疟原虫血片制作方法课件
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疟原虫的镜检技术制片染色
门诊和发热病人血片每片1人，涂2个厚血膜1个薄 血膜，以防血膜脱落而影响检查。
标签
标本片
发热病人血片
厚血膜的制作
取洁净的载玻片1张，左手持载玻片平置,右手持推片， 用推片的一角，从取血部位刮取①约4～5微升血量 （相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触， 再由里向外一个方向旋转，转2～4圈，涂成②直径 0.8～1cm大小圆形厚血膜。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20h内取血，发作后2小 时左右，此时环状体发育至最高峰，初发患者退热后常查不到原 虫。末梢血血检到恶性疟原虫配子体，是在末梢血出现环状体之 后的7-10天。
血膜的制作（取血操作）
❖在采集标本、制作血片前，首先要核对 患者的姓名、年龄和住址。
❖取血部位和方法
耳垂或无名指（婴幼儿 拇趾或足跟），通常在 耳垂取血，先用75%酒精 棉球消毒取血部位，待 酒精干后，用左手拇指 和食指紧捏耳垂上方或 无名指指尖，右手持消 毒针迅速刺入皮肤，不 宜过深或过浅（1～2mm 为宜）。然后用左手大 拇指、食指和右手中指 协同轻轻挤压出血滴。
7
偏右或偏左过多
5
8
过多或过少
5
厚薄不匀呈波浪型
8
5
血片染色质量（10分）
外观（4分） 镜下（6分）
蓝紫色
4
白细胞、疟原虫胞浆蓝色，
核红色
6
深蓝色
3
深红色或灰白色
2
染色过深，原虫胞浆与核
染色过浅，胞浆蓝色不易显
均呈深蓝色
4
见，核淡红
3
血片清洁度（10分）
外观（5分） 光洁无油灰 镜下（5分） 无沉渣
制作血膜注意事项
❖清洗玻片，且勿碰撞、磨损 载玻片必须完全清洁
标签
标本片
发热病人血片
厚血膜的制作
取洁净的载玻片1张，左手持载玻片平置,右手持推片， 用推片的一角，从取血部位刮取①约4～5微升血量 （相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触， 再由里向外一个方向旋转，转2～4圈，涂成②直径 0.8～1cm大小圆形厚血膜。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20h内取血，发作后2小 时左右，此时环状体发育至最高峰，初发患者退热后常查不到原 虫。末梢血血检到恶性疟原虫配子体，是在末梢血出现环状体之 后的7-10天。
血膜的制作（取血操作）
❖在采集标本、制作血片前，首先要核对 患者的姓名、年龄和住址。
❖取血部位和方法
耳垂或无名指（婴幼儿 拇趾或足跟），通常在 耳垂取血，先用75%酒精 棉球消毒取血部位，待 酒精干后，用左手拇指 和食指紧捏耳垂上方或 无名指指尖，右手持消 毒针迅速刺入皮肤，不 宜过深或过浅（1～2mm 为宜）。然后用左手大 拇指、食指和右手中指 协同轻轻挤压出血滴。
7
偏右或偏左过多
5
8
过多或过少
5
厚薄不匀呈波浪型
8
5
血片染色质量（10分）
外观（4分） 镜下（6分）
蓝紫色
4
白细胞、疟原虫胞浆蓝色，
核红色
6
深蓝色
3
深红色或灰白色
2
染色过深，原虫胞浆与核
染色过浅，胞浆蓝色不易显
均呈深蓝色
4
见，核淡红
3
血片清洁度（10分）
外观（5分） 光洁无油灰 镜下（5分） 无沉渣
制作血膜注意事项
❖清洗玻片，且勿碰撞、磨损 载玻片必须完全清洁
疟原虫镜检血片的制作与染色课件
厚血膜的位置，位于玻片右1/3处。
厚血膜外观：圆形厚薄均匀，无划痕。过厚易于脱 落，过薄达不到检出率的要求。
4.推制薄血膜
用干棉球抹净玻片角上的血渍，然后将推片下缘 平抵载玻片的中线，当血液在载玻片与推片之间 向两侧扩展至约2cm宽时，使两玻片保持25~35° 角，从右向左迅速向前推成舌状薄血膜，厚度 应以红细胞之间互相接触而不相互重叠为佳。
吉姆萨（Giemsa）染液由天青、伊红组成。染料中天青是 碱性的,伊红是酸性的。染色的原理是基于在酸性染料中具 有染色作用的阴离子和细胞内的碱性物质相结合，而碱性染 料中的阳离子和细胞内的酸性物质相结合，所以酸性的细胞 成分被碱性染料所染色，而碱性的细胞组分则被酸性染料染 色。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色， 称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性，与 碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中 性颗粒呈等电状态与伊红和天青均可结合，染淡紫色，称为 中性物质。
(2) 采血针：使用一次性釆血针。
(3) 玻片盒：
(4) 75％乙醇棉球：用于采血前后的消毒。
(5) 标签记号笔：用于玻片上书写号码。
2. 采血部位及取血方法 采血部位以耳垂较为 合适，也可在手指末端采血，婴儿可从拇趾或 足跟取血。先用75％乙醇棉球消毒取血部位后， 以一次性采血针迅速刺入取血部位1~2mm深， 然后用左手大拇指、食指和右手中指协同挤出 血滴。
2. 染色用水
常用的染液的稀释用水和染色的冲洗用水，是中 性的蒸馏水或经煮沸过滤的冷开水，也可用井水、 河水、泉水或雨水。为了使血膜着色较好，应用 pH7.0～7.2水效果最佳。
可配制缓冲液用于染液的稀释和染色后的冲洗。 配制pH6.6~7.4缓冲液时，先制备好两种贮备液。 贮备液Ⅰ为每1 000ml蒸馏水含9.5g 磷酸氢二钠， 贮备液Ⅱ为每1 000ml蒸馏水含9.07g 磷酸二氢钾。 配制pH6.6~7.4的缓冲液时，将两种贮备液按一定 比例混合后，用蒸馏水稀释成各种浓度的溶液。
厚血膜外观：圆形厚薄均匀，无划痕。过厚易于脱 落，过薄达不到检出率的要求。
4.推制薄血膜
用干棉球抹净玻片角上的血渍，然后将推片下缘 平抵载玻片的中线，当血液在载玻片与推片之间 向两侧扩展至约2cm宽时，使两玻片保持25~35° 角，从右向左迅速向前推成舌状薄血膜，厚度 应以红细胞之间互相接触而不相互重叠为佳。
吉姆萨（Giemsa）染液由天青、伊红组成。染料中天青是 碱性的,伊红是酸性的。染色的原理是基于在酸性染料中具 有染色作用的阴离子和细胞内的碱性物质相结合，而碱性染 料中的阳离子和细胞内的酸性物质相结合，所以酸性的细胞 成分被碱性染料所染色，而碱性的细胞组分则被酸性染料染 色。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色， 称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性，与 碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中 性颗粒呈等电状态与伊红和天青均可结合，染淡紫色，称为 中性物质。
(2) 采血针：使用一次性釆血针。
(3) 玻片盒：
(4) 75％乙醇棉球：用于采血前后的消毒。
(5) 标签记号笔：用于玻片上书写号码。
2. 采血部位及取血方法 采血部位以耳垂较为 合适，也可在手指末端采血，婴儿可从拇趾或 足跟取血。先用75％乙醇棉球消毒取血部位后， 以一次性采血针迅速刺入取血部位1~2mm深， 然后用左手大拇指、食指和右手中指协同挤出 血滴。
2. 染色用水
常用的染液的稀释用水和染色的冲洗用水，是中 性的蒸馏水或经煮沸过滤的冷开水，也可用井水、 河水、泉水或雨水。为了使血膜着色较好，应用 pH7.0～7.2水效果最佳。
可配制缓冲液用于染液的稀释和染色后的冲洗。 配制pH6.6~7.4缓冲液时，先制备好两种贮备液。 贮备液Ⅰ为每1 000ml蒸馏水含9.5g 磷酸氢二钠， 贮备液Ⅱ为每1 000ml蒸馏水含9.07g 磷酸二氢钾。 配制pH6.6~7.4的缓冲液时，将两种贮备液按一定 比例混合后，用蒸馏水稀释成各种浓度的溶液。
血片制作 PPT课件
2019/9/7
3
血片制作染色与疟原虫计数
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂
呈薄膜状，称薄血膜；一种是血辅在玻片上面。
发热病人血片 2019/9/7
标本片 4
52006-12-13
取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普 查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期 疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
2019/9/7
13
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称 很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液 变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液 两大类，前者包括罗氏、西氏（Simon)、 J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染 液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰 氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分， 第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3 格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个； 门诊和发热病人血片每片1人，涂
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
标标签签
防血膜脱落而影响检查；
2019/9/7
2
血片制作与染色镜检
2 采血制片 自耳垂或手指采血，厚血膜的血量约为火柴 头大小（4-5mm3），滴在载玻片的1/3处；薄血膜的 血量为其1/4，滴于玻片中央，立即用边缘整齐光滑的推 片与玻片之间成30-40度角平直向前推成薄血膜。再用推 片的一角将厚血滴涂制成直径约0.8-1cm的圆形厚血膜， 厚度以能清晰映出报刊上的铅字为宜。薄片的厚度为镜下 只见一层均匀紧密排列的红细胞为宜。血片涂制好后用 HB铅笔在干燥的薄血膜底部写上受检者的姓名或编号。 对疑为恶性疟者，可用皮肤划痕法刮取渗出的体液作涂片 染色，此法检出率较高，且可查见末梢血液中不常看到的 恶性疟原虫的滋养体和裂殖体。
疟疾血片制作课件ppt课件
吉氏染液的染色方法
血片染色： 取蒸馏水或缓冲液1ml加入吉氏原液1滴， 混合均匀后涂在厚、薄血膜上，染色30分钟左 右，然后用清水轻轻将载玻片上的染液冲洗干 净，晾干镜检。
血片制作注意事项
A. 使用前载玻片一定要清洁，否则会影响 血片制作和镜检结果。 B. 厚血膜干燥时勿加热，加热会使原虫变 形，影响镜检结果。 C. 固定薄血膜时勿将甲醇触碰到厚血膜。
厚度以薄血膜上的红细胞之间互相接触而不相互 重叠为佳。
薄血膜
血片的制作（厚血膜涂片）
用推片的一角刮取4~5微升血量（相当于火柴 头大小），使血滴涂于载玻片的中央偏右处，由 里向外一个方向旋转2圈，涂成直径0.8~1.0cm的 圆形厚血膜，血膜厚薄均匀，过厚易于脱落，过 薄达不到检出率的要求（厚度以1个油镜视野内可 见5~10个白细胞为宜）。
血膜染色前的处理
固定薄血膜 血片干燥后，用吸有甲醇的吸管 在薄血膜表面轻轻涂抹，自然干燥。注意固定 时甲醇不要接触厚血膜，否则会影响厚血膜的 溶血。 溶解厚血膜 血片干燥后，用滴管滴水于厚血 膜上，待血膜呈灰白色时，将水倒去，晾干。 （吉姆萨染色：直接）
血膜制作意事项
1. 清洗玻片，且勿碰撞、磨损 2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内 3. 血膜应自然干燥 ，要充分干燥。
疟疾血片制作 课件
血片的制作（厚、薄血膜）
用于检查疟原虫的血涂片有两种： 一种是将血液涂成薄膜状，称薄血膜； 一种是血液涂成圆盘状，称厚血膜。 最好一张玻片上同时制作厚、薄两种血膜。
血片的制作（薄血膜涂片）
取洁净的载玻片 1 张，左手持 载玻片平置 , 右手持推片，推片一端边缘 的中点刮取血液 1.0~1.5 微升（相当于 1/4 火柴头大小），使血滴与平置的载玻片中 线接触，待血液向两侧扩展约 2cm 宽时， 以25°～35°夹角均匀而迅速地向左推成 舌状薄血膜（约2.5cm长）。
疟原虫镜检技术-制片与染色_PPT课件
• 染色用水：为了使血膜着色较好，应用pH7.0～7.2水效果
最佳。中性的蒸馏水也可。
缓冲液配制
pH
1/15mol/L 磷酸氢二钠溶液
1/15mol/L 磷酸1
7.0
6.3
3.7
7.2
7.3
2.7
7.4
8.1
1.9
蒸馏水 （ml）
90
90
90
90
染色方法
• 少量血片染色：取吉氏染液1份，加入缓冲液或蒸馏水15 至20份，混合均匀后，滴在厚、薄血膜上，染色20~30分 钟，然后用缓冲液或蒸馏水将血片上的染液冲走，晾干待 检。
血膜的染色
• 染色液的制备：推荐使用吉氏染液。吉氏染剂不仅适用于 厚血膜和批量血膜的染色，而且效果稳定，染色时间和染 液浓度对染色结果影响较小，染色后的血膜保存时间较长， 同时吉氏染剂能长期保存而不变质。
• 吉氏染液配制：吉氏粉 5g，甲醇250ml，甘油250ml。将 吉氏粉置于研钵中，加入少量甘油充分研磨，边加边磨， 至甘油加完为止，倒入500ml有塞玻璃瓶中。在研钵中加 入少量甲醇，洗掉剩余部分，倒入瓶内，再次加甲醇，洗 后再倒入瓶中，至甲醇洗净研钵为止。塞紧瓶塞，充分摇 匀，室温内放置，每天用力摇动溶液5分钟，3天后即可使 用。
注意事项
• 染色效果的好坏与稀释用水的氢离子浓度 （pH）、染液的浓度、染色时温度的高低、 染色的时间长短、染液配制的时间长短等 都有密切的关系，因此，每批血片染色前 要进行试染，以取得更好的染色效果。
染色前血膜的保存
• 血膜制成后，立即将受检者号码写在玻片上，血膜朝下水平插入 标本盒内，让血膜自然干燥后才能染色。
• 血膜放置时间，夏天不宜超过48小时，冬天不宜超过72小时，否 则厚血膜会自然固定而不能溶血，影响镜检。
最佳。中性的蒸馏水也可。
缓冲液配制
pH
1/15mol/L 磷酸氢二钠溶液
1/15mol/L 磷酸1
7.0
6.3
3.7
7.2
7.3
2.7
7.4
8.1
1.9
蒸馏水 （ml）
90
90
90
90
染色方法
• 少量血片染色：取吉氏染液1份，加入缓冲液或蒸馏水15 至20份，混合均匀后，滴在厚、薄血膜上，染色20~30分 钟，然后用缓冲液或蒸馏水将血片上的染液冲走，晾干待 检。
血膜的染色
• 染色液的制备：推荐使用吉氏染液。吉氏染剂不仅适用于 厚血膜和批量血膜的染色，而且效果稳定，染色时间和染 液浓度对染色结果影响较小，染色后的血膜保存时间较长， 同时吉氏染剂能长期保存而不变质。
• 吉氏染液配制：吉氏粉 5g，甲醇250ml，甘油250ml。将 吉氏粉置于研钵中，加入少量甘油充分研磨，边加边磨， 至甘油加完为止，倒入500ml有塞玻璃瓶中。在研钵中加 入少量甲醇，洗掉剩余部分，倒入瓶内，再次加甲醇，洗 后再倒入瓶中，至甲醇洗净研钵为止。塞紧瓶塞，充分摇 匀，室温内放置，每天用力摇动溶液5分钟，3天后即可使 用。
注意事项
• 染色效果的好坏与稀释用水的氢离子浓度 （pH）、染液的浓度、染色时温度的高低、 染色的时间长短、染液配制的时间长短等 都有密切的关系，因此，每批血片染色前 要进行试染，以取得更好的染色效果。
染色前血膜的保存
• 血膜制成后，立即将受检者号码写在玻片上，血膜朝下水平插入 标本盒内，让血膜自然干燥后才能染色。
• 血膜放置时间，夏天不宜超过48小时，冬天不宜超过72小时，否 则厚血膜会自然固定而不能溶血，影响镜检。
血片制作染色课件
血片的染色
第二步：染色用水和冲洗用水配制
常用中性的蒸馏水或经煮沸过滤的冷开水； 用pH7.0～pH7.2的缓冲液。
血片的染色
第三步：染色
薄血膜经甲醇固定干燥后， 将血片平放
用PH7.0-7.2的磷酸缓冲液 (PBS)或蒸馏水将吉氏原液 稀释；
染色20-30分钟，晾干镜检。
血片的染色
久，颜色偏酸；
染色时间 ：染色时间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和气温而适当增减。 冲洗方法：染色后不要直接将染液倒掉，沿玻片及染缸边缘加水使染液表面 益出，并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒粘污血膜。
染色质量影响因素
染色稀释用水: PH7.0-7.2清洁水。
用水过酸，可致感 染的RBC上的点彩 染不出来； 用水过碱，则使薄 血膜上的RBC染成 灰蓝色，致使R的 胞浆难以辨论。
厚血膜溶血染色 放臵多时未染色的血 片（2天以上，薄片已 用甲醇固定），在染 色之前，须在厚血膜 上用清水进行溶血， 待血膜全部溶解后倒 掉，用吉氏染液染色, 清水漂洗干净,晾干。
血片的染色
如果血片偏红,说明
标 准
偏 碱
血片制作影响因素
载玻片必须清洁无油污，理想的薄血膜是一层血细胞均匀 分布不重叠、无裂缝、无皱折和空泡，血膜末端呈舌状； 厚血膜厚度以一个油镜视野内可见5-10个白细胞为宜； 血片制作场所要保持清洁，以免尘埃沾污血膜，防止苍蝇 等舔食血膜； 制成的血片在未干前不能倾斜放臵，待其自然干燥，不要 加热，加热会使原虫变形，影响镜检结果．
血片制作
第二步：患者信息的核实
首先要核对患者的姓名、年龄和住址。
非常重要
血片制作
第三步：血样的采集 部位：指尖、耳垂
2013.4.15疟原虫血片制作染色
2020/2/25
9
血片编号
血膜制成后，立即将受检者的个人编 号写在玻片磨砂面上（血片的编号要 与血检登记本上编号一致）以防差错。
2020/2/25
10
制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时，手指只能持载片的边缘，不 能接触玻片表面，以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑， 才能使推出的血膜均匀一致。
血片制作和染色质量标准
项目
检查 内容
好
质量标准
中
差
血量 4～5цl
略多或略少
过多或过少
厚血 膜
位置 直径
玻片右1/3 0.8～1.0cm
稍偏右
0.7～0.8 或1.0～ 1.2cm
偏右过多 <0.7或>1.2cm
血片 制作
外观 血量
圆形厚膜均匀， 边缘整齐
1～1.5цl
圆形稍不均不整齐 厚薄不匀影响着色
2020/2/25
23
影响染色效果的因素
（4）染液的稀释浓度 染液的浓度高其着 色就快而深，从而疟原虫寄生红细胞的薛 氏点粗大显著，但颜色常偏碱；染液浓度 过低则染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不 明显或消失。
2020/2/25
24
影响染色效果的因素
（5）染色时间 染色时间长染色效果好， 反之较差。室温高则着色快，染色时间可 略缩短，气温低可适当延长。因此染色时 间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和 气温而适当增减。
2020/2/25
15
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又 具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
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制作血膜的注意事项
2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜 未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧， 造成血膜厚薄不均，厚处不一溶血和着色而影 响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍 蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标 本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段 时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜红 蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
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血膜的制作（取血时间）
取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普 查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期 疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环 状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体 期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有 利时机；36~48小时，可检出裂殖体；发作 一、二次后，配子体出现较多。
取血量及涂片法（涂片操作） 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
薄血膜 取洁净的载玻片2张， 1张平置在桌上，以左手拇 指，食指夹持载玻片两端 （手指切勿接触玻片表面）， 用另一张边缘平滑（最好为 磨口边缘）的载玻片做推片， 用推片一端边缘的中点从取 血部分取约1微升的血量 （相当于1/4火柴头大小）， 使血滴与平置的载玻片接触， 并形成25~30度夹角，待 血液向两侧扩展约2厘米长 度时，均匀而迅速地轻轻向 左推出（约2.5厘米长）。
血片的染色 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称 很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液 变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液 两大类，前者包括罗氏、西氏（Simon)、 J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染 液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰 氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
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（涂片操作）
厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约4微升血 量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片 接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4圈，涂成 直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀， 过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性 水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离 解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸 性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、 嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的 沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰 离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的 胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合 染成兰色。
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血膜的制作（涂片操作）
涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分， 第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3 格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个； 门诊和发热病人血片每片1人，涂
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制作血膜的注意事项
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或 火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。 夏天标本尽可能24~48小时内固定染色； 冬天也不能超过72小时。放置时间越久， 厚血膜越不易脱血，染色效果也差。若 不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定 （1~3分钟）然后用过滤清水对厚血膜 溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以 后染色。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小 时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。
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血膜的制作（取血操作）
取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头， 通常在耳垂取血（现场取血建议用大头针 采血，一人一针，避免血传疾病）。先用 75%酒精棉球消毒取血部位（冬季用手 捻动耳垂使其充血后再行消毒），待酒精 干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方， 右手持消毒针迅速刺入耳垂下端1~2毫米， 不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向 挤压出血。
血片的染色 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又 具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
标标签签
防血膜脱落而影响检查；
标本片
疟疾调查时，每张玻片
可涂制2~3人血膜。
发热病人血片
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血膜的制作
血膜编号 血膜制成后，立即用特种 蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的 号码，以防差错，待薄血膜干后再用 铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号 和受检者的个人编号，依次顺序插入 标本盒内。
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制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时，手指只能持载片的边缘，不 能接触玻片表面，以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑， 才能使推出的血膜均匀一致。