蛋白质溶解度的测定
蛋白质溶解度
分析结果计算
15/75=x/1.5g=0.3gx ps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋 白含量×100%
注意事项
不同样品的粒度应相同。 不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应 一致 。
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试剂
a) 氢氧化钾（分析纯），无水硫酸钾、五 水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲 酚绿、硫酸铵； b) 浓硫酸、盐酸（分析纯）、95%乙醇、 蒸馏水。
仪器和设备
a) 感量为0.0001 g分析天平； b) 磁力搅拌器； c) 离心机； d) 样品粉碎机； e) 60目分析筛； f) 电炉； g) 100 mL或250 mL凯氏烧瓶； h) 凯氏蒸馏装置； i) 250 mL锥形瓶； j) 1000 mL容量瓶； k) 微量滴定管。
试样处理
称取试样1.5 g（准确至0.0002 g）置于 250 mL烧杯中，准确移入 0.042 M氢氧化 钾溶液75 mL，磁力搅拌20 min，然后将 试样转移至离心管中，以2700 r/min的速 度离心10 min。
测定
吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照 GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中 可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白 质的含量。
蛋白质溶解度
在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白 质质量占试样中总蛋白质量的百分数。 NSI 通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白 通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白 质分散指数（(PDI)来表示。 质分散指数（(PDI)来表示。
原理
用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可 溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提 取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加 出试样中可溶性蛋白质含量； 同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算 出试样的蛋白溶解度。
蛋白质的性质实验二-蛋白质的等电点测定和沉淀反应
蛋白质沉淀反应结果分析
要点一
蛋白质沉淀反应原理
当溶液的pH值低于或高于蛋白质的 等电点时，蛋白质带负电荷或正电荷 ，容易与其他带相反电荷的物质发生 静电吸引而产生沉淀。沉淀反应可用 于分离纯化和测定蛋白质含量。
要点二
实验结果
实验观察到在pH值低于或高于等电 点时，蛋白质出现沉淀现象。通过离 心分离和称重，测定了沉淀物中蛋白 质的质量和含量。实验结果表明，该 蛋白质在不同pH值下的沉淀效果显 著，可用于蛋白质的分离纯化和含量 测定。
实验试剂
盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、磷酸盐缓冲液等。
配置不同pH值的缓冲液
选择适当的缓冲液，如醋酸-醋酸钠缓 冲液、磷酸盐缓冲液等。
根据需要配置不同pH值的缓冲液，确 保缓冲液的准确性和稳定性。
蛋白质溶液的等电点测定
将蛋白质溶液与不同pH值的缓冲液混合，观察蛋白质的溶解度变化。
当蛋白质溶解度最低时，记录对应的pH值，即为该蛋白质的等电点。
了解蛋白质的沉淀反应及原理
沉淀反应
蛋白质在某些条件下，失去溶解性从 溶液中析出的现象。
原理
蛋白质的沉淀反应通常与溶液的pH值 、离子强度、温度等因素有关，当这 些因素发生变化时，蛋白质的溶解度 可能会降低，导致沉淀的产生。
02
实验原理
蛋白质等电点的概念及影响因素
蛋白质等电点
蛋白质分子在溶液中处于净电中性状态时的pH值，此时蛋白质的溶解度最低。
通过测定不同pH值下的蛋白质电导率，确定了蛋 白质的等电点。
在实验过程中，观察到了蛋白质的溶解度变化和 电荷性质的变化。
分析实验结果与理论预期的差异
实验结果与理论预期基本一致，没有出现明显的偏差。
实验结果支持了蛋白质等电点沉淀的理论，即当溶液pH值等于蛋白质等电点时，蛋白质溶解度最低， 容易发生沉淀。
蛋白质的起泡性测定方法
一．蛋白质的起泡性测定方法1.配制l0ml 1%蛋白分散液（pH 8. 05的0.05mo1/L Tris-HC1缓冲液），在室温的条件下，利用高速分散机均质l min，快速转移到25m1的量筒中，，每30min记录一次泡沫体积。
每个样品重复三次，取平均值。
2.采用搅打发泡测定法[29]：将蛋清蛋白溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中，配成3%的蛋清蛋白溶液。
取200ml3%的蛋清蛋白溶液，在A-88组织捣碎匀浆机中，以8000r/min的转速打泡3min,测其泡沫体积，记录为V0，按下式计算起泡度（FAI）： FAI(%)=(V0-200/200) ×100静置30分钟后，测泡沫体积，记录为V1，按下式计算泡沫稳定性（FS）：FS(%)= (V1-200/200 )×1003.参照Hammershoj 等介绍的方法[36]。
首先将全蛋液稀释到5%（v/v），然后取100mL的稀释液，10000r/min速度搅拌1min。
记录均质停止时和停止后30min的泡沫体积与液体体积，起泡力与泡沫稳定性分别用OR与FS表示，计算公式如下：起泡性（OR）=Vf0 /Vli 2-3泡沫稳定性（FS）=Vf30/Vf0 2-4式2-3 与2-4中：Vf0—零时刻时泡沫的体积（mL）；Vli—初始阶段的液体体积（100mL）；Vf30—静置 30min后的泡沫体积。
Hammershoj, M., Qvist, K. B. Importance of hen age and egg storage time for egg albumen foaming [J]. Lebensmittel-Wissenschaft-Technologie, 2001, 34: 118–120.4.二．乳化性及乳化稳定性的测定方法用0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）配制1%的蛋白样品，取1 mL色拉油与3 mL待测溶液于均质机中均质剪切1min，分别于0min和10min时从底部取50 μL用0.1% SDS 25 mL稀释后测OD500乳化活性指数(EA I)=(2.303 × 2 × OD500)/(C × Φ ×L)乳状液稳定指数(ES)=OD500× Δt/ΔOD500式中：EAl ——每克蛋白质的乳化面积，m2/g；Φ——油相所占的分数，在本实验中油相占1/4；C——蛋白质的浓度，1%；L——比色池光径，10mm。
蛋白质在盐溶液中的溶解度曲线
蛋白质在盐溶液中的溶解度曲线
蛋白质是生物体内非常重要的有机分子，它们在细胞代谢、信号传递、免疫系统等多个生物学过程中发挥着至关重要的作用。
然而，蛋白质在盐溶液中的溶解度问题一直是制约其应用的重要因素之一。
蛋白质在盐溶液中的溶解度通常会受到多种因素的影响，其中最主要的因素之一就是盐的种类和浓度。
一些盐比如硫酸铵和硫酸钠，可以增加蛋白质的溶解度，而另一些盐比如氯化钠则会降低蛋白质的溶解度。
为了研究蛋白质在盐溶液中的溶解度变化规律，科学家们通常会制作蛋白质在不同盐浓度下的溶解度曲线。
这些曲线能够反映蛋白质在不同盐浓度下的相对溶解度，从而帮助科学家更好地理解蛋白质的化学性质和生物学特性。
通过对不同种类、不同浓度的盐对蛋白质溶解度的影响进行研究和分析，科学家们可以为蛋白质的应用和开发提供更加可靠和有效的技术支持，从而推动生物技术和医学领域的发展。
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蛋白质盐析实验报告
一、实验目的1. 了解蛋白质盐析的原理和过程。
2. 掌握蛋白质盐析实验的操作步骤。
3. 通过实验观察蛋白质盐析现象，验证盐析对蛋白质溶解度的影响。
二、实验原理蛋白质盐析是指在高浓度的中性盐溶液中，由于盐离子与蛋白质争夺水分子，破坏了蛋白质的水化层，导致蛋白质溶解度降低，从而从溶液中沉淀出来的现象。
实验中常用的盐析剂有硫酸铵、硫酸钠等。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：鸡蛋清、硫酸铵、蒸馏水、试管、试管架、磁力搅拌器等。
2. 试剂：硫酸铵饱和溶液、蒸馏水。
四、实验步骤1. 取一个干净的试管，加入2ml鸡蛋清溶液。
2. 向试管中加入2ml蒸馏水，充分混合。
3. 向试管中加入1ml硫酸铵饱和溶液，用磁力搅拌器搅拌，观察蛋白质沉淀现象。
4. 继续加入硫酸铵饱和溶液，观察蛋白质沉淀量的变化。
5. 记录实验现象，包括沉淀的形态、颜色、溶解度等。
五、实验结果与分析1. 实验现象：随着硫酸铵饱和溶液的加入，蛋白质逐渐沉淀，形成白色絮状沉淀。
继续加入硫酸铵饱和溶液，沉淀量逐渐增多，但沉淀的形态和颜色没有明显变化。
2. 分析：蛋白质盐析现象的发生是由于硫酸铵饱和溶液中的盐离子与蛋白质争夺水分子，破坏了蛋白质的水化层，导致蛋白质溶解度降低。
实验结果验证了盐析对蛋白质溶解度的影响。
六、实验结论1. 盐析是蛋白质分离纯化的一种常用方法，通过调节盐浓度，可以使蛋白质从溶液中沉淀出来。
2. 盐析过程中，盐离子与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质的水化层，导致蛋白质溶解度降低。
3. 实验结果验证了盐析对蛋白质溶解度的影响，为蛋白质分离纯化提供了理论依据。
七、实验注意事项1. 实验过程中应严格控制硫酸铵饱和溶液的加入量，以免影响实验结果。
2. 实验操作要规范，避免污染。
3. 实验过程中要注意观察现象，及时记录实验数据。
八、实验拓展1. 探究不同盐离子对蛋白质盐析的影响。
2. 研究蛋白质盐析过程中，盐浓度与蛋白质沉淀量的关系。
3. 利用蛋白质盐析技术进行蛋白质分离纯化实验。
蛋白质功能性质的检测
蛋白质功能性质的检测蛋白质的功能性质的一般是指能使蛋白质成为人们所需要的食品特征而具有的物理化学性质，即对食品的加工、贮藏、销售过程中发生作用的那些性质，这些性质对食品的质量和风味起着重要的作用。
蛋白质的功能性质与蛋白质在食品体系中的用途有着十分密切的关系，是开发和有效利用蛋白质资源的重要依据。
蛋白质的功能性质可以分为水化性质、表面性质、蛋白质-蛋白质相互作用的有关性质三个主要类型，主要包括有吸水性、溶解性、保水性、分散ing、粘度合粘着性、乳化性、起泡性、凝胶作用的等等。
一、实验目的通过本实验定性地了解蛋白质的主要功能性质。
二、实验材料、试剂和仪器2.1. 实验材料2.1.1 2%蛋清蛋白溶液：取2g蛋清加98ml蒸馏水稀释，过滤取清夜。
2.1.2 卵黄蛋白：鸡蛋除蛋清后剩下的蛋黄捣碎。
2.2 试剂2.2.1 硫酸铵、饱和硫酸铵溶液2.2.2 氯化钠、饱和氯化钠溶液2.2.3 花生油2.2.4 酒石酸2.3 仪器若干试管、100ml烧杯、冰箱、均质机三、操作步骤3.1蛋白质水溶性的测定在10ml试管中加入0.5ml蛋清蛋白，加入5ml水，摇匀，观察其水溶性，有无沉淀产生。
在溶液中逐滴加入饱和氯化钠溶液，摇匀，得到澄清的蛋白质的氯化钠溶液。
取上述蛋白质的氯化钠溶液3ml，加入3ml饱和硫酸铵溶液，观察球蛋白的沉淀析出，再加入粉末硫酸铵至饱和，摇匀，观察清蛋白从溶液中析出，解释蛋清蛋白质在水中及氯化钠溶液中的溶解度以及蛋白质沉淀的原因。
3.2蛋白质乳化性的测定取10g卵黄蛋白于均质机料液瓶中，加入90g 水，加入5ml花生油，均质1min后，取约10ml于试管中；另取100g水于均质机料液瓶中，加入5ml花生油，进行均质1min后，取约10ml于试管中，两试管中液面相平即可，然后将两支试管放在试管架上，每隔15min观察一次，共观察4次，观察油水是否分离。
3.3蛋白质起泡性的测定(1) 在二个100ml的烧杯中，各加入2%的蛋清蛋白溶液30ml，一份用玻璃棒不断搅打1~2min；另一份用吸管不断吹入空气泡1~2min，观察泡沫的生成、泡沫的多少及泡沫稳定时间的长短。
利用蛋白质的溶解度来分离的方法
利用蛋白质的溶解度来分离的方法利用蛋白质的溶解度来分离的方法如下：
1、蛋白质的盐析法：中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析。
2、等电点沉淀法：蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。
3、低温有机溶剂沉淀法：用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分辨力比盐析高，但蛋白质较易变性，应在低温下进行。
蛋白质溶解度的测定
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蛋白溶解度的测定
一、适用范围：本方法适用于豆粕生熟度的检测
二、定义蛋白溶解度是根据蛋白质在一定含量的KOH溶解PRO的质量。
三、分析结果：生大豆的PS达100%，在日常分析中，当PS大于85%则认为大豆粕过生。
当PS小于75%则认为大豆粕过熟。
PS在80%左右时大豆粕加工适度。
四、试剂：本方法除特殊注明外，试剂均为分析纯，水均为蒸馏水。
1 .氢氧化钾溶液：0.2% 相当于0.042mol/L,PH12.5。
2. 其它试剂为凯氏定氮所需的标准试剂。
3. 称取2.360gKOH于容量瓶中，加水溶解并稀释至1000ml。
注意补充KOH试剂的纯度。
（KOH纯度为82%时应称取量为2.878g。
五、测定方法称取粉细（防止过热）后的豆粕1.5g与250ml烧杯中。
加75ml氢氧化钾，在磁力搅拌器上搅拌20min，将溶液转至离心管中，用2700r·min速度离心10min后过滤。
吸取滤液15ml，放入消化管中，用凯氏定氮法测定其中的PRO的含量，此含量相当于0.3g试样中溶解的蛋白质量。
加入12ml硫酸和催化剂进行消化。
（后面的步骤与粗蛋白的方法一样）
六、测定结果的计算与分析
Ps=（0.3g样品中粗蛋白质的含量/原样中粗蛋白质的含量）*100。