生物学实验室常用试剂配方1
生物实验室常用试剂的配制
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液，待用。在3毫升待测液中加入1mL10%氢氧化 钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，放入 无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。过滤 后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g苏丹 Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼酸，使成 为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸银，溶 解在100mL水中即成。
4.用于分离植物根尖细胞的试剂
(1)盐酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份浓盐酸，即 成盐酸乙醇溶液。密闭保存。
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里， 装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在 100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，颜色为无色至 蓝色。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲醛溶 液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的是 40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%甲醛
中学生物实验中常用试剂的配制及作用
中学生物实验中常用试剂的配制及作用徐以润（江苏省灌南高级中学江苏连云港222500）1.碘液配制：取2g碘化钾，溶解在5ml蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。
溶液在光亮处容易变成紫色，必须保存在暗色玻璃瓶里。
作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。
2.斐林试剂配制：斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家斐林（Hermann von Fehling，1812年--1885年）在1849年发明的。
斐林试剂斐林试剂A和斐林试剂B配制而成的。
斐林试剂A 是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液，斐林试剂B是硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL 的溶液。
临用时斐林试剂A与斐林试剂B等量混合。
作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，水浴加热，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中是否有还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
3.班氏尿糖定性试剂配制：173克柠檬酸钠和100克无水碳酸钠溶解于800毫升水中。
再取17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中，慢慢将此溶液加入上述溶液中，最后用水稀释到1升，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
作用：鉴定还原性糖，在沸水浴加热条件下与还原糖反应而生成砖红色的Cu2O沉淀，使用原理同斐林试剂，都是二价铜离子与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀，所不同的是班氏试剂可长期使用。
4.双缩脲试剂配制：双缩脲试剂（biuret reagent）是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO4)两种试剂组成。
双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液；双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
双缩脲试剂使用时，先向2mL蛋白质溶液加入2mL双缩脲试剂A，振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴双缩脲试剂B，振荡摇匀后观察现象。
生物学实验基本技术与方法生物学实验室常用仪器和试剂简介学时生物学实验室常用试剂配制方法
无色透明的动植物组织、细胞及细胞器必须经染色剂染色，才 能在显微镜下观察清楚。
常用染色剂：酸性染色剂和碱性染色剂。染料的划分依据在于 染料分子电离后的主要有色分子是阳离子还是阴离子，并非由染 料溶液的pH值决定。若染料分子电离后，有色离子为阳离子即为 碱性染料；若有色离子为阴离子即为酸性染料；而中性染料则是 由碱性染料和酸性染料混合后配制成的复合染料。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程 为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）
定性鉴定物质的试剂
➢ 斐林试剂--鉴定葡萄糖的试剂 甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4 溶液 注意：1、甲乙液分别保存；现用现配： 甲乙液混合后若放置
时间过久,，则OH-会和空气中的CO2 反应, 导致OH-浓度降低, 当PH <14 时,[Cu(OH)4]2-络阴离子会逐渐分解为Cu(OH)2蓝色沉 淀，不利于醛与Cu2+的接触，影响实验的显色反应。
生物实验室常用试剂的配制
叶覃 江苏师范大学 生物学国家级实验教学示范中心
一 检验酸碱性的试剂
二 定验酸碱性的试剂
➢ 酚酞试剂：0.1g酚酞，溶解在100ml 60-90%的乙醇
溶液里，棕色试剂瓶密封保存。 注意：碱性酚酞试剂呈红色。
➢ 溴甲酚紫指示剂：将0.1g溴甲酚溶于9.25ml的 0.02M
2019-9-21
定性鉴定物质的试剂
➢ 苏丹黑染液--鉴定脂肪的试剂
注意： 实验时需用少许50%的酒精洗去装片上的浮色, 适当加热
可促进反应。
2019-9-21
定性鉴定物质的试剂
➢ 碘液--鉴定淀粉的试剂
原理：淀粉为白色粉末状, 由10%-30% 直链淀粉和70% 90% 的支链淀粉组成。直链淀粉由分子内的氢键使链卷曲 成螺旋状, 加人碘液, 碘分子嵌人到螺旋结构的空隙中, 碘分 子与淀粉之间借助范得华力联系在一起,形成一种络合物,这 种络合物能够比较均匀吸收除蓝光以外的其它可见光( 波长 范围为4 0 0一7 50 n m ), 而使淀粉溶液呈现蓝色。
生物实验常用溶液的配制
常用溶液的配制贮存液配方solution Ingredients MW Dose Note 10M/L NaOH NaOH 40.00 4g 搅拌溶解T·H2O 10ml1M/L Tris·ClTris(HOCH2)3CNH2121.14 12.11g 微波炉加热溶解，冷却后浓盐酸调pH至8.0，加三蒸水定容至100ml浓盐酸约5ml T·H2O 80ml0.1M/L EDTA EDTA（C10H6N2O8）292.25 2.92g 微波炉加热溶解，冷却后10M/L NaOH调pH至8.0，加三蒸水定容至100mlT·H2O 80mlRNA酶A母液10mg/ml RNA酶A 100℃加热15分钟,使混有的DNA酶失活。
冷却后用1.5mleppendorf管分装成小份保存于-20℃10mmol/LTris·Cl(pH7.5),15mmol/L NaCl工作液配方solution Ingredients materials Dose Note溶液Ⅰ50mmol/L Glucose Glucose (C6H12O6•H2O)198.170.99g 搅拌溶解后定容至100ml，高压灭菌4℃保存25mmol/L Tris·Cl 1M/L Tris·Cl 2.5ml10mmol/L EDTA 0.1M/L EDTA 10ml T·H2O 50ml溶液Ⅱ1％SDS SDS 1g 分开常温保存，用时临配。
1ml溶液Ⅱ：1%SDS 980μl+10mol/L NaOH20μlT·H2O 100ml0.2mol/L NaOH溶液Ⅲ5 mol/L KAc CH3COOKMW:98.1460ml 定容至100ml, 并高压灭菌。
溶液终浓度：K+3mol/L,Acˉ5mol/L。
冰醋酸11.5mlT·H2O 28.5mlLB液体培养基(Luria-Bertani) 蛋白胨(Tryptone) 10 g 溶于800ml去离子水中NaOH调pH至7.5，加去离子水至总体积1升,高压下蒸气灭菌20分钟酵母提取物(Yeastextract)5 gNaCl 10 gLB固体培养基LB液体培养基100ml 高压灭菌后成凝胶状，用时微波炉加热至100℃以上溶解，加入5mg/mlAmpcillin 1ml（终浓度为50ug/ml），摇匀后倒入培养皿中，冷却凝固即可涂板琼脂粉 1.2g氨苄青霉素(Ampicillin, Amp)工作液Ampcillin（规格0.48g,80万U）1支5mg/ml贮存液（终浓度为50ug/ml）,-20℃保存备用三蒸水100ml溶菌酶溶液(10mg/ml) 溶菌酶溶液0.1g 分装成1ml/小份，保存于-20℃,每一小份一经使用后便予丢弃10mmol/LTris·Cl(pH8.0)10ml3mol/l NaAc (pH5.2) NaAc·3H2O 40.81g 冰醋酸调pH至5.2，加水定容至100ml，分装后高压灭菌,储存于4℃冰箱三蒸水50mlTE缓冲液10mmo/LTris·Cl，1M/LTris·Cl(pH8.0) 0.5ml 加水定容至50ml，高压灭菌后EP管分装备用1mmol/L EDTA 0.1M/LEDTA(pH8.0) 0.5mlT·H2O 49mlTBE 缓冲液(5×)Tris 54g 定容至1000ml硼酸27.5g，0.5M/LEDTA(pH8.0) 20m l上样缓冲液(6×)0.25% 溴酚蓝溴酚蓝0.25g 定容至100ml40% (w/v)蔗糖水溶液蔗糖40g三蒸水80ml0.7％琼脂糖凝胶琼脂糖粉0.14g 微波炉加热溶解。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全
试剂配制方法一、实验室常用储备液（1）0.5mol/L EDTA（乙二胺四乙酸）在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0（约用10mol/L NaOH 50ml），补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意：EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0，才会溶解。
（2）1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中，用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后，方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L，分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色，应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异，温度每升高1℃，PH值大约降低0.03个单位。
（3）10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中，磁力搅拌至完全溶解，用蒸馏水定容至1L，过滤除菌，室温贮存。
乙酸铵在热水中分解，含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
（4）甘油（10％，V/V）用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份，-20℃贮存。
（5） 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶，磁力搅拌数小时，以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中，于4℃避光保存。
注意：溴化乙啶是一种诱变剂，必须小心操作。
（6） 70％乙醇（C2H5OH）100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
（7） 50×葡萄糖Glucose（150ml储备液）将54g D-葡萄糖溶于超纯水，磁力搅拌至完全溶解，并将体积调至150ml，过滤除菌，室温贮存。
（8） 10mol/L氢氧化钠（NaOH）将400g NaOH颗粒，加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中，磁力搅拌至完全溶解。
实验一常用试剂配制
实验一 分子生物学实验 常用试剂配制
分子生物学实验室注意事项
• 规范使用仪器 • 有毒试剂使用和净 • 蓝色：1ml 黄色：200ul 白色：10um 带一次性PE手套 高压灭菌后使用
微量移液器的正确使用
• 1．设定取液值：转动移液器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可 提高设定取液量。顺时针方向转动旋钮，可降低取液量。在调整旋钮 时，不要用力过猛，并应注意使移液器显示的数值不应超过其可调范 围。 2．吸液： （1）选择吸头(Tip) 放在移液器套筒上，稍加压力使之与套筒之间无 空气间隙。 （2）把按钮压至第一停点（图A），垂直握持加样器，使吸头浸入液 面下3-5毫米处，然后缓慢平稳地松开按钮，吸入液体（图B）。 3．放液： （1）将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜，平稳地把按钮压到第 一停点（图C），再把按钮压到第二停点以排出剩余液体（图D）。 （2）压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过（图D）。松 开按钮（图E），按吸头弹射器除去吸头。
常用试剂配制
需配
0.25% 溴酚蓝 40% M/V 40%（M/V）蔗糖 4℃贮存
1mol/L CaCl2
54 g CaCl2•H2O溶于200mL纯水中，0.22um 滤器过滤除菌，分装每 小份10mL，-20℃贮存。用时稀释。
75% 乙醇 RNA酶 酶
1．取0.5g RNase A置于50ml塑料离心管中。 2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容50ml。 3．100℃煮沸15min,缓慢冷却至室温，小份分装（1ml一管）后， 置于－20℃保存。 实验书P79
生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法1．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL培养基中参加lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后参加10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A 液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序参加，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品，最后补足水到总量。
生物学实验室常用试剂的配制方法
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA 的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中，加0.5mL硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
0.1g苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加2.75mL浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋0.5g洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
生物学常用试剂配制
常用试剂储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。
避免光照。
室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。
包装必须密封，切勿受潮。
应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。
操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。
远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。
0.5M EDTA（PH 8.0）组分浓度: 0.5 mol/L EDTA（MW：372.24）配制量: 500ml配制方法:1．称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。
2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近8.0时，EDTA 方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。
4．高温高压灭菌后，室温保存半年。
5M NaCl组份浓度：5mol/L NaCl (MW：58.5)配制量：1L配制方法：1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。
2.用去离子水溶解并稀释至1L。
3.高温高压灭菌后，常温保存。
2.5M CaCl2组份浓度：2.5mol/L CaCl2 (MW：110.98)配制量：50ml配制方法:1.准确称取氯化钙g于50ml的conical tube中。
2.用去离子水溶解并稀释至500ml，用0.22μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。
3.贮存于4℃。
50% 甘油组分浓度：50%(V/V) glycerol配制量：100ml配制方法:1. 量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中：100% glycerol 50ml2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。
3.高温高压灭菌，4℃保存。
4.使用时，到超净台分装。
Amp-氨苄青霉素（钠盐）放置：置于4°C冰箱配方及配法：配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中)，溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，以1*的终浓度（200ug/ml）加入培养基。
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实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0) ■组份浓度 1 M Tris-HCl■配制量 1 L■配制方法 1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70 ml7.6 约60 ml8.0 约42 ml4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)10×TE Buffer (pH7.4，7.6，8.0) ■组份浓度 1.5 M Tris-HCl■配制量 1 L■配制方法 1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
■组份浓度 100 mM Tris-HCI，10 mM EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH 7.4,7.6,8.0）100 ml500 mM EDTA (pH 8.0) 20 m l2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3 M 醋酸钠(pH5.2)PBS Buffer 10 M 醋酸铵■组份浓度 3 M 醋酸钠■配制量 100 ml■配制方法 1. 称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100～200 ml烧杯中，加入约40 ml的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
■组份浓度 137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
■组份浓度 10 M 醋酸铵■配制量 100 ml■配制方法 1. 称量77.1 醋酸铵置于100～200 ml烧杯中，加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 使用0.22 μm滤器过滤除菌。
4. 密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
Tris-HCl平衡苯酚苯酚/氯仿/异戊醇(25 : 24 : 1) ■配制方法 1. 使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。
但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用，同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。
因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
2. 操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。
所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
3. 苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上，苯酚平衡操作方法如下：○1液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈结晶状态。
从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。
○2加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度0.1%。
该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。
○3加入等体积的1 M Tris-HCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
○4重复操作步骤○3。
○5加入等体积的0.1 M Tris-HCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
○6重复操作步骤○5，稍微残留部分上层水相。
○7使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。
○8将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
■配制方法 1. 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25 : 24 : 1）。
氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24 : 1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
10%（W/V）SDS2 N NaOH2.5 N HCl5 M NaCl20%（W/V）Glucose ■组份浓度 10%（W/V）SDS■配制量 100 ml■配制方法 1. 称量10 g高纯度的SDS置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml的去离子水，68℃加热溶解。
2. 滴加浓盐酸调节pH值至7.2。
3. 将溶液定容至100 ml后，室温保存。
■组份浓度 2 N NaOH■配制量 100 ml■配制方法 1. 量取80 ml去离子水置于100～200 ml塑料烧杯中（NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂）。
2. 称取8 g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液定容至100ml。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
■组份浓度 2.5 N HCl■配制量 100 ml■配制方法 1. 在78.4 ml的去离子水中加入21.6 ml的浓盐酸（11.6 N），均匀混合。
2. 室温保存。
■组份浓度 5 M NaCl■配制量 1 L■配制方法 1. 称取292.2 g NaCl置于1 L烧杯中，加入约800 ml的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1 L后，适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
■组份浓度 20%（W/V）Glucose■配制量 100 ml■配制方法 1. 称取20 g Glucose置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
Solution I (质粒提取用)Solution II (质粒提取用)Solution III (质粒提取用)0.5 M EDTA (pH8.0) ■组份浓度 25 mM Tris-HCl（pH8.0），10 mM EDTA，50 mM Glucose ■配制量 1 L■配制方法 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
1 M Tris-HCl（pH8.0） 25 ml0.5 M EDTA（pH8.0） 20 ml20% Glucose（1.11 M）45 mldH2O 910 ml2. 高温高压灭菌后，4℃保存。
3. 使用前每50 ml的Solution I中加入2 ml的RNase A（20 mg/ml）。
■组份浓度 200 mM NaOH，1%（W/V）SDS■配制量 500 ml■配制方法 1. 量取下列溶液，置于500 ml烧杯中。
10% SDS 50 ml2 N NaOH 50 ml2. 加灭菌水定容至500 ml，充分混匀。
3. 室温保存。
此溶液保存时间最好不要超过一个月。
注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。
■组份浓度 3 M KOAc，5 M CH3COOH■配制量 500 ml■配制方法 1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。
KOAc 147 gCH3COOH 57.5 ml2. 加入300 ml去离子水后搅拌溶解。
3. 加入去离子水将溶液定容至500 ml。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
■组份浓度 0.5 M EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。
3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH）。
注意：pH至8.0时，EDTA才能完成溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
1 M DTT 10 mM ATP ■组份浓度 1 M DTT■配制量 20 ml■配制方法 1. 称取3.09 g DTT，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加入20 ml的0.01 M NaOAc（pH5.2），溶解后使用0.22μm滤器过滤除菌。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
■组份浓度 10 mM ATP■配制量 20 ml■配制方法 1. 称取121 mg Na2ATP·3H2O，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的25 mM Tris-HCl（pH8.0），搅拌溶解。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。