DNA与蛋白质等杂质的溶解性比较
DNA粗提取与鉴定-2023年高考生物一轮复习(新高考专用)
④再次溶解并析出DNA
D试剂
D试剂是什么，其作用是什么？ 95%的冷酒精，DNA不溶于酒精，使DNA析出， 同时除去能溶于酒精中杂质。
析出DNA
⑤DNA的鉴定
①原理
沸水浴
②如何设置对照？
对照组： 一定量的2mol/L的NaCl溶液 实验组： 等量的2mol/L的NaCl+DNA溶液
③预期实验结果 对照组无颜色变化，实验组出现蓝色。
2023高考
微专题31
DNA粗提取与鉴定
【高考再现】
(2022山东高考T13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ B ）
A．过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 B．离心研磨液是为了加速DNA的沉淀 C．在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色 D．粗提取的DNA中可能含有蛋白质 【解答】解：A、过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行可以使酶的活性降低，可以防止 DNA降解，A正确； B、离心研磨液是为了加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质等的沉淀，B错误； C、在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，C正确； D、粗提取的DNA中可能含有蛋白质，D正确。
（进一步提纯）
⑤DNA的鉴定
用高浓度的盐溶液溶 解DNA，能除去不能溶解 在其中的杂质；
用低浓度的盐溶液和 酒精使DNA析出，能除去 溶解在其中的杂质。
因此，通过反复溶解 于析出DNA，就能够除去 DNA中的杂质。
03. 总结分析鸡血细胞吸水涨破
第二次
稀释NaCl溶液，使DNA逐渐析出
案例.鸡血细胞的DNA粗提取与鉴定
①制备鸡血细胞液
思考：加入柠檬酸钠的作用是什么？ 防止血液凝固
②破碎细胞，释放核物质 A试剂
人教版高中生物选择性必修第3册 DNA的提取和鉴定
为2 mL的4种不同溶液中，经搅拌后过滤，获得4种滤液，含DNA最少的是滤液 (填
表中字母)。
• 洗涤剂——离子去污剂，能溶解细胞膜，利于DNA释放 • 食 盐——NaCl，利于DNA的溶解于研磨液中 • 研磨不充分——使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少
破碎鸡血细胞，获取细胞核物质
【思考】：获取含细胞核的滤液中的可能有哪些细胞成分？ 可能有DNA、核蛋白、多糖、脂质和RNA等杂质。
过滤
溶解 滤液中
不溶解 滤渣中
去除杂质，将 DNA 与 其 他 大
滤 液 中 加 入 95% 冷 却 酒精
DNA不溶于酒精，某些蛋 白质杂质可溶
分子分离
玻璃棒卷起丝状物
DNA析出
溶液中
DNA的鉴定
A：2mol/L的NaCl+提取 •DNA 溶 解 于 2mol/L 的
丝状物+二苯胺
NaCl中
B：2mol/L的NaCl+二苯 •沸水浴中，DNA遇二苯
【例1】 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验相关操作中所 选取的试剂，错误的是（ B ）
【例2】下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置，请回答 下列相关的问题：
(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡 血细胞液中有较高含量的_D_N__A____。 (2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是使血细胞吸水涨破， 通过图B所示的步骤取得滤液，再在滤液中加入质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液的目的是__使__滤__液__中_的__D_N__A_溶__于_N__a_C_l溶__液___。 (3)图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的__使__D_N__A_析__出________。
胺
高中生物一轮复习 第45讲 DNA和蛋白质技术课件
• (2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 • 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。 大多数蛋白质不能忍受60℃～80℃的高温，而 DNA在80℃以上时才会变性，洗涤剂能够溶解细 胞膜，但对DNA没有影响。 • (3)DNA的热变性 • DNA分子在细胞内复制或转录时，在解旋酶的 作用下使氢键断裂，而在体外，DNA在80℃～ l00℃的温度范围内变性，即双螺旋解开，成为单 链；当温度慢慢降低后，两条彼此分离的单链又 会重新结合形成双链。但高温能使DNA聚合酶变 性失活，后来发现了耐高温的TaqDNA聚合酶， 解决了上述矛盾。
细胞内 在解旋酶作用下，细胞提 供能量，部分解开
一小段RNA 在引物基础上，一条链连 续合成，另一条链不连续 合成
微量离心管内 加热至90℃，双链全部解开，不需解 旋酶
可以是RNA或单链DNA分子片段 分别从两条链的引物端开始，都是连 续合成，控制温度72℃
特点
DNA聚合酶 循环次数 相同点
边解旋边复制，半保留复 制
第二步复性
55℃～60℃
第三步 延伸合成
70℃～75℃
将反应体系升温至70℃～75℃，在耐高温 的DNA聚合酶催化作用下，将与模板互补 的单个核苷酸加到引物所提供的3 7一OH 上，使DNA链延伸，产生一条与模板链互 补的DNA链。
• (6)结果：上述三步反应完成后，一个DNA 分子就变成了两个DNA分子，随着重复次 数的增多，DNA分子就以2”的形式增加。 PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成 的。
• 【例3】红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机 能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能 是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、 羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分 离血红蛋白，请回答下列有关问题： • (1)以上所述的过程即是样品处理，它包 括 、 、分离血红蛋白溶液。 • (2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透 析，这就是样品的粗分离。 • ①透析的目的是 。 • ②透析的原理是 。
专题5课题1 DNA的粗提取与鉴定
思考： 阅读教材中（ 思考 ： 阅读教材中 （ P55-56） 的三个方 ） 分析： 案 ， 分析 ： 方案二与方案三的原理有什 么不同？ 么不同？ 答 ： 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白， 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白， 从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案 与蛋白质分开； 从而使提取的 与蛋白质分开 三利用的是DNA和蛋白质对高温的耐受 三利用的是 和蛋白质对高温的耐受 性的不同，从而使蛋白质变性， 性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA 分离。 分离。
实验设计
（一）实验材料的选取 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 （三）去除滤液中的杂质 思考： 思考：此步骤获得的滤液中可能含有 哪些细胞成分？ 哪些细胞成分？ 可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂 答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂 质。
实验设计
思考：为什么反复地溶解与析出DNA， 思考：为什么反复地溶解与析出 ， 能够去除杂质？ 能够去除杂质？ 用高浓度的盐溶液溶解DNA，可以 答 ：用高浓度的盐溶液溶解 ， 除去在高浓度盐溶液中不能溶解的杂质。 除去在高浓度盐溶液中不能溶解的杂质 。 用低浓度的盐溶液析出DNA，可以除去 用低浓度的盐溶液析出 ， 溶解在低浓度盐溶液中的杂质。因此， 溶解在低浓度盐溶液中的杂质 。 因此 ， 通过反复地溶解与析出DNA，就能够除 通过反复地溶解与析出 ， 去与DNA溶解度不同的多种杂质。 溶解度不同的多种杂质。 去与 溶解度不同的多种杂质
基础பைடு நூலகம்识
DNA的鉴定 （四）DNA的鉴定
请阅读《教材》 内容， 请阅读《教材》P54内容，分析： 内容 分析： 思考：DNA鉴定时用到什么试剂 鉴定时用到什么试剂？ 思考：DNA鉴定时用到什么试剂？需要什么条 呈现什么颜色？ 件？呈现什么颜色？ 试剂：二苯胺。 试剂：二苯胺。 条件：沸水浴。 条件：沸水浴。 现象：溶液呈现蓝色。 现象：溶液呈现蓝色。
生物选修一知识点总结（2）
生物选修一知识点总结（2）下列不属于酶制剂的是A.蛋白酶B.脂肪酶C.淀粉酶D.麦芽糖酶解析：目前常用的酶制剂有四大类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。
其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。
碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。
脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更强的去污能力。
《酵母细胞的固定化》一、基础知识酶：优点：催化效率高，低耗能、低污染，大规模地应用于食品、化工等各个领域。
实际问题：对环境条件敏感，易失活;溶液中的酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本;反应后的酶会混合在产物中，如不除去，会影响产品质量。
设想：固定化酶：优点实际问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的设想：固定化细胞：优点二、固定化酶的应用实例高果糖浆是指能将葡萄糖转化为果糖的酶是。
使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的。
酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。
生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。
反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。
三、固定化细胞技术固定化酶和固定化细胞是利用或方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括、和法。
一般来说，酶更适合采用和法固定，而细胞多采用法固定化。
这是因为细胞个大，而酶分子很小;个大的细胞难以或，而个小的酶容易从中漏出。
包埋法法固定化细胞即将微生物细胞包埋在不溶于水的中。
常用的载体有、、、和等。
四、实验操作(一)制备固定化酵母细胞制备固定化酵母细胞需要的材料是、、、、、、、、和1.酵母菌的活化活化就是处于状态的微生物重新恢复正常的生活状态。
福建省南平市2023-2024学年高二下学期期末考试生物word版含解析
具体操作
裂解
香蕉去皮剪碎，加入食盐水及5滴洗洁精（替代研磨液），充分研磨
分离
在研磨液中加入2g嫩肉粉（有效成分是木瓜蛋白酶），混合均匀后适温加热
沉淀
冷却后加入等体积、预冷的体积分数为95%的酒精；静置后挑取白色絮状析出物
鉴定
加入二苯胺试剂
A.研磨的目的是裂解细胞膜，同时释放出DNA等物质
B.适温加热可以加快嫩肉粉对多糖和蛋白质的水解
C.用黑藻叶片观察质壁分离现象时，叶绿体的存在会干扰观察
D.污染严重的水体中培育黑藻，定期移除处理可逐步改善水质
5.基因工程、发酵工程等现代生物技术广泛应用于农牧业、医药卫生和食品工业等方面。下列相关叙述，错误的是（ ）
A.利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的化学防治
B.采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白
A.细胞器甲是具有双层膜 细胞器，是葡萄糖分解产生丙酮酸的场所
B.细胞器乙是一种具有单层膜的细胞器，可能是蛋白加工、分类和包装的车间
C.细胞器丙的化学成分主要是DNA和蛋白质，是家鸽细胞“生产蛋白质的机器”
D.家鸽红细胞成熟过程中内部结构发生改变，无细胞核，也无上述三种细胞器
9.生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也需关注它的安全性。下列有关应用实践，不符合生物技术安全规范的是（ ）
D.野果研磨液用斐林试剂检测，出现砖红色沉淀说明其中含葡萄糖
4.黑藻是一种叶片薄且叶绿体较大的多年生沉水植物，是生物学实验常用的材料。黑藻能够吸收重金属离子、降解某些农药等污染物，因此可以作为净化水质的先锋植物。下列相关叙述，错误的是（ ）
A.黑藻适应水下的弱光环境，幼嫩的叶片可直接制成临时装片
B.观察细胞质流动前，将黑藻放在光照、温度适宜条件下培养
高中生物 专题 DNA和蛋白质技术 课题 DNA的粗提取与鉴定素材2
专题5 DNA和蛋白质技术课题1 DNA的粗提取与鉴定庖丁巧解牛知识•巧学一、提取DNA的方法1.基本思路利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的理化性质（1）DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,此外，DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
利用上述特点可达到分离DNA的目的.(2）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。
大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温，而DNA在80 ℃以上才会变性。
洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响.要点提示 DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系：当NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时，随浓度的升高，DNA 的溶解度降低；当NaCl溶液浓度高于0.14 mol/L时，随浓度升高，DNA的溶解度升高。
3。
DNA的鉴定DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定Ｄ。
Ａ的试剂.知识拓展蛋白质的溶解度与盐溶液浓度的关系：在中性盐溶液中，低浓度时，蛋白质的溶解度较高即盐溶现象；高浓度时，蛋白质的溶解度较低，并可析出即盐析现象.二、实验设计1。
实验材料的选取一定要选取DNA含量较高的生物材料,否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难.2。
破碎细胞，获取含DNA的滤液以动物细胞为实验材料时,破碎细胞较容易，例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。
以植物细胞为材料时，充分研磨破坏了细胞壁，洗涤剂中的表面活性剂成分能够与膜蛋白结合从而破坏细胞膜，这些为核DNA的释放提供了通道.3.去除滤液中的杂质根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将DNA与杂质分开。
4.DNA的析出与鉴定难点剖析在DNA的析出步骤中，用玻璃棒搅拌时,注意动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
专题2--DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取
卓越个性化教案 GFJW0901学生姓名 年级 授课时间 教师姓名 张明志 课时 2h课 题专题2--DNA 和蛋白质技术、植物有效成分的提取教学目标1．PCR 技术的基本操作和应用 2．蛋白质的提取和分离3．从生物材料中提取某些特定的成分重 点1．DNA 粗提取的原理、方法和注意事项 2．PCR 技术操作及原理 3．蛋白质提取的原理和方法4．提取芳香油的三种常用方法及适用范围难 点1．DNA 粗提取的原理、方法和注意事项 2．PCR 技术操作及原理 3．蛋白质提取的原理和方法作 业判断下列说法是否正确：1．DNA 溶解度随NaCl 溶液浓度的下降而降低( ) 2．PCR 是一种体外迅速扩增DNA 片段的技术，扩增过程同细胞内DNA 分子的复制完全一样( )3．血红蛋白的提取和分离需要模拟生物体的状态配制一定pH 的缓冲溶液( ) 4．可以用牛、马、羊的血进行DNA 的提取( ) 5．玫瑰精油可用蒸馏法和压榨法来提取( )提示： 1.× 2.× 3.√ 4.× 5.×一、DNA 的粗提取与鉴定 1．DNA 的溶解性DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同，在浓度为 时DNA 的溶解度最小；此外DNA 不溶于 0.14mol/L ，但是细胞中的某些蛋白质则可溶于酒精。
2．DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。
二、RCR 技术1．PCR 原理：在一定的缓冲溶液中提供DNA 模板，分别与两条模板链结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA 聚合酶，同时控制温度使DNA 复制在体外反复进行。
2．PCR 的反应过程：变性→ 复性 →延伸。
[疑点扫描] PCR 扩增与生物体内DNA 复制的区别在于：PCR 不需要解旋酶，而生物体内DNA 复制时需要解旋酶；PCR 需要耐热的DNA 聚合酶，而生物体内DNA 聚合酶在高温时会变性；PCR 一般需经三十多次循环，而生物体内DNA 复制需要生物体自身的控制 。