氢氧化钾蛋白质溶解度的测定
蛋白质溶解度
分析结果计算
15/75=x/1.5g=0.3gx ps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋 白含量×100%
注意事项
不同样品的粒度应相同。 不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应 一致 。
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试剂
a) 氢氧化钾（分析纯），无水硫酸钾、五 水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲 酚绿、硫酸铵； b) 浓硫酸、盐酸（分析纯）、95%乙醇、 蒸馏水。
仪器和设备
a) 感量为0.0001 g分析天平； b) 磁力搅拌器； c) 离心机； d) 样品粉碎机； e) 60目分析筛； f) 电炉； g) 100 mL或250 mL凯氏烧瓶； h) 凯氏蒸馏装置； i) 250 mL锥形瓶； j) 1000 mL容量瓶； k) 微量滴定管。
试样处理
称取试样1.5 g（准确至0.0002 g）置于 250 mL烧杯中，准确移入 0.042 M氢氧化 钾溶液75 mL，磁力搅拌20 min，然后将 试样转移至离心管中，以2700 r/min的速 度离心10 min。
测定
吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照 GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中 可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白 质的含量。
蛋白质溶解度
在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白 质质量占试样中总蛋白质量的百分数。 NSI 通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白 通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白 质分散指数（(PDI)来表示。 质分散指数（(PDI)来表示。
原理
用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可 溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提 取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加 出试样中可溶性蛋白质含量； 同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算 出试样的蛋白溶解度。
浅谈凯氏定氮法测定豆粕中氢氧化钾蛋白质溶解度的不确定度评定
T logy科技分析与检测豆粕在生产过程中的加热程度常用蛋白质溶解度来表示。
豆粕加热过度，赖氨酸会发生美拉德反应，降低蛋白质利用率；加热程度不够会导致豆粕过生，抗胰蛋白酶活性变高，影响蛋白消化。
因此准确测定氢氧化钾蛋白质溶解度将为生产工艺改进提供可靠数据，从而降低豆粕营养损失率。
1测量不确定度评定过程1.1检测原理与方法简述检测原理及方法依据GB/T 19541—2017附录A方法[1-2]。
1.2主要仪器凯氏定氮仪，福斯Kjeltec8200；电子分析天平，赛多利斯BSA224S-CW （感量0.0001g）；滴定管，50mL数显滴定仪（A级）；离心机，奥豪斯FC5714；移液管：15mL。
1.3数学模型粗蛋白质含量W2=（V1-V0）×c×0.014×K×100m（1）氢氧化钾蛋白质溶解度X（%）=W1W2×100（2）式中：V1—滴定豆粕样品消耗盐酸标液的体积，mL；V0—滴定空白消耗盐酸标液的体积，mL；c—盐酸标液的浓度，mol/L；0.014—每毫摩尔质量氮的克数；m—称样量，g；K—豆粕的换算系数为6.25；W1—豆粕溶解于0.2%KOH 溶液中的粗蛋白质含量，%。
1.4测量不确定度来源分析盐酸标准溶液（c）标定试验引入的不确定度u（c）；称量豆粕质量（m）过程中引入的不确定度u（m）；半自动凯氏由测量重复性引起的相对标准不确定度为u r（c1）=0.27×10-40.1007=2.68×10-4。
1.5.1.2标准物质碳酸钠的纯度引入的不确定度u（c2）根据碳酸钠准物质证书，已知扩展不确定度为0.05%（k=2），则u（c2）=0.00052=0.025%，则相对标准不确定度u r（c2）为0.025%。
1.5.1.3称量用电子天平引入的不确定度u（c3）根据BSA224S-CW电子天平的最大允许误差为±0.001g，按均匀分布考虑，k=3，称样量约为0.20329g，则：u（c3）=0.00058相对标定度u r（c3）=0.000580.20329=0.00291.5.1.450mL滴定管引入的不确定度u（c4）（属B类不确定度评定）使用50mL滴定管标定溶液，其不定氮仪测定过程中引入的不确定度u（v）；离心后用15mL移液管移取溶液过程中引入的不确定度u（移液管）。
蛋白质、粗蛋白、胃蛋白酶消化率、总氮方法步骤总结
称取样品时称样量按照样品中蛋白质含量多少称取蛋白质（GB 5009.5-2016）试剂：硼酸（20g/L）：50g硼酸+2.5L水NaOH（400g/L）：3瓶氢氧化钠稀释至桶标刻度线甲基红指示剂（1g/L）：0.1g甲基红，95%乙醇稀释至100mL亚甲基蓝指示剂（1g/L）：0.1g亚甲基蓝，95%乙醇稀释至100mL溴甲基绿指示剂（1g/L）：0.1g溴甲酚绿，95%乙醇稀释至100mLB混合指示剂：2份甲基红+1份亚甲基蓝B混合指示剂：1份甲基红+5溴甲酚绿蛋白催化剂：33.3g硫酸铜+500g硫酸钾。
称样：燃烧法：0.1-0.3g 腐竹：粉碎燃烧（糖分较高或脂肪较高的样品可选择1g-1.5g的称取量）淀粉：5g 鸡蛋：1g 奶、血浆、冰棍：3-4g 酱油：1mL 醋：5mL 饮料、口服液：4-5g 调味酱：1-2g 湿饲料：2g 制不匀的饲料、酒糟、草：1g 酒：5mL挥干乙醇胃蛋白酶消化率：称样3-4g，用乙醚脱脂，洗液澄清，室温风干。
称风干试样1g→250mL磨口锥形瓶→150mL水+0.9mL浓盐酸+0.3g胃蛋白酶→盖塞→45℃振摇16h→抽滤→消化→蒸馏→滴定氢氧化钾蛋白质溶解度：称样1g→250mL烧杯→50mL 0.2%KOH→搅拌20min→2700r/min离心10min→取上清液→消化→6432的规定测粗蛋白含量酪蛋白的测定：称0.2g试样→150mL具塞锥形瓶→酸法（0.0200±0.0010gNaHCO3+ 8mL水）或酶法（0.0200±0.0010g三聚磷酸钠 + 8mL水）或膜法（8mL水）→混匀→65-67℃水浴→每隔5min轻摇一次至溶解→冷却加1mL乙酸→混匀，静置5min→加1mL乙酸钠→静置，沉淀，过滤→沉淀物置于消化管→5009.5处理水溶性蛋白质（腐乳）：取样沥干汁液，捏匀称取25g，加少量水煮沸冷却转移250mL容量瓶，定容过滤，吸取10mL置于消化管→5009.5处理。
koh的溶解度曲线
koh的溶解度曲线
KOH（氢氧化钾）的溶解度曲线描述了在不同温度下KOH溶解于
水时所能溶解的最大量。
溶解度曲线通常以溶解度（单位，克/100
克溶剂）与温度（单位，摄氏度）之间的关系来表示。
在回答这个问题之前，需要说明的是，KOH在水中的溶解度受
到温度的影响。
通常情况下，随着温度的升高，KOH的溶解度也会
增加。
下面是一种可能的溶解度曲线：
在低温下，例如0°C到20°C之间，KOH的溶解度相对较低。
随着温度的升高，溶解度逐渐增加。
在约50°C左右，KOH的溶解
度达到最大值。
此后，随着温度的继续升高，溶解度开始下降，直
至达到饱和状态。
需要注意的是，溶解度曲线可能会因实验条件、纯度等因素而
有所不同。
因此，不同的参考资料可能会给出略有不同的溶解度曲线。
此外，溶解度曲线通常是通过实验测定得出的，而非理论计算。
总结起来，KOH的溶解度曲线描述了在不同温度下KOH在水中
的溶解度变化情况。
随着温度的升高，溶解度逐渐增加，达到最大值后开始下降。
希望这个回答能够满足你的要求。
氢氧化钾溶解度
氢氧化钾溶解度氢氧化钾是一种无机化合物，化学式为KOH，常见的形式是白色固体。
它是一种强碱，可以溶解在水中，产生氢氧根离子和钾离子。
氢氧化钾在工业生产中被广泛应用，也常用作实验室试剂。
它的溶解度是一个重要的物理化学性质，对于很多实际应用和实验操作都有重要意义。
氢氧化钾在水中的溶解度受到温度的影响。
一般来说，温度越高，溶解度越大。
在室温下，氢氧化钾的溶解度约为112g/100mL。
这意味着在100毫升的水中最多可以溶解112克的氢氧化钾。
随着温度的升高，这个数值会增加。
例如，在100摄氏度下，氢氧化钾的溶解度可以达到167g/100mL。
氢氧化钾的溶解度与水的性质有关。
一般来说，硬水中氢氧化钾的溶解度会比软水要小。
这是因为硬水中含有大量的钙离子和镁离子，它们会与氢氧化钾发生反应，生成难溶的碳酸钙和碳酸镁，从而减少氢氧化钾的溶解度。
氢氧化钾溶解度的研究不仅对于工业生产有着重要意义，也对于环境保护和生活用水有一定的指导意义。
了解氢氧化钾在水中的溶解度，可以帮助我们更好地控制工业废水的处理过程，避免因过量排放氢氧化钾而引起的环境污染。
同时，对于家庭生活用水的处理也有一定的指导意义，可以帮助我们更好地选择适合的水处理设备，保证家庭用水的质量和安全。
除了溶解度，氢氧化钾在水中的溶解过程也是一个重要的研究课题。
它的溶解过程是一个放热反应，释放出大量的热量。
这意味着在氢氧化钾溶解的过程中会伴随着温度的升高。
这一点在实际应用中需要引起重视，特别是在工业生产中，需要注意控制溶解过程中产生的热量，避免因此引起的安全事故。
在实验室中，氢氧化钾的溶解度也是一个重要的研究课题。
它的溶解度可以用来帮助确定其他物质的溶解度，或者用来进行定量分析。
通过测定氢氧化钾在不同温度下的溶解度，可以获得很多有用的数据，为其他实验提供重要的参考。
总的来说，氢氧化钾的溶解度是一个重要的物理化学性质，对于工业生产、环境保护和实验研究都有着重要的意义。
发酵豆粕常见指标检测方法
粗蛋白含量检测(GB/T6432)一、原理：凯氏法测定样中的含氮量、即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。
二、仪器设备：1.高速粉碎机，粉碎时间1分钟。
2.分样筛；、40目3.分析天平；感量4.消化炉5.滴定管；酸式50mL6.锥形瓶；250mL7.定氮仪；以凯氏原理制造的半自动蛋白测定仪三、试剂1.硫酸：含量98%2.氢氧化钠：40%水溶液（m/V）3.硼酸：2%水溶液（m/V）4.混合催化剂：硫酸铜(5个结晶水)，6g硫酸钾或硫酸钠，磨碎混匀。
5.混合指示剂：甲基红%乙醇溶液，溴甲酚绿%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
6.L盐酸标准溶液：mL盐酸注入1000 mL蒸馏水中。
标定：减量法称取左右在270-300℃灼烧2h的无水NaCO3，加水50mL溶解，加10滴混合指示剂，用配好的盐酸滴定成暗红色，煮沸2min，冷却(水中)后再滴至暗红色，同时作空白试验(不加Na2C03)。
计算：C=m×1000 (V1-V2)M式中: C——硫代硫酸钠标准溶液之物质的量浓度（mol/L）m——无水碳酸钠的质量，gV1——盐酸溶液的用量，mLV2——空白试验盐酸溶液的用量，mLM——无水碳酸钠的摩尔质量数值，单位为克每摩尔（g/mol）〔M(1/2NaCO3)=〕7.蔗糖8.硫酸铵：分析纯，干燥四、分析步骤：（国标推荐法）1.试样的消煮2.称取试（含氮量5～80mg）准确至，放入消化管中，加入混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸，于420℃消化炉中消化3小时。
冷却后，加入蒸馏水20ml，待用。
3.氨的蒸馏；采用半自动定氮仪，将带消化液的消化管插在蒸馏装置上，以25mL硼酸为吸收液，加入2-3滴混合指示剂，蒸馏装置的冷凝管末端要浸入装有吸收液的锥形瓶内，然后向消化管中加入氢氧化钠溶液，以溶液变黑为宜，即当生成黑色的氢氧化铜时，加碱量已够。
不同方法测定大豆脲酶活性的比较研究
不同方法测定大豆脲酶活性的比较研究杨奇慧舒璐钟剑锋摘要：用滴定法和增值法测定大豆粉在85℃和140℃下分别热处理0、45、90、135、180min的脲酶活性，并用0.2%KOH溶解法测定大豆粉在不同热处理下的蛋白质溶解度。
结果表明：在85℃条件下，处理0～180min 大豆粉的脲酶活性和蛋白质溶解度随着时间延长无明显变化；而在140℃条件下，大豆粉的脲酶活性和蛋白质溶解度随着处理时间的延长显著降低。
通过测定结果可见，同一样品用滴定法和增值法测得的脲酶活性在数值上不相等，不能互用，但蛋白质溶解度更能反映大豆粉受热过度的程度。
关键词：大豆粉；脲酶活性；蛋白质溶解度；pH增值法；滴定法众所周知，大豆含有较丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物等，是饲料生产中主要的植物蛋白质源之一，具有较高营养价值。
但是，大豆中含有多种抗营养因子，如蛋白酶抑制因子、植物凝集素、胃肠胀气因子、抗维生素因子、抗原蛋白等，这些抗营养因子阻碍营养物质在动物体内的利用，尤其是胰蛋白酶抑制因子的存在不仅会降低饲料营养成分的消化率和适口性，而且也会影响动物对蛋白质的消化吸收，对动物生长发育也产生不良的影响。
但是，胰蛋白酶抑制因子的测定较困难，而豆粕中脲酶活性与胰蛋白酶抑制因子活性呈正相关，所以通常通过测定脲酶活性来反映蛋白酶抑制因子的活性。
目前，脲酶活性的测定方法有滴定法（国标法）、pH增值法等，目前，对脲酶活性不同测定方法差异性的研究较少，本文拟对两种方法进行研究，以比较不同方法对测定结果的影响，为实际生产和理论研究提供依据和参考。
1 材料和方法1.1 实验材料大豆粉：将生大豆粉碎，过60目标准筛。
在85℃和140℃下分别处理0、45、90、135和180min冷却后装入封口袋保存备用。
1.2 化学试剂本实验所用试剂均为分析纯（AR），实验用水为蒸馏水。
1.3 测定方法1.3.1 pH增值法实验原理：将研细的试样与尿素缓冲液混合，尿素在尿素酶作用下水解产生氨，使溶液pH 值改变，改变的程度与脲酶活性大小相关，因此可以用其与空白溶液的差值表示脲酶活性高低，单位为△pH值。
对蛋白溶解度作为鉴定豆粕
EVALUATION OF PROTEIN SOLUBILITY AS AN INDICATOR OF OVERPROCESSING SOYBEAN MEAL
M. Araba, N. M. Dale，佐治亚大学家禽科学系
摘要 本项研究针对以豆粕的脲酶活性（UA）、橙黄 G 结合力（OGBC)以及
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精氨酸和蛋氨酸促进了雏鸡生长。 试验 5 是试图确定在本研究条件下哪一种氨基酸最具有限制性。除了含有蒸煮
0min 和 40min 豆粕的两种对照日粮之外，配制了 7 种含蒸煮 40min 豆粕的日粮， 即：单独补充 0.2%L—赖氨酸、单独补充 0.2%L—精氨酸、单独补充 0.1%DL—蛋 氨酸、补充其中两种、补充全部三种。
本项研究的目的就是评价以豆粕蛋白质在 0.2%氢氧化钾溶液中的溶解度作为 鉴定豆粕是否加热过度而营养下降这一方法的价值。此外，本项目对含不同蛋白 溶解度的豆粕日粮补充氨基酸，进行动物试验以评价补充氨基酸的效果。
材料和方法
总体设计
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试验 1、2、3 的目的是比较各种化学分析方法及其与雏鸡生产性能的关联程度。 试验 4 和 5 的目的是考察补充氨基酸以克服低蛋白溶解度豆粕抑制肉鸡生长的效 果。从一家当地饲料厂选定 5 批浸提法生产的去皮豆粕。为模拟过度加热，从每 批豆粕中采集少量实验材料，摊在浅铝盘（高 2.54cm）中，放进高压蒸煮器内以 121℃蒸煮不同时间。风干之后，将试验材料移出浅盘。
1原发表于《Poultry Science》69:76-83，1990
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最常用来鉴定豆粕是否加工过度的指标是脲酶活性。脲酶水平本身对家禽营养 没有什么意义，但被用来做为鉴定是否含有抗胰蛋白酶之类有毒因子的指标。然 而，Abraham 等人（1971）提到，脲酶完全失活后，脲酶活性测定不能反映热处 理对豆粕品质的影响程度。而且，彻底破坏豆粕的脲酶也不一定妨碍雏鸡生长 （McNaughton and Reece，1980；Dale 等人，1986）。脲酶活性低至 0.01（pH 变化 值）的豆粕与脲酶活性较高的豆粕相比，饲喂雏鸡的效果没有差别（De Schrijver， 1977 ）。 再 者 ， 加 热 不 足 的 豆 粕 经 过 长 时 间 贮 存 后 ， 其 脲 酶 活 性 也 会 降 低 （DeSchrijver，1977）。
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氢氧化钾蛋白质溶解度
---参照GB/T 19541-2004
1适用范围：豆粕、菜籽粕、棉籽粕。
2 氢氧化钾蛋白质溶解度
大豆粕样品在规定的条件下，可溶于0.2%氢氧化钾溶液中的粗蛋白质含量占样品中总的粗蛋白质含量的质量百分数。
3氢氧化钾蛋白质溶解度的测定
3.1 方法原理
氢氧化钾蛋白质溶解度可以反映大豆粕产品加热过度的情况。
不同加热程度的大豆粕，氢氧化钾蛋白质溶解度不同。
先测定大豆粕样品在规定的条件下，可溶于氢氧化钾溶液中的粗蛋白质含量；再测定同一大豆粕样品中总的粗蛋白含量，计算出氢氧化钾蛋白质溶解度。
3.2 试剂
所用试剂均为分析纯，所用的水为按GB/T 6682中规定的三级水。
3.2.1 0.2%的氢氧化钾溶液：2.44g氢氧化钾（含量：≥82％）溶解于水中，稀释并定容至1L。
3.3 仪器设备
3.3.1实验室用样品粉碎机。
3.3.2样品筛：孔径0.25mm。
3.3.3分析天平：感量0.0001g。
3.3.4 磁力搅拌器。
3.3.5离心机：转速为2700 r/min以上。
3.3.6 TECATOR装置：消化管、消化系统、蒸馏系统。
3.4 样品的制备
取具有代表性的大豆粕样品，用四分法缩减分取200g左右，粉碎过0.25mm 孔径的样品筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。
3.5 测定步骤
称取大豆粕式样1.0g，精确到0.1mg，置于250mL高型烧杯中，加入50.00mL 氢氧化钾溶液，在磁力边搅拌器上搅拌20min，将溶液转移至离心管中，以2700 r/min离心10min，小心移取清液10.00ml，放入消化管中，加入6.4g混合催化剂和10mL浓硫酸，消化，蒸馏，测其粗蛋白，同时测定同一式样总的粗蛋白质含量。
3.6 结果计算
氢氧化钾蛋白质溶解度X，数值以质量分数表示，按式计算：
X = W1 / W2 ×K × 100
公式中：
W1 —大豆粕式样溶于氢氧化钾溶液中的粗蛋白质含量，%。
W2 —大豆粕式样总的粗蛋白质含量（以两次平行测定结果的算术平均值为测定结果），%。
K —稀释倍数。
计算记过表示到小数点后一位。
3.7 精密度
3.7.1重复性
在同一实验室，由同一操作人员完成的两个平行测定结果，相对偏差不大于2%；以两次平行测定结果的算术平均值为测定结果。
3.7.2 再现性
再不同实验室，由不同操作人员用不同的仪器设备完成的两个测定结果，相对偏差不大于4%。