最新中药指纹图谱的研究进展

中药指纹图谱的研究进展药物分析学选论期末综述中药指纹图谱的研究进展姓名：学号：班级：中药指纹图谱的研究进展摘要：中药指纹图谱的质量控制是中药现代化的突破口和中药基础研究领域的热点，目前建立的方法主要有：①光谱法：紫外光谱法、红外光谱法、荧光光谱法等；②色谱法：薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等；③其他方法：x射线衍射法、核磁共振法、电化学法等。

关键词：中药指纹图谱、光谱法、色谱法Advances in the means research on fingerprint ofTraditional Chinese MedicineAbstract: Fingerprint of traditional Chinese medicine is a breakthrough in modern medicine and a hot area of basic research in traditional Chinese medicine field. the current established method: ①Spectroscopy: UV、IR、fluorescencespectrometry; ②Chromatography:TLC、LC、GC、CE；③Other means: XRD、NMR、Electrochemical.Key words: fingerprint of Traditional Chinese Medicine、Spectroscopy、Chromatography中药指纹图谱是指采用一定分析手段，对适当处理后中药材或中成药进行分析，得到标识该中药特性的共有峰的图谱。

它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，能基本反映中药全貌的一种综合的，可量化的鉴定手段。

使其质控指标由原有的对单一成分含量的测定上升为对整个中药内在品质，包括杂质的检测。

实现了对中药内在质量的综合评价和整体物质的全面控制，使中药质量达到稳定可控。

主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。

中药指纹图谱可从整体上分析中药的生物、理化特征，又具有一定的可量化参数，充分体现了中药整体性和模糊性的特点[1]。

因此，经过严格试验获得重现性良好的指纹图谱是中药现代化的突破口之一，也是其关键技术之一。

其能确保中医临床疗效的稳定，对中医药现代化和国际化具有及其重要的意义。

近年来，中药指纹图谱研究已成为我国中药基础研究领域的热点。

其研究水平和应用范围在不断提升和扩大，研究趋势已单指标向多指标综合发展，并且向多学科渗透。

随着现代色谱，光谱，电化学技术的飞速发展，已有越来越多的先进手段应用于中药质量标准分析中。

目前中药指纹图谱的建立方法主要有：①光谱法：紫外光谱法、红外光谱法、荧光光谱法等；②色谱法：薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等；③其他方法：x射线衍射法、核磁共振法、电化学法等。

其中，色谱法为主流方法，是目前研究中药化学指纹图谱优先考虑的方法。

本文结合这些技术和成就，综述了中药指纹图谱的方法研究进展。

1 色谱指纹图谱1.1 薄层色谱（TLC）指纹图谱薄层色谱是最早应用于中药分析的常规技术，具有快速、分析成本低、可靠、操作简单、适用范围广等特点。

高效薄层板进一步提高了样品的容纳量，样品中各成分的分离度，并使斑点小而圆，增强其重现性[2]。

但是TIC灵敏度较低。

雷敬卫等[3]在鉴别生熟地黄及考察熟地黄饮片质量的稳定性和一致性的实验中，建立了其薄层色谱指纹图谱。

研究发现薄层色谱方法操作简单，图谱特征明显，可比性强，是一种可以快速鉴别中药材真伪及考察药材质量稳定性的有效手段。

高晓霞等[4]采用TLC指纹图谱研究了何首乌药材，分别对6种色谱条件进行了比较分析，建立了何首乌中二苯乙烯苷类和蒽醌类成分的TLC指纹图谱，但无法鉴别何首乌中的磷脂类成分。

微乳薄层色谱(ME—TLC)是在传统TLC法的基础上，改用微乳液作为展开剂。

其具有良好的稳定性和增溶增敏的特点，可对不同极性、不同电荷的成分实现分离。

蔡力行等[5]采用ME—TLC，建立化橘红的胶束薄层色谱指纹图谱，确定了5个指纹峰，可作为化橘红质量控制和鉴定的依据。

1.2 液相色谱(LC)指纹图谱LC尤其是高效液相色谱(HPLC)是目前中药指纹图谱中最常用的，应用范围最广的方法，有对样品挥发度和热稳定性的限制小，兼高柱效、高选择性、灵敏度高、重复性好等优点，适合中药复杂体系的分析。

李菁等[6]用HPLC-ELSD测定10批次灵芝孢子油样品，标定共有峰13个，相似度较高，各色谱峰分离较好，成功建立灵芝孢子油的HPLC指纹图谱，为灵芝孢子油的定性鉴别及内在质量评价提供了科学依据。

王启帅等[7]研究了柴胡样品进行HPLC指纹图谱，利用相似度分析、聚类分析及主成分分析对图谱数据进行分析，:建立了北柴胡HPLC-ELSD指纹图谱的分析方法。

研究发现该指纹图谱分析方法稳定，可靠，具有较好的重复性，聚类分析及主成分分析可应用于柴胡指纹图谱数据信息的处理。

孙国祥等[8]以桂附地黄丸(Guifu DihuangWan,GFDHW)平行五波长(PFW)高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的均谱为基础,依据系统指纹定量法(SQFM)鉴定桂附地黄丸整体质量，建立一种评价多波长中药色谱指纹图谱的新方法-均谱法(MFM)。

MFM能最大限度保留指纹峰,实现化学指纹信息最大化,同时能有效改善指纹信号质量,是HPLC-DAD三维指纹图谱的简化代表,因此可作为综合定量鉴定中药质量的有效、可靠和简便方法。

Seger等[9]应用LC-DAD-MS/SPE-NMR联用技术鉴定南非钩麻中的脂苷异构体，鉴定出4个化合物，其中有1个新的产物。

1.3 气相色谱指纹图谱气相色谱具有分离效能高、分析速度快等优点，所得的色谱轮廓重现性好、分辨率较高，采用保留时间确定共有峰，缺少定性能力。

近年来陆续出现了一些实用性更强的新方法、新技术，如毛细管气相色谱、气相色谱保留指数谱、裂解气相色谱、顶空气相色谱、气相色谱一质谱。

GC-MS联用发挥了气相色谱的高分离效能和质谱的高定性能力，具有分离效能及灵敏度高的特点，适用于中药易挥发性成分的分析，是气相色谱指纹图谱中最常用的方法,但对高沸点物质的分析比较困难。

严云丽等[10]采用GC-MS方法对防风挥发油成分进行分析，共分离出69种化合物，揭示了4个不同产地防风挥发油有效成分及含量的差异，对防风的指纹图谱建立有一定的参考价值。

L.F.Hu等[11]对不同产地的广藿香建立了GC-MS指纹图谱．并鉴定了10个共有特征峰。

结果表明该方法能够鉴别广藿香及其伪品，评价不同来源广藿香的差异性，有效地控制广藿香的质量。

相淞华等[12]采用顶空气相色谱-质谱（HSGC-MS）联用技术对不同产地罗布麻叶的挥发性成分进行分析，测定其指纹图谱，确定共有指纹峰，并作模糊聚类分析和相似度评价，建立罗布麻叶挥发性成分顶空气相色谱-质谱(HSGC-MS)指纹图谱分析方法。

全二维气相色谱(GC×GC)方法是将分离机制不同的两支独立色谱柱以调制器串联，经第1支色谱柱分离的馏分将通过调制器聚焦后以脉冲方式进入第2支色谱柱进一步分离，因此比一维GC具有更好的分离能力。

武建芳等用全二维气相色谱/飞行时间质谱(GC×GC/TOFMS)研究莪术挥发油成分，且与传统的GC-MS技术相比较，结果GC仅分离出87个峰，而GC×GC分离出约500个峰;GC/MS鉴定出匹配度大于800的组分为46种，而GC×GC/TOFMS为227种。

结果表明，与传统的分析技术相比，GC×GC/TOFMS在中药挥发油成分分析领域有很大的优势。

1.4 毛细管电泳指纹图谱毛细管电泳法(CE)适合水溶性或醇溶性成分的分离分析，其具有分离效率高、分析速度快、试剂用量少和成本低等特点，是进行中药质量控制的绿色分析方法。

Yi Sun等[13]利用CE法对红花进行了分析，并建立了指纹图谱，为鉴别红花及其伪品提供了依据。

毛细管区带电泳指纹图谱在植物类中药中广泛应用。

孙国祥等[14]采用毛细管区带电泳法, 以电泳峰出现率100%计,确定金银花的共有指纹峰为18个。

并提出了指纹图谱宏观含量相似度R、投影含量相似度C和定量相似度P的概念，可从总体上评价药材化学组分的整体含量情况。

合格药材应具备以下两个条件:(1)代表化学成分分布相似性的定性相似度(S)≥0.90；(2)描述药材整体化学成分含量的定量相似度(R,C,P,Q)应在80%~120%。

以此二类相似度指标控制金银花的质量,建立了指纹图谱评价的又一新方法。

李喜凤等[15]研究并建立不同产地蒲公英药材CZE-DAD指纹图谱，标定15个共有峰, 10批药材的相似度为0.926-0.983。

毛细管区带电泳指纹图谱已应用于动物类中药。

雒翠霞等[16]采用毛细管区带电泳法(CZE)，以双定性双定量相似度法评价了10批不同产地斑蝥药材及斑蝥不同部位质量。

以尿苷峰为参照物峰,确定了10个共有峰,建立了斑蝥药材的数字化CEFP，获得了判别斑蝥药材质量的重要数字信息，为斑蝥药材质量控制提供了新方法。

2 波谱指纹图谱在中药指纹图谱及其质量控制的研究中，紫外一可见光谱[17, 18]、红外光谱[19]、荧光光谱[20, 21]等波谱学方法也发挥着重要的作用。

对于中药材的复杂体系，波谱指纹图谱体现各组分光谱的叠加，虽具有一定的特征性，但难以对各组分进行定性和定量分析。

因此，波谱学方法多用作色谱指纹图谱的辅助方法。

红外光谱在中药指纹图谱的应用较为广泛。

已有众多药材及部分中成药建立了IR指纹图谱，通过考察各色谱峰的共有峰率和变异峰率，实现质量控制。

李莹等[22] 建立不同种石斛药材红外指纹图谱的鉴别方法，为对其种的鉴定与品质评价提供新技术。

刘红等[23]借助红外光谱的指纹特性，以八种益智精油红外指纹图谱的共有峰率和变异峰率为指标，计算了样品相对于该标准品的共有峰率和变异峰率，并按照共有峰率、变异峰率的大小建立了不同的序列。

多维共有峰率和变异峰率双指标序列分析法可以对不同产地药材准确、精细且非常直观的鉴别，该方法可以准确地区别不同产地的益智。

陈惠清[24]研究了用红外指纹图谱鉴别丹参。

3其他方法的指纹图谱3.1 x射线衍射指纹图谱杨红玲等[25]采用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法，通过对5个射干中药材进行实验。

研究表明X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材射干的鉴定。

尹海波等[26]对老鹳草药材及其它7种易混品进行X射线衍射分析，获得了老鹳草药材及其它7种易混品不同的X射线衍射Fourier指纹图谱。