无菌技术操作原则资料讲解
无菌技术六大操作原则
无菌技术六大操作原则无菌技术是一种在实验室和医疗领域中广泛应用的技术，用于防止细菌和其他微生物的污染。
在无菌操作中，有六个重要的操作原则需要遵循，以确保操作的有效性和可靠性。
本文将详细介绍这六大操作原则，并探讨它们的意义和应用。
第一大操作原则是“准备良好的工作区域”。
在进行无菌操作之前，必须确保工作区域是干净的、整洁的，并且已经进行了必要的消毒。
所有可能带来污染的物品和材料都应该被清理或移开，以防止细菌的传播。
同时，工作区域的空气流动也应得到足够的考虑，以确保细菌不会通过空气传播到操作区域。
第二大操作原则是“正确佩戴个人防护装备”。
在进行无菌操作时，人员应佩戴适当的个人防护装备，如手套、口罩和实验室服。
这些装备可以在一定程度上防止人员对操作区域引入细菌，并且还可以保护人员免受可能存在的致病微生物的威胁。
第三大操作原则是“正确使用消毒剂”。
消毒剂是无菌操作中至关重要的工具，可以杀灭或抑制细菌的生长。
在使用消毒剂之前，需要进行充分的培训和了解其正确的使用方法。
不同的消毒剂适用于不同的材料和操作情境，因此必须选择合适的消毒剂，并按照正确的浓度和时间进行使用，以确保消毒效果的可靠性。
第四大操作原则是“正确进行容器和设备的处理”。
在无菌操作中，容器和设备是细菌污染的主要来源之一。
因此，必须采取适当的方法来处理它们，以确保其无菌状态。
这可能包括使用适当的清洁剂进行清洗和消毒，或使用一次性器械和消耗品来避免交叉污染。
此外，容器和设备的存储也需要特别注意，以防止细菌重新污染。
第五大操作原则是“正确进行物品的传递和移动”。
在无菌操作中，物品的传递和移动是相当常见的。
然而，这也是可能引入细菌的风险所在。
因此，在传递和移动物品时，必须采取适当的操作步骤，如使用无菌物品传递工具、避免直接接触无菌区域等，以确保传递和移动过程中的无菌状态。
最后一大操作原则是“合理使用洁净区和无菌区”。
在无菌操作中，通常会划分洁净区和无菌区，用于区分已经进行了消毒和无菌处理的区域以及可能存在细菌的区域。
无菌操作的基本原则
无菌操作的基本原则无菌操作（aseptic technique）是在实验室或医院环境中进行的一系列措施，旨在防止微生物的污染，确保实验结果的准确性和患者的安全。
以下是无菌操作的基本原则：1.清洁操作区域：清洁操作区域是无菌操作的核心环境。
操作员应该在无菌操作台或无菌室中进行操作，这些设备具有特殊的过滤系统以保证空气无菌。
在操作区域内保持洁净，并定期消毒以降低微生物的数量。
2.持续洗手：操作员在进行无菌操作之前和操作过程中应经常洗手。
用肥皂和流动水充分洗手至少20秒，然后用无菌毛巾或纸巾擦干。
这有助于去除手部微生物，并防止污染。
操作员还可以使用医用级别的洗手液和消毒酒精来增强洗手效果。
3.穿戴无菌服装：在无菌操作过程中，操作员需要穿戴无菌手套、无菌口罩和无菌帽子等无菌服装。
这些服装有助于减少操作员或周围环境中的微生物污染。
在换装时，应采取谨慎措施，确保无菌状态不受到破坏。
4.使用无菌器械和耗材：在进行无菌操作时，所有使用的器械和耗材必须是无菌的。
例如，使用无菌的移液器、无菌培养皿、无菌培养基和无菌培养液等。
这些物品经过高温高压灭菌或经过其他有效的灭菌方法处理，以确保其不会被微生物污染。
5.避免空气污染：空气中悬浮的微生物是无菌实验室中常见的污染源之一、在进行无菌操作时，应尽量减少操作区域内的空气流动，并避免与操作区域内的气流直接接触。
拆封培养皿或打开培养液瓶盖时，应迅速将其放入无菌操作台内，以减少空气污染的可能性。
6.避免触碰非无菌物品：在进行无菌操作时，操作员必须避免触碰非无菌物品，尤其是触碰自己的皮肤、头发、面部和衣物等。
这些物品可能携带微生物并污染无菌环境。
如果意外触碰到非无菌物品，操作员应立即更换手套和清洁工具。
7.避免交叉污染：交叉污染是指在无菌操作过程中将微生物从一个无菌物体转移到另一个无菌物体的现象。
为了避免交叉污染，操作员应该避免将无菌器械、耗材或培养物品放在非无菌的表面上，并避免使用已经被其他无菌物品接触过的器械。
无菌技术的操作原则
无菌技术操作原则
无菌技术是指在无菌条件下，按照一定的方法和操作程序进行实验室操作，以防止细菌、真菌及其他微生物的侵入，保证实验的准确性和可靠性。
无菌操作需要严格遵守以下原则：
1.保持洁净：操作人员必须保持清洁，更新、清洗、消毒实验室设备和器具。
2.严格控制区域：无菌操作需要在洁净室内进行。
洁净室应该有压差控制、过滤器和紫外线灯等措施，使得室内微生物数量降到最低。
3.避免空气交叉：关闭门窗，避免室外空气进入洁净室，避免人员交叉、过多的操作人员等。
4.保持低温低湿：温度和湿度可以影响微生物的繁殖，保持较低的温度和相对湿度，可以减少细菌的滋生。
5.隔离处理：操作人员应佩戴适宜的个人防护用品，如手套、口罩、实验衣等，避免操作人员的污染和微生物传播。
6.灭菌处理：使用灭菌方法，如高压蒸汽灭菌、热空气灭菌、紫外线灭菌等，对器具和培养基进行灭菌处理。
7.无菌操作：衣帽穿戴要整洁。
帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
必要时穿好无菌衣，带好无菌手套。
如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可
使用，应更换或重新灭菌。
8.物品管理：无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌物品一经使用后，必须再经无菌处理后方可使用，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。
洁净手术部(室)无菌技术操作原则
洁净手术部（室）无菌技术操作原则无菌技术是在进行医疗护理操作过程中，防止一切微生物侵入机体，保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作和管理方法。
作为手术部（室）护士必须认真掌握一般无菌原则，手术中应遵循无菌原则和无菌物品储存原则，并将其贯彻于一切工作中，以维护手术过程的无菌性，减少和杜绝感染的发生，保证手术的安全进行。
一、一般无菌技术原则1.操作环境需清洁、宽敞、明亮。
为减少空气中的尘埃，无菌操作前30分钟应停止清扫工作，减少人员流动。
2.无菌操作前，应修剪指甲、洗手、戴帽及口罩。
着长袖工作服时，应将衣袖挽至肘关节以上或束紧衣袖口，操作时应与无菌物品、无菌区域保持一定的距离（约20cm）o必要时，应穿无菌衣、戴无菌手套。
3.取无菌物品时，必须用无菌持物钳，操作时注意衣袖、衣服勿触及无菌物品或跨越无菌区域。
不可面向无菌区讲话、咳嗽或打喷嚏。
4.一切无菌物品均不能在空气中暴露过久。
无菌物品一经取出，即使未用也不可放回原处。
若暂不使用，则应用无菌巾包好，超过4小时应重新灭菌。
5.瓶装的无菌溶液，瓶盖内应保持无菌。
倒溶液前做好瓶口周围的消毒，揭开瓶盖时，手勿触及瓶盖、瓶口，先倒出少许溶液冲洗瓶口，最好一次性使用，勿保存。
6.无菌物品和非无菌物品应分开放置。
经高压蒸气灭菌后的无菌物品保存期一般为1〜2周，梅雨季节为1周。
若超过灭菌时间，则应重新灭菌。
7.一套无菌物品只供一个手术患者使用。
8•怀疑无菌物品被污染时，不可再使用。
二、手术中无菌技术原则1.避免浮尘飞扬，影响手术间净化效果。
术前应做好准备工作，术中应尽量减少人员流动，各项操作动作轻柔，勿在手术间内抖动各种敷料，所有整理工作宜在术后进行。
层流手术部应使用少尘、无尘、无粉物品、如一次性物品、无粉手套等。
9.操作中无菌范围手术人员一经洗手，双手不得低于脐水平，两侧不得超过腋前线，上举不得超过锁骨连线；穿好手术衣、戴好手套后，遮盖式手术衣背部为相对无菌区，腰部以下和胸骨窝水平线以上为非无菌区，手术台无菌区应在手术台平面以上。
无菌技术操作原则ppt课件
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一底一盖无菌巾的铺法：
按无菌操作，取出一块无菌巾。 用两手捏住或无菌持物钳夹住无菌巾的左
右两上角的外面，轻轻抖开，从远端向近 端铺于治疗盘上。根据需要放置无菌物品。 再自近端向远端覆盖一块无菌巾，无菌面 向下，然后将四周大于治疗盘的双层边缘 向上反折。
无菌技ห้องสมุดไป่ตู้操作原则
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半铺、半盖单层治疗巾铺法：
4、手术开始后，该无菌器械桌内物品只对此病人
无菌的，对于其他病人则属于污染的，不能使用。
无菌技术操作原则
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四、手术中无菌操作注意事项
1、术者脐平面以下区域均视为污染区，手和器 械不能置于该平面以下。
2、手术者或助手都不可伸臂横过手术区取器械 物品，更不能在身后传递物品。
3、已取出的器械物品不能再放回无菌包或容器 内，虽未被污染也不能放回，更不能供其他手术 使用（手套、手术衣、敷料、器械等）。
先打开无菌包，用无菌钳取出一块治疗巾， 放在治疗盘内，双手捏住治疗巾上层两角 的外缘对齐，将周围多余部分向上反折盖 严，以保持无菌。
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双层治疗巾铺法：
双手捏住治疗巾的一端的两角外面，轻轻 抖开，从远端向近端，铺三折使成双层底， 上层呈扇型折叠，根据需要放入无菌物品， 边缘对齐，将开口处向上翻折，保持无菌。
患有呼吸道感染者，不能进入手术室，更不能参 加手术工作。
参加手术的医护人员必须严格执行各项有关消毒 隔离制度。
1.修剪指甲 甲缘内的污物是造成感染的原因。 这是术前的主要要求。
2.更鞋、穿洗手衣裤、戴帽子和口罩 3.手和手臂消毒 4.穿无菌手术衣 5.带无菌手套
无菌技术操作原则
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三、铺无菌器械桌
3、同法戴好手套后将手套口翻转，套在工作衣袖 外面。
无菌技术的概念及操作原则
无菌技术的概念及操作原则
无菌技术是一种重要的实验室操作技术，用于防止外源菌的污染，并保持实验环境的无菌状态。
它主要用于细胞培养、微生物学实验、分子生物学实验等各种实验中。
无菌技术的操作原则如下：
1. 严格的个人卫生：进行无菌技术操作时，操作人员必须穿戴干净的实验服，并戴上手套、口罩和护目镜，以防止人员带入细菌等微生物。
2. 消毒操作：在操作过程中，使用已经消毒的仪器、培养皿、培养液等物品。
一般情况下，使用75%的酒精进行表面消毒，或者使用高压蒸汽灭菌器进行物品的高温高压消毒。
3. 实验环境控制：实验室内必须保持良好的清洁环境，定期进行实验室清洁和通风，减少空气中的微生物污染。
4. 空气过滤：在需要进行无菌操作的环境中，可以采用空气过滤器，过滤掉悬浮的微生物颗粒，以减少空气传播的细菌。
5. 炉灭菌和紫外线消毒：实验室中可以使用高温高压灭菌器对试验装置和实验用品进行消毒，也可以使用紫外线消毒灯照射工作区域，杀灭细菌。
6. 快速操作和密封容器：在进行无菌技术操作时，应该尽可能快速进行，以减少无菌环境的有效时间。
同时，将实验物品放
入密封的容器中，以防止空气中的微生物进入。
7. 传递物品的方法：在进行无菌技术操作时，应该采用合适的方法传递物品，如用酒精烧灼工具，用无菌钳取物品等，以减少细菌的污染。
总之，无菌技术的操作原则旨在最大程度上防止外源性细菌的污染，确保实验结果的准确性和可靠性。
医学无菌操作知识点总结
医学无菌操作知识点总结一、无菌操作的基本原则1. 个人卫生：医务人员在进行无菌操作前，首先要保证自己的个人卫生，要求医务人员每天都要洗澡、换衣服，并保持指甲的清洁和整洁。
同时，医务人员还要注意口腔清洁，避免因为呼吸、唾液等导致微生物的传播。
2. 环境卫生：无菌操作需要在洁净的环境中进行，医院的手术室、无菌室等地方都要经过特殊的清洁和消毒处理，以确保工作环境的无菌。
3. 操作器械的无菌处理：在无菌操作中，医务人员需要使用一些无菌包装的器械，这些器械要经过专门的消毒、灭菌处理，以保证其无菌状态。
4. 良好的手部卫生：医务人员在进行无菌操作前，需要进行充分的手部消毒，这是保证无菌操作成功的关键环节之一，正确的手部消毒能有效地杀灭手部表面的细菌和病毒，从而保证操作的无菌性。
5. 严格的术前准备：在无菌操作前，医务人员需要对患者进行全面的检查和评估，确保患者的身体状态能够满足手术的需要，在术前准备的过程中，医务人员还需要使用无菌包装的器械和无菌覆盖物对术前准备进行无菌处理。
二、无菌操作的操作流程1. 手部消毒：在进行无菌操作前，医务人员需要进行必要的手部消毒，手部消毒是无菌操作的第一步，医务人员需要使用含有75%酒精的手消毒剂进行手部消毒，消毒时间不少于2分钟，确保手部表面的细菌和病毒得到彻底的杀灭。
2. 穿戴手术衣和手术帽：在进行无菌操作时，医务人员需要穿戴特制的手术衣和手术帽，这样可以有效地阻隔空气中的微生物对手术区域的侵害。
3. 洗手：在进行无菌操作之前，医务人员需要进行必要的洗手，洗手的方法和步骤要符合洗手的操作规范，确保洗手的效果。
4. 准备无菌器械：在准备无菌器械的过程中，医务人员需要注意器械的包装是否完好，是否过期，同时还要检查器械的外观是否出现损坏等情况，以确保器械的无菌状态。
5. 确定手术部位：在进行无菌操作时，医务人员需要清楚地确定手术部位，避免误操作和交叉感染的发生。
6. 封闭手术区域：在进行无菌操作时，医务人员需要使用专门的无菌覆盖物对手术区域进行封闭，避免外界的微生物对手术区域的侵害和污染。
无菌技术操作的原则(课件PPT)
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20XX-08-29
目录
• 保持环境清洁，操作区域宽敞并定期消毒 • 工作人员进行无菌操作前 • 物品管理有序 • 明确无菌区与非无菌区 • 防止交叉感染
保持环境清洁，操作区域宽敞并定期消毒
• 操作前30min须停止扫地、更换床单等工作，减少走动，避免不必要的人群流 动，防止尘埃飞扬。
工作人员进行无菌操作前
• 着装符合无菌操作要求，衣帽整洁、洗手、戴口罩，口罩须盖住口鼻，最好用 一次性口罩，一般情况下，口罩应每4~8h更换一次，一经潮湿，细菌易于穿 透，应及时更换。必要时穿无菌衣，戴无菌手套。
物品管理有序
• (1)无菌物品必须与非无菌物品分开放置，且有明显标志。 • (2)无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中。 • (3)无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，无菌包应放在清洁、干燥、固定的地
方。按失效期先后顺序摆放。有效期为7~14天，过期或受潮，均应重新灭菌 。(4)取用无菌物品时应使用无菌持物钳。 • (5)无菌物品一经取出，虽未使用，也不得放回原处。 • (6)物品疑有或已被污染，即不可使用，应予更换并重新灭菌。
明确无菌区与非无菌区
• ①操作者身体应与无菌区保持一定距离； • ②取放无菌物品时，应面向无菌区； • ③手臂应保持在腰部或操作台面以上，手不可接触无菌物品，不可跨越无菌区
； • ④避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏； • ⑤未经消毒的物品不可触及无菌物品或跨越无菌区域。
防止交叉感染பைடு நூலகம்
• 一套无菌物品只供一位患者使用一次，防止交叉感染。
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无菌技术操作原则
无菌技术操作原则无菌技术在医疗、制药、实验室等领域扮演着重要的角色，确保操作的无菌和无污染是关键。
本文将介绍无菌技术操作的原则，以保证操作的成功和安全。
一、无菌技术概述无菌技术是一种通过预防和控制微生物污染的方法，保持操作区域和物品的无菌状态。
在医疗领域，无菌技术用于手术操作、药品制备和伤口处理等。
在实验室和制药领域，无菌技术则主要应用于细胞培养、微生物实验和药物研发等领域。
二、准备工作在进行无菌技术操作之前，必须对操作区域和所需物品进行充分准备，以确保无菌状态的操作环境。
1. 操作环境准备操作区域应该是一个密封的无菌房间或无菌柜，旨在阻隔空气中的微生物。
无菌房间应具备过滤系统、紫外线灯等设备，以提供无菌环境。
2. 操作器材准备无菌操作器材，如无菌医用手套、口罩、帽子、无菌盖玻片、培养皿等，应在操作前进行高温高压灭菌处理，确保器材表面没有微生物。
3. 操作物品准备操作所需的物品，如培养基、培养液等，应购买质量可靠的无菌产品。
在实验室中，可使用无菌微量移液管和移液枪进行操作，确保样品无菌。
三、操作规范在进行无菌技术操作时，必须按照特定的操作规范，以防止微生物的污染。
1. 洗手和穿戴器材在进入无菌操作区域之前，操作人员必须进行充分的洗手，并戴上无菌手套、口罩和帽子。
手套应选用质量可靠的无菌手套，并确保手套没有破损。
2. 操作步骤操作人员应熟悉无菌技术操作的步骤，并按照操作规范进行操作。
在进行移液、接种等操作时，应注意避免产生小颗粒和飞溅，以防止微生物的传播。
3. 空气污染控制无菌操作区域的空气质量对于操作结果有着重要影响，因此应尽量避免产生气流和空气扬尘。
操作区域的门应尽量保持关闭状态，以防止外部微生物的进入。
四、质量控制与验证为确保操作的无菌性，必须对实施无菌技术操作的结果进行质量控制和验证。
1. 阴性对照在进行无菌培养和实验之前，应准备阴性对照，即将培养基或样本暴露在无菌环境下，并进行培养或接种。
无菌技术操作原则
无菌技术操作原则无菌技术是在实验室、医院和药品制造过程中常用的重要操作技术，用于保持和创建无菌环境，以防止细菌和其他微生物的污染。
无菌技术操作准确无误地履行至关重要，以确保实验结果的准确性和可重现性，以及保证药品的质量和安全。
本文将介绍无菌技术操作的原则，以帮助读者正确进行无菌操作。
1. 穿戴合适的个人防护装备在进行无菌技术操作之前，操作人员应穿戴适当的个人防护装备，包括实验服、手套、帽子和口罩。
实验服应为专用实验服，能覆盖全身，并具备阻隔微生物的功能。
手套应选择合适尺寸，并确保手套的完整性，以免微生物通过手套进入操作区域。
帽子和口罩则用于遮住头发和口鼻，防止微生物通过呼吸进入工作区域。
2. 准备无菌工作区域在进行无菌技术操作之前，应准备洁净的无菌工作区域。
无菌工作台是常用的无菌操作台，用于提供无菌环境。
操作人员应及时清洁工作台，并在每次操作前用紫外线灯照射工作台表面，消毒并杀死悬浮于空气中的微生物。
同时，还应准备好所需的试剂、培养基和器具，并确保它们都是无菌的。
3. 注意洗手和消毒洗手是进行无菌技术操作的重要步骤。
操作人员应在进入无菌工作区域之前彻底清洁双手，并使用消毒剂进行消毒。
洗手过程应包括适当的时间和正确的步骤，以确保双手的卫生。
此外，不仅在操作前，操作人员还应在每次操作后再次洗手和消毒。
4. 防止污染源在无菌技术操作中，要特别注意避免接触或污染操作区域以外的物品和表面。
在操作过程中，应尽量避免大范围移动和振动，以减少空气中微生物的扩散。
同时，还要确保操作区域内的器具和试剂都是无菌的，并且不与无菌区域外的物品接触，以防止交叉污染。
5. 细胞培养的无菌技术操作注意事项细胞培养是生物学研究中常用的技术之一，而无菌技术在细胞培养中尤为重要。
在进行细胞培养无菌操作时，应将培养皿和培养瓶预先消毒，并将细胞转移到预先处理过的培养容器中。
同时，应避免对培养皿和培养瓶的开启时间过长，以减少操作过程中的空气污染。
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无菌技术操作原则
无菌技术操作原则
在护理中，控制致病微生物，避免发生感染的最好办法是无菌技术。
护/士需要把临床护理中无菌技术的理论和实践运用于护理中，减少病人感染的发生，提高护理服务的质量。
无菌技术是指在执行医疗护理操作的过程中，防止一切医微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。
和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。
2.无菌物品经过物理或化学方法灭菌后，未被污染的物品称无菌物品。
3.无菌区域经过灭菌处理而未被污染的区域，称无菌区域。
4.非无菌物品或区域未经灭菌或经灭菌后被污染的物品或区域，称非无菌物品或区域。
1、环境要清洁。
进行无菌技术操作前半小时，须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，减少人员走动，以降低室内空气中的尘埃。
防止尘埃飞扬。
2、工作人员进行无菌操作
衣帽穿戴要整洁。
帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
3、物品管理
放于无菌包或无菌容器内，无菌物品一经使用后，必须再经无菌处理后方可使用，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。
4、无菌物品
无菌物品必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，有效期一周为宜，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。
无菌包在未被污染的情况下，可保存7-14天，过期应重新灭菌。
无菌物品一经使用或过期，潮湿应重新进行灭菌处理。
5、取无菌物
操作者身距无菌区20cm，取无菌物品时须用无菌持物钳（镊），不可触及无菌物品或跨越无菌区域，手臂应保持在腰部以上。
无菌物品取出后，不可过久暴露，若未使用，也不可放回无菌包或无菌容器内。
疑有污染，不得使用。
未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。
6、进行无菌操作时
如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。
7、一物一人，一套无菌物品，只能供一个病员使用，以免发生交叉感染。
8、任何情况下，不得用嘴吸取菌液
目的
取用、放置、保存无菌物品符合无菌操作原则，保证无菌物品和无菌区域不被污染。
防止病原微生物侵入或传播给他人。
评估
1.着装整洁，
洗手，戴口罩，更换圆帽。
2.操作环境：
操作区域是否整洁、宽敞、安全；操作台是否清洁、干燥、平坦。
3.无菌物品
无菌物品存放是否合理，是否在有效期内。
用品
治疗盘内置：
无菌持物钳浸泡于消毒液中、无菌治疗巾、无菌储槽、无菌液体、无菌纱布罐、无菌棉签、无菌手套包、治疗盘、2%碘酒、70%酒精、纸、笔、纱布、启瓶器、弯盘。
要点：
系统变成无菌；②在作业系统与外界的联系之间隔绝一切微生物穿过（如用火
开作业，防止不需要的微生物侵入作业系统
内容
1.检查无菌治疗巾的有效日期，解开系带并缠好，按顺序逐层打开。
2.用无菌持物钳夹取无菌治疗巾一块放入治疗盘内。
3.使用无菌持物钳时保持钳端向下，不可倒举向上，用后立即放回。
4.取放无菌持物钳时，钳端应闭合，不可触及容器液面以上部分。
5.未用完的无菌治疗巾，应按原折折好系带，注明开包日期与时间。
（口述：有效期为24小时）
6.找到治疗巾最外侧边缘，打开铺成半铺半盖。
7.上层半幅反折三折到对面，开口处向外，露出无菌区。
8.打开无菌储槽，用持物钳夹取一个弯盘，再夹取一块纱布放进弯盘内，放回持物钳。
9.将上层无菌巾盖好，边缘对齐，并将开口处向上反折两次，两侧边缘向下反折一次，注明铺盘日期与时间。
（口述：有效期为4小时）
10.用纱布擦去无菌液体上的尘土，仔细检查核对溶液后，撬去铝盖，两手拇指将瓶盖边缘向上翻起松动。
11.用无菌持物钳在无菌储槽内夹取无菌治疗碗，应托其底部，手不能触及其内侧及边缘放下。
食指和中指套住皮塞拉出，手不能触及瓶口及盖的内面。
12.手握瓶签，先倒出少许溶液冲洗瓶口（倒入弯盘内），再由原处将溶液倒入治疗碗内。
13.如有剩余液体，常规消毒瓶塞后翻下。
14.注明开瓶日期与时间。
（口述：有效期为24小时）
15.检查无菌手套外面的号码及有效日期，解开系带并打开无菌手套包。
16.检查手套放置的位置无误后，取滑石粉涂擦在两手掌和手背之间，剩余的不再放回手套包内。
17.一手掀起口袋开口处，另一手捏住手套翻折部分（手套内面），取出手套对准五指戴好。
18.未戴手套的手掀起另一开口处，用已戴好手套的手，插入另一手套的翻边内面（手套外面）对准五指戴好。
19.将手套的反折边套在工作服袖上。
（检查手套有无破损、漏洞，擦去手套上的滑石粉）
20.操作完毕，（口述：用清水洗净手套上的污物和血渍），脱去手套，第一只脱去外侧面，第二只脱去内侧面。
21.分类整理用物，洗手后放回保留物品。
22. 口述无菌操作的基本原则。
注意事项
1.使用无菌持物钳时保持钳端向下，不可倒举向上，用后立即放回。
取放无菌持物钳时，钳端应闭合，不可触及容器液面以上部分。
如用无菌持物钳取远物时，应连同镊子筒移至无菌物品旁使用。
2.不能在无菌容器上方翻转容器盖，防止污染容器内物品。
3.无菌物品一经取出，即使未用，也不可再放回。
4.打开无菌包内，手不能触及无菌巾的内侧面，不可跨越无菌区。
5.倒溶液时，勿使瓶口接触容器口边缘。
6.戴手套时不可强拉，最后将两手套反折面套在工作衣袖外面。
无菌物品的保管
1.无菌物品和非无菌物品应分别放置。
2.无菌物品必须存放那个在无菌容器或无菌包内，无菌包外要注明物品的名称、灭菌日期，物品按日期先后顺序放置。
3.定期检查无菌物品保存情况，无菌包在为污染的情况下，保存期一般以7天为宜，过期或包布受潮应重新灭菌。
无菌物品的管理应按医院内部规定进行。
所有无菌物品要标明灭菌日期与灭菌标记，和非无菌物品分开放置，无菌物品要放置在干燥清洁的屋子内，放置无菌物品的容器要定期消毒；各类无菌物品应有规定的存放地点，每天检查。
通常一块双层包布的无菌包在没污染的情况下可保持7d，用密闭的包装纸或者塑料袋可保持半年或者一年；存放无菌干棉球、棉签和盐水棉球等没有消毒液在内的容器，要每天灭菌。