精原干细胞研究进展
精原干细胞移植技术研究进展
精原干细胞移植技术研究进展精子发生是男性生殖细胞增殖、分化的过程，始于青春期并维持终生。
精原细胞尤其是精原干细胞是持续维持精子发生的关键因素。
个体内可因缺乏精原干细胞或放疗、化疗而导致生精细胞发育障碍或产生无功能性精子等原因引起不育。
新近发展的精原干细胞移植技术为研究精子发生机理提供了新的途径。
本文简要综述这项技术的发展过程、主要方法以及最新进展和应用前景。
1 精原干细胞移植技术分类及发展过程精原干细胞同源移植技术包括自体移植和同种异体移植。
这项技术始于1994年Brinster等[1]将可育小鼠的精原干细胞注射到不育小鼠的曲细精管使受体鼠产生了具有受精能力的精子并产出了正常后代，这是精原干细胞移植的首次重要突破。
Honaramooz等[2]在实验中，将猪的生殖细胞移入自身对侧的睾丸（自体移植）和无关另外一头猪的睾丸中（同种异体移植），结果两者都未对供者的生殖细胞发生明显免疫应答，但植入猪睾丸中的小鼠生殖细胞却很快被清除，故他们认为免疫耐受现象只限于同源移植。
1996年Clonthier等[3]将大鼠睾丸细胞显微注射到无免疫应答的重度综合免疫缺陷(severe-combined immunodeficient mice，SCID)的裸小鼠的睾丸中，睾丸干细胞会继续发育，并产生带有供体细胞种属的精子发生，取得了跨物种产生精子的重大突破。
1999年Ogawa等[4]将小鼠的睾丸细胞移植到大鼠的睾丸中获得成功。
Sofikitis[5]等认为人类睾丸细胞移入小鼠或大鼠可使25%的受体产生精子，这似乎表明灵长类生殖细胞或多或少比其它非啮齿类、非灵长类种属与啮齿类动物生精小管的微环境更相容。
Napano等[6]发现人的精原干细胞能在小鼠睾丸中至少可以存活六个月，且在移植后第一个月能保持增殖但不能分化。
这种现象0gawa等认为可能是由于小鼠内源性的支持细胞缺乏足够的能力来支持系统发育距离较远的物种。
但用睾丸组织块异位移植可部分解决上述问题，2002年Honaramooz等将新生小鼠、猪或羊的睾丸组织块（0.5-1mm3）移植到阉割的裸鼠的背部皮下，结果60% 以上的移植物存活，而且体积增大，并最终产生成熟的精子。
精子发生与生命科学的研究现状
精子发生与生命科学的研究现状精子是人类繁衍后代的必要物质，也是生命科学中一个备受研究的领域。
近年来，关于精子发生的研究已经取得了很多重要的成果，包括注意力、营养、基因等多个方面。
本文将就精子发生的相关问题进行探讨。
一. 精子基本结构与形成精子是男性体内的一种特殊细胞，其基本结构为头部、颈部和尾巴三个部分。
头部主要负责精子的进入，颈部则是连接头部和尾巴的部分，尾巴则有着重要的运动功能。
据研究发现，精子的形成是需要经过一个漫长的过程的，这个过程被称为精子发生。
从精子的发生来看，精子是由精原细胞经过不同的发生分化过程生成的。
在分化的过程中，精原细胞会逐渐经历减数分裂，使得其倍体数目减半，形成单倍体的精子。
这个过程通常发生在人的精索中，整个周期大约需要两个月，最终生成的精子会从睾丸中被释放出来。
二. 精子的生命能力精子在体内的生存时间较短，大概只有几天的时间。
但是，它们非常具有生命力，由于其运动能力相当强，可以游泳到女性的卵子所在的位置，进行受精，从而促成新生命的到来。
除此之外，精子还具有自身调节能力。
研究发现，男性的精液中会含有一些维生素和微量元素，这些物质会调节精子的数量和质量。
因此，男性保持良好的身体状况和健康饮食可以提高精子的生命力和数量。
三. 精子的营养需求跟其他细胞一样，精子需要吸收营养来保持其自身的生命活动。
研究发现，精子的运动需要消耗大量的能量，因此精液中的葡萄糖浓度就非常重要。
同时，前列腺液中还会含有一些对精子运动有益的物质，如锌、镁等。
此外，研究者也发现，营养素的供给和缺乏会影响精子的形态和数量。
因此，男性应该保持均衡的膳食，并注重摄入丰富的蛋白质、维生素和矿物质等。
四. 精子的基因调节机制精子不仅是生殖细胞，也承载了父亲基因遗传信息。
近年来，研究者对精子的基因调节机制进行了深入的探讨。
研究发现，不同阶段的精子会表达不同的基因，且这些基因的表达方式是精确而可控的。
这个过程主要涉及到染色体上的一些表观遗传修饰（如DNA甲基化、组蛋白修饰等）和非编码RNA的调节。
精原干细胞研究进展
精原干细胞研究进展精原干细胞是精子形成的前体细胞，具有自我增殖和多向分化潜能。
本文对精原干细胞的微环境、体外培养和冻存的研究现状进行综述。
标签：精原干细胞；微环境；体外培养中图分类号R321.2 文献标识码 B 文章编号1674-6805(2012)11-0148-02精原干细胞(spermatogonial stem cells，SSCs)是位于睾丸曲细精管生精上皮基膜上的一群成体干细胞，具有高度自我增殖和多向分化潜能。
SSCs的终生扩增性和永生性是产生雄性生殖细胞的保证。
SSCs通过有序而严格调控的细胞增殖和分化，使精子发生的过程可以持续男性的一生，产生大量的精子。
现对近年来精原干细胞在增殖和冻存方面的研究成果做简要概述。
1 精原干细胞的微环境SSCs位于生精上皮基底部，是相对数量极少的一类细胞，据估计仅占睾丸精原细胞的0.03%。
如同小肠隐窝存在很多干细胞，SSCs既包括未分化的干细胞，也包括祖细胞，这两类细胞都在成年男性体内保持生殖能力。
有证据证明，根据被研究细胞的背景，SSCs的祖细胞具有与未分化SSCs相同的功能。
研究显示，SSCs龛境的结构和分子特征首先限制龛境内的SSCs[1]。
Sertoli细胞、基膜、小管周的肌样细胞构成睾丸SSCs龛框架或龛骨架，而这些框架或骨架围绕的空间形成的微环境称为龛境。
SSCs龛境简单定义为存在SSCs的曲细精管区域，在男性的一生中起支持SSCs增殖和自我更新的作用。
与其他干细胞类似，位于龛境中的SSCs可以维持其可塑性。
一旦离开龛境，SSCs 就会失去自我更新的能力，并且开始发生分化，最终形成成熟精子[2]。
曲细精管中，精原细胞的增殖、自我更新和分化说明基膜室是真正的SSCs龛境的分界区域。
基底膜的分子标志为鉴定和富集SSCs提供了基础。
曲细精管及其周围的间质组织由各种不同的细胞组成，为精子发生提供各种激素、生长因子和细胞因子。
合成和分泌的上述各种因子调节龛境SSCs的自我更新和增殖，离开龛境的SSCs会发生分化。
精原干细胞研究进展
精原干细胞研究进展宋瑞高;姚晓磊;石磊【摘要】Spermatogonial stem cells are oocytes of male mamals germ cells which not only can maintain the number of themselves but also can differentiate to spermatocyte. Spermatogonial stem cells are also closely related to the genetic background of the next male generation individuals. Therefore, the study of spermatogonial stem cells in the field of cell biology,medicine and transgene has broad application prospects. In this review,biological characteristics,isolation,purification,cultivation and transplantation of spermatogonial stem cells were discussed.%精原干细胞（spermatogonial stem cells，SSCs）是各种雄性动物生殖细胞的母细胞，是一群具有自我更新和分化潜能的细胞，并且在雄性个体中精原干细胞与下一代的遗传背景密切相关。
因此，精原干细胞在细胞生物学、医学、转基因等领域的研究有着广阔的应用前景。
文章根据国内外相关研究进展，对精原干细胞的生物学特性、分离纯化与培养、移植等作一概述。
【期刊名称】《中国草食动物科学》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P54-56,57)【关键词】精原干细胞;生物学特性;分离纯化;移植【作者】宋瑞高;姚晓磊;石磊【作者单位】山西农业大学动物科技学院，太谷 030801;山西农业大学动物科技学院，太谷 030801;山西农业大学动物科技学院，太谷 030801【正文语种】中文【中图分类】Q2哺乳动物雄性成体中的精子发生系统在雄性配子的产生和进化过程中起着基因传递的作用，这一系统的基础就是精原干细胞（spermatogonial stemcells，SSCs）。
精原干细胞研究进展
是异体移植Ｓ Ｓ Ｃ 等 技 术 中 ，分 离 纯 化Ｓ Ｓ Ｃ 都 极 为 重 要 。但 由于 生精 上 皮 内 细胞 的组分 类 别 较 复杂 ， 且
Ｓ Ｓ Ｃ 数量 极少 ， 因此分 离 、 鉴定Ｓ Ｓ Ｃ 一 直 较 为 困 难 。在
可 以从青 春 期一 直持续 到繁 殖 能力结 束 ． 在此 期 间 ， Ｓ Ｓ Ｃ 不 断地发 生增 殖与 分化 。一 般将 Ｓ Ｓ Ｃ 分 为Ａ、 Ｂ 两
型。 Ａ 型 细胞 核染 色质 细小 ， 核仁 常靠 近核 膜 ， 而Ｂ 型 细 胞 的核 仁 位 于 中 央 ，核 膜 内 附着 有 粗 大 的 异 染 色 质 。根 据 曲 细 精 管 基 膜 上 局 部 排 列 特 征 ， 又 可 将 Ａ型
臻
速 ・Ｒ ｅ ｖ ｉ ｅ ｗ Ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ｓ
２ ０ ｉ ３ 坪 凳４ 卷 第 ５期
精原干细胞研究进展
杨 炜 蓉 ， 汪 勇 ， 张 姣 姣 ， 孙 燕 ， 张 家骅
（ １ ． 西 南大 学动物 科技 学 院 ， 重 庆 市牧草 与草食 家畜重 点 实验 室， 重庆
Ｓ Ｓ Ｃ 分离 、 鉴 定 中需 利 用 Ｓ Ｓ Ｃ 表面标志 ， 但 到 目前 为
止 还 没 有 任何 一 种 分 子 可作 为Ｓ Ｓ Ｃ 标志 ． １ ０ ０ ％地 分 离纯化Ｓ Ｓ Ｃ．所 以 寻 找 Ｓ Ｓ Ｃ 特 异 性 抗 原 标 志 一 直 是
良好 时 ， 细胞透明 ， 颗粒 较 少 ， 核 不 明显 ， 除单 个 细 胞外 ． 常见 ２ 个 或 多个Ｓ Ｓ Ｃ ｔ 。
对 精 原 干 细胞 的 生 物 学特 性 、 功 能 调 控 因子 、 体外 培养 和移植 等作 一综 述。 关 键词 ： Ｓ Ｓ Ｃ； 生 物 学特 性 ； 调 控 因子 ； 体 外培 养 ； 移植 ； 大鼠
牛精原干细胞研究进展
牛精原干细胞研究进展王春伟;扶晓波;吕妍;赵军;郭秋萍;张卫艺;胡建宏【摘要】精原干细胞(SSCs)是雄性生殖系干细胞,位于睾丸曲细精管基底膜上,具有自我更新和定向分化的潜能,是自然状态下出生后动物体内在整个生命过程中进行自我更新并能将基因传递至子代的惟一成体干细胞.本文在阐述精原干细胞发生的基础上,通过分析犊牛精原干细胞分离纯化、培养鉴定、冷冻保存和诱导分化的现状,分析了牛精原干细胞研究领域目前存在的主要问题,展望了牛精原干细胞的应用前景,以期为精原干细胞的研究提供参考.【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2013(034)010【总页数】4页(P6-9)【关键词】牛;精原干细胞;研究进展;存在问题;发展前景【作者】王春伟;扶晓波;吕妍;赵军;郭秋萍;张卫艺;胡建宏【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】S811.6精子发生是雄性动物终身产生大量精子的一个过程，其特点是由二倍体生殖细胞(精原干细胞)的单向分化，通过减数分裂形成精母细胞，最后产生单倍体配子精子[1]。
精原干细胞(spermatogonial stem cells，SSCs)是哺乳动物出生后唯一能进行自我更新并将遗传信息传递给后代的具有像胚胎干细胞一样增殖和分化潜能的干细胞[2]。
精原干细胞的建立，不仅提供了一种新的工具来分析精子发生或干细胞的自我更新，同时也开辟了干细胞实际应用的新领域。
本文通过分析牛精原干细胞分离纯化、培养鉴定、冷冻保存和诱导分化的研究现状，指出目前存在的主要问题，并展望其应用前景，以期为精原干细胞的研究提供借鉴。
精原干细胞的研究进展
ｃｅｌｌｓ Ｔｈｉｓ
ｒｅｖｉｅｗ
ａｌｓｏ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｓ
ｃｏｎｔｒｏｌ ｆａｃｔｏｒｓ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ
Ｎａｔｌ Ｊ Ａｎｄｒｏｌ，２００３，９
（４）：２８８－２９１．２９５
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌ
ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ
ｎｅｕｒｏｔ扣ｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ，ＧＤＮＦ）
ｈｏｒｍｏｎｅ，
作用下加速进行。同时还发现ＧＤＮＦ浓度的一圭墨 调控子为卵泡刺激素（ｆｏｌｌｉｃｌｅ—ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ 通路自我调控生殖干细胞的增殖。 ２．２干细胞因子和集落刺激因子的调控作用 Ｄｉｒａｍｉ等…‘采用富含钾的培养基（ａ
ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ；Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ；Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
在哺乳动物成体中存在几套自我更新系统，包 括造血系统、精子发生系统、肠上皮和皮肤等，就物 种延续而言最重要的莫过于精子发生（ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎ— ｅｓｉｓ），、因为它承担着雄性配子的产生和进化所必需 的基因传递。青春期启动后，精子发生的过程持续 于整个雄性生命，其通过有序而又严格调控的细胞 增殖和分化步骤而产生大鼍的精子，这一系统的基 础便是精原干细胞（ｓｐｅｎｎａｔｏｇｏｎｉａｌ
・２８８・
第９卷第４期
２００３年７月
中华男科学
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｄｒｏｌｏｇｙ
ＶｏＪ．９
Ｎｏ．４
Ｊｔｔｌ．２００３
－综
述・
精原干细胞的研究进展
曾辛综述；徐斯凡审校
（江两医学院生理学教研室，江西南昌３３０００６）
精原干细胞研究进展
境 。Ｓ Ｃ 龛境 简单定义为存在 Ｓ Ｃ Ｓｓ Ｓ ｓ的曲细精管区域 ，在男性 的
一
生 中起支持 Ｓ Ｃ 增殖和 自我更新 的作用。与其他干细胞类似 ， Ｓｓ
位于龛境中的 Ｓ Ｃ 可以维持其可塑性。—旦离开龛境，Ｓ Ｃ 就会 Ｓｓ Ｓｓ 曲细精 管 中，精原 细胞 的增 殖、 自我 更新 和分化 说明基 膜 室是 真正 的 Ｓ Ｃ 龛境 的分界区域。基底膜 的分 子标志为鉴定和富集 Ｓｓ
ｃ ｍ ｉｅ ｕｉｎＪ．ｎ ｌ ｉａａ ｈ ｍ，２ ０ ，３ ９７ ８ ２ ９ — １ ２ ｏ ｂｎｄｅ ｔ ［ Ａ ａ ｏｎ ｌ ｅ ｌ ｏ ］ Ｂ Ｃ ０ ７ ８ （－ ）： ０ ７ ２０ ．
［］ Ｓ Ｈａｅ ． Ｐ ｉｉｓ ｎ ｂ ｏ ｆ ｆ ｎｔ ｈｏ ｔｇａ ｈ ．ｎ ｄ ８ Ｄ．． ｇ，ＴＭ． ｈｌｐ． ｄ ｏ ｋｏ ｉ ｉ Ｃ ｒｍａｏ ｒｐ ｙ２ ｄｅ ． ｌ Ｈａ Ａ ｙ
Ｓ ｒ ｌ细胞 、基 膜、小管周的肌样细 胞构成睾丸 Ｓ Ｃ 龛框 激 ，内部受到来 自特异性 基因表达 的调节 ［。 ｅｔ ｉ ｏ Ｓｓ ３ ｌ 架 或龛骨架 ，而这些框架 或骨架围绕的空 间形成的微环境称 为龛 ２ 精原干细胞的体外培养 睾丸活检所获得 的 Ｓ Ｃ 数量不够进 行移植 ，这使得体外大 Ｓｓ
参 考 文 献
［ Ｐ ｒｙ Ｗａ ｇＭｏｏｉ ｉ Ｃ ｒｍａｏｒｐ ｙａｄｉ ｄ ｒ ｐｌ ａ ｏｓＭ］ １ ｅｒ １ ］ Ｇ． ｎ ． ｎ ｌｈｃ ｈｏ ｔｇａｈ ｎ ｓ ｔ ｔ ＭｏｅｎＡ ｐｉ ｔ ｎ ［ ． ｃｉ
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---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------精原干细胞研究进展精原干细胞研究进展动物生殖生理学课程论文精原干细胞移植的研究进展【摘要】 :精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs) 是精子发生的起始细胞。
SSCs 移植是近年发展起来的一项技术，是将供体动物的 SSCs 移植到受体动物的睾丸内，使其在受体睾丸内迁移、定居、增殖并启动精子发生，产生有受精能力精子的过程。
该技术在雄性不育的治疗、精子发生机制的探讨、干细胞生物学研究及优质动物或转基因动物繁育等方面具有广阔的应用前景。
本文就 SSCs 移植技术、移植研究的发展和 SSCs 移植应用作一综述。
【关键词】 : 精原干细胞、移植、鉴别、分离、受体Progress on Spermatogonial Stem Cell Transplantation 【Abstract】 : Spermatogonial stem cells (spermatogonial stem cells, SSCs) are initiating cells of sperm production. SSCs transplantation is novel technique developed in recent years, in which the testicular cell suspension from donor animals is microinjected into seminiferous tubes at the surface of the host testis, and subsequently, the donor SSCs survive, migrate, proliferate, initiate the spermatogenesis and produce the sperms with normal fertilization ability in the host testis.1/ 19This technique provides a new opportunity for therapy of sterile male, study of spermatogenesis mechanism and production of transgenic animals. Here the advances in SSCs transplantation are reviewed. 【Keywords】 : Spermatogonial stem cells; transplant; Identification; separation; receptor 干细胞是一类具有自我更新能力和分化潜能的细胞，包括胚胎干细胞和成体干细胞。
精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs) 是一种成体干细胞，位于生精上皮基底部，是具有高度自我更新能力和多向分化潜能的细胞，是哺乳动物成体睾丸生精上皮中唯一可复制的多能二倍体细胞，能在体外分离纯化、培养、冻存，可进行同体或异体移植。
SSCs 移植是从可育供体将 SSCs 移植到不育受体睾丸中，使供体来源的精子发生在受体睾丸中恢复的过程。
其结果是供体基因型通过受体传给受体子代。
SSCs 移植有助于阐明雄性生殖干细胞和其在睾丸的生理功能，有助于开发出分离与培养精原干细胞体外系统，检查精子发生缺陷，纠正雄性不育和引入遗传改变进雄性生殖系。
本文就 SSCs 移植技术、移植研究的发展、应用及潜在的问题作一综述。
1 SSCs 的生物学特性SSCs 来源于原始生殖细胞(primordial germcells， PGCs) ， PGCs 先演化为性原细胞，性原---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------细胞再发育为 SSCs[1]。
初始 SSCs 为单个型( A single， As) 精原细胞， As 能自我更新或者分裂产生 2 个通过胞质桥相连的对称型( A paired， Apr) 精原细胞， Apr 进一步分裂形成 4、 8、 16 个细胞的链状排列型(A aligned， Aal) 精原细胞。
Aal 即为第 1 代分化的 A1 型精原细胞。
A1 随后进行连续 6 次的细胞分裂，依次产生 A2、 A3、 A4 等中间型和B 型精原细胞， B 型精原细胞经过数次分裂后，体积增大分化为初级精母细胞，再经过减数分裂产生精子细胞，最终形成精子[2] 。
目前认为，仅单个型原细胞具有干细胞性质，即所谓的精原干细胞。
因此， SSCs 又被称为 As 型精原细胞。
SSCs 相对数量极少，仅占成体生殖细胞的0. 02%~0. 03%[3]。
SSCs 一方面能够自我更新，产生新的干细胞以维持自身数量的恒定，一方面能够在自身基因或外来信号的调节下增殖分化为各阶段的 - 1 -动物生殖生理学课程论文生殖细胞直至精子。
2 SSCs 移植技术自从 1994 年 Brinster 等利用显微注射技术，以 LacZ 基因为报告基因，将正常小鼠的SSCs 移植入白消安处理过或遗传缺陷的小鼠曲细精管中的试验成功以来， SSCs 移3/ 19植技术得到了很大的发展［4］。
目前， SSCs 移植技术一般需要经过 5 个步骤：1) 供体的选择；2) SSCs 的体外培养； 3) SSCs 的鉴别与分离；4) 受体动物的准备； 5) 移植操作，即将移植液注入受体睾丸的生精小管中。
2. 1 供体的选择作为 SSC 移植的供体动物，首先要带有一定的标记以区别于受体本身的细胞。
目前，常用的受体动物是能在精子发生各阶段都表达 E colil -半乳糖苷酶的转基因小鼠，这种小鼠的精原细胞在含 5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷(X-gal) 的培养液中可被孵育染成蓝色，可与受体本身的精原细胞相区别。
另外， Kanatsu 等使用能在身体所有细胞都表达绿色荧光蛋白(GFP) 的新生期转基因小鼠，这种小鼠的精原细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光[5]。
这两种动物都是良好的供体动物。
选择供体动物将其麻醉，取出睾丸，消化分散曲精小管，收集 SSC。
2. 2 SSCs 的体外培养 1998 年， Nagano M 第一次提出小鼠的 SSCs 需经体外培养一段时间后才能移植，其目的是使 SSCs 在体外增殖，增加移植的数量，并使细胞能够在培养时进行自身的损伤修复，从而提高移植成功率。
在体外培养条件下，添加干细胞因子(stem cell factor， SCF)、---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 白血病抑制因子(1eukemia inhibitory factor， LIF) 及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor， bFGF) 对 SSCs 的分裂增殖均有较好的效果[9]。
近年来有许多改进小鼠 SSCs 培养体系的报道，如 Jeong D 用成纤维细胞系作为饲养层细胞， DMEM 作为基础培养液，添加干细胞因子、白血病抑制因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子等营养物质，使牛 SSCs 可在改进的培养液中培养存活 1 个月[10]。
2. 3 SSCs 的鉴别与分离选择适龄的供体动物，准确地鉴别精原干细胞，可提高 SSCs 移植的成功率。
SSCs 所占的比例很小，在 1 104 个的睾丸细胞中仅有 2 个SSCs，所以将供体动物诱导成隐睾症可减少 SSCs 分化，从而达到增加 SSCs 比例的目的。
在鉴定 SSCs 方面，人们还未找到 SSCs的特异性分子标记。
因为精原干细胞和其他的干细胞表面标志存在一定程度的相似性，所以一些干细胞表面标志也用来鉴定 SSCs，如 SSEA-1、SSEA-3、 SSEA-4 和 AP 等。
一般是通过这些分子及其相应抗体来筛选和鉴定 SSCs[6]。
最近有学者报道，神经标志物蛋白基因产物 9. 5(Protein gene pr- oduct 9. 5， PGP9. 5) 可作为猪睾丸中 SSCs 的特异标记，这一结果为 SSCs 特异性分子标记的进一步研究奠定了一定的基础5/ 19[7]。
SSCs 分离的原理是根据曲精细管内各种细胞的比重、大小、贴壁速度及表面标记等性质的不同将其分离。
过去主要方法有重力沉降法、牛血清白蛋白梯度离心法、Percoll 密度梯度离心法。
目前有报道采用多参数筛选法和荧光激活分析法，从隐睾小鼠睾丸中可获的SSCs 是用普通方法获得的 SSCs 的 166 倍。
Buageaw A 等通过使用磁力活性的细胞进行细胞分选[8]。
将洗过的精子用 H-Y 抗原的单克隆抗体处理。
再把被第二抗体所包裹的超磁化多聚体小珠加到精子中，过柱，利用磁体将与磁珠相连的精子从样品中去除。
相对于多参数筛选法、荧光激活分类分析法，免疫磁珠法不但有更高的效率，而且对 SSCs 的损伤也小。
- 2 - 动物生殖生理学课程论文 2. 4 受体动物的准备受体动物的年龄是影响移植效率的关键因素之一[11]。
用不同的方法处理受体动物睾丸的目的主要有两个方面：首先，抑制受体动物自身 SSCs 的精子发生；其次，尽量减少对受体动物睾丸的损伤。
通常在进行 SSCs 移植之前，用白消安(Busulfan，抗肿瘤药物) 处理受体动物。
其作用机理是 Busulfan 使 DNA 烷基化从而破坏受体 SSCs 增殖，剂量因种群而异，但这种方法会导致骨髓减少从而使动物致死---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ [12]。
Busulfan 处理 17 周龄的猪和绵羊，不但睾丸重量和 SSCs 的数量减少，而且有全身性的毒性。