高效液相色谱法测定枣中糖类物质

２．国内外对枣中糖类的研究现状
枣树是我国的特产果树，国外的研究报道比较少。国内对于枣中的维生素、蛋白质等的 研究比较多。对含量最大的成分——糖类，目前基本局限于总糖和还原糖的测定。对于多糖 的研究．是把多糖分解后，再进行总糖和还原糖的测定，或者对组成多糖的单糖进行定性分 析，没有对某种单糖进行定量分析的报道。
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高效液相色潜法测定枣中糖类物质
蜂蜜中果糖含量接近“……。
２．１单糖的测定
食品中常见的单糖包括：葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、 半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖酸和山梨糖醇等［１７－１８】。
单糖类的测定有滴定法、比色法和色谱法””６１等。前者主要是利用还原糖的还原性来进 行滴定：比色法是利用还原糖与其他物质反应生成有颜色的物质，然后用分光光度计进行比 色测定。色谱法是利用色谱原理把各种糖类物质分开，然后用～定的检测器测定含量。
人枣中含有钙、镁、钾、钠、磷、氯、硫、铁、硒等微量元素和矿物元素‘９‘１ ３Ｉ，每百克 鲜果约含有钙４１毫克、磷２３毫克，铁０．５毫克。这些物质都是人体骨骼、血液及许多酶的 组成成分。因此，常食枣可以使体内无机盐得到平衡。
人枣又可以作为药物．除了跟其含有的营养化学物质有关外，还含有其他的化学成分。 大枣性温，味甘、无毒。功用为补脾和胃，益气生津，调营养，解药毒。现在药理研究 表明，人枣还具有降低血清胆固醇、增加血清总蛋白及自蛋白、抗过敏、抑癌抗癌、镇静催 眠、降血压、增强心肌收缩力、调节免疫功能、强壮、保肝、镇咳等作用。大枣除了含有～ 些常见的营养物质外，还含有环磷酸腺苷、大枣苄甙、大枣催吐醇甙、芦丁等‘１。６Ｉ。 ｌ＿１．５环核苷酸 据有关资料报导【９－１０１，枣成熟果肉中环核苷酸含量达１０．３００ｎｍｏｌ／ｇ，是所有己测动植物材 料中最高的，为一般动植物材料环核苷酸含量的数千至数万倍。大枣中含有的环磷酸腺苷可 调节细胞的分裂增值，有利于肿瘤细胞向正常细胞转化。环磷酸腺苷还有扩张血管的作用， 可改善心肌的营养状况，增强心肌收缩力，有利于心脏的正常活动。环磷酸腺苷还是一种抗 过敏作剧的化学物，它使细胞膜变稳定，减少过敏性介质的释放，从而阻止过敏反应的发生。 １．１．６其他物质
从枣的枝叶以及果实的质地特点可以推断，枣果实的多糖应该据有特殊的分子结构，而 且确有学者从枣果实中分离出非消化性单糖。用小鼠做的枣膳食纤维素调整肠道功效试验的 结果也说明，枣膳食纤维素确有明显的生理调节作用，因此可以认为，有必要继续对枣中多 糖的化学组成进行进一步研究。本研究拟以枣果为研究对象，建立高效液相色谱分析法，对 枣中多糖进行单糖组成的定性定量分析，初步掌握枣多糖组成和结构概况。
枣中含有丰富的维生素．其中维生素Ｃ的含量【９＿ｌ”，每百克鲜果肉中约３８０毫克～６００ 毫克，比苹果、桃高１００倍左右，比橘子高７～１０倍，有天然维生素丸之称。酸枣的含量更 高，达１０００毫克以上。
枣中的维生素Ａ、维生素Ｂ、维生素Ｄ的含量也很高，还含有维生素Ｐ、硫胺素、胡萝 ｈ素等…”。 １．１．４微量元素（Ｍｉｃｒｏｅｌｅｍｅｎｔ）
关键词：枣；高效液相色谱：糖类：动态变化
独创性声明
本人弗翡所量突豹学接论文是本人在导ｊ｜ｉｌｉ攒导下进行的研究工作及取褥的研
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入已疑发表或撰写过的轿究成槊，也不包含为获缮 育机构的举位藏证书而使绡遘豹材辩．与我一蠲工作静瓣志对本臻究所傲靛任爨 贡献均已在论文中作了明确的说明并表承谢意．
枣中糖类的含量极为丰富。据文献“１报道，枣果中的糖包括葡萄糖、果糖、低聚糖、多 糖等。粗纤维平均为２．４１％，其中以河南灰枣最高，辽宁木枣最低”１。总糖含量平均为６０．３６％， 其中以陕西晋枣、河北沧州金丝小枣Ｉ号最高，陕酲黑疙瘩枣最低。不同品种间各种营养成 分差异显著”ｌ。同一品种中，随着品质由优变劣，枣中糖的含量逐渐减少，酸的含量、纤维 素、果胶等含量逐渐增加。枣中果糖含量为１４～３５％，占总糖的２０％～４８％，平均３１．５％，与
枣果不仅是滋补佳品，而且也是一味传统的中药，具有补脾益胃、养心安神、缓和药 性等功效。主治脾虚食少，乏力便溏，妇人脏躁””。现代药理研究表明，它具有抗变态反 应、抗肿瘤、镇静、保肝、抗炎、抗衰老等多方面药理作用…。这些功能的存在应归咎ｆ其 所含的特殊化学成分。研究表明，枣中含有糖类、蛋白质、多种维生素、膳食纤维素、脂肪、 微量元素、环核苷酸、生物碱、三萜酸、类黄酮等成分”。１“，这些成分有些是人体新陈代谢 所必需的营养成分，有些则是具有生理调节作用的生物活性成分。因此，枣是我国特有的功 能性食品基料资源。
１．１枣中的化学成分
枣为我国传统药食兼用果品。作为食品，丈枣含有人体所需的碳水化合物、蛋白质、脂 肪、多种氨基酸、维生素、微量元素、有机酸和粗纤维等”““，这些都是构成和参与人体生 命过程不可少的重要物质。 １．１．１碳水化合物（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ）
枣果中碳水化合物含量很高，鲜果中达２６％～３６％，干枣中高达６０％，其中包括葡萄糖、 果糖、低聚糖、多糖等““。不同的枣品种含糖量不一样。据文献报道”１，尖枣作为一个鲜食 品种，其总糖、还原糖、果糖含量及果糖占总糖的比例等项指标在被测９个枣品种中均为最 高，而纤维素含量最低：婆婆枣中总糖含量最低，而纤维素、果胶含量最高；而同一品种的 枣，随着品质由优变劣，枣中糖的含量逐渐减少””８ ３。 １．１．２蛋白质和氨基酸（Ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ）
大枣中含有蛋白质１．２％一３．３％，人体所必需的２４种氨基酸中，枣含有１７种。据中国农
高效液相色潜法测定枣中糖类物质
业院蔬菜研究所对乐陵金丝小枣样品化验分析…”，每百克果肉中含有天门冬氨酸０．３毫克。 苏氮酸０ ０６毫克、丝氨酸Ｏ．０６毫克、谷氨酸０．１５毫克、甘氨酸０．０７毫克、丙氨酸Ｏ．０６毫 克、颉氨酸Ｏ．０７毫克、蛋氨酸Ｏ．０６毫克、异亮丙氨酸Ｏ ０６毫克、亮氨酸０．０９毫克、酪氨酸 ｏ．０６毫克、苯丙氨酸ｏ．０６毫克、赖氨酸ｏ．０７毫克、组氨酸０．２３毫克、精氨酸０．０６毫克、脯 氦酸Ｉ ７８毫克、胱氨酸０ ０５毫克。 １．１．３维生素（Ｖｉｔａｍｉｎ）
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河北农业大学 硕士学位论文 高效液相色谱法测定枣中糖类物质 姓名：赵仁邦 申请学位级别：硕士 专业：农产品加工及贮藏工程 指导教师：崔同
2003.5.1
河北农业大效液相色谱法。枣样品经过烘干和粉碎后，用９５％的乙 醇提取，分为寡糖（含单糖）和多糖，寡糖直接进色谱柱测定，多糖经水解、中和、浓缩和 定容后，再进色谱柱测定。色谱泵为Ｐ２００ＩＩ高压恒流泵，检测器为Ｗａｔｅｒｓ ４５０示差折光检 测器，色谱柱为大连伊利特ＨＹＤＥＲＳＩＲ．ＮＨ２，柱温３５。Ｃ，检测池温度３５℃，流动相为乙腈： 乙酸乙酯：水＝６０：２５：１５，流速０．６ｍＬ／ｍｉｎ，进样体积１０ ｕ Ｌ。结果表明，此方法测定各种 单糖的稳定性用相对标准偏差ＲＳＤ来表示，半乳糖３．１９％，果糖０．７５％，鼠李糖５．１３％，木 糖Ｏ．８９７％，阿拉伯糖１．７４％葡萄糖２．２１％蔗糖２．３４％，甘露糖４．１１％。测定各种单糖的 回收率为鼠李糖９６．２％，木糖９９．３％，阿拉伯糖９７．０％，果糖１１０％，甘露糖９７．５％，葡萄糖 ９７ ｏ％，半乳糖１１０％，蔗糖１１０％。用此方法测定的各种单糖的线性方程，鼠李糖 仁．３ ８７Ｅ．４＋７．５７Ｅ．５Ｘ，相关系数０．９９５，木糖ｒ＿１．４０Ｅ．５ ４－８．６７Ｅ．５Ｘ，相关系数０．９９６，阿拉 伯糖怍．１．２４Ｅ．５＋１．２３Ｅ．４ｘ，相关系数０．９９１，果糖ｒ－．２．７８Ｅ．４＋７．２０Ｅ．５Ｘ，相关系数０．９９７， 甘露糖ｙ＿－．１．９８Ｅ．４＋９．７７Ｅ．５儿相关系数Ｏ．９９９，葡萄糖ｐ．１ ７５Ｅ．４＋６．１５ Ｅ－５Ｘ，相关系数Ｏ．９９９， 半乳糖Ｙ－－Ｉ．９１Ｅ．４＋４．１０Ｅ．５Ｘ，相关系数Ｏ，９９９，蔗糖ｙ＿－５．６ＩＥ－５＋６．６０Ｅ一５Ｘ，相关系数０．９９９。 用此方法测定半红期的冬枣中各种单糖和双糖含量，鼠李糖：７．５５ｍｇ／ｇ；阿拉伯糖：９ ０９ｍｇ／ｇ： 果糖：２１２ｍｇ幢；葡萄糖：３６．３ｒａｇ／ｇ；半乳糖：２８．０３ｍｇ／ｇ；双糖（用蔗糖算）：２８５ｍｇ／ｇ。测 定组成多糖的单糖含量，鼠李糖为：１１．１ｍｇ／ｇ；阿拉伯糖：７．６５ｍｇ／ｇ；果糖：３６．６１ｍｇ／ｇ；甘 露糖：７．１４ｍｇ／ｇ；葡萄糖：１９．９ｍｇ／ｇ；半乳糖：２２ ２ｍｇ／ｇ。用此方法对不同发育阶段冬枣和 小枣的糖类的变化进行动态分析，发现糖的含量随着生长期而变化，在幼果期、白熟期、半 红期和全红期的各种糖的变化比较明显。在幼果期，果糖、葡萄糖和半乳糖含量比较高，自 熟期以后寡糖含量增高，而果糖、葡萄糖和半乳糖的含量先减少，再升高。
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河北农业大学硕士论文
枣中含有三萜类化合物，据报道三萜类化合物对癌的抑制作用超过抗癌药物５．氟嘧啶。 枣中含有的三萜类化合物有山楂酸等‘’“，
大枣中含有达玛烷型皂甙，有抗疲劳的作用，能增强人的耐力。大枣中的黄酮类化合物 有镇静、催眠和降血压作用。大枣中的乙基－Ｄ．呋喃葡萄糖甙衍生物对５．羟色胺和组织胺有
２．１．１滴定法 滴定法常见的有直接滴定法、高锰酸钾滴定法、萨氏法、碘量法和蓝一爱农法“”２“等。 由于是利用氧化还原反应，酮糖和醛糖都具有一定的还原性，所以滴定法的选择性差，测定 的是总还原糖的含量，或总酮糖和总醛糖的含量，不能具体测定某种还原糖的含量。 ２．１．２比色法 比色法有３，５～二硝基水杨酸比色法和半胱氨酸一咔唑比色法“””。前者也是利用还原糖
对抗作用”“。
枣是我国一大特色和优势资源，枣产业是河北省太行山区和沧州盐碱地区的支柱性产 业。然而，迄今枣的加工增值环节尚十分薄弱，尤其缺乏能突出枣果营养和独特食疗价值的 高附加值产品， 这一现状己成为枣树生产再上新台阶和可持续发展的关键性制约因素。因 此，研究枣中营养成分，特别是含量极其丰富的糖类成分，就具有了至关重要的作用。对于 开发和利用枣资源具有重要的意义。