用兔脑粉浸液复制弥散性血管内凝血（DIC）
家兔DIC实验报告
实验2 急性DIC实验时间：5月23日【实验目的】1、学习复制急性DIC动物模型的方法。
2、了解实验室诊断DIC的常用方法及其意义。
3、结合实验和血液学指标测定结果，联系理论知识加深理解DIC的病因及发生机制。
【实验对象】家兔1只，雌（未孕）雄均可。
体重～kg。
【药品和试剂】1%普鲁卡因、%枸椽酸钠液、2%兔脑粉浸出液（临用时配制）、饱和氯化钠液、生理盐水、1%鱼精蛋白液。
【实验器材】兔台、哺乳动物手术器械一套（包括手术刀、普通剪刀、眼科剪刀、止血钳）、电热恒温水浴箱、台式离心机、721分光光度计、秒表、刻度离心管（10ml）、试管（13×75mm、15×100mm）、刻度吸管（2ml、5ml）、试管架、微量定量移液器（10µl、50µl、500µl）、橡皮吸球、乳胶滴管、玻片、棉球、纱布、颈动脉插管（硅胶管）2根、动脉夹，注射器。
【实验方法】1、将家兔仰位固定兔台、颈部剪毛、皮下1%普鲁卡因局部浸润麻醉，作正中纵切口（约3~4cm左右），常规暴露一侧颈总动脉，结扎其远心端，近心端用动脉夹夹闭；在结扎线下方剪口插入硅胶管并固定，松夹放血7ml至盛有%枸椽酸钠液2ml的10ml刻度离心管中，立即混匀离心（3000rpm，5分钟），分离血浆，备作纤维蛋白原定量与3P试验。
再松动动脉夹放血2~3滴于洁净玻片上，作凝血时间测定。
2、复制DIC模型：用10ml注射器吸取2%兔脑粉浸液，按3ml/kg的量缓慢（以每分钟2ml的速度为宜）注入家兔耳缘静脉内，同时观察其反应，如出现呼吸急促、躁动不安，即停止注射，速行第二次采血（方法同1），如未出现反应可注射毕后采血。
重复上述各项指标测定。
4、整理并分析实验结果。
【附录】1、凝血时间测定（玻片法）：放血2~3滴于洁净玻片上，同时按动秒表，用清洁废针头挑拨血滴，见有明显血丝出现，迅即停表，记录时间。
2、纤维蛋白原含量测定（饱和盐水法）：取15×100mm 试管一支，置样本血浆，加入饱和氯化钠溶液，立即混匀，于37℃水浴中孵育3分钟取出，再混匀后以721分光光度计，520nm 滤光板比浊，读取光密度值；以生理盐水替代饱和氯化钠液作同样操作后为空白对照管调零，测出光密度，按下式计算；)/(10005.0dl mg 纤维蛋白原测定管光密度值=⨯ 3、3P 试验：取13×75mm 试管一支，置血浆，加入1%鱼精蛋白液，轻轻摇匀，于37℃水浴中15分钟后取出，于黑色背景下观察，如见絮状沉淀或胶冻状即为阳性，清澈则为阴性。
功能学实验家兔弥散性血管内凝血(DIC)
功能学实验家兔实验性弥散性血管内凝血实验报告一．实验目的应用静脉注射兔脑浸液方法，复制家兔实验性DIC。
通过实验和几项血液学指标的测定及结果分析，了解实验室诊断DIC 的常用方法。
并且联系理论知识加深理解DIC 的病因及发病机理。
二．实验动物未知性别家兔（实验室提供）一只。
三．实验过程1. 家兔于仰卧位固定，颈部剪毛，在颈部皮下注射局麻药1%普鲁卡因约5ml，行局部麻醉。
2. 用剪刀颈部切开皮肤，钝性分离皮下组织，暴露气管后往外侧拉开切口边缘的皮肤及下方的肌肉组织，找到颈动脉并用玻璃分针分离，行颈动脉插管。
3. 第一次采集血标本：预先向10ml离心管中注入0.5ml3.8％枸橼酸钠溶液。
再打开血管夹，从颈动脉插管放血4.5ml，立即反复颠倒混匀（切忌振荡混匀），待离心。
向动脉插管中回推生理盐水，夹好血管夹。
4. 复制DIC 模型：抽取2％兔脑浸出液10ml于注射器中，经耳缘静脉缓慢推注，注入速度为每分钟2ml以下。
同时密切观察家兔反应，如出现呼吸急促，烦动不安，当即停止注射，迅速进行第二次采血。
若注射完后家兔未挣扎，则在注射后计时2min，2min后进行第二次采血。
采血方式与第一次采血相同。
5. 将前后两次所得的抗凝血，经3000rpm离心5min，将上层血浆清液分别吸至两支清洁试管中，切忌吸入细胞成分，并作好标记备用。
其中一支试管吸入0.5ml血浆，另一只试管尽量吸取剩下的血浆。
6. 血浆鱼精蛋白副凝固试验（3P实验）：向吸取0.5ml血浆的两支试管中加入1%鱼精蛋白溶液50μl，轻轻摇匀后，在37℃水浴15min。
取出试管，在灯光下对黑色背景一边晃动试管一边观察，溶液清澈者为阴性，出现絮状沉淀或胶冻状物为阳性。
7. KPTT, PT, TT, FIB实验：剩余两支试管使用凝血仪测定KPTT, PT, TT和FIB，并记录数据。
四．实验药物及器材实验药物：2％兔脑浸出液（临用前配，并在37℃保存），1％普鲁卡因溶液，3.8％枸橼酸钠溶液。
机能实验设计
家兔弥散性血管内凝血（DIC）的功能代谢变化实验目的：建立DIC模型，观察DIC的功能代谢变化实验原理：由于某些致病因子的作用，凝血因子和血小板被激活，大量促凝物质入血，是凝血酶增加，进而微循环中形成广泛的微血栓。
大量微血栓的形成消耗了大量凝血因子和血小板，同时引起继发性纤维蛋白溶解功能增强，导致患者出现明显的出血、休克、器官功能障碍和溶血性贫血等临床表现。
也就是说其血液先呈高凝状态而后呈低凝，最后纤溶亢进，出血倾向，即家兔血液凝血时间由短变长。
兔脑粉化学名促凝血酶原激物，类白色粉末状，主要成份为组织凝血活酶，可启动外源性凝血系统而导致DICDIC的功能代谢变化包括：出血、器官功能障碍、休克、贫血实验对象：家兔实验器材：兔手术器械一套、兔手术台、气管插管、动脉导管、动脉夹、Medlab生物信号采集处理系统、三通开关、压力换能器、铁支架、有色丝线、干净玻片、电子称、秒表、20%氨基甲酸乙酯、1000u/ml 肝素生理盐水实验步骤：1.链接实验仪器装置将压力换能器固定在铁支架上，换能器的位置大致与心脏在同一水平。
将动脉导管经三通开关与压力换能器正中的数入接口相接，压力换能器侧管上的输入接口与另一三通开关连接。
压力换能器的输入信号插头与生物信号采集处理系统的信号放大器输入盒相连。
用注射器通过三通开关向压力换能器及动脉导管内注满肝素生理盐水，排尽气泡，然后关闭三通开关备用。
打开计算机启动生物信号采集处理系统，点击菜单“实验/实验项目”，按计算机提示逐步进入动脉血压记录的实验项目。
2.手术(1)取家兔两只，称重。
一只用来取正常器官作对照，另外一只用来做DIC模型。
(2)动物麻醉与固定：用20%氨基甲酸乙酯溶液以5ml/kg体重的剂量由耳缘静脉注入。
动物麻醉后，仰卧位固定于手术台上。
(3)气管插管：剪去颈部的毛，沿颈正中先作5-7cm的皮肤切口。
分离皮下组织及肌肉，暴露、分离气管。
在气管下方穿以丝线，于甲状软骨下方2-3cm处作倒“T”形切口，插入气管插管，以丝线结扎固定。
--医学课件弥散性血管内凝血(DIC)_1
注意事项
1．兔脑粉浸液极易招致兔猝死, 注射过程中，密切观察动 物呼吸，控制推注速度.注射前做好二次采血的准备,以免 措手不及而耽误取血。 2．纤维蛋白原含量检测时，一旦血浆与饱和盐水接触，应 即混匀，否则易致局部沉淀，影响测定。 3．作3P试验，应先加血浆，再加鱼精蛋白液，否则易致假 阳性。
兔脑粉浸液的制备：称取兔脑粉[实验前检测其活力，以凝 血酶原时间(PT)不超过12s为宜]400mg，加人生理盐水10m1， 充分搅匀后放入37℃（摄氏度）恒温水浴箱内孵育60min， 每隔15min搅拌一次,然后离心(1000转／min)5min，取上清 液过滤后供静脉注射用。
P试液配制：实验前称取兔脑粉200mg，加入5m1生理盐水， 充分混匀后放人37°C恒温水浴箱内孵育1h，在此过程中， 用玻璃棒搅拌3～4次，并颠倒混匀，然后离心(1000转／ min)5min,吸取上清液，再加入等量的0．025mol／L氯化钙 溶液，用前摇匀，作PT实验用
③重复2～3次，取平均值,家兔正常值约为30sec。 ⑵凝血酶原时间(PT)测定
①取被检血浆0.1ห้องสมุดไป่ตู้l，置于小试管内放于37℃水浴中。
②加入P试液0.2ml，开动秒表，轻轻地侧动，直至液体停止 流动或出现粗颗粒，即为凝血酶原时间.
③重复3次，取平均值,家兔正常值为6～8sec。
⑶凝血酶时间(TT)测定
思考题
1．本实验是否复制了急性DIC？有何根据？ 2．本实验所致的DIC其主要发病机制是什么？ 3．急性DIC时本实验的观察指标为什么会改变？ 4．如果先给家兔注入肝素后再注射兔脑粉浸液，能否起到
⑸血清纤维蛋白(原)含量测定(饱和盐水法)
低分子肝素对家兔弥散性血管内凝血的预防和治疗作用
低分子肝素对家兔弥散性血管内凝血的预防和治疗作用赵淑杰;尹永杰;郑福鸿【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2012(032)007【摘要】目的探讨低分子肝素(LMWH)对家兔弥散性血管内凝血(DIC)的预防和治疗作用,从而为LMWH用于DIC临床治疗提供实验依据.方法利用4％兔脑粉浸液(3 ml/kg)静脉注射制造家兔DIC模型,将20只建模家兔随机分为对照组和LMWH治疗组,比较两组家兔凝血功能、抗凝功能、纤溶功能相关指标,比较两组动物一般状态及肾脏光镜下的病理改变.结果两组家兔PLT及D-二聚体相对增加百分比(△DD％)差异无显著性(P＞0.05)；两组FIB含量在初始阶段都有下降,但6h 后LMWH治疗组家兔FIB接近给药前水平,明显高于对照组(P＜0.05)；与对照组相比,LMWH治疗组家兔各时间段APTT延长(P＜0.05).LMWH治疗组家兔肾脏标本中无明显微血栓形成.结论 LMWH可改善DIC动物的一般状态,抗凝效果确切,能抑制纤维蛋白原活化、预防微血栓形成,对DIC有良好的预防和治疗作用.【总页数】2页(P1435-1436)【作者】赵淑杰;尹永杰;郑福鸿【作者单位】吉林大学第二医院ICU科,吉林长春130041;吉林大学第二医院ICU 科,吉林长春130041;吉林大学第二医院ICU科,吉林长春130041【正文语种】中文【中图分类】R554.8【相关文献】1.脓毒症早期应用低分子肝素预防弥散性血管内凝血的研究 [J], 刘琴2.血必净注射液联合低分子肝素对创伤性弥散性血管内凝血的临床疗效与安全性研究 [J], 钟斐; 万健; 杨瑞霞; 宋熙; 张黔; 孙杰; 诸海军; 陈嵩; 樊聪慧3.低分子肝素抗凝治疗脓毒症合并弥散性血管内凝血或凝血病的疗效分析 [J], 王海军;邢学忠;曲世宁;黄初林;王浩;袁振南;张昊;杨全会4.尿激酶、低分子肝素对脓毒症弥散性血管内凝血大鼠模型的影响研究 [J], 尤金枝;于勇;王捷虹;高麦仓;王瑞哲;任耀龙;王晨曦;王博;梁嘉斌;刘旺5.低分子肝素联合血必净注射液治疗创伤性弥散性血管内凝血疗效及安全性分析[J], 吴辉;王满琴;章柏平;郭剑因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
DIC的造病和实验室检测
【附录】
1. 血小板计数（BPC）
将试管内已稀释血液滴到计数板上静置10min， 用高倍镜计数。准确数出计数板中央l大方格的血小板数，乘以2000就是 每立方毫米的血小板数。
3．静脉推注兔脑匀浆的速度快慢是实验成败的关键，故密 切注意动物的反应。
4. 兔脑匀浆和P试液用之前必须充分混匀。
4. 作3P试验，应先加血浆，再加鱼精蛋白液，否则易致假 阳性。
5. 纤维蛋白原含量检测时，一旦血浆与饱和盐水接触，应 即混匀，否则易致局部沉淀，影响测定。
【思考题】
1．静脉注入兔脑浸液后为何能复制出家兔DIC模型？ 试述其发生机制。
【实验步骤】
1.称重、麻醉和固定家兔 称重：kg 麻醉：全麻：戊巴比妥钠 ３ml/kg 局麻：1%普鲁卡因 颈部 2ml 固定： 手术：颈前正中切口4-5cm。分离家兔一侧颈总动脉，动脉
插管，备放血用。
2.取肝素抗凝管和枸橼酸钠抗凝管各3个，分别做好标记。
3. 正常血标本各项指标的的制备
最先流出的数 滴血应弃去
一般状态
表2-3-2
项目 BPC PT(sec) 3P试验 Fbg量
DIC实验指标的测定记录
注射前 注射后（立即）
注射后（30/45min）
血小板计数
家兔正常值为（3～6）×105／mm3
10倍镜下 40倍镜下
凝血酶原时间测定（PT）
TF+ Ca2+ + 被检血浆，使凝血酶原变为凝血酶，再进 一步促进纤维蛋白形成。
分期：
1.高凝期：凝血酶含量升高，大量微血栓形成。 2.消耗性低凝期：凝血因子和血小板大量消耗，继发性纤
家兔dic实验报告
家兔dic实验报告篇一：功能学实验家兔弥散性血管内凝血功能学实验家兔实验性弥散性血管内凝血实验报告一．实验目的应用静脉注射兔脑浸液方法，复制家兔实验性 DIC。
通过实验和几项血液学指标的测定及结果分析，了解实验室诊断 DIC 的常用方法。
并且联系理论知识加深理解 DIC 的病因及发病机理。
二．实验动物未知性别家兔（实验室提供）一只。
三．实验过程1.家兔于仰卧位固定，颈部剪毛，在颈部皮下注射局麻药1%普鲁卡因约5ml，行局部麻醉。
2. 用剪刀颈部切开皮肤，钝性分离皮下组织，暴露气管后往外侧拉开切口边缘的皮肤及下方的肌肉组织，找到颈动脉并用玻璃分针分离，行颈动脉插管。
3. 第一次采集血标本：预先向10ml 离心管中注入％枸橼酸钠溶液。
再打开血管夹，从颈动脉插管放血，立即反复颠倒混匀（切忌振荡混匀），待离心。
向动脉插管中回推生理盐水，夹好血管夹。
4. 复制 DIC 模型：抽取 2％兔脑浸出液10ml于注射器中，经耳缘静脉缓慢推注，注入速度为每分钟 2ml以下。
同时密切观察家兔反应，如出现呼吸急促，烦动不安，当即停止注射，迅速进行第二次采血。
若注射完后家兔未挣扎，则在注射后计时2min，2min后进行第二次采血。
采血方式与第一次采血相同。
5. 将前后两次所得的抗凝血，经3000rpm离心5min，将上层血浆清液分别吸至两支清洁试管中，切忌吸入细胞成分，并作好标记备用。
其中一支试管吸入血浆，另一只试管尽量吸取剩下的血浆。
6. 血浆鱼精蛋白副凝固试验（3P 实验）：向吸取血浆的两支试管中加入1%鱼精蛋白溶液50μl，轻轻摇匀后，在37℃水浴15min。
取出试管，在灯光下对黑色背景一边晃动试管一边观察，溶液清澈者为阴性，出现絮状沉淀或胶冻状物为阳性。
7. KPTT, PT, TT, FIB实验：剩余两支试管使用凝血仪测定KPTT, PT, TT 和FIB，并记录数据。
四．实验药物及器材实验药物：2％兔脑浸出液（临用前配，并在37℃保存），1％普鲁卡因溶液，％枸橼酸钠溶液。
疾病学基础 实验九 DIC
实验九家兔凝血功能和急性DIC的观察一、实验目的1．学习建立急性实验性DIC动物模型的方法。
2．测定DIC模型凝血时间、血压，了解凝血功能。
二、实验内容1．家兔急性DIC模型的复制；2．家兔急性DIC的判定、观察。
三、实验准备【实验动物】成年家兔一只，重2～2.5kg。
【仪器设备】颈部手术器械一套、小试管、气管插管、5cm长塑料插管、5ml注射器，计时钟、BL-410生物信号采集系统、压力换能器、兔解剖台、干净玻片、干净纱布【药品试剂】3%戊巴比妥钠、0.1%肝素、兔脑粉溶液、生理盐水四、实验方法1．实验兔一只，称重。
用3%戊巴比妥钠按1.0ml/kg由耳缘静脉缓慢注入麻醉(每分钟不超过1毫升)。
麻醉后将动物仰卧固定于兔解剖台上，必要时将实验台底面灯开亮作保温用,剪去颈部手术视野的皮毛，常规暴露一侧颈总动脉，在靠近远心端处用眼科剪剪一个“V”字形的切口，将充满生理盐水的动脉插管插入颈总动脉内连接压力换能器，并牢固结扎，备用。
2．连接装置放开动脉夹，降压力换能器来连接到BL-420生物信号采集系统的通道1，设定输入信号为“血压”。
3．模型复制耳缘静脉缓慢注入兔脑粉溶液2ml，复制DIC模型。
4．测定凝血时间在注入兔脑粉溶液前5min，注入兔脑粉后5 min、15min、30min及45min测凝血时间。
方法为：在三通管处用注射器吸取适量血液放于载玻片上，血滴直径约5cm，同时开始计时。
每隔10s用大头针朝一个方向挑拨载玻片上的血滴，待有血丝出现时停止时间，记录凝血时间。
注意吸取血液后推入生理盐水避免血液凝固于插管内。
5．观察血压的变化。
五、注意事项1．本实验中,兔脑粉溶液的制备及注射速度对实验成败影响很大。
在注入兔脑粉浸液的过程中，密切观察动物的呼吸情况，必要时酌情调整注射速度。
2．动物麻醉深浅要适度。
过深会严重抑制呼吸；过浅时动物疼痛挣扎，影响观察结果。
六、观察结果DIC时凝血时间及血压结果给药前5 min给药后5min 15min 30min 45min凝血时间血压(mmHg)七、分析讨论1．观察DIC时凝血时间的变化，并分析这些变化的原因和急性DIC的发病机制。
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用兔脑粉浸液复制弥散性血管内凝血（DIC）
李秀华;张兆龙
【期刊名称】《内蒙古医学杂志》
【年(卷),期】1997(029)004
【摘要】本文用兔脑粉浸液化耳静脉注入家兔体现人，经６０只家兔复制成ＤＩ
Ｃ模型。
注射兔脑粉浸液前后分别采血１次，每次采和的血样标本进行纤维蛋白原，白陶土血活酶时间、凝血酶原时间、血浆鱼精蛋白副凝试验，四基指标的测定。
与对照组进行比较，分析所测得结果，说明弥散性血管内凝血的发生机理，以利於临床的诊断和治疗。
【总页数】2页(P204-205)
【作者】李秀华;张兆龙
【作者单位】内蒙古医学院;内蒙古医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R554.802
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1.炭纤维粉注入兔脑颞叶皮质内的脑电图观察 [J], 王金武;费克香
2.快速弥散性血管内凝血(DIC)/DIC前期(Pre-DIC)的实验检测 [J], 程大卫;张威;阮长耿
3.不同浓度兔脑粉致家兔DIC模型肠系膜微循环的变化 [J], 王芳芳;梁衍锋;邵帅;
马小茹;张东东;王淑秋
4.改良兔脑粉DIC模型的建立及血液指标的变化比较 [J], 邱家祥;米克热木·沙衣
布扎提;徐鸣;王贤
5.弥散性血管内凝血（DIC）和DIC前状态的诊断 [J], 王学文
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