【doc】醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究
延胡索醋炙前后饮片和煎剂中延胡索乙素的含量比较
延胡索醋炙前后饮片和煎剂中延胡索乙素的含量比较
李兴华;马志鑫
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2017(036)002
【摘要】目的比较延胡索醋炙前后饮片和煎剂中延胡索乙素的含量变化.方法采用高效液相色谱法,对延胡索醋炙前后饮片和煎剂中延胡索乙素的含量进行测定.结果延胡索醋炙后,饮片中延胡索乙素含量降低3.70%,但在煎剂中延胡索乙素的含量提高18.18%.结论醋炙对于延胡索饮片中延胡索乙素的含量影响较小,但可以明显增加其在煎剂中的溶出.
【总页数】3页(P75-76,117)
【作者】李兴华;马志鑫
【作者单位】中国药科大学中药学院,江苏南京211198;中国药科大学中药学院,江苏南京211198
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.延胡索醋炙前后饮片和煎剂中延胡索乙素含量变化对比 [J], 孟德阳
2.赤芍、当归和漏芦对醋延胡索中延胡索乙素的影响 [J], 郭志烨;韩丽;杨明;刘李梅;何婧;邹文铨
3.延胡索醋炙前后饮片和煎剂中延胡索乙素的含量比较 [J], 李兴华;马志鑫;
4.4种不同药材来源郁金饮片醋炙前后的HPLC特征图谱分析及水煎出物含量比较
[J], 张军;苏本正;石典花;孙立立
5.醋炙元胡中延胡索乙素不同提取方法比较 [J], 张艳华;包淑云;年四辉;喻丽珍;刘人豪
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醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究
醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究
赵翡翠;赵晓琴;李永和
【期刊名称】《新疆中医药》
【年(卷),期】2007(025)002
【摘要】目的:考察不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用所产生的影响.方法:采用HPLC法测定延胡索醋制品中延胡索乙素的含量,采用小鼠扭体法和热板法对比各醋制品镇痛作用.结果:醋制延胡索中延胡索乙素的含量高于生品,其中以醋烘品为最高;醋制延胡索的镇痛作用强于生品,其中以醋烘品为优.结论:采用醋烘法进行延胡索加工炮制可控,可行、有效,为延胡索加工炮制的规范化提供了新的可以借鉴的方法.
【总页数】3页(P34-36)
【作者】赵翡翠;赵晓琴;李永和
【作者单位】新疆维吾尔自治区,新疆医科大学附属中医医院,830000;新疆维吾尔自治区,新疆医科大学附属中医医院,830000;新疆维吾尔自治区,新疆医科大学附属中医医院,830000
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.不同醋制工艺对元胡中延胡索乙素溶出的影响 [J], 张艳华;包淑云;年四辉;方昌樵;郭祥
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3.元胡止痛片中延胡索乙素的含量与镇痛作用相关性的研究 [J], 王建明;夏文娟
4.延胡索、醋制延胡索镇痛作用实验研究 [J], 俞浩;胡勃;杨硕
5.高效液相色谱法测定延胡索中延胡索乙素、延胡索丙素、小檗碱的含量及不同炮制品稳定性研究 [J], 林家寿
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不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响
《当代医药论丛》Contemporary Medical Symposium2019年第17卷第18期•中医中药•167 3讨论原发性痛经是妇科临床上最为常见的病症之一。
此病患者在行经前、月经期间或行经后可出现下腹部疼痛、坠胀，或伴有腰酸及其他不适症状。
原发性痛经会严重影响患者正常的工作和生活，可明显降低其生活质量冈。
中医认为，原发性痛经属于“经行腹痛”的范畴，多因气滞血瘀、肾阳不足所致，其病机是气血运行不畅、不通则痛，在治疗上当以散寒止痛为主刊。
原发性痛经的中医辨证特点不外乎"瘀”、“滞”和“虚”。
其中，“瘀”指血瘀，即瘀血内阻、不通则痛，该类型痛经患者的临床表现主要是疼痛剧烈（多为行经前疼痛），经色紫暗，有血凝块；“滞”指气滞，即气机阻滞、不通则痛，该类型痛经患者的临床表现主要是平素喜好生闷气，经期前后情绪不佳，胀痛；“虚”指血虚、阳虚或肝肾亏虚,临床表现主要是经色浅淡、月经量少、痛经患者的临床表现主要是浮肿冷痛、小腹胀痛，伴乳房血虚型痛经患者的面色淡白，阳虚型畏寒肢冷、经色紫暗有血凝块，肝肾亏虚型痛经患者的临床表现主要是腰膝酸软、齿摇发脱、头晕耳鸣⑷。
中医认为，三阴交穴是足太阴脾经、足少阴肾经和足厥阴肝经的交会之穴，刺激该穴可起到健脾益血、调肝补肾及安神助眠的功效;关元穴和次醪穴主治痛经、少腹疼痛，刺激这两个穴位可起到通经活络、活血止痛、健脾除湿的功效；子宫穴主治痛经，刺激该穴可起到调经止带、理气和血的功效；合谷穴是阳明经之原穴，乃调理人体气机之大穴，刺激该穴可起到理血活血、通经止痛的功效⑼。
对上述穴位进行针灸，能起到通经活络、活血止痛的作用。
依据国家中医药管理局颁布的《中医病症诊断疗效标准》对两组患者的临床疗效进行判定的结果显示，研究组患者治疗的总有效率高达96.8%,明显高于对照组患者的77.4%。
综上所述，用针灸疗法治疗原发性痛经的临床效果显著，此法值得在临床上推广应用。
参考文献［1］杨东云.原发性痛经患者利用中医针炎治疗的价值探析［J］.临床医药文献电子杂志,2017,4（43）:8373-8374.［2］李翠萍.针炎治疗原发性痛经的临床研究［J］.世界临床医学,2016,10⑵:27-27.［3］唐英.中医针炎治疗原发性痛经的研究进展［J］.大家健康（中旬版）,2017,11（2）:38-39.［4］宋明明，毕明昌.中医针炎治疗原发性痛经的临床分析［J］.实用妇科内分滂电子杂志,2017,4（22）:32,34.［5］刘美章.中医针炎治疗原发性痛经的疗效观察［J］,tt床医药文献电子杂志,2017,4（13）:2413-2414.不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响黄小平（重庆市梁平区中医医院药剂科，重庆405200）［摘要］目的:研究并分析不同的炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的彩响。
不同醋炙延胡索中延胡索乙素的含量变化_魏良兵
供试品 ( 1): 取 延胡索药材 生片 500g, 加 100g 米醋搅拌, 放置闷润。待米醋被药材吸收后, 置锅内 用文火炒至微干, 取出放凉, 即得。
供试品 ( 2): 取 延胡索药材 颗粒 500g, 加 100g 米醋搅拌, 放置闷润。待米醋被药材吸收后, 置锅内 用文火炒至微干, 取出放凉, 即得。
供试品 ( 5): 取延胡索药材 500g, 加 200g 米醋 搅拌, 放置闷润。待米醋被药材吸至内无白心后, 切 片晒干, 置锅内用文火炒至略焦干, 取出放凉, 即得。
供试品 ( 6) : 即生延胡索。 其中供试品 ( 1) 、( 2) 为安徽省炮制规范收载炮 制品种152, 供试品 ( 3)、( 4) 为中国药典收载炮制品 种122, 供试品 ( 5) 为本院炮制品种, 供试品 ( 6) 为延 胡索生品。 212 色谱条 件 吸附剂: 硅胶 G 板, 展开剂: 甲 苯-丙酮 ( 9: 2) 122, 饱和 30m in, 展开, 取出, 晾干, 置 碘缸中约 3分钟后取出, 挥尽板上吸附的碘。光谱 扫描确定最大吸收波长: 照薄层色谱法 ( 中国药典 2005年版一部附录 V IB ) 试验, 吸取对照品溶液、6 种供试品溶液各 1L,l 点于 10 m @ 10 m 的硅胶 G 薄 层板上, 依法展开; 在 200~ 700 nm 的波长范围内扫 描延 胡 索乙 素 斑点, 选 定 280nm 为检 测 波 长, 在 650nm 处均无吸收, 选定 650nm 为参比波长。 213 对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对 照品, 加甲醇制成每 1 m l含 0110 m g的溶液, 即得。 214 供试品溶液的制备 精密称取供试品 ( 1) 2g, 置圆底烧瓶中, 精密加入浓氨试液-甲醇 ( 1B20)混合 溶液 100 m ,l 称定重量, 冷浸 1 h, 加热回流 1 h, 放 冷, 再称定重量, 用浓氨试液-甲醇 ( 1B20) 补足减失 的重量, 摇匀, 滤过, 取续滤液 25 m l蒸干, 残渣加甲 醇溶解, 转移至 10 m l容量瓶中, 并稀释到刻度, 摇 匀, 滤过, 取续滤液, 即得供试品溶液 ( 1) 162。同法
延胡索中延胡索乙素的提取工艺研究
延胡索中延胡索乙素的提取工艺研究曾维丽;谢述琼;李向东;黎佳;蓝冬叶;陈金婷;张宇【摘要】Yanhusuo contains abundant tetrahydropalmatine, has strong analgesic effect.The extraction from rhizoma corydalis tetrahydropalmatine process to determine the optimal extraction parameters wasstudied.Through the single factor gradient experiment research, first determining things were the best extracting method and extracting solvent, several parameters such as concentration of extraction solvent, extraction time, extraction temperature, extraction times were studied.The most efficient way of ultrasonic extraction of tetrahydropalmatine in methanol method was found, and solid-liquid ratio was 1:10, ultrasonic extraction solvent was 50% methanol, ultrasonic extraction time was 30 min, ultrasonic temperature was 60 ℃, the number of ultrasonic extraction was when 2 times.When tetrahydropalmatine in methanol extraction process parameters achieved the best, its extraction efficiency could be greatly improved.%延胡索中含有丰富的延胡索乙素,具有较强的止痛作用,本文研究了从延胡索中浸提延胡索乙素的工艺,确定其最佳的浸提参数.通过单因素梯度实验研究,首先确定最佳的提取方法以及提取溶剂,然后对浸提溶剂的浓度,浸提时间,浸提温度,浸提次数几种参数进行研究.得出提取延胡索乙素用甲醇超声提取的最好方法是:料液比为1:10,超声浸提溶剂为50%甲醇,超声浸提时间为30 min,超声提温度为60 ℃,超声浸提的次数为2次.延胡索乙素用甲醇浸提工艺参数达到最佳时,其提取率可以大大的提高.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)006【总页数】3页(P85-87)【关键词】延胡索;延胡索乙素;提取工艺【作者】曾维丽;谢述琼;李向东;黎佳;蓝冬叶;陈金婷;张宇【作者单位】贵州理工学院,贵州贵阳 550025;贵州理工学院,贵州贵阳 550025;贵州理工学院,贵州贵阳 550025;贵州理工学院,贵州贵阳 550025;贵州理工学院,贵州贵阳 550025;贵州理工学院,贵州贵阳 550025;贵州理工学院,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】O62延胡索为罂粟科植物延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang)的干燥块茎，又称之为“元胡”[1-3]，是活血化瘀的代表药，具有化瘀止痛、理气活血[4-5]、以及很好的止痛功效，从痛经角度来说，其具有的活血散瘀理气的功效可有效的缓解气滞血瘀导致的疼痛，治疗痛经有很好的效果，特别在临床上具有非常广泛的应用[6]。
实验五 延胡索炮制前后镇痛作用比较
3、40min后，全部腹腔注射0.7%冰醋酸0.1ml/10g体重，致痛。 4、观察15分钟内产生扭体反应（伸屈后肢，腹部收缩内凹、臀部高起） 的动物数和总扭体次数。
5、结果记入下表 延胡索镇痛药理作用的观察表
实验三 延胡索镇痛作用的观察
一、实验目的 通过本实验，可验证延胡索镇痛的药理作用，并让学生了解扭体法 镇痛实验的具体做法。
【延胡索】
为罂粟科植物延胡索的干燥块茎。含有生物碱近20种其中以延胡索 乙素（四氢巴马汀、四氢掌叶防已碱）、甲素（紫堇碱）、丑素和去氢延 胡索甲素的生物活性较强。味辛苦，性温。归肝、脾经。
功效与药理
活血理气、止痛 1、镇痛作用 乙素最强、对钝痛作用优于锐痛。 2、镇静催眠作用 3、抗冠心病作用 4、抗溃疡病作用
5、体内过程 四氢巴马汀口服、吸收迅速、完全。静注射后透过血脑 屏障，但脑内消除迅速。本品主要由肾排出。临床用于胸胁、脘腹疼痛、 经闭痛经、产后瘀阻，跌扑肿痛。
临床： 1、止痛： 延胡索乙素治疗胃肠道、肝胆疼痛疗效较好，用于神经痛、 月经痛、术后止痛也有效。用于分娩痛、不影响胎儿呼吸。也用于产后腹 痛。 2、镇静催眠 ： 用于失眠患者，可减少多梦现象，且次日无头昏、乏 力、精神不振等后遗反应。
组别 生延胡索
鼠号 1 2
给药时间
扭体反应时间
3
制延胡索
4
5
生理盐水
6
扭体反应次数
四、实验报告 （药理作业）通过本实验，可否验证延胡索镇痛的药理作用？ （炮制作业）延胡索的炮制方法有哪些 延胡索水煎液、100%致延胡索水煎液（经离心沉 淀去渣）、 0.7冰醋酸液、生理盐水。
延胡索不同炮制品镇痛抗炎作用研究
延胡索不同炮制品镇痛抗炎作用研究【摘要】目的通过不同的致痛、致炎模型观察延胡索不同炮制品的镇痛抗炎作用。
方法采用小鼠热板法和扭体法，观察延胡索不同炮制品镇痛作用；采用耳肿法及毛细血管通透性法观察药物的抗炎作用。
结果延胡索不同饮片对二甲苯所致的耳廓肿胀及醋酸所致的毛细血管通透性增加都有明显的抑制作用，其中以醋煮延胡索作用较强。
延胡索不同炮制品对醋酸所致的扭体也有明显的抑制作用。
热板法显示各样品均能明显提高小鼠的痛阈值，其中以醋煮延胡索作用较为明显。
结论延胡索的不同炮制品均有显著的镇痛抗炎作用，其中以醋煮延胡索作用较强。
【关键词】延胡索；镇痛；抗炎；炮制Abstract：ObjectiveTo study analgesic and anti-inflammatory effects of different kinds of Corydalis yanhusuo.MethodsThe analgesic effect was tested by hot plate method and writhing body method in mice. The anti-inflammatory effect was tested by ear swollen method and capillary penetration method in mice. ResultsThe action of Corydalis yanhusuo Aeruginosae was more intensives. ConclusionCorydalis yanhusuo and its different processed products have marked analgesic and anti-inflammatory effects， of which the vinegar-product is more intensive.Key words：Corydalis yanhusuo; Analgesia; Anti-inflammation延胡索具活血化淤，行气止痛功效，临床常用于胸胁、脘腹疼痛，经闭痛经，产后淤阻，跌扑肿痛等证。
【doc】醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究
【doc】醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究新疆中医药2007年第25卷第2期(总第108期)醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究霾萑彝皇蜃中医医院(8300o0)赵翡翠赵晓琴李永和摘要目的:考察不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用所产生的影响.方法:采用HPLC法测定延胡索醋制品中延胡索乙素的含量,采用小鼠扭体法和热板法对比各醋制品镇痛作用.结果:醋制延胡索中延胡索乙素的含量高于生品,其中以醋烘品为最高;醋制延胡索的镇痛作用强于生品,:采用其中以醋烘品为优.结论醋烘法进行延胡索加工炮制可控,可行,有效,为延胡索加工炮制的规范化提供了新的可以借鉴的方法.关键词醋制廷胡索;延胡索乙素;镇痛;炮制延胡索为罂粟科紫堇属植物延胡索(CorydalisyanhusuoW.T.Wang)的干燥块茎,味辛,微苦,性温.归肝脾经,功能行气血,调月经,止疼痛,用治气血瘀滞诸痛证.延胡索有多种炮制方法,如醋炒,醋煮,醋蒸,酒炒,盐炒等.醋,味酸,苦,性温,具有散瘀止血,理气止痛作用,中医认为,醋能引药人肝,增强药物疏肝散瘀,止痛的功效,醋制能加强延胡索疏肝止痛的作用.现代研究表明延胡索主要含生物碱类成份,其中延胡索总生物碱,延胡索甲素,乙素,丑素均有镇痛作用,尤以延胡索乙素镇痛作用最强【1】.但延胡索乙素为叔胺型,亲脂型生物碱,游离时难溶于水,经醋制后,其生物碱与醋酸结合成易溶于水的醋酸盐,煎煮时易于溶出,从而更好地发挥药效,故临床上多以延胡索醋制品人药. 现延胡索多用醋炒,醋煮两种炮制方法,但工艺中不易于控制炮制温度和药材含水量,也不便于规范饮片炮制质量,尽管有关延胡索的炮制条件和含量变化的探讨,文献报道较多,但如何规范炮制 4讨论4.1国内糖尿病研究有应用STZ一次性剂量 5065mg/kg,数天后可产生持续性高血糖,但与糖尿病实际发病有一定差距[51.本实验用高脂饮食结合小剂量STZ注射的方法复制出糖尿病动物模型, 该模型具有中度高血糖,高血脂的特点,其发病过程及特征与2型糖尿病患者的代谢特点和临床过程比较相似,且造模方法简便易行,成功率高,重复性好,是研究2型糖尿病发病机制,相关并发症及药物学评价的理想模型.4.2本实验中,三黄消渴片低,高剂量组均能明显降低糖尿病大鼠血糖,而且随用药时间的延长,降糖作用增强.低剂量组降糖效果优于高剂量组,表明其降糖作用没有剂量依赖性.这些结果为我~f31t$ 床运用三黄消渴片治疗糖尿病提供了实验依据,至于其降糖作用的机制则有待进一步研究. 4.3在整个观察过程中,模型空白对照组出现典型的多饮,多食,多尿和明显消瘦,毛竖无光泽,跄卧拱背.阳性药物对照组也有类似改变,但程度较模型组轻.给药20天后服用三黄消渴片低,高剂量组大鼠的毛发,体重,精神状况,血糖值比阳性对照药物组和模型空白对照组相比均有明显改善. 4.4三黄消渴片低剂最组大鼠在喂药30天内全部存活,存活率100%.三黄消渴片高剂量组大鼠有3只死亡,存活率57.1%.模型空白对照组有4只死亡,存活率20%.阳性对照药物有4只死亡,存活率20%. 本研究结果表明,三黄消渴片具有一定的中医理论基础,且低剂量组在降低糖尿病高脂血症大鼠血糖的同时,对其消渴症状,体质,精神状态均有明显改善.表明三黄消渴片疗效肯定,可作为临床糖尿病治疗的辅助用药,充分发挥中医药标本兼治, 扶正祛邪的优势.】【1【2】【3】【4]【5】参考文献:E海科学技术出版社,1989:.83-102 苗述楷,蔡惠文.糖尿病并发症防治学【M】.北京:中国医药科技出版社,2000.陈奇.中药药理研究方法学【M].人民卫生出版社,1993. 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学【M】.人民卫生出版社,1982.粱海荣,唐焕文,罗皓,链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠肾病模型的建立.应用预防医学,2006,12(3):133-135. (收稿日期:2007-03—14)新疆中医药2007年第25卷第2期(总第108期)35 方法,改善目前各种市售的炮制品质量差异大的状况,还有待进一步验证.而据文献报道【21醋烘法具有易控制烘制温度和药材含水量,操作简单易行, 便于规范炮制品质量等优点,故本实验参照《中国药典》一部2005版延胡索药材项下测定醋烘法与醋炒法和醋煮法中延胡索乙素的含量,并进行小鼠镇痛作用的对比,对采用醋烘法炮制延胡索进行初步探索,以便为今后规范醋延胡索的炮制工艺和质量标准奠定基础.l仪器与试药Waters2695高效液相色谱仪(美国waters公QTM5超纯水仪(MilliporeCorporation, 司);Direct—Bedford,MA,U.S.A.);延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110726—200409),延胡索药材(新疆参茸药业有限公司,批号20060101),小白鼠:昆明种,体重l8—22g,由新疆医科大学动物中心提供(动物合格证号:医动字16—001).所用试剂均为分析纯.2方法与结果2.1延胡索炮制品的制延胡索生品:取延胡索药材捣碎成粗颗粒状, 颗粒度为过一号筛.醋炒延胡索:取延胡索粗颗粒,加入30%米醋拌匀,闷润至醋被吸尽后,置炒制容器内,用文火加热炒干,取出放凉.醋煮延胡索:取延胡索粗颗粒,加入30%米醋与适量清水(以平药面为宜),置煮制容器内,用文火加热煮至透心.醋液被吸尽时,取出晾干. 醋烘延胡索:取延胡索粗颗粒,加入30%米醋拌匀,至醋吸尽后,置烘箱中于8O?烘干,取出放凉. 2.2各炮制品中延胡索乙素含量测定2.2.1色谱条件色谱柱:4.6mmxl50mmVP—ODS C.柱,粒度5lxm;流动相:甲醇一O.1%磷酸(用三乙胺调pH至6.0)(55:45),流速:1.0ml?min;检测波长:280nm;柱温:35?,进样量:lOIxL. 2.2.2对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量,加甲醇制成每lmL含461xg的溶液,作为对照品溶液.2.2.3供试品溶液制备取延胡索各炮制品粉末 (过三号筛)lg,精密称定,置平底烧瓶中,精密加入浓氨试液一甲醇(1:20)50mL,称定重量,冷浸lh后加热回流lh,放冷,再称定重量,用浓氨试液一甲醇(1: 20)混合溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25mL,蒸干,残渣加甲醇溶解,定量转移至5mL容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,即得. 2.2.4线性关系的考察精密吸取延胡索乙素对照品溶液5,lO,l5,2O,25,30lxL在上述色谱条件下重复进样3次,测定峰面积,以峰面积平均值和浓度进行线性回归,得线性方程为:Y=998.03X+248.8,r=0.9997.延胡索乙素在0.234—1.403lxg之间具有良好的线性关系.2.2.5各炮制品中延胡索乙素的含量测定精密吸取各炮制品的供试品溶液201xL注入色谱柱,按外标峰面积法计算延胡索乙素的含量,结果见表1. 表1延胡索乙素含量测定结果2.3小鼠镇痛实验2.3.1样品液的制备嘲称取延胡索生品及炮制品各25g,分别置于1000mL烧杯中,用400mL和,每次保持微沸20min,用脱 250mL水分别煎煮2次脂棉过滤,合并滤液,浓缩至100mL,备用. 2.3.2扭体法圈取体重18~22g小鼠(雌雄各半)l00 只,随机分成5组,分别灌胃给予生理盐水及上述样品液,每只0.6mL,剂量分别为7.5g生药每kg体重.40min后,各鼠腹腔注射O.7%醋酸0.2mL,观察并记录15min内各鼠产生扭体反应(小鼠腹部受化学刺激后出现伸展后肢,腹部收缩,扭曲身体;腹部内凹呈蜂腰状,躯干与后肢伸张,臀部高起)的次数,由表 2可见,各样品组与生理盐水组比较小鼠扭体次数差异均有统计学意义(JP.O1),醋品镇痛作用均强于生品(JP.O1),其中以醋烘延胡索作用为强. 表2延胡索小鼠的镇痛作用(扭体法)与生理盐水组比较,?P<O.Ol;与生品组比较,AP<O.O12.3.3热板法昀取体重18~22g小鼠(雌性),调节恒温水浴水温在(55~0.5)?,将500mL烧杯放入其36新疆中医药2007年第25卷第2期(总第108期) 与给药前比较,'O.01;与生理盐水组比较,AP>0.05,AP<0.01;与生品组比较,?O.01中,使烧杯底部接触水面.小白鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时,就发生舔后足的特殊反应.从接触热板到舔后足所需要的时间作为痛阈值,以此为观察指标.每次取雌性小白鼠1只,放人烧杯内.记录自放人烧杯至出现舔后足所需时间(S),作为该鼠的痛阈值.凡30s内不出现舔后足者,弃之不用.依次测量各小鼠的痛阈值.取预选合格的小鼠100 只,随机分为5组,每组20只,重新测痛阈值1次. 将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值.各鼠分别灌胃给予生理盐水及上述样品液,每只 0.6mL,剂量分别为7.5g生药每kg体重,给药后的 30,60min测定各鼠痛域值.若小白鼠在热板上 60min无痛觉反应,应即取出,按60min结果计人表内,计算用药后痛域提高的百分率(结果见表3),可见各样品组镇痛作用均强于给药前和生理盐水组,醋品镇痛作用均强于生品(P<O.01),其中以醋烘法作用为强.痛阈提高百分率=(用药后平均痛阈值一用药前平均痛阈值)佣药前平均痛阈值X 1oo%3讨论中药饮片是在中医药理论指导下,根据辨证用药及调剂,制剂的需要,对中药材进行加工炮制的成品.炮制工艺包含着深厚的中医药理论与丰富的经验技艺,是中医药的特色,也是具有民族特色的独特制药技术,必须继承其中的精髓,勇于创新,使其应用科学化,规范化,正是基于此,本实验对比延胡索生品及其不同醋制品中延胡索乙素的含量变化,并进行了小鼠镇痛实验,结果表明:延胡索经醋炒,醋煮,醋烘后均能提高延胡索乙素的含量,从而证明了醋品的止痛作用增强的原因,同时醋烘品相对于醋炒品,醋煮品延胡索乙素含量稍高,可能是烘制温度较低,对延胡索乙素破坏较少的原因【7】. 扭体法和热板法两种镇痛实验表明,延胡索具有镇痛作用(P<O.01),且醋制延胡索的镇痛作用明显优于延胡索生品(P<O.01),醋烘法优于醋炒法和醋煮法,可得出采用醋烘法进行延胡索加工炮制从操作工艺上是可以控制的,从有效成份含量的测定来看是可行的,从药理实验结果来看是有效的,从而为延胡索加工炮制的规范化提供了新的可以借鉴的方法.参考文献[1]沙世炎,徐礼桑,严敏如,等.中草药有效成份分析法(上册).北京:人民卫生出版社,1985:53.[2]窦志英,孙巍.不同炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响.天津中医药大学,2006,25(3):186-187. [3]张化,张学兰.延胡索炮制现代研究.山东中医药大学,2001,25(2):l43一l44.[4]龚千峰.中药炮制学[M】.北京:中国中医药出版社,2003:201. [5]杨中林.中药炮制学实验与指导【M】.北京:中国中医药出版社, 20o3:84.[6]苗明三.实验动物和动物实验技术【M】.北京:中国中医药出版社.1997:130-145,187—190.[7]马民.元胡炮制的现代研究.时珍国医国药,2005,16(5):709. (收稿日期:2006-11-28)。
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【doc】醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究新疆中医药2007年第25卷第2期(总第108期)醋制延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用的对比研究霾萑彝皇蜃中医医院(8300o0)赵翡翠赵晓琴李永和摘要目的:考察不同醋制方法对延胡索中延胡索乙素含量及镇痛作用所产生的影响.方法:采用HPLC法测定延胡索醋制品中延胡索乙素的含量,采用小鼠扭体法和热板法对比各醋制品镇痛作用.结果:醋制延胡索中延胡索乙素的含量高于生品,其中以醋烘品为最高;醋制延胡索的镇痛作用强于生品,:采用其中以醋烘品为优.结论醋烘法进行延胡索加工炮制可控,可行,有效,为延胡索加工炮制的规范化提供了新的可以借鉴的方法.关键词醋制廷胡索;延胡索乙素;镇痛;炮制延胡索为罂粟科紫堇属植物延胡索(CorydalisyanhusuoW.T.Wang)的干燥块茎,味辛,微苦,性温.归肝脾经,功能行气血,调月经,止疼痛,用治气血瘀滞诸痛证.延胡索有多种炮制方法,如醋炒,醋煮,醋蒸,酒炒,盐炒等.醋,味酸,苦,性温,具有散瘀止血,理气止痛作用,中医认为,醋能引药人肝,增强药物疏肝散瘀,止痛的功效,醋制能加强延胡索疏肝止痛的作用.现代研究表明延胡索主要含生物碱类成份,其中延胡索总生物碱,延胡索甲素,乙素,丑素均有镇痛作用,尤以延胡索乙素镇痛作用最强【1】.但延胡索乙素为叔胺型,亲脂型生物碱,游离时难溶于水,经醋制后,其生物碱与醋酸结合成易溶于水的醋酸盐,煎煮时易于溶出,从而更好地发挥药效,故临床上多以延胡索醋制品人药. 现延胡索多用醋炒,醋煮两种炮制方法,但工艺中不易于控制炮制温度和药材含水量,也不便于规范饮片炮制质量,尽管有关延胡索的炮制条件和含量变化的探讨,文献报道较多,但如何规范炮制 4讨论4.1国内糖尿病研究有应用STZ一次性剂量 5065mg/kg,数天后可产生持续性高血糖,但与糖尿病实际发病有一定差距[51.本实验用高脂饮食结合小剂量STZ注射的方法复制出糖尿病动物模型, 该模型具有中度高血糖,高血脂的特点,其发病过程及特征与2型糖尿病患者的代谢特点和临床过程比较相似,且造模方法简便易行,成功率高,重复性好,是研究2型糖尿病发病机制,相关并发症及药物学评价的理想模型.4.2本实验中,三黄消渴片低,高剂量组均能明显降低糖尿病大鼠血糖,而且随用药时间的延长,降糖作用增强.低剂量组降糖效果优于高剂量组,表明其降糖作用没有剂量依赖性.这些结果为我~f31t$ 床运用三黄消渴片治疗糖尿病提供了实验依据,至于其降糖作用的机制则有待进一步研究. 4.3在整个观察过程中,模型空白对照组出现典型的多饮,多食,多尿和明显消瘦,毛竖无光泽,跄卧拱背.阳性药物对照组也有类似改变,但程度较模型组轻.给药20天后服用三黄消渴片低,高剂量组大鼠的毛发,体重,精神状况,血糖值比阳性对照药物组和模型空白对照组相比均有明显改善. 4.4三黄消渴片低剂最组大鼠在喂药30天内全部存活,存活率100%.三黄消渴片高剂量组大鼠有3只死亡,存活率57.1%.模型空白对照组有4只死亡,存活率20%.阳性对照药物有4只死亡,存活率20%. 本研究结果表明,三黄消渴片具有一定的中医理论基础,且低剂量组在降低糖尿病高脂血症大鼠血糖的同时,对其消渴症状,体质,精神状态均有明显改善.表明三黄消渴片疗效肯定,可作为临床糖尿病治疗的辅助用药,充分发挥中医药标本兼治, 扶正祛邪的优势.】【1【2】【3】【4]【5】参考文献:E海科学技术出版社,1989:.83-102 苗述楷,蔡惠文.糖尿病并发症防治学【M】.北京:中国医药科技出版社,2000.陈奇.中药药理研究方法学【M].人民卫生出版社,1993. 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学【M】.人民卫生出版社,1982.粱海荣,唐焕文,罗皓,链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠肾病模型的建立.应用预防医学,2006,12(3):133-135. (收稿日期:2007-03—14)新疆中医药2007年第25卷第2期(总第108期)35 方法,改善目前各种市售的炮制品质量差异大的状况,还有待进一步验证.而据文献报道【21醋烘法具有易控制烘制温度和药材含水量,操作简单易行, 便于规范炮制品质量等优点,故本实验参照《中国药典》一部2005版延胡索药材项下测定醋烘法与醋炒法和醋煮法中延胡索乙素的含量,并进行小鼠镇痛作用的对比,对采用醋烘法炮制延胡索进行初步探索,以便为今后规范醋延胡索的炮制工艺和质量标准奠定基础.l仪器与试药Waters2695高效液相色谱仪(美国waters公QTM5超纯水仪(MilliporeCorporation, 司);Direct—Bedford,MA,U.S.A.);延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110726—200409),延胡索药材(新疆参茸药业有限公司,批号20060101),小白鼠:昆明种,体重l8—22g,由新疆医科大学动物中心提供(动物合格证号:医动字16—001).所用试剂均为分析纯.2方法与结果2.1延胡索炮制品的制延胡索生品:取延胡索药材捣碎成粗颗粒状, 颗粒度为过一号筛.醋炒延胡索:取延胡索粗颗粒,加入30%米醋拌匀,闷润至醋被吸尽后,置炒制容器内,用文火加热炒干,取出放凉.醋煮延胡索:取延胡索粗颗粒,加入30%米醋与适量清水(以平药面为宜),置煮制容器内,用文火加热煮至透心.醋液被吸尽时,取出晾干. 醋烘延胡索:取延胡索粗颗粒,加入30%米醋拌匀,至醋吸尽后,置烘箱中于8O?烘干,取出放凉. 2.2各炮制品中延胡索乙素含量测定2.2.1色谱条件色谱柱:4.6mmxl50mmVP—ODS C.柱,粒度5lxm;流动相:甲醇一O.1%磷酸(用三乙胺调pH至6.0)(55:45),流速:1.0ml?min;检测波长:280nm;柱温:35?,进样量:lOIxL. 2.2.2对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量,加甲醇制成每lmL含461xg的溶液,作为对照品溶液.2.2.3供试品溶液制备取延胡索各炮制品粉末 (过三号筛)lg,精密称定,置平底烧瓶中,精密加入浓氨试液一甲醇(1:20)50mL,称定重量,冷浸lh后加热回流lh,放冷,再称定重量,用浓氨试液一甲醇(1: 20)混合溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25mL,蒸干,残渣加甲醇溶解,定量转移至5mL容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,即得. 2.2.4线性关系的考察精密吸取延胡索乙素对照品溶液5,lO,l5,2O,25,30lxL在上述色谱条件下重复进样3次,测定峰面积,以峰面积平均值和浓度进行线性回归,得线性方程为:Y=998.03X+248.8,r=0.9997.延胡索乙素在0.234—1.403lxg之间具有良好的线性关系.2.2.5各炮制品中延胡索乙素的含量测定精密吸取各炮制品的供试品溶液201xL注入色谱柱,按外标峰面积法计算延胡索乙素的含量,结果见表1. 表1延胡索乙素含量测定结果2.3小鼠镇痛实验2.3.1样品液的制备嘲称取延胡索生品及炮制品各25g,分别置于1000mL烧杯中,用400mL和,每次保持微沸20min,用脱 250mL水分别煎煮2次脂棉过滤,合并滤液,浓缩至100mL,备用. 2.3.2扭体法圈取体重18~22g小鼠(雌雄各半)l00 只,随机分成5组,分别灌胃给予生理盐水及上述样品液,每只0.6mL,剂量分别为7.5g生药每kg体重.40min后,各鼠腹腔注射O.7%醋酸0.2mL,观察并记录15min内各鼠产生扭体反应(小鼠腹部受化学刺激后出现伸展后肢,腹部收缩,扭曲身体;腹部内凹呈蜂腰状,躯干与后肢伸张,臀部高起)的次数,由表 2可见,各样品组与生理盐水组比较小鼠扭体次数差异均有统计学意义(JP.O1),醋品镇痛作用均强于生品(JP.O1),其中以醋烘延胡索作用为强. 表2延胡索小鼠的镇痛作用(扭体法)与生理盐水组比较,?P<O.Ol;与生品组比较,AP<O.O12.3.3热板法昀取体重18~22g小鼠(雌性),调节恒温水浴水温在(55~0.5)?,将500mL烧杯放入其36新疆中医药2007年第25卷第2期(总第108期) 与给药前比较,'O.01;与生理盐水组比较,AP>0.05,AP<0.01;与生品组比较,?O.01中,使烧杯底部接触水面.小白鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时,就发生舔后足的特殊反应.从接触热板到舔后足所需要的时间作为痛阈值,以此为观察指标.每次取雌性小白鼠1只,放人烧杯内.记录自放人烧杯至出现舔后足所需时间(S),作为该鼠的痛阈值.凡30s内不出现舔后足者,弃之不用.依次测量各小鼠的痛阈值.取预选合格的小鼠100 只,随机分为5组,每组20只,重新测痛阈值1次. 将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值.各鼠分别灌胃给予生理盐水及上述样品液,每只 0.6mL,剂量分别为7.5g生药每kg体重,给药后的 30,60min测定各鼠痛域值.若小白鼠在热板上 60min无痛觉反应,应即取出,按60min结果计人表内,计算用药后痛域提高的百分率(结果见表3),可见各样品组镇痛作用均强于给药前和生理盐水组,醋品镇痛作用均强于生品(P<O.01),其中以醋烘法作用为强.痛阈提高百分率=(用药后平均痛阈值一用药前平均痛阈值)佣药前平均痛阈值X 1oo%3讨论中药饮片是在中医药理论指导下,根据辨证用药及调剂,制剂的需要,对中药材进行加工炮制的成品.炮制工艺包含着深厚的中医药理论与丰富的经验技艺,是中医药的特色,也是具有民族特色的独特制药技术,必须继承其中的精髓,勇于创新,使其应用科学化,规范化,正是基于此,本实验对比延胡索生品及其不同醋制品中延胡索乙素的含量变化,并进行了小鼠镇痛实验,结果表明:延胡索经醋炒,醋煮,醋烘后均能提高延胡索乙素的含量,从而证明了醋品的止痛作用增强的原因,同时醋烘品相对于醋炒品,醋煮品延胡索乙素含量稍高,可能是烘制温度较低,对延胡索乙素破坏较少的原因【7】. 扭体法和热板法两种镇痛实验表明,延胡索具有镇痛作用(P<O.01),且醋制延胡索的镇痛作用明显优于延胡索生品(P<O.01),醋烘法优于醋炒法和醋煮法,可得出采用醋烘法进行延胡索加工炮制从操作工艺上是可以控制的,从有效成份含量的测定来看是可行的,从药理实验结果来看是有效的,从而为延胡索加工炮制的规范化提供了新的可以借鉴的方法.参考文献[1]沙世炎,徐礼桑,严敏如,等.中草药有效成份分析法(上册).北京:人民卫生出版社,1985:53.[2]窦志英,孙巍.不同炮制方法对延胡索中延胡索乙素含量的影响.天津中医药大学,2006,25(3):186-187. [3]张化,张学兰.延胡索炮制现代研究.山东中医药大学,2001,25(2):l43一l44.[4]龚千峰.中药炮制学[M】.北京:中国中医药出版社,2003:201. [5]杨中林.中药炮制学实验与指导【M】.北京:中国中医药出版社, 20o3:84.[6]苗明三.实验动物和动物实验技术【M】.北京:中国中医药出版社.1997:130-145,187—190.[7]马民.元胡炮制的现代研究.时珍国医国药,2005,16(5):709. (收稿日期:2006-11-28)。