高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素残留的研究综述_李红
鲜乳中抗生素残留量测定原理(一)
鲜乳中抗生素残留量测定原理(一)鲜乳中抗生素残留量测定引言鲜乳是我们日常饮食中重要的一部分，然而，为了保护牛群健康和提高产量，农民普遍使用抗生素来预防和治疗乳牛疾病。
尽管抗生素在牛体内被分解和排除，但仍有可能在牛奶中残留一定量的抗生素。
因此，针对鲜乳中抗生素残留量的测定显得尤为重要。
测定原理鲜乳中抗生素残留的测定可以采用多种方法，其中一种常用的方法是高效液相色谱（HPLC）法。
高效液相色谱（HPLC）法HPLC法运用液相对样品进行分离和测定，通过测定样品中特定化合物的浓度来确定抗生素的残留量。
具体步骤如下：1.样品预处理：首先，将鲜乳样品与适量的溶剂混合，使抗生素的分子从样品中转移到溶剂中。
这个步骤通常包括提取和净化。
2.样品注射：将预处理后的样品注入高效液相色谱仪中。
3.色谱柱分离：样品中的化合物在色谱柱中以不同的速率通过，分离出混合物中的目标化合物。
某些特定的色谱柱可对抗生素具有选择性。
4.检测器检测：使用特定的检测器（如紫外检测器）对分离出的目标化合物进行测定。
抗生素在特定波长下会吸收特定的光，因此可以通过检测样品对光的吸收来测定目标化合物的浓度。
5.数据分析：根据样品中目标化合物在色谱柱上的峰面积或峰高，结合标准曲线，计算出样品中抗生素的浓度。
抗生素残留量的标准和限制不同国家和地区对鲜乳中抗生素残留量有着不同的标准和限制。
这些标准和限制是为了保护消费者的健康，避免抗生素过量对人体造成潜在的风险。
通常，标准的抗生素残留限制应保持在安全的水平，最大限度地减少对人体健康的危害。
结论通过高效液相色谱法，我们能够准确测定鲜乳中抗生素的残留量。
这对于监测和控制鲜乳质量具有重要意义，有助于保护消费者的健康。
随着科学技术的不断发展，相信将来会有更先进的测定方法出现，为鲜乳中抗生素残留量的测定提供更好的解决方案。
我们期待着未来鲜乳产业的健康发展。
目前存在的问题与挑战尽管高效液相色谱法已经成为鲜乳中抗生素残留量测定的常用方法，但仍然存在一些问题和挑战需要解决。
高效液相色谱-质谱法测定生鲜乳中氯霉素的方法研究
高效液相色谱-质谱法测定生鲜乳中氯霉素的方法研究黄鑫;廖欢;陈灵;栾庆祥;周泽晓;章厉劼;杨强;金晓峰【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2024(52)4【摘要】建立高效液相色谱-串联质谱法测定生鲜乳中氯霉素残留的方法。
对GB 29688—2013《牛奶中氯霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法》中的测定方法进行优化。
量取生鲜乳适量,加氯霉素-D_(5)内标工作液,经乙腈萃取后,5000 r/min 离心,过OASIS Prime HLB柱,将所过溶液氮气吹干,水复溶,取下层水溶液层过0.22μm水系滤膜。
将C_(18)柱作为液相色谱柱,按V_((乙腈))∶V_((水))=60:40体积比等度洗脱。
结果表明,氯霉素在0.2~10.0μg/kg范围内有较好的准确度,相关系数均大于0.99,方法检测限0.05μg/kg,定量限都为0.2μg/kg,3个加标浓度(0.2、1.0、10.0μg/kg)的氯霉素的平均回收率为85.5%~116.0%,相对标准偏差为1.23%~8.16%。
试验结果完全符合国家标准检测要求,适用于生鲜乳中氯霉素定性定量快速检测。
【总页数】4页(P61-64)【作者】黄鑫;廖欢;陈灵;栾庆祥;周泽晓;章厉劼;杨强;金晓峰【作者单位】贵州省兽药饲料检测所【正文语种】中文【中图分类】TS252.7【相关文献】1.高效液相色谱-串联质谱法测定生鲜乳中三聚氰胺的含量2.超高效液相色谱-串联质谱法同时测定生鲜乳中7种β-内酰胺类抗生素残留3.超高效液相色谱—串联质谱法测定生鲜乳中6种农药的残留4.超高效液相色谱-质谱法同时测定水产品中硝基呋喃类代谢物、孔雀石绿及氯霉素残留量的方法验证5.高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸡肉中氯霉素类药物及其代谢物残留方法的建立因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定牛奶中的氯霉素残留
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０ ． ０ ０ ９ ｍ ｇ・ Ｌ ～。平 均回收率在 ９ ３ ． Ｏ ％ ～ ９ ７ ． ３ ％之 问 ， 相对标准偏差在 ３ ． ６ ７ ％～ ５ ． ２ ５ ％之间 （ ／ １ － ＝ ６ ） ， 该方法简 便、 准确， 适用于牛奶 中氯霉素 的检测 。 关键词 ： 牛奶 ； 氯霉素 ； 液相 色谱 ； 测定
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱是一种基于溶剂流动的液相色谱方法，具有灵敏度高、分离能力强等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过样品前处理，去除干扰物，然后使用适当的洗脱液将抗生素从固相萃取柱中洗脱出来，最后用高效液相色谱对抗生素进行分离和定量。
2.毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种基于电场作用下溶液中离子迁移速度的分析方法。
该方法具有高分离能力、快速分析速度等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品进行前处理，然后通过毛细管电泳仪器进行分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且样品准备过程相对简单。
3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种基于色谱柱分离原理的分析方法，通过适当的蒸发和衍生反应可以将抗生素样品转换为易于气相色谱分析的衍生化物。
该方法具有高度选择性、高灵敏度等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，通常需要进行样品前处理。
首先将牛奶样品中的脂肪物质去除，然后使用适当的溶剂将抗生素从样品中提取出来，并通过气相色谱进行分离和定量分析。
4.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体反应原理的免疫学方法。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先利用适当的蛋白质工程技术制备特异性抗生素抗体，然后将牛奶样品中的抗生素与抗体结合，通过酶标记的二抗或亲和素染色法对特异性抗体进行检测。
该方法具有灵敏度高、操作简单等特点。
5.高分辨质谱法（HRMS）：高分辨质谱法是一种基于质荷比检测的方法，具有高灵敏度、高分辨率等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过适当的前处理，然后通过质谱仪对抗生素进行定性和定量分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且可以准确测定其残留量。
总结起来，牛奶中抗生素残留的检测方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、酶联免疫吸附法和高分辨质谱法等。
这些方法具有不同的优点和适用范围，可以根据具体需求选择合适的方法进行检测。
高效液相色谱法检测牛奶中氯霉素残留
（上接第 294 页） 长 278 nm；柱温 30 ℃；进样量 10 μL。 2.2 液相色谱标准曲线
标准溶液系列：取一定量的氯霉素储备液，稀释成浓度 分别为 1、5、10、15、20、25、30 mg/L 的系列标准溶液，绘制标 准曲线，结果见图 2。
在 1~30 mg/L 范围内氯霉素标准曲线的回归方程为 Y= 0.202 7x+0.375 3，相关系数 R2=0.999 1。 2.3 方法回收率与精密度
按 1.4 方法配制牛奶试样，按 1.5 处理方法进行提取， 测定氯霉素含量，计算回收率，每个水平进行 3 次重复试 验，结果见表 1。样品平均回收率在 85.33%~97.20%，相对标 准偏差（RSD）为 5.18%~10.63%。 3 结论与讨论
氯霉素可以通过抑制细菌蛋白质合成而发挥抑菌作 用，对大多数革兰氏阳性和阴性菌有效，对革兰氏阳性菌作 用性较强。在畜牧业生产中，氯霉素常常被用于治疗动物各 种传染性疾病，特别是在治疗奶牛乳腺炎的过程中，使用频 率非常高。由于用药随意性大、用药后没有及时停止挤奶， 常常导致牛奶及奶制品中残留氯霉素。氯霉素对人体健康 有非常不利的影响，能够杀伤颗粒性白细胞，抑制红细胞的 成熟，容易引起再生障碍性贫血，损害视力，引起急性中毒 性表皮松懈症，使眼睑粘连及产生角膜瘢痕，对老年人、新 生儿、早产儿以及肝肾功能不全的病人影响更大。氯霉素的 应用已有近 50 年的历史，但由于上述毒副作用使氯霉素成 为第 1 种被禁止用于可食用动物的抗生素[1]。为了保 障 消 费 者的健康，扩大我国动物产品在国际市场上的销售，需要建 立牛奶中氯霉素残留量的测定方法，对市场上的牛奶产品 进行监测管理，预防氯霉素的污染。
关键词 高效液相色谱；氯霉素；牛奶；检测 中图分类号 S859.84 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）01-0294-01
猪肉和牛奶中氯霉素残留的高效液相色谱检测实验报告
猪肉和牛奶中氯霉素残留的高效液相色谱检测实验报告
实验目的:
本实验旨在通过高效液相色谱法检测猪肉和牛奶中氯霉素残留的含量。
实验器材:
1. 高效液相色谱仪(HPLC)及相应的色谱柱和检测器。
2. 液相色谱样品准备仪。
3. 氯霉素标准品。
实验步骤:
1. 准备样品: 取一定量的猪肉和牛奶样品，精确称量，并将其加入样品准备仪中。
2. 提取样品: 使用合适的提取液对样品进行提取，待提取液达到一定浓度后进行离心分离。
3. 过滤样品: 将分离后的提取液进行滤过，以去除杂质并获得纯净的提取液。
4. 准备标准曲线: 取氯霉素标准品系列浓度，分别进行色谱分析，得到各浓度下的峰面积值。
5. 测定样品: 将经过提取和过滤的样品注入HPLC，通过比对样品中峰面积值与标准曲线，可以计算出样品中氯霉素的残留含量。
实验结果:
通过HPLC的分析，得到了猪肉和牛奶样品中氯霉素的残留含量。
根据标准曲线进行计算。
讨论与结论:
通过实验结果可以得出猪肉和牛奶样品中氯霉素的残留含量。
如果残留超过国家标准限量，则表明样品不符合食品质量安全要求。
实验注意事项:
1. 在操作中要注意个人的安全，避免直接接触有毒的样品或溶液。
2. 严格按照实验步骤进行操作，避免污染或误操作导致结果的偏差。
3. 在实验过程中，注意仪器的正常运行和维护，确保结果的准确性和可靠性。
4. 样品的存储和保存要符合相应的要求，避免样品损坏或变质影响结果。
奶中氯霉素残留量的高效液相色谱方法研究
食品工业防褐变、保脆和消毒等多种功能于一体,只需一个单元操作———护色保脆,即可同时达到上述目的。
该护色保脆剂的配方为:亚硫酸钠0120%或焦亚硫酸钠0110%、柠檬酸012%、氯化钙011%、氯化钠014%。
防腐保鲜剂:该剂有两种配方,具有防腐保鲜和防褐变等功能。
一种供带汤汁产品使用,即汤汁配料,其配方为:柠檬酸012%、氯化钠014%、双乙酸钠016%或双乙酸钠012%+山梨酸钾012%、另一种供不带汤汁产品使用,其配方为:柠檬酸012%、氯化钠014%、双乙酸钠115%或山梨酸钾015%+双乙酸钠110%。
虽然在单因子试验中,抗坏血酸钠具有很好的防褐变效果,EDT A对褐变也有一定的抑制作用,但在复合试剂试验中却发现,加有抗坏血酸钠的样品较未加抗坏血酸钠的样品易于褐变,加有EDT A的样品细菌总数远高于未加EDT A的样品,使用焦磷酸钠和不使用焦磷酸钠的试样无明显差别。
故在复合试剂中不使用这三种试剂。
4结论4.1产品感官品质色泽洁白自然,基本保持了原藕的天然色泽,无漂白色;藕片厚薄均匀一致,为2～5mm;汤汁澄清透明,无肉眼可见外来杂质。
具有良好的清脆度;具有原藕的自然风味,无酸涩味及其他异味。
在0～5℃贮藏6个月后,产品仍色白无褐变、带汤汁产品汤汁澄清透明。
4.2卫生品质产品在0～5℃贮藏6个月后:细菌总数:带汤汁产品155个/g,不带汤汁产品167个/g;SO2残留(微量滴定法):带汤汁产品:22～26m g/ k g,不带汤汁产品:28～30m g/k g。
山梨酸残留(高效液相色谱):带汤汁产品:88～102m g/k g,不带汤汁产品:306～309m g/k g。
主要参考文献[1]潘思轶等.莲藕爽汁饮料护色方法及品味调配试验研究.食品科学,1995,(5):30～36.[2]张有林等.莲藕贮期褐变机理与防褐变技术研究.食品工业技术,2003,(1):87～89.[3]胡晓丹等.莲藕酶促褐变的研究.江苏食品与发酵, 1999,(2):1～4.[4]郁志芳等.鲜切莲藕酶促褐变底物的分析确定.食品科学,2002,(4):41～44.[5]陈移平等.水煮莲藕漂白护色工艺研究.食品工业科技,2003,(11):48～49.[6]严守雷等.水煮莲藕片研制工艺学探讨.保鲜与加工,2002,(3):12～14.食品检测摘要建立了对牛奶中氯霉素残留量进行检测的高效液相色谱-荧光测定方法的研究。
超高效液相色谱法-串联质谱法测定牛奶中的氯霉素残留
摘
要： 应用超 高效液相 色谱 一串联 质谱 法建立 了牛 奶 中的 氯霉素 的检 测方 法。样 品经 乙酸 乙酯提取后 ， 用正 已烷
除脂 ， Ｃ ８固相 萃取 小柱 富集纯化后 ， Ｃ ８反 相柱 为分析柱 ， 经 １ 以 １ 乙腈 一 ． ｍｍ ｌＬ乙酸铵溶 液为流 动相 ， ０５ ｏ ／ 采用 电喷 雾 负电离源（ Ｓ 一） 多反应监测模式（ Ｒ ， ＥＩ ， Ｓ Ｍ） 用内标法 定量检 测。该方 法提 高 了检 测灵敏性 和分析 结果的 可靠性 ，
能 够适 应 大规 模 样 品 的分 析 要 求。
关键词 ： 高效液相 色谱 一串联质谱 ； 超 氯霉素 ； 残留
中 图分 类号 ０ ４ ６６ 文献 标 识 码 Ａ 文 章 编 号 １０ ７ ３ （０ ２ ｌ ０７— ７ １ ２ ｌ ）９…１５ Ｏ ７ ２
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｌ ｒ ｍｐ ｅ ｉｏ ｓ ｕ ｓ ｉ ｉ ｙ ＵＩＬＣ —Ｍ ｓ Ｍ Ｓ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆ Ｃｈ ｏ ａ ｈ ｎ ｃ ｌＲｅ ｉ ｅ Ｍ ｌ ｂ ． ｄ ｎ ｋ ／
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动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定动物源性食品是人们日常饮食中重要的一部分，然而其中可能存在着一些潜在的危险因素，比如动物体内的残留药物。
氯霉素类药物是一类广泛使用的抗生素，用于治疗动物的疾病。
大量使用氯霉素类药物可能导致其在动物体内残留，并通过食品链进入人体，对人体健康造成潜在威胁。
对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定是非常重要的。
目前，国内外对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法有很多种，常用的方法有高效液相色谱法、气相色谱法、质谱联用技术等。
这些方法在检测灵敏度、准确性和可操作性等方面各有优势，但也存在一些局限性，例如部分方法需要昂贵的设备和专业的操作技能。
在选择合适的测定方法时需要根据具体的实验条件和需要进行综合考虑。
高效液相色谱法是一种目前应用较为广泛的氯霉素类药物残留测定方法。
该方法操作简便，准确度高，且可以同时测定多种氯霉素类药物的残留量。
其原理是利用高效液相色谱仪对样品中的氯霉素类药物进行分离和检测，通过比对标准曲线来计算出样品中的氯霉素类药物残留量。
但是该方法也存在一些局限性，比如需要使用高昂的仪器设备，操作技能要求较高等。
在选择合适的氯霉素类药物残留测定方法时，需要根据实际情况进行综合考虑。
对于一般的常规检测工作，可以选择高效液相色谱法或气相色谱法进行分析；对于对检测结果精度和灵敏度要求较高的情况，可以选择质谱联用技术进行分析。
在进行氯霉素类药物残留测定时，还需要严格按照标准操作程序，进行严格的质量控制和质量保证，确保检测结果的准确性和可靠性。
动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定是一项十分重要的工作。
尽管不同的测定方法各有优势和局限性，但在实际工作中需要根据具体情况选择合适的方法，并严格按照标准操作程序进行操作，以保证检测结果的准确性和可靠性。
只有这样，才能确保动物源性食品的安全性和健康性，保障人民群众的身体健康。
高效液相色谱_荧光检测法测定牛奶中氯霉素的残留量
2005年11月Nove mber 2005色谱C h inese J ou rna l of C h rom a tog raphyVo l .23N o.6577～580收稿日期:2005206213作者简介:潘莹宇,女,硕士研究生,E 2mail:yingyupan@.通讯联系人:许 茜,女,副教授,硕士生导师,主要从事色谱研究工作,E 2mail:xutiange@s ohu .com.高效液相色谱2荧光检测法测定牛奶中氯霉素的残留量潘莹宇, 许 茜, 康学军, 张建新(东南大学公共卫生学院营养与食品卫生学系,江苏南京210009)摘要:建立了对牛奶中氯霉素的残留量进行检测的高效液相色谱2荧光检测方法。
氯霉素还原后在温和条件下与荧光胺发生衍生化反应,采用十八烷基键合硅胶固定相,以乙腈/四氢呋喃/0102m o l/L 醋酸钠2醋酸缓冲液(pH 610)(体积比为16∶8∶76)为流动相,流速110mL /m in,柱温40℃,荧光检测激发波长为410nm ,发射波长为508nm 。
在上述实验条件下,氯霉素检测的线性范围为014～800μg /L (r 2=019999),检出限为012μg /L 。
当空白样品中氯霉素添加水平为2～40μg /L 时,该方法的回收率为6616%～9218%,相对标准偏差为415%～914%。
该方法适用于牛奶中氯霉素痕量残留的监测,具有干扰小、选择性好、灵敏度高等优点。
关键词:高效液相色谱2荧光检测法;柱前衍生化;荧光胺;氯霉素;残留;牛奶中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:100028713(2005)0620577204D e te rm in a t io n o f C h lo ram p h e n ico l R e s id u e s in M ilk b yR e ve rs e d 2P h a s e H igh P e rfo rm a n ce L iq u id C h rom a to g rap h y w ith F lu o re s ce n ce D e te c t io nPAN Yingyu,XU Q ian,K AN G Xue jun,ZHAN G J ianx in(D ep a r tm en t of N u tr ition a n d Food H ygien e,School of Pu blic H ea lth,Sou thea s t U n ivers ity,N a n jin g 210009,Ch in a )A b s t ra c t:A h igh p e rfo r m ance liqu id ch rom a tograp h ic m e thod w ith fluo rescence de tec tion fo r the de te r m ina tion of ch lo ram p hen ico l (CA P )res idues in m ilk w as deve lop ed.A lthough CA P itse lf is non 2fluo rescen t the a rom a tic n itro group of CA P cou ld be reduced to a rom a tic p ri m a ry am ino group and fluo rescam ine can be used as a se lec tive reagen t fo r p ri m a ry am ines.The re 2fo re,the CA P w as de riva tized w ith fluo rescam ine p rio r to in jec tion in th is p ro jec t .The H PLC m e thod w as p e rfo r m ed on a D iam ond C 18co lum n (250m m ×416m m i 1d 1,410μm )w ith the m ob ile p hase com p osed of sod ium ace ta te buffe r (0102m o l/L,pH 610)2ace ton itrile 2te trahyd ro 2fu ran (76∶16∶8,v /v /v ).The flow ra te of the m ob ile p hase w as se t a t 110m L /m in,and the co lum n w as m a in ta ined a t 40℃.A na ly tes w e re de tec ted by a fluo rescence de tec to r a t 410nm exc ita tion and 508nm em iss ion w ave leng th.The s tanda rd cu rve w as linea r in the range from014μg /L to 800μg /L.The li m it of de tec tion (LOD )w as 012μg /L,and the li m it of quan tita 2tion (LOQ )w as 014μg /L.O ve ra ll recove ries w e re be t w een 6616%and 9218%w ith re la tive s tanda rd dev ia tions be t w een 415%and 914%.The p rocedu re p rovides a rap id,re liab le and sen 2s itive m e thod fo r the de te r m ina tion of CA P in m ilk.Ke y w o rd s:h igh p e rfo r m ance liqu id ch rom a tograp hy 2fluo rescence de tec tion;p re 2co lum n de ri 2va tiza tion;fluo rescam ine;ch lo ram p hen ico l ;res idues;m ilk 氯霉素(ch lo ram p hen ico l,CA P )是一种较有效的抗生素,广泛用于动物的各种传染性疾病的治疗。
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河南畜牧兽医２００７年（第２８卷）第２期
综合版专论综述
专论综述
高效液相色谱法测定牛奶中
氯霉素残留的研究综述
李红１，张莹蕾２，李永军１，马伟华１
（１．河南省乳品工程技术研究中心，河南郑州４５０００８；２．河南三鹿花花牛乳业有限公司）
中图分类号：Ｓ８５９．８４文献标识码：Ｂ文章编号：１００４－５０９０（２００７）０３－００１１－０１
氯霉素抗菌谱较广，能抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，由于其价格低廉、抗菌性能好，是预防和治疗牛乳房炎等疾病的主要药物，但其残留对人体健康的危害不容忽视，它能够导致严重的再生障碍性贫血，并且其发生与使用剂量和频率无关。
因此，近年来美国和欧盟对动物食品中的氯霉素残留量都制定了严格的限制指标，残留量不得超过０．１μｇ／ｋｇ。
我国农业部已禁止使用该药，无论内销还是出口的畜产品，氯霉素残留都是必检项目。
到现在为止，氯霉素残留的检测已相继建立了气相色谱、液相色谱、薄层色谱、放射性分析、微生物法及免疫学检测等方法。
高效液相色谱法是一种快速有效的分离分析技术，它引入了气相色谱理论，在技术上采用高压泵、高效固定和高灵敏度检测器，实现了分离速度快、效率高和操作自动化。
高效液相色谱法测定牛奶中的氯霉素残留都要经过提取、层析柱净化、浓缩以及残留药物分离和检测。
该文就从这四个方面对高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素的残留进行概述。
１样品的提取与净化
１．１样品的提取
牛奶中含有大量蛋白质、脂肪、糖类、维生素、无机盐、水分等，这些样品基质的存在不但干扰待测物的检测，而且污染仪器和降低设备使用寿命，因此需要选择合理有效的提取方法。
为了从牛奶样品中提取氯霉素，首先要使蛋白质变性，破坏其胶体状态。
从牛奶中提取氯霉素使用最多的是乙酸乙酯和乙腈，乙酸乙酯既能有效提取氯霉素，又能减少牛奶中蛋白质等水溶性杂质被萃取到溶剂中。
乙腈能够有效除去牛奶中的蛋白质，但萃取效率没有乙酸乙酯高。
使用高氯酸溶液能有效地净化残留物，减少对氯霉素的干扰。
但高氯酸具有强腐蚀性及氧化性，会损害色谱柱，使柱效降低。
蒋定国等用含１％高氯酸的乙酸乙酯溶液提取氯霉素，提取液浓缩后，高氯酸溶液溶解，以正己烷去除脂溶性杂质，然后进行测定，其方法的平均回收率为８８．０％～９７．７％。
１．２提取液的净化
通常得到的提取液中氯霉素浓度很低，还含有许多脂肪等共萃物，这些物质在最终的溶液中存在，不仅会损害色谱仪器，还会降低柱效以及干扰光谱检测，影响色谱分离及检测的正常进行。
为了降低共萃物的干扰，通常需要对氯霉素提取液进行净化。
常用的净化方法有液－液分离法、固相萃取和免疫亲合色谱法。
应用正己烷或异辛烷除去乙酸乙酯提取液中的脂类物质。
彭莉等采用乙酸乙酯提取牛奶中残留的氯霉素，用正己烷－氯仿溶解残渣后以乙腈－磷酸氢
二铵作为流动相，平均回收率达９４．８％，变异系数小于１２．０％。
该方法灵敏度高、操作简便、检测结果准确可靠。
固相萃取多用Ｃ１８柱，回收率较高。
但用Ｃ１８净化后，再使用Ｃ１８柱进行液相色谱分析，容易造成某些干扰杂质和被测物不能完全分开，所以有人应用氧化铝柱进行净化。
同时，固相萃取也可直接用于牛奶中氯霉素残留的提取。
Ｓｏｒｅｎｓｅｎ省去溶剂萃取的步骤，应用固相萃取直接萃取牛奶中的氯霉素残留，然后应用氧化铝柱净化萃取液。
近年来应用免疫亲和净化提取液的方法越来越多。
１９６６年，Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ首次制备了抗氯霉素的抗体。
ＶａｎｄｅＷａｔｅｒ等报道了牛奶中氯霉素的免疫亲合色谱（ＩＡＣ）净化法，样品经离心、过滤和稀释后用ＩＡＣ柱净化，ＨＰＬＣ／ＵＶＤ测定，回收率为７０％～９９％。
牛奶样品的检测限最低可达２０ｎｇ／Ｌ。
由于ＩＡＣ的高度选择性方法检测主要决定于取样量，通过柱切系统，Ｈａａｇｓｍａ等进一步建立了牛奶中氯霉素的在线亲和色谱测定法，能直接分析液体样品或提取液。
Ｌｏｎｇ等采用基质固相分散技术（ＭＳＰＤ）净化牛奶中的氯霉素，将牛奶加到Ｃ１８填料的颗粒上，混匀后，把混合物填充到玻璃柱中进行净化，这种处理方法可能对避免柱子堵塞有用，但由于使用的Ｃ１８填料的量非常小，所用的样品的量受到了限制。
１．３样品的浓缩
经过提取和净化的待测物有时不能满足检测仪器的要求。
如浓度低于检测器的响应值，待测物的溶剂与液相色谱不兼容等，所以需要对待测物进行浓缩和富集以提高其浓度，常用的方法是减压蒸馏或充氮气浓缩。
２氯霉素的液相色谱分离及检测方法
非极性烷基键合相是目前应用最广泛的柱填料，其中十八烷基硅烷键合相在反相液相色谱中发挥着主要作用。
氯霉素结构中含有一个不游离的氨，为中等极性化合物，可用反相法进行分离。
采用的流动相主要是甲醇或乙腈与磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液或水。
氯霉素结构中有发色基团，具有紫外吸收，检测时使用紫外检测器，氯霉素的检测波长一般选择２７８ｎｍ。
此外，用液相色谱法测定氯霉素使用的定性手段还有二极管阵列检测器和质谱检测器。
应用紫外检测器和二级管阵列检测器操作简单，样品前处理过程简单，但灵敏度较低（１０μｇ／ｋｇ）。
随着现代检测水平的提高，对分析仪器也提出了更高的要求，采用ＬＣ／ＭＳ方法对氯霉素残留进行测定的报道也越来越多。
采用ＬＣ／ＭＳ联用的方法，既可以达到简化样品前处理过程又能达到检出限的目的。
参考文献：（略）
（收稿日期：２００６－１２－１１）
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