羊肚菌菌种制作技术复习过程
羊肚菌菌种培育方法
羊肚菌菌种的培养方法-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------一种羊肚菌菌种的培养方法本技术公然了一种中药材的优良高产栽种方法。
该方法包含以下步骤： (1)母种的制作及培养，包含①制作母种培养基：将 250g 土豆、 30g 琼脂、 25g 葡萄糖和 3g 维生素 B 放入2000ml 的水中加热，直至琼脂完整煮化即得母种培养基，②培养母种：将试管放入密封的无菌接种箱中，每个试管中接入 1cm×1cm 的菌丝后，置于 20℃培养箱中，直至生长成母种； (2)原种的制作及培养，包含①制作原种培养基：取小麦 80％、木销 10％和麦麸 10％，将所述小麦煮熟后捞出，与所述木销和麦麸搅拌平均，水分控制在 60-80％，100℃下保温 6 小时，②培养原种； (3)种植中的制作及培养，包含①制作种植种培养基和②培养种植种。
本技术中，培养出优秀的羊肚菌菌种，提升了栽种的存活率。
详细实行方式一种羊肚菌菌种的培养方法，该方法包含以下步骤:(1)母种的制作及培养①制作母种培养基:将 250g 土豆 ,30g 琼脂 ,25g 葡萄糖和 3g 维生素 B 放入 2000m1的水中加热，直至琼脂完整煮化即得母种培养基；②培养母种 :取所述母种培养基 200ml 装入 300ml 的试管中，用棉花塞住管口，将所述试管放在 125℃的高压灭菌锅内灭菌 1. 5h 冷却至室温后，将所述试管放入密封的无菌接种箱中，每个试管中接入 1cmX 1cm 的菌丝后，置于 20℃培养箱中，直至生长成母种。
在步骤 (1) 中，土豆需要早先放入水中煮半小时，以后将其捞山，再与琼脂、葡萄糖、维生素 B 一起放入水中煮，直至琼脂煮化，将煮好的培养基放在试管里，等凝结以后，再用棉花寒住试管的管口。
大学生羊肚菌菌种制备与栽培技术研究性学习方案
大学生羊肚菌菌种制备与栽培技术研究性学习方案一、研究背景与意义羊肚菌（morel）是一种珍贵的食用菌，具有独特的风味和高营养价值。
然而，由于其生长环境要求苛刻，羊肚菌的野生资源逐渐减少，市场上的羊肚菌价格高昂。
因此，开展大学生羊肚菌菌种制备与栽培技术研究具有重要的理论和实际意义。
本学习方案旨在引导大学生深入了解羊肚菌的生态特点和栽培技术要点，通过自主研究与实践，掌握羊肚菌菌种制备及栽培技术，为羊肚菌的商业化生产提供科学依据。
二、学习目标1.了解羊肚菌的生态特点和分布情况；2.掌握羊肚菌菌种制备的基本原理和方法；3.熟悉羊肚菌栽培的关键技术要点；4.通过研究性学习，培养科研能力和创新意识；5.提高团队协作和沟通能力。
三、学习内容与步骤第一阶段：羊肚菌的生态特点与分布调研1.阅读相关文献，了解羊肚菌的生态特点、适生环境和分布情况；2.前往自然保护区或野外进行实地考察，观察和记录羊肚菌的生境环境；3.结合实地考察和文献研究，撰写羊肚菌的生态特点与分布调研报告。
第二阶段：羊肚菌菌种制备技术研究1.学习羊肚菌菌种的制备原理和方法；2.搜集并筛选适合制备菌种的羊肚菌菌株；3.根据菌种制备方法进行实验操作，并记录相关数据；4.对实验结果进行统计分析，并撰写羊肚菌菌种制备技术研究报告。
第三阶段：羊肚菌栽培关键技术研究1.学习羊肚菌栽培的基本原理和关键技术要点；2.设计羊肚菌栽培试验方案，并进行实验操作；3.对栽培试验结果进行观察和记录，并进行统计分析；4.探讨羊肚菌栽培中遇到的问题和解决方法，并撰写栽培技术研究报告。
第四阶段：研究性学习成果总结与分享1.将学习过程、实验数据和研究成果进行整理和总结；2.准备学术报告或论文，介绍研究背景、方法和结果；3.在学术交流会或班级汇报中分享研究成果，并接受同学和教师的评议。
四、学习评估方式1.学习期间的参与度和作业完成情况；2.学术报告或论文的质量和表达能力；3.学术交流会或班级汇报的展示效果和表达能力；4.指导教师的评价和对研究成果的认可程度。
羊肚菌的栽培技术
羊肚菌的栽培技术
羊肚菌的栽培技术
一、介绍
羊肚菌（学名：Morchella esculenta）是一种高档食用菌类，因其独特的形状和美味的味道而备受追捧。
本文将详细介绍羊肚菌的栽培技术，以帮助栽培者更好地进行羊肚菌的生产。
二、羊肚菌的生命周期
⒈孢子的采集
⒉孢子的发芽
⒊菌丝的生长
⒋菌丝的分化成子实体
⒌子实体的形成
⒍子实体的采摘
⒎子实体的后期处理
三、材料准备
⒈培养基配制
⒉培养容器准备
⒊孢子的采集器具四、培养基配制
⒈麦芽提取液的制备
⒉蔗糖溶液的制备
⒊液体培养基的配制
⒋固体培养基的配制五、孢子的采集
⒈选择合适的子实体
⒉采集孢子的器具
⒊孢子的采集方法六、孢子的发芽
⒈孢子的消毒处理
⒉孢子的发芽培养条件七、菌丝的生长
⒈菌丝的接种方法
⒉菌丝生长的环境要求
⒊菌丝生长的时间控制
八、菌丝的分化成子实体
⒈培养条件的调节
⒉菌丝分化成子实体的时间控制九、子实体的形成
⒈光照条件的控制
⒉温度和湿度的调节
⒊空气流通的控制
十、子实体的采摘
⒈适时采摘子实体
⒉采摘子实体的工具
十一、子实体的后期处理
⒈清洗子实体
⒉子实体的保存和加工
附件：
⒈孢子采集器具的图片
⒉孢子的发芽培养箱制作图纸法律名词及注释：
⒈《食品安全法》：国家法律，旨在保障食品安全，维护人民
群众的身体健康。
⒉《农业生产法》：国家法律，规定农业生产的各项法律法规。
羊肚菌二级菌种(原种)的生产技术
羊肚菌二级菌种（原种）的生产技术1.培养基配方小麦70%～75%，稻壳3%～5%，阔叶树木屑或玉米芯18%～23%，碳酸钙1%，石膏1%，含水量60%～62%，pH自然。
2.原料预处理小麦用清水浸泡24～48h或煮沸20min，捞起、沥干，干/湿为1/1.8～2.0；稻壳浸泡24h，捞起、沥干；木屑、玉米芯加水拌匀，堆制发酵2周后使用。
堆制方法：玉米芯、木屑、稻壳混合，加1.2倍水搅拌均匀，建1～1.2m高的堆，盖厚膜发酵，第6～7天翻堆1次，发酵5天后再次翻堆，4天后摊开晾晒1～2天即可使用。
3.拌料、装瓶、灭菌将各种辅料与小麦按比例混合均匀，水分含量以用手挤压有水迹而不下滴为度。
装料采用新的体积为750～2000mL的带通气盖聚丙烯菌种瓶，不能使用旧的菌种瓶、玻璃瓶和通气盖。
将培养料装入菌种瓶中，用清水清洗瓶口、底部和外表面，透气盖封口。
采用高压灭菌锅灭菌，121～125°C下保持2～3h，自然冷却。
4.接种、培养接种方法：在超净工作台上，用75%乙醇喷洒工作台，放入待接菌种瓶，点燃酒精灯，在无菌条件下接入一级斜面菌种，斜面长度5～10mm，每支试管斜面菌种接5～6瓶原种。
接种后置于20～23°C培养箱中避光培养15～25天，菌丝满瓶后立即使用。
5.注意事项小麦的处理，浸泡和蒸煮择一即可，不同时进行，因为小麦的干/湿比达到1/3时，其含水量会超过70%，灭菌后易发生表皮破裂而黏连，菌丝无法长满全部培养料。
宜选用厚皮的小麦，如常见的红皮小麦；而薄皮的小麦表皮容易在蒸煮、灭菌过程中破裂，影响菌种质量。
经验丰富的技术人员一般会采用纯麦粒生产原种。
不宜使用长期存放的木屑、玉米芯等原料。
长满的原种须尽快使用。
羊肚菌种植技术培训
羊肚菌种植技术培训羊肚菌，又称为松茸、牛肝菌，是一种珍贵的食用菌。
其肉质鲜嫩，味道浓郁，营养丰富，被誉为“菌中之王”。
由于羊肚菌生长期长，且野生资源日益减少，因此羊肚菌种植技术的培训变得尤为重要。
本文将介绍羊肚菌种植技术的基本步骤和培训内容，帮助初学者了解和掌握羊肚菌种植技术。
第一部分：羊肚菌种植技术的基本步骤羊肚菌种植技术主要分为以下几个步骤：1. 环境准备：羊肚菌喜欢在松树、云杉等酸性土壤中生长，因此需要选择适宜的种植环境。
在种植地点周围清理杂草，防止杂草对羊肚菌的生长造成影响。
2. 培养基准备：羊肚菌的培养基主要由木屑、麦麸、棉花种子壳等材料组成。
将这些材料进行消毒、拌和，制成培养基。
3. 基质准备：将松树、云杉等树木锯成长短不等的木块，清除表面的杂质。
然后将木块浸泡在清水中，以保持基质湿润。
4. 灌种和包装：将羊肚菌培养基均匀地涂抹在木块表面，然后将其放置在适宜的环境中，等待菌丝生长。
待菌丝完全覆盖木块表面后，将其用锡纸或塑料袋包裹起来，以保持湿度和温度。
5. 培养环境控制：在适宜的环境中，控制温度、湿度和通风等因素对羊肚菌的生长起关键作用。
保持恒定的湿度和适宜的温度有助于菌丝的扩散和子实体的形成。
6. 收获和处理：当子实体形成和长大后，可以进行采收。
注意采摘时要留下部分子实体，以保证下次的再生。
采收后，应及时处理并迅速进行食用或销售，以保持其新鲜度和口感。
第二部分：羊肚菌种植技术的培训内容羊肚菌种植技术的培训内容可以包括以下几个方面：1. 理论知识介绍：培训课程可以从羊肚菌的概述、分类、生长环境要求等方面介绍羊肚菌的基本知识，使学员对羊肚菌有一个全面的了解。
2. 种植技术讲解：培训课程重点介绍羊肚菌的种植技术，包括培养基的准备、基质的准备、灌种和包装、培养环境的控制等。
通过具体的操作演示和讲解，帮助学员掌握羊肚菌种植的关键技术。
3. 病虫害防治：培训课程还应包括羊肚菌种植过程中的常见病虫害防治方法。
羊肚菌生产技术
羊肚菌生产技术
羊肚菌是一种高级食用菌，其生产技术主要包括人工培养和野生采集两种方法。
人工培养是羊肚菌的主要生产方式，其技术流程包括以下步骤：1. 菌种培养：选取羊肚菌的新鲜菌株，进行菌种的分离和纯化培养，常用的培养基包括玉米粉、蔗糖、麦麸等。
2. 培养基制备：根据羊肚菌的喜好环境，调配适合其生长的培养基，包括有机质、无机盐和水分，以供菌丝生长繁殖。
3. 培养容器消毒：将培养容器进行高温高压消毒处理，以杀灭其中的细菌和病毒。
4. 菌丝接种：将培养好的菌种接种到培养容器中的培养基上，使菌丝在培养基上生长繁殖。
5. 培养条件控制：控制培养容器内的温度、湿度、光照和通气等条件，提供适宜的环境促进菌丝的生长和菌实体的形成。
6. 菌实体成熟：经过一段时间的培养，菌丝会逐渐形成菌实体，菌实体成熟后可以进行采摘和销售。
野生采集是羊肚菌的传统生产方式，主要通过人工寻找和采摘自然界中生长的野生羊肚菌。
野生采集的技术主要包括以下方面：
1. 选址：根据羊肚菌的生态习性和适生地理分布，选择适合生长羊肚菌的地点进行采集。
2. 季节选择：羊肚菌有明显的生长季节，一般选择在适宜的季节进行采集，如春季或秋季。
3. 寻找和识别：通过观察植被和土壤环境，寻找可能有羊肚菌生长的地方，并通过羊肚菌特有的形态特征进行识别和辨别。
4. 采摘和处理：用工具小心地将羊肚菌采摘下来，保持菌体完整，然后进行清洗、晾干和包装。
无论是人工培养还是野生采集，对于羊肚菌的生产技术，关键是要掌握良好的菌种培养和合适的培养条件，以保证菌丝的生长和菌实体的质量。
此外，在生产过程中还需要注意卫生和质量控制，确保产品的安全和卫生。
羊肚菌菌种制备与栽培技术研究性学习方案
羊肚菌菌种制备与栽培技术研究性学习方案本课题的研究内容主要包括羊肚菌菌种的分离、羊肚菌人工栽培技术的研究以及如何提高栽培的成功率。
菌种的分离方法主要是通过对子实体的组织分离，可以对菌柄或者菌盖进行分离；然后在进行一系列的消毒措施，最后接种于PDA培养基中，在25℃下恒温培养，并定期观察菌丝生长情况。
羊肚菌是一种低温型菌类，适宜温度较低的地区栽培，气温在22℃以下15℃以上即可栽培，多数在10月份是栽培的好时间，适宜菌丝生长发育，遇低温季节有利羊肚菌的生理变化。
翌年3份气温逐渐回升，子实体开始大量形成。
1、本课题研究现状及趋势1.1、羊肚菌的菌种分离菌种分离是在无菌条件下将所需要的食用菌与其他微生物分开，在适宜的条件下培养以获得纯培养的过程。
分离纯化得到的纯培养即是母种，母种的培育制种的关键，也是食用菌生产的关键。
母种可由孢子萌发而成，也可从子实体组织分离或用斜面菌的菌丝体一节扩增而得。
主要方法有：孢子分离法、组织分离法、菇木分离法和培养料分离法。
1.2、羊肚菌的栽培羊肚菌为野生真菌，其产量受季节、气侯等因素的制约。
所以，一百多年来，羊肚菌的人工栽培研究，一直是真菌学家和业余爱好者最感兴趣的课题之一。
虽有人工栽培成功的报道，但试验的重复性仍较差，大面积栽培还有待进一步研究。
2、研究本课题的理论意义及应用价值我国羊肚菌资源丰富，目前在20多个省、市、自治区都发现了羊肚菌的踪迹。
由于羊肚菌具有较高的食用药用价值，其子实体栽培技术尚不成熟，而天然资源有限，导致供需不平衡，市场价格居高不下。
所以人工栽培是解决羊肚菌紧俏的出路，实现羊肚菌商业化、工厂化生产无疑是真菌学家急需攻克的难题。
为解决这一问题，除了要合理保护、利用、开发天然资源，如调查新的羊肚菌资源，对国内羊肚菌进行资源调查、分类方面的研究，开展羊肚菌的分子分类学研究和分子地理学的研究等，还需要深入研究羊肚菌的人工栽培技术，实现其工业化和商业化的生产。
羊肚菌菌种生产和营养袋制作技术简介
羊肚菌菌种生产和营养袋制作技术简介羊肚菌菌种最大的缺点就是容易退化、变异，给羊肚菌栽培带来很大困难。
（一）菌种生产技术要点菌种生产流程如下：羊肚菌选择和采集>组织（孢子）分离>提纯培养>出菇试验>优良一级菌种>复壮培养>菌种扩繁>二级菌种接种>培养栽培菌种。
1.菌种分离羊肚菌的分离方法与其他食用菌大体相同，采用组织分离和孢子分离。
（1）组织分离选取成熟、具优良长势的羊肚菌子实体，在无菌环境中用接种针将组织块接入平皿培养基上，获得菌种。
①培养基制作。
配方为马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18～20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、水1000ml。
将培养基装到500ml三角瓶中（每瓶装入200ml），115℃灭菌30min后在无菌条件下将培养基倒入平皿中（每个平皿约20ml），冷却备用。
②选取头潮、新鲜、健壮、周围幼菇或原基多、朵形圆整、七八分熟的子实体。
③菇面用75%酒精棉球擦拭消毒。
④切取组织块（菌肉）。
用手术刀切开种菇，在菌盖或菌柄内侧用无菌手术刀或尖嘴镊子取5mm见方组织块（菌肉）接于培养基上。
⑤培养。
温箱18℃恒温培养，2天后组织块萌发，待菌落长到2cm，用接种针选取最优菌落的先端菌丝接入新培养基，进行尖端脱毒。
将菌丝生长快、产菌核适中、产色素少且晚的分离物挑选出来，作为第一代母种保存备用。
（2）孢子分离无菌条件下，使孢子在适宜的培养基上萌发成菌丝体而获得纯培养的方法。
多孢分离的菌株不能直接用于生产，要经过出菇试验。
采集孢子有多种方法，如整朵插种菇、三角瓶钩悬和试管琼脂培养基黏附法等，此处介绍整朵插种菇法。
①选取头潮、新鲜、健壮、八九分成熟的子实体。
②采集孢子。
将按照组织分离方法消毒子实体的整朵菇插入无菌孢子收集器里，在18℃下培养2～3天后子囊孢子落下，形成孢子印。
③孢子分离、培养。
无菌条件下，将少量孢子移入盛无菌水的三角瓶内稀释成孢子悬浮液，其浓度以1滴水中含5～10个孢子为宜。
羊肚菌菌种制作(清晰整齐)
羊肚菌的菌种制作羊肚菌的菌种制作并不复杂, 它和其它食用菌制作基本相似, 现将母种、原种、栽培种的制作技术介绍如下:(一)母种制作培养基配方:1.黄豆芽50克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,羊肝菌基脚土50克,水1000 毫升；2.黄豆芽50克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,KH2PO4l克,Mg2SO41克,水1000毫升；3.木屑500 克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,水1000毫升;4.马铃薯20克(煮汁)，白糖20克,琼脂20克,蛋白脂0.5克,牛肉膏0.5克,水1000毫升；5.蛋白质1克,葡萄糖20克,琼脂20克, 酵母膏1克,KH2PO4l 克,Mg2SO41克,VB11克, 水1000毫升。
以上pH 均为自然。
操作过程:将上述配方任选一组,按共它母种制作常规操作方法分装于试管中, 塞上棉塞进行灭菌。
灭菌在121℃下维持30分钟,放成斜面备用。
接种: 待斜面培养基表面余水干后才能使用,否则被感染细菌, 接种要求在接种箱内通过药物灭菌进行, 将原分离的纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基, 放入空白斜面培养基上, 每支母种可接10-15支, 母种只能扩一次, 不能多接或多扩, 更不能传代, 否则会影响子实体生长。
培养: 接种后放在22-27℃条件下避光培养,2一3 天菌丝开始萌发, 7 天左右可长满斜面培养基, 如不及时使用需放入冰箱0一3℃保存, 但时间最长不超过半年。
(二)原种制作培养基配方:1.木屑50%，棉籽壳30%，麦麸15%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%；2.木屑75%，米糠或麦麸20 %, 自糖1%，石膏1%, 过磷酸钙1%, 土2% ；3.稻草粉70%，麦麸25%石膏1.5%,过磷酸钙1.5%,土2% ；4.棉籽壳90%，木屑8%，土2%；5.玉米芯50%，木屑30% ,米糠15%,石膏1%，过磷酸钙1%，土3% 。
操作过程:将配方混合均匀后, 加入清水,使含水量达65 % 时即可装瓶, 装瓶要求松紧一致,装至瓶肩为宜, 再将表面压平, 洗去瓶壁内外沽染的培养基, 然后塞上棉塞, 或者用塑料薄膜封口都行。
羊肚菌菌种制作方法,如何种植羊肚菌
羊肚菌菌种制作方法，如何种植羊肚菌1、准备原料：想要制作羊肚菌菌种，需要准备黄豆芽500克、白糖20克、琼脂20克、羊肚菌基脚50克、清水1升。
2、操作过程：羊肚菌菌种的材料准备好后将其混合均匀，并加入清水，含水量达到65%时装瓶。
3、灭菌方法：先将其放在0.68千克压力下维持1小时，再转入常压100°C的温度下保持6-8小时。
一、羊肚菌菌种制作方法1、准备原料（1）制作羊肚菌菌种一定要准备一些材料，需要准备的材料有黄豆芽500克、白糖20克、琼脂20克、羊肚菌基脚50克、水1升。
（2）一定要将黄豆芽煮成汁水，这样可以加快羊肚菌菌种的繁殖速度。
2、操作过程（1）菌种的材料准备好后可以将其全部混合均匀，再加入清水，当含水量达到65%时即可装瓶。
（2）装瓶要求松紧一致，要洗去瓶壁内外沾染的原料，然后再塞上棉塞，等待羊肚菌发酵。
3、灭菌方法（1）羊肚菌菌种一定要经过灭菌后才能使用，首先将其放在0.68千克压力下维持1小时，然后再转入常压100°C的温度下保持6-8小时即可。
（2）灭菌时间不能过长或者压力过高，否则会破坏羊肚菌菌种的养分。
4、接种培养（1）接种羊肚菌时要对接种箱进行消毒，每支母种可接原种5-10瓶左右。
（2）接种后要将其放在18-22°C的温度下避光培养，大约10天后羊肚菌就会长满菌丝。
二、如何种植羊肚菌1、土质要求（1）羊肚菌对土质的要求比较严格，一定要将其种植在偏中性或者微偏碱性的土质中，可以选择肥沃的松质黑土。
（2）在种植之前要确保土壤的透气排水性，土壤里面不能残留病菌和虫卵。
2、生长环境羊肚菌的适宜生长温度为20°C左右，它的生长旺季是春秋2季，浇水湿度要保持在70%左右。
3、适当留草（1）羊肚菌在生长过程在不需要进行手工除草，它可以和杂草一起生长。
（2）人工除草翻土时很容易伤害到土里的菌丝，影响生长，而且杂草也是很好的遮挡物。
4、及时采收羊肚菌是落实生长的植物，在生长过程有不规则的延长性，所以一定要及时采收，这样在保证新鲜的同时也能避免对羊肚菌生长有影响。
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羊肚菌菌种制作技术
羊肚菌菌种制作技术
羊肚菌是世界上珍贵的稀有食用菌之一，属高级营养品。
它富含蛋白质、碳水化合物、多种维生素及20多种氨基酸，特别是有机锗含量高，具有补肾、壮阳、补脑、提神的功能；主治精肾亏损、阳痿不举、性欲冷淡；对头晕失眠、肠胃炎症、脾胃虚弱、消化不良、饮食不振有良好的辅助治疗作用；还可以防癌抗癌、预防感冒、增强人体免疫力，在医学上有重要的开发价值。
由于它功能齐全，香味独特，食疗效果显著，目前国内每千克售价800～1000元，尤其在西欧国家供应十分紧俏，价格更昂贵。
因羊肚菌与其它食用菌不同，栽培适应性较差，特别是在异地栽培稳定性差。
因此，利用当地的羊肚菌品种分离制出的菌种，能适应当地环境，可避免异地购种的地区性差异和邮寄途中的影响，建议种植户最好分离当地的品种。
它能适应当地环境，但也要注意羊肚菌的菌种隔年使用效果不好，有变异现象。
这就给大面积栽培和推广带来了困难。
所以羊肚菌的菌种最好每年分离、驯化。
这是迄今尚未实现商品化栽培的原因之一，加上栽培管理或环境达不到要求就会不出菇。
这就是羊肚菌人工栽培困难的奥秘。
一、制种注意事项
羊肚菌的菌种性能与其它食用菌不同，菌种分离方法和育种手段及栽培管理技术与其它食用菌也有很大差异。
最大的缺点就是容易退化、变异、生霉。
这对栽培羊肚菌带来很大困难。
对此，首先要控制菌种传代，无论母种、原种、栽培种，若违反技术要求，多传一代就会出现上述不良反应或不长子实体。
母种只能经过原种栽培种，到栽培中的一次流程和3次破菌愈合才能保住质量；
若超过3次菌丝断裂而重新萌发的新菌丝，会失去或降低酶的分解作用，以致抗病力差，易生杂菌，不出菇。
二、母种制作
（一）培养基配方
①黄豆芽500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，羊肚菌基脚～50克，水1升。
②黄豆芽500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，水1升。
③栎木屑500克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，水1升。
④马铃薯200克（煮汁），白糖20克，琼脂20克，蛋白胨0.5克，牛肉膏
0.5克，水1升。
⑤蛋白胨1克，葡萄糖20克，琼脂20克，酵母膏1克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，维生素B1，1克，水1升。
pH值自然。
上述配方任选一组。
将木屑或豆芽加水1升煮30分钟，过滤取汁，并将余下的水补足1升，加入其它原料，煮至溶化后，按母种制作常规方法，分装于18毫米×180毫米或20毫米×200毫米试管的1/5，塞上棉塞，使用高压灭菌锅彻底灭菌；在0.68千克压力下维持60分钟，自然冷却至指针回到原位才可打开，放成斜面备用。
（二）菌种分离
首先要具有食用菌专业基础知识、多年的菌种分离经验及菌丝鉴别能力，其次要购置母种培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高倍显微镜等必要设备。
根据当地羊肚菌生长季节，趁羊肚菌生长旺盛时做菌种分离工作。
1.分离方法。
羊肚菌的分离方法与其它食用菌大不相同。
它需要一种助生菌与羊肚菌菌丝共生时才能出菇。
这种助生菌长期活动在土壤中，有时以芽孢菌形式出现，有时以菌丝形式出现。
它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。
因此，从土壤中分离该菌比其它任何方式分离要好些。
但从土壤分离难度太大，成功率不到万分之一，并且难以分辨，所以只有采取羊肚菌基脚土分离，才能真正找到羊肚菌的出菇菌丝。
初学者可在四川绵阳市食用菌研究所购买培养好的羊肚菌优良母种，并参加现场培训。
2.操作过程。
在羊肚菌生长的周围，可见白色菌丝充满土壤。
从土壤中挑选这种菌丝容易成功。
现介绍两种土壤分离的简易方法：一种是土壤直接分离，另一种是浸提分离。
土壤直接分离法：在羊肚菌生长的地方去掉羊肚菌，取周围5厘米以内的土壤，去掉表层，把土壤放入无菌接种箱内，然后放入试管培养基，进行接种箱空间消毒。
即按接种箱每立方米空间用甲醛10毫升，高锰酸钾5克，混合产生气体消毒，半小时后才可操作。
将基脚土用接种针挑取黄豆大小一块，迅速放到试管内的空白培养基上，每管放一块，塞上棉塞，接种后取出培养。
浸提分离法：将基脚土用无菌水稀释，澄清后用接种针蘸取少量溶液，滴到试管内的空白培养基上，塞上棉塞后取出培养。
分离后，放在12～18℃温度下培养观察。
3天后培养基上萌发菌丝，每天仔细检查每支试管的发菌及变化情况。
区分和认识各类杂菌是最关键的核心技术。
真正的羊肚菌菌丝最初为灰白色，生长很快，时间长会变成棕黄色，有时会出现菌核，母种7天长满试管，原种、栽培种15天可长满瓶底。
是否分离成功，必须做栽培出菇试验，待出菇后才能准确认定是否羊肚菌的菌种。
一旦菌
种分离成功，在以后的转接过程中要小心，不能再让杂菌感染，必须把好高温灭菌关和接种消毒关，才能保证菌种质量和成活率。
（三）转接提纯
待培养基表面余水干后才能使用，否则会被细菌感染。
接种要求在接种箱内通过药物灭菌进行，将第一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基，放入空白培养基上，每支母种可接10～15支，母种只能扩种一次，不能多接或多扩，否则会影响子实体生长。
（四）培养
接种后放在18～22℃温度下避光培养，2～3天菌丝萌发，7天可长满斜面培养基。
如不使用则放入冰箱在0～3℃温度下保存，时间最长不超过半年。
三、原种制作
（一）培养基配方
①栎木屑50%，棉籽壳30%，麦麸 15%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
②栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
③稻草粉70%，麦麸25%，石膏1.5%，过磷酸钙1.5%，土2%，pH值自然。
④棉籽壳90%，木屑8%，土2%，pH值自然。
⑤玉米芯50%，木屑30%，米糠15%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH 值自然。
（二）操作过程
按配方将原料混合均匀，加入清水，使含水量达65%时装瓶。
装瓶要求松紧一致，装至瓶肩，将表面压平，洗去瓶壁内外沾染的培养基，塞上棉塞，或用塑料薄膜封口。
（三）灭菌
高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时，常压灭菌在100℃温度下保持6～8小时。
灭菌时间不能过长或压力过高，否则会破坏其中养分。
（四）接种与培养
接种在接种箱内经消毒后，每支母种可接种原种5～10瓶。
接种后放在18～22℃温度下避光培养，3天菌丝萌发吃料，10天菌丝布满培养基表面，15～20天菌丝长满瓶底。
培养期间尽量避免强光刺激，菌龄以不超过50天为好。
菌丝寿命与温度有关，超过30℃以上几小时就死亡。
四、栽培种制作
（一）培养基配方
①栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
②棉籽壳75%，麦麸20%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。
③稻草粉75%，麦麸15%，过磷酸钙2%，土3%，pH值自然。
④玉米芯80%，米糠15%，石膏2%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
⑤农作物藤秆粉75%，米糠10%，麦麸10%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
（二）操作过程
按配方将原料混匀后，加水调至含水量为65%，装瓶，灭菌接种，培养。
操作方法同上述原种。
经1个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。