!高效液相色谱_电喷雾质谱法研究人尿中_生育酚的主要代谢产物
分散液相微萃取-高效液相色谱法同时测定尿样中2,5-己二酮、苯酚及邻甲酚
分散液相微萃取-高效液相色谱法同时测定尿样中2,5-己二酮、苯酚及邻甲酚张伟亚;李红丽;刘丽华;徐烨;韩彦龙【摘要】提出了分散液相微萃取-高效液相色谱法同时测定尿样中2,5-己二酮、苯酚及邻甲酚的含量.优化的试验条件如下:①衍生试剂为2,4-二硝基苯肼;②反应时间为20 min;③反应温度为70℃;④萃取剂三氯甲烷的用量为0.3 mL;⑤萃取时间为10 min.以C18色谱柱为固定相,用不同比例的甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,用紫外检测器测定.2,5-己二酮、苯酚及邻甲酚在一定的质量浓度范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.3～0.7μg·L-1之间.加标回收率在89.1％～104％之间,测定值的相对标准偏差(n=7)在3.0％～4.6％之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)009【总页数】4页(P1274-1277)【关键词】高效液相色谱法;尿样;分散液相微萃取;2,5-己二酮;苯酚;邻甲酚【作者】张伟亚;李红丽;刘丽华;徐烨;韩彦龙【作者单位】东北大学理学院,沈阳110819;东北大学理学院,沈阳110819;东北大学理学院,沈阳110819;东北大学理学院,沈阳110819;承德石油高等专科学校机械工程系,承德067000【正文语种】中文【中图分类】O652.63近年来,随着化学工业的不断发展,有机溶剂的生产使用量日益增加,使用有机溶剂造成的职业中毒事件时有发生[1]。
正己烷、苯和甲苯等有机化合物作为常见溶剂被广泛应用于工业和科学研究领域,在某些特定职业工作场所,这些物质经人体呼吸道吸入或皮肤接触进入体内后,会对神经、呼吸、生殖、心血管、皮肤、血液等系统和组织造成不同程度的损伤。
此类有机溶剂经体内代谢后可在其尿、血等生物材料中检出其相应的代谢产物,对尿样中常见有机溶剂代谢产物进行监测,既能客观地反映出机体接触有害物质的水平及中毒程度,又可以为职业中毒诊断和治疗提供重要的依据。
反相高效液相色谱-串联质谱法测定植物油中生育酚的含量
反相高效液相色谱-串联质谱法测定植物油中生育酚的含量顾强;陈忍忍;乙小娟;张慧;刘一军【摘要】采用C18反相色谱柱分离,大气压化学电离源(APCI)离子化,三重串联四级杆质谱测定,通过优化质谱参数、样品前处理条件,建立了植物油中α-、β-、γ-、δ-生育酚的反相高效液相色谱-串联质谱定量检测方法.结果表明,该方法检出限为0.05 ～0.10 mg/kg,线性范围0.025 ～50.0 mg/L,加标回收率在80.4％～97.4％之间,RSD小于10％.为植物油中生育酚的检测提供了一种更为灵敏、更易于推广的新方法.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2014(039)010【总页数】4页(P85-88)【关键词】生育酚;定量检测;反相高效液相色谱-串联质谱【作者】顾强;陈忍忍;乙小娟;张慧;刘一军【作者单位】张家港出入境检验检疫局,江苏张家港215600;张家港出入境检验检疫局,江苏张家港215600;张家港出入境检验检疫局,江苏张家港215600;张家港出入境检验检疫局,江苏张家港215600;张家港出入境检验检疫局,江苏张家港215600【正文语种】中文【中图分类】TS225.1;TQ646生育酚是一系列表现出维生素E活性的甲基化酚类物质，根据其甲基数目和位置不同，生育酚分为α-、β-、γ-和δ- 4种形式。
生育酚对人体健康有很多益处，包括促进生殖、抗氧化、延缓衰老等。
各种生育酚的生理活性也各有特点，α-生育酚的生理活性最强，而γ-生育酚则具有突出的抗氧化活性[1]。
植物油中含有丰富的生育酚，而不同植物油中所含生育酚的种类也不同，比如橄榄油、葵花籽油中富含α-生育酚，大豆油、玉米油中γ-生育酚的含量比较高。
植物油中生育酚含量的检测一般采用正相液相色谱法分离，样品经正庚烷溶解后直接上机测定，荧光检测器检测。
这种方法的好处是无需前处理，但正相液相色谱柱稳定性较差，给定量检测带来一定的困难[2-3]。
超高效液相色谱-串联质谱法测定人尿中硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚的含量
超高效液相色谱-串联质谱法测定人尿中硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚的含量肖永华; 许开冰; 王胜; 毛翔; 卢圆圆【期刊名称】《《理化检验-化学分册》》【年(卷),期】2019(055)010【总页数】6页(P1151-1156)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱法; 硫酸吲哚酚; 硫酸对甲酚; 人尿【作者】肖永华; 许开冰; 王胜; 毛翔; 卢圆圆【作者单位】武汉市疾病预防控制中心武汉 430022; 华中科技大学同济医学院附属同济医院武汉 430030【正文语种】中文【中图分类】O657.63硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚分别为色氨酸和酪氨酸在肠道细菌作用下的代谢产物。
食物中的色氨酸经大肠埃希菌分解产生吲哚,吲哚经过门静脉进入肝脏经羟化、硫酸化过程,最终生成硫酸吲哚酚[1-2];肠道厌氧菌将食物中的酪氨酸转变为4-羟基苯乙酸,4-羟基苯乙酸脱羧成为对甲酚,大部分对甲酚经肠道黏膜吸收,在肠道上皮细胞磺基转移酶的作用下转化为硫酸对甲酚。
有研究表明,硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚具有肾脏毒性和心血管毒性,能促进心肌细胞凋亡,加重动脉钙化使动脉壁变厚以及心室肥大[3-7],同时,心血管疾病是慢性肾病患者最主要的影响因素之一[8]。
硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚还能促进肾间质细胞向成纤维细胞转化,引起肾脏的纤维化,属于尿毒症毒素[9-11]。
当人体肾功能出现障碍时,硫酸对甲酚和硫酸吲哚酚不能有效排除体外,导致在人体内蓄积,从而对人体带来毒副作用。
我国慢性肾病的发病率高达11%,发病率和血液透析人数呈逐年上升趋势[12],在慢性肾病患者的队列研究中,发现游离的硫酸对甲酚是慢性肾病患者的一个重要的死亡率预测因子[13]。
目前,研究硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚的生物样本主要为血清和血浆[14-15],对尿液中硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚的研究较少。
同时,研究对象主要为肾功能异常的患者,对正常人群研究较少,在国内仅有初启江等[16]研究了正常人血清及尿样中硫酸吲哚酚的含量的分析方法,但是对儿童和孕妇尿样中硫酸吲哚酚和硫酸对甲酚的研究还未见报道。
固相萃取—高效液相色谱—荧光法测定人体尿液中单胺类神经递质
固相萃取—高效液相色谱—荧光法测定人体尿液中单胺类神经递质作者：高慧邢燕汪洋来源：《中国测试》2017年第02期摘要：建立一种快速、准确测定人体尿液中肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺4种单胺类神经递质的方法。
尿液样品以Waters Oasis WCX固相萃取柱富集，依次用2 mL 20 mmol/L乙酸铵-甲醇溶液、2 mL甲醇淋洗杂质，最后用5 mL含2%甲酸的乙腈水溶液（85∶15，ν∶ν）提取被分析物。
经Agilent C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分离，以甲醇与乙酸钠溶液的不同配比设置流动相梯度，在荧光检测激发波长280 nm，发射波长340 nm条件下，测定人体尿液中4种单胺类神经递质的含量。
结果表明：4种单胺类神经递质的回收率为92.2%～104.8%，相对偏差为1.6%～3.1%，检出限为0.002～0.05 μg/mL。
该方法稳定、快速、简便，能满足人体尿液中多种单胺类神经递质的含量测定。
关键词：单胺类神经递质；固相萃取；高效液相色谱；荧光检测文献标志码：A 文章编号：1674-5124（2017）02-0060-040 引言神经递质是神经末梢分泌的化学物质，在化学突触传递中担当信使的作用。
单胺类物质（MNTs）是最早发现的一类神经递质，包括多巴胺（DA）、肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）和5-羟色胺（5-HT）。
MNTs在中枢神经系统、外周植物神经系统和激素介导的内分泌及外分泌活动中起着极其重要的作用[1]。
固相萃取（solid-phase extraction，SPE）是近年发展起来的一种样品预处理技术，主要用于样品的分离、纯化和浓缩，与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更可将分析物与干扰组分有效分离，正成为复杂样品纯化、富集的有效手段。
人体尿液中单胺类神经递质含量的准确检测，对嗜铬细胞瘤等相关疾病诊断、新药研制开发、药物疗效评价等方面有重要意义。
高效液相色谱-电化学检测法测定人尿液中的5-羟基吲哚乙酸和高香草酸
关键 词
反相高效液相色谱法 ， 电化学检测 。 人尿 ，－ ５羟基吲哚 乙酸 ， 高香草酸
１ 前言
尿 液 中儿 茶酚胺 和 ５羟基色胺 （－ Ｔ 的 酸性 － ５ ） Ｈ 代谢 产物 的测定 常用溶 剂提取法［或小柱［ ４ １ ］ ２］ 进行 样 品预处理 ， 费时且成本高 。Ｅｒｄ等［报道了直接 ｌ ｏ ５ ］ 测定稀释 人尿 液 中的 ５ Ｉ Ａ。本文 探讨 了同时测 － Ａ Ｈ 定人 尿 液 中 ５ Ｉ Ａ 和 Ｈ Ａ 的色谱 条 件 ， － Ａ Ｈ Ｖ 用该 方 法测定 了正 常人和接 触锰 人群组 １ 小 时尿液 中的 ２
２ 实验部分
２１ 仪 器和试剂 ．
Ｗａｅｓ ６ ０ Ａ 泵 ， Ｋ 进 样 阀 ， Ｃ ４ ／ ７ ｔｒ Ｍ ０ ０ Ｕ６ Ｌ －Ｂ １
型 电化学 检测器 （ｉ ｎｌ ｉ ｌ ｔ ＩＣ ） Ｂｏ ａ ｔａＳ ｓ ｍ ａ ｙ ｃ ｙ ｅ Ｎ 及岛津 ＣＲ Ａ 数据 处 理 仪。５ Ｉ Ａ 为 Ｆｕａ产品 ， Ｖ －３ － Ａ Ｈ ｌ ｋ Ｈ Ａ 为 Ｅ Ｍｅｃ 品， ． ｒｋ产 其余 为 国产 分析 纯试 剂 ， 为超 水
３ １９ ２： ５ ０
＊ 本文为祝贺卢佩章先生七十华诞而作 本文收稿 日期 ：９５ ５ ５日 １９ 年 月
１％则 Ｎ ２ Ｈ Ａ 重叠 ； 甲醇浓度增至 １ ％， ０ Ｐ与 Ｖ 若 ４ 则 Ｎ ２ ｔ 降低 而与 ５Ｈ Ａ Ｐ的 Ｒ － Ｉ Ａ重叠 。 综 合上述 各种 因素 ， 最后选择 了含 １ ％甲醇 的 ２ ０ １ ｏ／ Ｎ Ｈ Ｐ ４ 冲液 （Ｈ ． ０含 ０１ ｍ ｌ ．ｍ ｌ Ｌ ａ Ｏ 缓 ｐ ４２ ， ．ｍ ｏ／ Ｌ Ｔ －Ｎ ┪ Ｅ Ａ ２ ａ 为流动 相 ， 作电位 ０６Ｖ。图 ２为 Ｄ 工 ．５ 标 准样品色谱 图， ３ 图 为尿液色谱 图。
高效液相色谱-质谱法测定性保健品中脱水吗啡、西地那非、前列地尔
!" 实验部分
! ! !" 仪器与试剂 # # "#$%&’( )*$$%% +, - ./0 1234 /+ 高 效 液 相 色 谱 ! 质谱联用仪 （ 德国） ； /32(52$67 .8!$& / 电子分析 天平 （ 德国） 。甲酸 （ 分 析 纯， 上海试剂一厂） ， 甲醇 （ 色 谱 纯， 9$7:&2 公 司 ） ， 乙腈 （ 色 谱 纯， 9$7:&2 公 /$#;3 公 司 ） ， 司） ， 脱水 吗 啡 及 前 列 地 尔 （ 分 析 纯， 西地那非 （ 由中国药品生物制品检定所提供） 。 ! ! %" 色谱条件 # # 色谱柱： C52D3E 8?%$47& F0G!, $) 柱 （ $&% ;; / !0 $ ;; $0 <0 ， & !;） 。流动相 " ： %0 & H 的甲酸 水溶 液； 流动相 G ： 乙腈。 洗 脱 程 序： % 1 ! ;$’ ， !% H G ； ! ;$’ 以 后 至 结 束， )% H G 。 柱 温： "& I ， 流 速： %0 !& ;+ - ;$’ ， 进样量： & !+。 ! ! $" 质谱条件 # # 采用电喷雾电离源 （ 8/J ） ， 电 喷 雾 电 压 为 "0 & BK ， 喷雾 气 （ L! ） 压 力 为 !+, B*3 （ (% 47$ ） ， 干燥气 温 度 为 "&% I ， 流 速 为 $%0 % + - ;$’ 。 在 $ % & （ L! ） $%% 1 &%% 范 围 内 进 行 全 离 子 扫 描 并 选 择 $ % & !,) （ 脱水吗啡） 、 $ % & (+& （ 西地那非） 带正电荷的准分 子离子峰和 $ % & "&" （ 前列地尔） 带负电荷的准分 子离子峰的峰面积用于定量。 ! ! &" 标准溶液的配制 # # 准确称取脱水 吗 啡、 西地那非和前列地尔标准 品各 $%0 % ;# ， 用甲醇 溶 解 并 定 容 在 $% ;+ 容 量 瓶 中， 配制成 $ # - + 的混合 标 准 贮 备 液， 于冰箱 （( I ） 中保存， 使用时用甲醇稀释成所需浓度。 ! ! ’" 样品的制备 # # 取数粒中药性保健品胶囊样品的内容物， 混匀， 从中 准 确 称 取 %0 !% # 于 锥 形 瓶 中， 用甲醇超声溶 解， 移至 !&% ;+ 容 量 瓶 中， 再 用 甲 醇 定 容 至 刻 度， 摇匀， 用 %0 (& ! ; 微孔滤膜过滤后即可进样。 # # 取 !0 % ;+ 中药性保健品口服液 样品， 置于 $%% ;+ 容量瓶中， 用甲醇定容至刻度， 用 %0 (& ! ; 微孔 滤膜过滤后即可进样。
高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中丙烯醛的代谢产物
高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中丙烯醛的代谢产物肖卫强;黄健;袁凯龙;胡安福;吴希美;刘金莉;夏倩;戴路;周国俊【摘要】HPLC-MS/MS was applied to the determination of 3-hydroxypropyl mercapturic acid (3-HPMA), the metabolite of acrolein,in human urine.The frozen urine sample was unfrozen at room temperature and centrifugalized.3-HPMA-15 N-13 C3 as internal standard was added to the supernatant.3-HPMA in the supernatant was extracted with acetonitrile.The extract was separated on a Diamonsil C18 (2)column,with a mixture of 0.1%(φ)acetic acid solution and metha nol as the mobile phase for gradient elution.ESI and SRM were adopted in MS. The linearity rangeof 3-HPMA was 10.0 -2 500 mg ·L-1 ,with detection limit (3S/N)of 0.99μg ·L-1 . Recovery rates obtained by standard addition method were in the range of 88.4%-104% and RSDs (n=6)were in the range of 0.7%-2.7%.The method was used to determine 3-HPMA in 15 samples of human urine from smokers and non-smokers.It was found that the average content of3-HPMA in the urines from smokers were about 7.6 times of that in the urines from non-smokers.%采用高效液相色谱-串联质谱法测定人体尿液中丙烯醛的代谢产物 N-乙酰基-S-（3-羟基丙基）半胱氨酸（3-HPMA）。
液相色谱-电喷雾电离质谱法检测尿液中的3种合成类固醇药物
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通讯联系人： 秦 * 旸， 博士， 研究员 ’ *+# ： （ ")" ） %&+&%+,, ，,)-./# ：0/1$.12 - 34/1.5.’ 31’ 基金项目： 国家自然科学基金资助项目 （ (&’ !"%,’"") ） ’
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液相色谱-电喷雾电离质谱法检测尿液中的3种合成类固醇药物
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一
，
考 察 了不 同 的质谱条件对 这 类 化
。
合物 检测 结果 的影 响
一
。
建立 了人 尿液 中合成类 固醇 药 物 的液 相 色谱 电 喷雾 电离 质谱 的初 筛和 确证 方 法
一
关 键 词 ：液 相 色 谱 电 喷 雾 电 离 质 谱 ；合 成 类 固 醇 ；人 尿 液 ；兴 奋 剂 检 测 中 图 分 类 号 ：0
m
”
。
但
LC M S
．
方法对
运 动员 服 用 后 可 直 接 提 高 其 体 育 竞 赛 成 绩
。
这类 化合 物 的 响应 很 好
’
，
样 品无 需 气 化 及 衍 生
、
因 而 在 体 育 比 赛 及 赛 场 外 抽 查 中均 属 必 检 项 目
一
多
化 前处 理 简单
，
。
本 文 研 究 建立 了群 勃龙 四 氢孕 三
高效液相色谱_电喷雾串联质谱法_LC_ESI_MS_MS_检测人血浆中罗红霉素浓
摘要 目的: 建立人血浆中罗红霉素的高效液相色谱 - 电 喷雾串联 质谱 ( LC- ES I- M S /M S) 检测方 法。方法: 血浆样 品经乙
腈沉淀蛋白后, 反相液相色谱分离后进行质谱分析, 采用选择反 应监测 模式 ( SRM ) 进行检 测, 罗红霉 素和内标 物克拉 霉素的
检测离子对分别为 m /z 837 5 679 5和 m /z 748 5 158 1。结果: 罗红霉 素在 10~ 1, 000 ng mL- 1浓度范围 内线性 关系良
GUO Be i- ning1, YU Ji- cheng1, ZHANG J ing1, CAO Guo- ying1, SH I Y ao- guo1, L IU Fe i2
( 1. Inst itu te of A nt ib iot ics, H uashan H osp ita,l Fudan U n iversity, Shangha i 200040, Ch in a; 2. Therm o F isher S cien tif ic, Shanghai 201206, Ch ina)
* 上海市重点学科基金 ( B119)资助项目 第一作者 Te:l ( 021) 52888198; E - ma i:l gu obein ing@ yahoo. com. cn
# 1538 #
药 物分析杂志 Ch in J Pharm Ana l 2010, 30( 8)
要用于敏感菌引起的呼吸道感染包括鼻窦炎、中耳 炎、支气管炎及肺炎、皮肤软组织感染以及衣原体所
致的泌尿生殖道感染。本文建立了血浆中罗红霉素
的高效液相色谱 - 串联质谱 ( LC- M S /M S) 测定法, 方法简单、灵敏, 血样需要量及进样量少, 分析时间 短, 实用性强, 可用于临床药代动力学等研究。 1 仪器、试剂和材料
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F igure 1 LC M S tota l ion chrom atogram o f the urine sam ple o f the vo lunteer g iven tocophero l supplem ent
u r in ary
别记作 M 1、M 2、M 3和 M 4, 通过分析各自的二、三 级质谱, 鉴定各代谢物。 1. 1 代谢物 M 1 m /z 375[ M - H ] - , 在基峰选择 离子流色谱图 ( 图 2a) 上的保 留时间是 4 81 m in, 一级质谱图见图 2b。将 m /z 375 进行二级 质谱分 析, 得到碎片 峰 m /z 330、m /z 217 和 m /z 295 ( 图 2c) 。二级碎片离子 m /z 330( [ ( M - H ) - - 45] 脱 去 COOH ) 表 明 了该 代 谢 物 含有 羧 基; m /z 217 [ (M - H ) - - 158] 是 M 1的苯环部分, 结构见图 6; m /z 295( [ ( M - H ) - - 80] 脱去 SO 3 )提示该代谢物 为硫酸酯结合型代谢物, 并且脱去硫酸酯 m /z 295 质量数与 生育酚代谢物 生育酸一致。对二级 质谱中丰度最大的碎片离子 m /z 217进行三级质谱 分析 ( 图 2d) , 从图上看到三级质谱的主要碎片离 子有 m /z 138( [ ( M - H ) - - 80] 脱去 SO3 ) 证实了 M 1为硫酸酯轭合物。结合各级质谱数据推测 M 1 为 生育酸硫酸酯轭合物。 1. 2 代谢物 M 2 m /z 357[ M - H ] - , 在基峰选择 离子流色谱图 ( 图 3a) 上的保留时间是 29 19 m in, 一级质谱图见图 3b。把 m /z 357 进行二级 质谱分 析, 碎片离子有 m /z 163, m /z 278( 图 3c )。二级碎 片离子 m /z 278( [ ( M - H ) - - 80] 脱去 SO3 ) 提示 M 2中含有硫酸酯, m /z 80为硫酸酯的特征碎片离 子, 脱去硫酸酯离子后 m /z 278与 生育酚的代谢 物 CEHC 的质量数 相同; m /z 163 是 生 育酚类 化合物发生了 RDA 裂解得到的特征峰 [ 1, 7] , 这里的 m /z 163是 m /z 357脱去硫酸酯后的 m /z 278发生 RDA 裂解得到的碎片离子。对二 级质谱中丰度最 大的碎片离子 m /z 163进行三级质谱分析, 并没有 发现比 m /z 163更小的碎片, 说明 M 2结构中含有稳 定的 生育酚类化合物的特征离子, 综合各级质谱 推测 M 2是 CEHC 硫酸酯轭合物。
tocophero l detection w ith m any desirable properties inc luding h igh sensit iv ity and se lect iv ity, thus prov id ing a reliable pathw ay for further study in m etabo lism of tocophero.l
目前, 国外已有文 献报道 生育酚 的代谢研 究, 检测到的代谢物有 生育酸和 生育酸内
收稿日期: 2007 10 24. * 通讯作者 T e:l 86 - 20- 39310382,
E m a i:l yuyh s@ yahoo. com. cn
酯 [ 2] , 2, 5, 7, 8四甲 基 2 ( 2 羧乙基 ) 6硫 酸酯苯 并二氢 吡喃 ( CEH C ) 及 其硫 酸酯 轭合 物 [ 3 ~ 5 ] 和 2, 5, 7, 8 四甲基 2 ( 4 甲 基 5羧 基丁烷 基 ) 6苯 并 二氢吡喃 ( CM BHC ) [ 6] 。本文采用高效液相色谱 电喷雾质谱法对 口服维生素 E 后 人尿样中的代谢 产物进行了研 究。根据前人推测的 生育酚在人 体内的代谢过程 [ 3] 及实验结果, 本文检测到 生育 酚发生 氧化得到代谢物 CEHC 硫酸酯轭合物及 其与体内自由基发生氧化得到代谢物 生育酸硫
结果与讨论
1 尿中代谢产物的 LC M Sn 分析 在最佳色谱条件下, 以负离子方式检测, 用空
白尿样对照, 在服药尿样的一级全扫描质谱 ( 图 1) 中发现与母体药物相关的代谢物准分子离子峰 m /z 375、m /z 357、m /z 263和 m /z 539, 它们的色谱保留 时间分别是 4 81、29 19、33 68和 53 05 m in, 分
PAN Y ing yu, YU Y ing* , LA I Gu x ian, ZHU L i cai
(D epartmen t of Chem is try, South Ch ina N ormal University, Guangzhou 510006, Ch ina)
Abstract: To investigate prim ary m etabo lites o f tocopherol in hum an ur ine, the urine sam ples o f five hea lthy volunteers after o ral adm inistrat ion o f 250 m g v itam in E once a day for seven days w ere co llected w ithin 0- 6 h in the seventh day. The sam p les w ere purified through C18 so lid phase ex traction cartridge and analyzed by liqu id chrom atography tandem m ass spectrom etry. Tocopheronic acid, 2, 5, 7, 8 tetram ethy l 2 ( 2 carboxyethy l) 6 suphate chrom an ( CEHC sulpha te ), tocopheronolactone, and 2, 5, 7, 8 tetram ethy l 2 ( 4, 8 , 12 trim ethy l 12 carboxy dodecanyl) 6 suphate chrom an w ere found in urine of vo lunteers as four prim ary m etabo lites of tocophero.l T he m ethod has shown to be prom ising for
酸酯轭合物、 生育酸内酯, 还首次检测到 生育
潘 颖瑜等: 高效液相色谱 电喷雾质谱法研究人尿中 生育酚的主要代谢产物
Байду номын сангаас6 35
酚发生 ∀ 氧 化得 到的 代谢 物 2, 5, 7, 8四 甲基 2 ( 4, 8 , 12 三甲基 12 羧十二烷基 ) 6 硫酸酯苯并 二氢吡喃。
材料与方法
药品与试剂 维生素 E 250 m g /粒, 每粒含有 效成分 D 生育酚 97 5 m g( 海南养生堂保健品有 限公司 ) , 生育酚纯品 ( 天津 A lfa A esar公司 ) 。
质谱条件 质谱采用离子源 ( ESI) ; 扫描范围 m /z 50~ 1 000; 喷射电压 5 kV; 毛细管温度 300 ∀ ; 壳气 ( N 2 ) 流速 35个单位; 在负离子检测模式下采 用全扫描一级质谱及其源内碰撞诱导解离、全扫描 二级质谱的方式和全扫描三级质谱的方式鉴定尿中 的代谢物。
K ey words: liqu id chrom a tography m ass spectrom etry; so lid phase ex tract ion; tocophero;l m etabo lite
维生素 E 具有显著的抗衰老、抗肿瘤和提高机 体免疫力等许多功效 [ 1] 。天然维生素 E 有 , , 和 !等 4种生育酚以及 , , 和 !等 4种生育三 烯酚共 8种同类物, 其中 生育酚含量和活性最 高。
选择性高, 为深入研究 生育酚在人体内的代谢规律提供了可靠的方法。
关键词: 高效液相色谱 串联质谱; 固相萃取; 生 育酚; 代谢产物
中图分类号 : R 917; R969. 1
文献标识码: A
文章编号: 0513- 4870( 2008) 06- 0634- 06
Analysis of primary m etabolites of tocopherol in hum an urine by liquid chrom atography m ass spectrom etry
收集
0~
6 h尿样,
经
C
小柱固相萃取
18
(
SPE ) 分离纯化后,
直接采用液相色谱
质谱联用方法 ( LC M Sn )对尿 样进行测
定。在尿样中鉴定出 4个主要代 谢物, 它们分 别为 生育酸、2, 5, 7, 8 四甲 基 2 ( 2 羧乙基 ) 6硫 酸酯 苯并二 氢吡
喃、 生育酸内酯和 2, 5, 7, 8 四甲基 2 ( 4 , 8 , 12 三甲基 12 羧十 二烷基 ) 6 硫酸 酯苯并二 氢吡喃。 该方法 灵敏、