题内容与适用范围
本方法采用氯仿熏蒸—提取测定土壤微生物量碳、氮,适用范围广,既适用于中性和
微碱性土壤,也适用于强酸性土壤,并且适用于滞水土壤(如水稻土)和新施有机肥
土壤。

2.方法提要
土样经氯仿熏蒸和未熏蒸两种不同处理后,用K2SO4溶液浸提,提取液一部分用K2CrO7
(重络酸钾)氧化法测定微生物量碳,另一部分用浓H2SO4消煮、碱化蒸馏法测定微生
物量氮。

3.提取液的制备
仪器、设备:抽气皿(真空干燥器)、无醇氯仿、抽气机、大铝盒、分析天平(感量:)、小
烧杯(50ml)、大塑料瓶(250ml)、大三角瓶(150ml)、40C的冰箱、定量
滤纸(15cm)、漏斗、保鲜膜
试剂的制备: M K2SO4溶液(化学纯)、
无醇氯仿(提纯方法:用1N H2SO4溶液与氯仿(CHCl3三氯甲烷)按体积比2:1
于分液漏斗中振荡混匀,净置分离,共做3次;再用水代替硫酸与氯仿2:1
混匀,振荡分离,共5次,将提纯的氯仿放入到棕色试剂瓶中,加一勺无
水硫酸钠,保存)
分析步骤:
称取鲜土(取土要准确、均匀,不要夹入有机残体)于大铝盒中。

在抽气皿中放入盛有25ml
无醇氯仿的小烧杯,小烧杯中放几张小纸片以便于观察沸腾。

放入装土的大铝盒,连上抽
气机,抽真空使氯仿沸腾5分钟,关紧活塞,关闭抽气机。

包上黑布,置于阴暗处(250C)熏蒸24小时。

到时间后,取出小烧杯后反复抽真空2~3次(每次5分钟),排除氯仿。

另称取一批同等重量的土放入大塑料瓶中,不做熏蒸处理,同样包上黑布,置于阴暗处24小时。

将步骤中的两批土样转移到离心管中(红壤适宜离心管)。

用注射器注入每瓶50ml K2SO4
溶液,盖紧瓶塞,振荡30分钟,离心5分钟后取出,用15ml定量滤纸过滤到150ml大三
角瓶中,应立即测定。

如不立即测定,用保鲜膜封口(防止污染和挥发),保存在40C的冰
箱中。

4.生物量碳的测定—K2CrO7氧化法
仪器、设备:DOC测定仪(冷凝装置4套、配套沸瓶装16个)、玻璃沸珠、1500W电炉两个、
变压器两个、滴定管(25ml)
试剂的制备:蒸馏水、混合酸(浓硫酸:浓磷酸=2:1,分析纯) 、 K2CrO7标准溶液
邻菲罗啉指示剂、( N)K2CrO7溶液(L,分析纯)
(NH4)2Fe(SO4)2溶液:取L溶于蒸馏水,用20ml浓硫酸(98%,分析纯)
酸化,而后定容至1L、
分析步骤:
吸取2ml N K2CrO7溶液放入沸瓶,再吸15ml 混酸放入沸瓶,混合,加入等量的玻璃球(约
一小药匙,10个)。

吸取步骤()中的过滤液8~10ml(根据含碳量多少而定),放入到电炉
上,安装好冷凝系统,调压至130伏开始加热。

从玻璃球沸腾时开始记时,保持沸腾30分
钟,其间应摇匀两次。

在30分钟到前2分钟关上电炉,利用余热保持沸腾至30分钟,随后从冷凝管上口加入20ml蒸馏水,清洗冷凝管壁,降低沸瓶温度。

取下沸瓶,待冷却至室温,加入2~3滴指示剂,用准确标定过的(NH4)2Fe(SO4)2溶液滴定。

颜色从黄色→深绿色→天蓝色→浅灰色(很短暂)→红棕色到终点。

同时用 K2SO4代替过滤液作空白,注意两个电炉间的差异。

注:(NH4)2Fe(SO4)2溶液的标定:在三角瓶内放入 N K2CrO7标准溶液10ml,加入混合酸15ml,摇匀冷却,用(NH4)2Fe(SO4)2溶液滴定,颜色反应同上。

一般在测定开始和结束时各标定一次,取平均值,保留4位小数。

分析结果的表述:
计算公式:(1)C(ug/ml)=[(V空白—V样品)*N(NH4)2Fe(SO4)2*3*1000]/吸取样品的体积数(ml)(2)C(ug/g)=[C(ug/ml)*提取液的总体积数(ml)]/W干土(g)
(3)EC(ug/g)=C熏蒸(ug/g)—C未熏蒸(ug/g)
(4)微生物量碳BC(ug/g)=EC/(ug/g)
允许差
取平行测定结果的算术平均值作为测定结果(一般做两次重复)。

平行测定的绝对差值≤10ug/g。

(要求样品滴定时的绝对差值≤)
5.微生物量氮的测定—消煮、碱化蒸馏法
仪器、设备:定氮仪、烘箱、开氏瓶(50ml)、移液管(50ml、2ml、5ml)、小漏斗、小三角瓶(150ml)
试剂的制备:去离子水、浓硫酸(化学纯)、硼酸指示剂、10M NaOH溶液(化学纯)、CuSO4溶液
分析步骤:
吸取步骤中的过滤液25-30ml放入到开氏瓶(三角瓶)中,加入2ml浓硫酸(固定滤液中的氨)。

放入到烘箱中在60~700C烘2~3天,直至瓶内还剩下3ml左右溶液,取出。

加入3ml浓硫酸和溶液,放上小漏斗在电炉上消煮。

消至瓶内颜色呈天蓝色为止,取下冷却。

同时用 K2SO4溶液50ml代替滤液作空白。

用去离子水洗清小漏斗内外壁,少量多次冲洗开氏瓶,将开氏瓶中的液体全部转移到定氮仪中,加入20ml 10N NaOH溶液进行碱化蒸馏,冷凝管下口放装有5ml硼酸指示剂的小三角瓶,接收蒸馏液,待蒸馏液达到60ml时停止蒸馏。

蒸馏前应检查蒸馏装置是否漏气,并进行空蒸馏清洗管道。

用硫酸标准溶液滴定馏出液,加入指示剂,颜色由蓝色刚变成紫红色为终点,记录消耗硫酸标液的体积。

分析结果的表述:
计算公式:N (ug/g)=[(V—V0)*N H2SO4**稀释倍数*1000*]/W烘干土
微生物量氮BN(ug/g)=N熏蒸—N未熏蒸
其中: V :滴定样品所消耗的硫酸数,ml;
V0:滴定空白所消耗的硫酸数,ml;
稀释倍数:总过滤液是所吸取的过滤液的倍数,;
:无机氮转化为有机氮的转化系数。

允许差
取平行测定结果的算术平均值作为测定结果(一般做两次重复)。

平行测定的绝对差值≤5ug/g。

(要求样品滴定时的绝对差值≤)。

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