几丁质酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
辅酶 II NADP含量检测试剂盒MTT 显色法)说明书__ 可见分光光度法UPLC-MS-4370
辅酶II NADP(H)含量检测试剂盒（MTT 显色法）说明书货号：UPLC-MS-4370规格：50T/24S可见分光光度法产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1支-20℃保存试剂三液体12mL×1瓶2-8℃保存试剂四A 粉剂×1支-20℃保存试剂四B 液体5mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体40mL×1瓶2-8℃保存试剂六液体70mL×1瓶2-8℃保存NADP 标准品粉剂×1支-20℃保存NADPH 标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入6mL 蒸馏水充分混匀，溶解后2-8℃保存4周。
2、试剂四：临用前将试剂四A 溶解到试剂四B 中，溶解后分装保存，避免反复冻融，-20℃保存4周。
3、NADP 标准品：临用前加入1.27mL蒸馏水，即5µmol/mL ，-20℃可以保存2周。
4、NADPH 标准品：临用前加入1.2mL 蒸馏水，即5µmol/mL ，-20℃可以保存2周。
产品说明：辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NADP +和NADPH 含量测定可以计算NADP （NADPH +NADP +)含量和NADPH/NADP +比值，其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。
NADPH/NADP +比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一，而且在PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP +和NADPH 。
NADPH 通过PMS 的递氢作用，使氧化型噻唑蓝（MTT ）还原为甲瓒，570nm 下检测吸光值，从而测定NADPH 含量。
产几丁质酶的筛选及活力测定
产几丁质酶的筛选及活力测定一、实验材料1.菌种：白僵菌，或其他菌种及土壤采样等(菌种接种于PDA斜面上，28℃，80％RH 培养14 d后分别置于4℃和20℃备用。
)2.试剂：DNS试剂:（称取3，5-二硝基水杨酸3．15 g，加水500 mL。
，搅拌5 s，水浴至45。
然后逐步加入100 mL 0．2g/mL的氢氧化钠溶液，同时不断搅拌。
直到溶液清澈透明(注意：在加入氢氧化钠过程中，溶液温度不要超过48℃)。
再逐步加入四水酒石酸钾钠91．0 g苯酚2．5 g和无水亚硫酸钠2．5 g。
继续45"C水浴加热，同时补加水300 mL，不断搅拌，直到加入的物质完全溶解。
停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000 mL。
用烧结玻璃过滤器过滤，取滤液，储存在棕色瓶中，避光保存。
室温下存放7 d后可以使用。
) 几丁质酶基础培养基(g／L)：葡萄糖5．09，蛋白胨5．09，KH2P04、KCI、MgS04·7H20各0．59，FeS04·2H20 0．1 g，pH 7．0。
几丁质酶诱导培养基(g／L)：蛋白胨5．09，KH2P04、KCI、MgS04·7H20各0．59，ZnS04·7H202 0．01 g，胶体几丁质10 ml，pH 7．0。
（胶体几丁质固体培养基。
0.5 g K2HPO4，0.5 gKH2PO4，0.5 g MgSO4·H2O，0.1 g FeSO4·7H2O，0.1 gZnSO4·7H2O 500 ml 1%胶体几丁质，500 ml蒸馏水，15 g 琼脂，pH7.2，121℃灭菌15 min，冷却至50℃左右倒平板）马铃薯培养基(PDA)；去皮的马铃薯200 g切块，沸水煮30 min，纱布过滤，20 g蔗糖，209琼脂，加热至全部溶解，定容至1 L。
二、筛选1.初筛采用平板透明圈法。
用0．1 mL孢子悬液(1×107／mL)滴于几丁质平板的中央(每个样品重复3次)，28℃培养7d，其菌落周围有透明圈出现。
小鼠几丁质酶3样蛋白1（CHI3L1）酶联免疫吸附测定试剂盒
5th Edition, revised in Dec, 2013（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）小鼠几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书Mouse CHI3L1 (Chitinase 3-like 1) ELISA Kit 产品货号：E-EL-M0016c使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：全国免费电话400-660-4808 销售部电话************技术部电话************电子邮箱（销售） ********************电子邮箱（技术） **************************QQ 客服1037150941 网址 联系时请提供产品货号（见试剂盒标签），以便我们更高效地为您服务。
小鼠几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品货号：E-EL-M0016c（本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!）声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。
本产品适用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中天然和重组CHI3L1浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分！如有疑问，请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
试剂盒组成：特别说明：*: [96T/48T]（打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整）#:一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出！检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠CHI3L1抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠CHI3L1会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠CHI3L1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠CHI3L1抗体与结合在包被抗体上的小鼠CHI3L1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。
碧云天生物技术激酶活性检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0150S Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒 1000次 S0150MKinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒10000次产品简介：Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit )，是一种通过化学发光法测定激酶反应后溶液中ATP 的剩余量(最高可达10μM)来定量检测激酶活性的试剂盒。
本试剂盒也可用于检测任何消耗ATP 的酶，例如ATPase 。
本试剂盒可以检测反应体系中浓度最高为10μM 的ATP ，并在0-10μM 范围内有良好的线性关系。
对于更高浓度的ATP ，可以选购检测浓度上限为50μM 的Kinase-Lumi™增强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Plus Luminescent Kinase Assay Kit )或上限为200μM 的Kinase-Lumi™超强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Max Luminescent Kinase Assay Kit )，或者需要适当稀释后再进行检测。
另外两个试剂盒分别在0-50μM 和0-200μM 范围内有良好的线性关系。
本试剂盒应用范围广，适用于各类消耗ATP 的激酶，包括以蛋白或多肽为底物的蛋白激酶和以糖、脂、醇等为底物的非蛋白激酶。
本试剂盒也同样适用于检测消耗ATP 的ATPase 。
本试剂盒的检测激酶活性的原理参考图1。
激酶在反应过程中催化ATP 上的磷酸基团转移到底物的羟基上，从而使ATP 转变为ADP ，这样就可以根据ATP 的减少量来定量激酶的活性。
几丁质酶的活性测定
几丁质酶活性的测定⑴几丁质酶几丁质是绝大多数真菌细胞壁的主要成份，而在植物中却不存在。
但高等植物普遍存在着几丁质酶，并可通过几丁质酶催化几丁质的水解，使植物具有抵御真菌侵染的能力（Shibuya and Minami, 2001）。
在正常情况下，高等植物的几丁质酶表达水平很低，而当植物体遭受到病原真菌、细菌和病毒侵染，机械创伤或乙烯处理时，其表达活性显著增强。
特别是在β-1,3-葡聚糖酶的协同作用下，可明显抑制真菌的生长（Sela-Buurlage et al., 1993）。
几丁质酶是植物体中与防御有关的一种次生水解酶，是植物广谱防御机制的一个成分（V an Loon and Van Strien, 1999），它能催化真菌细胞壁的重要成分——几丁质的水解，从而抑制真菌的生长增殖，提高植物的抗真菌能力。
而植物体中尚未发现几丁质酶作用的底物，所以，几丁质酶在植物体中诱导与积累，对于增强植物的抗病能力有重要作用。
几丁质酶主要水解几丁质多聚体β-1,4键，产生N-乙酰葡聚糖胺寡聚体，水解可以是外切作用也可以是内切作用。
⑵试剂的配制①胶状几丁质的制备称取粉末状几丁质（甲壳素，sigma）5.0 g，缓慢加入200 mL （≤4℃）预冷的浓HCl中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，待几丁质粉末均匀分散后，在水浴中轻度搅拌并缓慢加热至37 ℃混合物的粘度迅速增加，几分钟后粘度开始下降，混合物逐渐变得清亮。
当几丁质基本上溶解完毕时，用玻璃棉过滤，将滤液倒入2000 mL预冷（≤4℃）的蒸馏水中，搅拌，几分钟后几丁质沉淀，溶液变得混浊，30分钟后停止搅拌，将悬液置于冰箱(≤4℃)沉淀过夜。
倒掉上清，剩余部分用双层中性滤纸抽滤，沉淀用蒸馏水洗涤数次，待pH达到5以上时，加数滴1 N NaOH使溶液呈中性。
将上述中性沉淀物加到200 mL的蒸馏水中，剧烈搅拌重新悬浮，即为胶体几丁质溶液。
取该溶液5 mL, 105℃烘箱干燥至衡重，测定溶液几丁质的含量（胶体几丁质溶液的几丁质含量为: mg/mL），并将胶体几丁质溶液浓度稀释为1%。
Ca++Mg++-ATP 酶活性检测试剂盒说明书
BC0960 -- 第 1 页，共 4 页Ca Mg -ATP 酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC0960 规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 液体4 mL×1 瓶 2-8℃保存 试剂三 粉剂×2支 -20℃保存 试剂四 液体2 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂五 液体3 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂六 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂七 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂八 液体15 mL×1 瓶 常温保存 标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂三：临用前取1支加入1 mL 蒸馏水充分混匀待用；现用现配。
用不完的试剂-20℃分装保存一周。
2、 试剂六：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
3、 试剂七：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
4、 标准品：10mmol/L 标准磷贮备液。
将标准品 20倍稀释，即取0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/mL 标准磷应用液，现用现配。
5、 定磷剂的配制：按H 2O ：试剂六：试剂七：试剂八=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据样本量现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：Ca ++Mg ++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
根据Ca ++Mg ++-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性高低。
ATP ADP + Pi注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
碱性磷酸酶活性测定试剂盒说明书
碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP/ALP）活性测定试剂盒说明书分光光度法50管/24样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
测定原理：在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μ mol/mL酚标准液，4℃保存。
粗酶液提取：1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，4℃、8000g离心10min，取上清液待测。
2. 细菌或细胞：按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血液可直接测定，或者适当稀释后测定。
测定步骤：1. 分光光度计预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸馏水，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A空白管。
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4040
土壤几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4040规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶（自备）常温保存试剂二液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体18mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五A粉剂×2瓶2-8℃保存试剂五B液体55mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯。
2、试剂三：悬浊液，使用前摇匀。
3、试剂四为饱和溶液，低温（2-8℃）取出可能会有晶体析出，加热使其溶解即可。
4、试剂五：临用前取1瓶加入25mL试剂五B，充分溶解，现配现用。
用不完的试剂2-8℃可以保存4周。
5、标准液：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。
临用前加入1mL试剂二配制成5mg/mL的标准溶液，即5000μg/mL的标准溶液，2-8℃可以保存4周。
产品说明：几丁质来源非常丰富，是自然界中仅次于纤维素的第二大类生物高聚物，由于其分解非常缓慢而大量堆积容易造成环境严重污染。
几丁质酶是影响土壤中氮矿化的一种重要的酶，其分解几丁质控制着氮循环的关键步骤。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖与碱共热产生的中间化合物可进一步与对二甲氨基苯甲醛反应产生显色物质，该显色物质在585nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
Chitin Chitinase N-Acetyl Glucosamine OH-Glucose OxazolineGlucose Oxazoline+P-Dimethylaminobenzaldehyde H+585nm 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
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几丁质酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0820
规格：50T/24S
产品内容：
提取液：液体80mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存，使用前摇匀。
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1瓶。
5mg N-乙酰氨基葡萄糖，4℃保存。
临用前加入2.27mL蒸馏水配成10μmol/mL 的标准溶液。
产品说明：
几丁质酶主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨)，以及真菌类的细胞壁中。
而几丁质酶(EC3.2.1.14)可催化几丁质水解，具有抵御真菌侵染的作用，成为抗真菌病害的研究热点。
几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，进一步与3,5-二硝基水杨酸产生棕红色化合物，在540nm 处有特征吸收峰，吸收值增加速率反映了几丁质酶的活性。
自备实验用品及仪器：
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.15g组织，加入1.5mL
提取液）进行冰浴匀浆，然后10000pm，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
2.真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议750万细胞加入1.5mL
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提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后12000rpm，4℃，离心20min，取上清置于冰上待检。
3.培养液：直接测定。
二、测定操作表：
1、可见分光光度计预热30min。
波长调至540nm，蒸馏水调零。
2、将标准溶液稀释为4、
3、2.5、2、1μmol/mL的标准溶液备用。
3、在EP管中分别加入：
试剂名称测定管对照管标准管空白管
样品（mL）0.50.5--标准溶液（mL）--0.5-
蒸馏水（mL）---0.5
试剂一（mL）0.5-0.50.5
混匀，37℃水浴1h，沸水浴5min。
试剂一（mL）-0.5--
8000rpm常温离心10min，分别取上清液0.8mL于新的EP管中。
试剂二（mL）0.20.20.20.2
混匀，沸水浴反应10min，立即置于冰上至室温。
测定每管在540nm下的吸光度，记为A测定管、A 对照管、A标准管、A空白管。
计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
三、计算公式
1、标准曲线的绘制：
以ΔA标准为y轴，标准溶液浓度为x轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b。
将ΔA测定带入标准方程中，得到x（μmol/mL）
2、几丁质酶活的计算：
（1）按照样本重量计算
酶活性定义：37℃下，每g组织每小时分解几丁质产生1μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性（U/g鲜重）=x×V样÷（V样÷V样总×W）÷T=1.5×x÷W。
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（2）按照蛋白质浓度计算
酶活性定义：37℃下，每毫克蛋白每小时分解几丁质产生1μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性（U/mg prot）=x×V样÷（V样×Cpr）÷T=x÷Cpr。
（3）按照细胞数量计算
酶活性定义：37℃下，每104个细胞每小时分解几丁质产生1μmolN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性（U/104cell）=x×V样÷（V样÷V样总×细胞数量）÷T=1.5×x÷细胞数量。
（4）按照培养液体积计算
酶活性定义：37℃下，每毫升培养液每小时分解几丁质产生1μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。
几丁质酶活性（U/mL）=x×V样÷V样÷T=x。
V样：反应体系中样本体积，0.5mL；V样总：加入提取液体积，1.5mL；
W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
T：反应时间，1h；细胞数量：以104为单位，万个。
注意事项：
1、反应结束后尽快进行比色。
2、吸光值大于1.5时，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数；或者缩短37℃水浴时间到X
小时（如0.5小时），按照原先计算公式得到的结果再除以X。
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