Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪操作规程
使用ACQUITY UPLC 和Xevo TQ-S 分析食品中致过敏物质肽
38 食品安全导刊 2015年3月使用ACQUITY UPLC和Xevo TQ-S分析食品中致过敏物质肽□ 沃特世公司 供稿食品过敏情况越来越多，对食品呈不良反应的人口数量也一直在增加。
尽管许多食品会导致发生反应，但90%的食品过敏反应局限于少量所谓的关键过敏原。
这些关键过敏原包含在牛奶、甲壳动物、卵、鱼、花生、大豆、坚果和小麦中。
为了帮助那些出现食品过敏的人，全球范围内都有与食品安全问题相关的许多不同法规。
许多年来，分析食品中是否出现过敏组分的最常见分析技术都基于酶联免疫吸附法和实时聚合酶链反应的抗体技术。
ELISA基于可利用目标过敏蛋白质和不会引起其他类似蛋白质反应的抗体，PCR不会标记相应的特定目标蛋白质，因此会产生假阳性结果。
由于能够标记特定蛋白质和一种方法分析多种过敏物质，最近使用质谱（MS）检测过敏原的方式引起很大关注。
能够在方法开发过程中同时监测基质背景，优化出最佳方案,确保方法高效可靠。
该技术简介中，用于制作面包的花生被用于解释食品基质中的过敏原肽标记的检测方法。
还介绍了在定量MRM分析过程中能够同时采集基质背景信息的仪器设计方面的重要进展。
该功能（被分析检测Tlogy科技表1 花生过敏原分析的MRM色谱通道称作RADAR TM 采集）为组分定量分析并且同时监测背景干扰提供了创新方法，能够在方法开发过程的同时持续监测基质背景，优化出最佳方案，确保方法高效可靠。
解决方案之前的实验在沃特世（Waters ®）nanoACQUITY UPLC ®和Xevo QTof MS （应用序列号720003656EN）上使用食品蛋白质组学方法鉴定摄入生或烤花生引起的过敏反应相关标记，该实验鉴定了生和烤花生的肽序列。
在本次实验Copyright©博看网 . All Rights Reserved.Mar 2015 CHINA FOOD SAFETY39图1 加标面包基质中Ara h1蛋白质的三种肽的MRM提取离子色谱图肽序列VLLEENAGGEQEER的三种具体MRM提取离子色谱放大图图2 使用RADAR生成的背景基质信息A：786.9>804.3(VLLEENAGGEQEER)的MRM提取离子色谱图B：688.8>930.5(DLAFPGSGEQVEK)的MRM提取离子色谱图C：全扫描MS TIC色谱图插图A至B分别显示Rt5.67和7.01处的加和全扫描质谱图分析检测中，使用其中两种肽段和ACQUITY UPLC 系统和Xevo TQ-S质谱开发高度灵敏和高特异性的方法。
UPLC-H-Class_系统介绍
培训教程(H-Class 系统)摘要ACQUITY UPLC H-Class 系统原理及特点 开机顺序及使用注意事项摘要ACQUITY UPLC H-Class 系统原理及特点 开机顺序及注意事项ACQUITY UPLC H-Class 系统ACQUITY UPLC H-Class 系统核心系统四元溶剂管理器(QSM)样品管理器–Flow Through Needle (SM-FTN) 柱温箱(CH-A)支持所有现在的ACQUITY 检测器–PDA and PDAeλ–TUV–FLR–ELSD–QDa and TQDACQUITY UPLC H-Class 四元溶剂管理器操作特点–最大流速= 2mL/min–最大操作压力= 15,000 psi四元溶剂混合自动混合功能H-Class QSM (四元溶剂管理器)流路QSM With Optional Solvent Select ValveTo SystemVent Valve Filter/MixerOptional SolventSelect ValveIndividual Gradient Proportioning Valves (4)ManifoldIn-Line Filters (4)Primary Accumulatori 2ValveSolvent Solvent SolventACQUITY UPLC H Class硬件简介四元溶剂管理器_Quaternary Solvent Management System （QSM）–脱气机–泵–GPV (比例阀)–Inlet manifold–溶剂处理单元ACQUITY UPLC H Class 溶剂脱气机QSM 脱气/ GPV 流路3-GPV 出口与低压入口混合SM处清除溶剂的脱气包管理器相连2-脱气包连向GPV入口1-溶剂瓶连向脱气包入口QSM 流路初级泵泵头蓄积泵泵头排液阀100 µL 混合器一对梯度比例阀低压混合管理器脱气包Seal Wash 泵QSM 泵头流路初级泵压力传感器到蓄积泵单向阀蓄积泵压力传感器到排液阀低压入口管理器到初级泵的I 2VGPV 出口到低压入口管理器I 2V 主动阀入口管理器滚花式不锈钢接头支架入口管理器侧视图俯视图柱塞相对运动速度图主柱塞蓄积柱塞送液(+)柱塞与流速方向相同进样点主柱塞传递溶液预压缩两柱塞之差送向系统(0.4)蓄积柱塞送液(0.4)过滤器/混合器集成装置位置废液管理器来自于检测器的废液来自于进样器的废液来自于密封清洗的废液QSM 控制面板菜单自动混合（AutoBlend技术）Water AcetonitrileAlcohol ConcentratedModifier95%0%45%50%自动混合梯度Water1%TFAIsopropanolAcetonitrileWater1%TFAIsopropanolAcetonitrile0%5%0%5%100%Water0%Acetonitrile 0.05%TFA 50%Water50%Acetonitrile 0.05%TFA肽图谱方法开发TFA 浓度变化-%DA U0.000.050.100.150.200.250.05% TFA –5% D0.025% TFA –2.5% DU样品管理器-FTN可变进样体积–标配进样体积可达10uL–最大扩展至250uL 进样进样针在流路中的设计–全体积样品进样–更低的交叉污染覆盖全范围的进样盘和样品瓶支持预加载样品和定量环离线功能样品管理器-FTNWash SolventPurge Solvent样品加载样品进样样品管理器（FTN ）正面流路一览至定量注射阀的管路连接单向阀单元进样阀管路连接清洗溶剂入口管路(没有脱气)漏液传感器连接处样品注射器内部流路针驱动装置SS Needle针密封清洗集Needle Lug Latch成装置R-Carriage End Plate针密封清洗装置针进样的位置进样针的类型标配的不锈钢针，15 µL–作为标配安装在样品管理器中不锈钢针包, 30 µL–最耐用的针选配的扩展环 50 µL扩展环 100 µL扩展环 250 µL扩展环样品管理器FTN (flow through needle)样品管理器FTN (flow through needle)色谱柱温控制温度范围: 室温+5 到90°C2.1 到4.6 mm, 最长可达150 mm 色谱柱接在线过滤器或预柱 标配主动预热装置主动预热确保温度控制的一致性消除环境对色谱柱温度带来的影响减小系统体积以减少额外的色谱柱谱带展宽 兼容之前的被动预加热装置主动预加热器ACQUITY UPLC®光电二极管矩阵(PDA)和可调紫外可见(TUV)检测器ACQUITY UPLC® PDA和TUV检测器提高的灵敏度优异的噪音抑制性能光引导流通池设计–两种流通池选件能够满足更广泛的应用范围低电子噪音–高亮度灯宽动态线性范围支持最大80 Hz的采集速率–独立的数据采集速率和滤波常数全控制台软件控制为何使用UPLC®专用检测器?更快的洗脱峰需要更高的数据采集速率–降低样品谱带在流通池中的扩展时间更小的峰需要最大的信噪比S/N–高光通量/传输–更快的数字滤波时间常数UPLC分离需要低扩散体积的流通池–保持峰形–不产生高反压ACQUITY UPLC® PDA 检测器Waters’ ACQUITY UPLC®PDA检测器–最大采集速率80 Hz–最小化的噪音o10 µAU–最大化的光谱分辨率–最大化的线性范围o为杂质和痕量分析提供更宽的动态范围o用更短的分析时间获得更好的数据o高可信度的数据结果–流通池o新颖的光引流通池设计o更长的激发光路能够给出更好的吸光度和灵敏度ACQUITY UPLC® TUV 检测器Waters’ ACQUITY UPLC®TUV 检测器–80 Hz 最大采集速率–最小化的噪音o 6 µAU–最大化的线性范围o 2.5 AUo为杂质和痕量分析提供更宽的动态范围o用更短的分析时间获得更好的数据o高可信度的数据结果–流通池o新颖的光导流通池设计o更长的激发光路能够给出更好的吸光度和灵敏度ACQUITY UPLC® 高亮度灯高亮度氘灯– 低噪音特性 – 能够输出近两倍于普通氘灯的亮度 （能量）好处– 低噪音 – 更高的灵敏度灯的保证寿命– 2000 小时前面板拆装 软件对灯的固件控制– 运行时间 – 点灯 – 序列号©2014 Waters Corporation41ACQUITY UPLC® 吸光度流通池 – 光引导方法光路TeflonAFα流动相TeflonAF光引导流通池实质上就是中间材料为液体的光纤 进入流通池的液芯中的光线在照射到Teflon® AF壁上时会发生全反射, 即全内反射(Total Internal Reflection, TIR) 理论上讲,在AF管的圆柱表面上的每一点上都会发生全反射,这样除了由 于样品的吸收,入射光就会以接近100% 的效率透射过流通池©2014 Waters Corporation 42PDA 流通池选件高灵敏分析型25 mm 2400 nL10 mm 500 nL©2014 Waters Corporation43TUV 流通池 高灵敏 分析型25 mm 光程 2400 nL 体积©2014 Waters Corporation10 mm 光程 500 nL 体积44反压调节器反压调整器能确保溶解在流动相中的气体不会产生气泡,从而保证基线平稳 不受气泡噪音的干扰 如果UV检测器是系统中的最后一个检测器，一定要装配反压调整器 如果在PDA/TUV后面还连接有质谱或其它检测器，则无需装配反压调整器©2014 Waters Corporation45ACQUITY UPLC® 检测器 -快速数据采集速率0.50 0.45 UPLC 条件 色谱系统: ACQUITY UPLC (BSM, SM, TUV) 色谱柱: 2.1 X 50 mm BEH C18, 1.7 µm 流动相: 50% of A: 10 mMol Ammonium Bicarbonate pH=10 50% of B: Acetonitrile 流速: 1.2 mL/min 进样体积: 1 µL (5 uL Loop, 30 uL PEEK Needle, PLUNO, 1 uL air gaps) 强洗 = 75% ACN/25% Water (250 uL) 弱洗 = 50% ACN/25%Water (1000 uL) 样品室温度: 15 °C 柱温箱温度: 45 °C 检测器: ACQUITY TUV @ 301 nm, Various data rates, FTC=Off 样品 = ~ 0.05 mg/mL Benzocaine, Butamben, and Tetracaine in 1:1 Buffer/ACN 数据: Empower 20.400.350.30AU0.250.20 1 Point per Second 2 Points per Second 5 Points per Second 10 Points per Second 20 Points per Second 40 Points per Second 80 Points per Second0.150.100.050.00 0.12 0.14 0.16 0.18 0.20 0.22 0.24 0.26 0.28 0.30 0.32 Minutes 0.34 0.36 0.38 0.40 0.42 0.44 0.46 0.48对于UPLC, 检测器的采集速率必须足够大，以确保完整检测到狭窄的 UPLC峰 ACQUITY UPLC 检测器支持从1到80Hz的各种采集速率,以满足任何 UPLC应用中的需要 有效的积分算法和独立的时间常数，确保了精确的和可重现的积分©2014 Waters Corporation 46ACQUITY UPLC® 独立的采集速率和滤波常数采集频率和滤波常数的单独优化，使得在确保分辨率和灵敏度最优的 条件下，找到最佳的检测参数©2014 Waters Corporation47PDA 通用(General)界面©2014 Waters Corporation482D 通道吸光度 基线补偿 (MBF) 最大吸收值绘图（Maxplot） 波长差减 波长叠加 比率(Ratio)波长©2014 Waters Corporation49摘要ACQUITY UPLC H-Class 系统原理及特点 运行准备及注意事项©2014 Waters Corporation50。
(沃特世)UPLC超高效液相色谱介绍
UPLC超高效液相色谱（沃特世）主要特点超高速度1.小颗粒填料色谱柱能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度2.显著增加样品的通量，提高工作效率，降低分析成本3.节省以往一向耗时的方法开发与认证的时间超高灵敏度1.小颗粒技术和整体化的仪器设计，UPLC®能在改善分离度的同时提高灵敏度2.更高的柱效和更窄的色谱峰，意味着更高的色谱峰高和更高的灵敏度3.在得到超高分离度和超高速度的同时能够得到超高灵敏度超高分离度1.利用高效创新小颗粒填料（1.7μL），获得超强分离能力2.超低扩散体积，充分发挥小颗粒填料分离能力3.超高分离度，适合复杂混合物的分离分析超级创新为满足色谱实验室对历史追踪不断增长的需求，每根ACQUITY UPLC®色谱柱出售时均带一个永久性的eCord，它能记录进样次数，最高的反压和柱温，其中还含有由沃特世公司提供的该色谱柱的分析测试合格证书。
色谱柱安装后，智能化的芯片会自动地把关键参数采集进入色谱柱的历史文档，并记录色谱柱整个寿命周期的历史。
该记录不能被删除。
技术参数最大操作压力：15000psi（1mL/min）溶剂输送精度：0.075%RSD或0.02minSD流速范围：0.010-2.000mL/min，增量0.001mL/min梯度曲线：11种。
包括线性、凹线、凸线和两种步进梯度变化有效系统体积:<140μL，与系统反压无关。
带标准混合器溶剂选择:最多四种。
可在A1与A2和B1和B2之间选择交叉污染:0.005%或2nL进样范围:0.5-50μL进样精度:<0.3%RSD进样线性:>0.999样品室温度控制:4 - 40℃色谱柱历史追踪:使用eCord技术检测器配置:紫外可见检测器、光电二极管矩阵检测器、蒸发光散射检测器以及所有质谱检测器超高速度,超高灵敏度,超高分离度,超级创新为满足色谱实验室对历史追踪不断增长的需求，每根ACQUITY UPLC®色谱柱出售时均带一个永久性的eCord，它能记录进样次数，最高的反压和柱温，其中还含有由Waters公司提供的该色谱柱的分析测试合格证书。
H-ClassXEVO TQD 用户操作练习手册
H-Class/Xevo TQD用户操作练习手册Waters 客服电话座机拨打：8008202676 手机拨打：4008202676 电子邮箱：************************一．仪器的原理H-Class 四元泵示意图H-Class 四元泵比例阀脱气包放空阀低压混合器 Seal wash 泵初级泵蓄集泵过滤器H-Class 自动进样器Sample Manager-FL示意图Sample Manager-FL样品盘盘号选择钮进样六通阀样品注射器Sample Manager – FTN示意图Sample Manager – FTN样品盘盘号选择钮进样六通阀样品注射器Xevo TQD示意图二．软件的基本操作与实验的一般流程打开Masslynx软件，调用已有的项目或建立新的项目（project）调用已有的项目1.在桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件2.单击File > Open Project,出现如下对话框3.单击Yes选择合适的路径和合适的项目，单击OK 即可建立新项目1.在桌面上双击Masslynx图标2.单击File > Project Wizard3.出现对话框“When changing to a new project, some services are automatically closed down, Continue?”,单击Yes4.出现如下对话框输入项目名称（project name）,对项目的描述（Description）,路径（Location），在路径中建议在C盘下新建一个文件夹，并命名为MS DATA，所有新建项目都放在这个文件夹中，单击Next5.选择create using existing project as template,并以C:\Masslynx\Default.pro为模板单击Finish注意：一般建议以当前PROJECT或DEFAULT或工程师安装仪器的Installation Project为模板建立新的PROJECT，一般不建议建全新的PROJECT。
Waters Acquity UPLC 超高效液相色谱仪
1.0目的为了指导实验分析员在实验工作中正确使用Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪，特制定本规程。
2.0范围适用于指导实验人员在实验工作中对Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪的操作。
3.0职责3.1实验人员在实验工作中使用Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪时应遵循本规程。
3.2部门负责人负责审核本规程并保证其实施。
3.3 QC部门负责日常运行的监管。
4.0 操作规程4.1 试剂准备使用色谱纯试剂配制的流动相和清洗液.强洗针液用较高比例的甲醇或乙腈的水溶液(如80/20),弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液(如10/90),清洗柱塞密封垫（Seal Wash）溶液应使用纯水或5%～10%甲醇溶液。
4.2 液相开机4.2.1 先打开UPLC所有模块电源（最后打开SO（Sample Organizer）电源），打开Analyst software，点击ACQUITY Console进入液相控制界面，图1。
图14.2.2 连接液相4.2.2.1自动启动液相：点击system，点击control，选择start up system，弹出图2控制界面，依次选择需要执行的项目。
Prime Solvents中选择需要进行SM（Sample Manger）和BSM（Binary Solvent Manager）的相关项目。
依次在Opitonal和Equilibrate to Method 中按实验需要进行设置。
然后点击start，仪器自动进行清洗等准备工作。
如果BSM,SM,SO等显示红色字体，说明仪器和软件连接失败，分别点击control，reset相关部分。
图24.2.2.2 连接液相各个部分（如果BSM,SM,SO等显示红色字体，说明仪器和软件连接失败，分别点击control，reset）。
选择BSM，点击control，选择Prime seal wash，进行柱塞杆的清洗。
waters_uplc_超高液相色谱仪使用方法_概述及解释说明
waters uplc 超高液相色谱仪使用方法概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在介绍和解释Waters UPLC超高液相色谱仪的使用方法。
超高液相色谱技术作为一种快速、高效、灵敏的分析方法，已广泛应用于生命科学、环境监测、药物研发等领域。
而Waters UPLC超高液相色谱仪则作为当前市场上领先的仪器之一，拥有先进的特点和优势。
1.2 文章结构本文将按照如下结构来进行介绍和说明：首先，在第2部分中，我们将对Waters UPLC超高液相色谱仪进行详细的介绍，包括其工作原理、构成和组件以及特点和优势。
然后，在第3部分中，我们将概述超高液相色谱分析方法的基本步骤，并重点讨论样品准备工作、色谱柱和流动相选择与优化以及仪器参数设置与调节等方面的内容。
接着，在第4部分中，我们将详细解释使用Waters UPLC超高液相色谱仪的具体步骤和操作说明，包括开机与准备工作、样品处理与注射操作以及方法运行与数据分析等方面。
最后，在第5部分中，我们将总结使用过程中的经验和解决技巧，并展望超高液相色谱在分析领域中的发展方向和应用前景。
1.3 目的本文旨在帮助读者全面了解Waters UPLC超高液相色谱仪的使用方法，包括仪器介绍、分析方法概述以及具体操作步骤。
通过阅读本文，读者将能够熟练运用该仪器进行高效、准确的样品分析，并对超高液相色谱技术在各个领域中的应用前景有更深入的了解。
同时，我们也希望通过分享使用经验和问题解决技巧，能够为相关科研人员提供一些实用的参考和指导。
2. Waters UPLC超高液相色谱仪介绍2.1 原理Waters UPLC（Ultra Performance Liquid Chromatography）超高液相色谱仪是一种高效的色谱分析技术。
其原理基于传统液相色谱，通过使用减小粒径和增强填充剂的方式，实现更高的分离效率和分辨率。
UPLC仪器利用高压泵将样品溶液加速通过色谱柱，在极短的时间内完成分离、富集和检测。
超高效液相色谱串联质谱法和离子色谱法测定饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸的比对
超高效液相色谱串联质谱法和离子色谱法测定 饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸的比对寇 斐（郑州自来水投资控股有限公司，河南郑州 450000）摘 要：目的：分别利用超高效液相色谱串联质谱法与离子色谱法对生活饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸进行测定，比较其检测性能。
方法：样品经滤膜过滤后，以乙腈/0.05%乙酸水溶液作为流动相，梯度洗脱，以三重四极杆质谱检测器进行检测，根据保留时间和特征离子峰进行定量分析。
离子色谱法以KOH作为淋洗液，IonPac AS19分析柱和IonPac AG19保护柱，8～40 mmol·L-1梯度淋洗，以电导检测器检测。
从检测时间、准确度、精密度、检出限等方面对两种方法进行对比。
结果：两种方法测定二氯乙酸、三氯乙酸线性良好，超高效液相色谱串联质谱法测定二氯乙酸检出限为0.000 6 mg·L-1，三氯乙酸检出限为0.001 8 mg·L-1，检测时间为4.5 min；离子色谱法测定二氯乙酸检出限为0.001 2 mg·L-1，三氯乙酸检出限为0.002 2 mg·L-1，检测时间为32 min。
两种方法精密度和准确度均满足实验要求。
结论：生活饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸可以用以上两种方法进行定性和定量分析，其中离子色谱法所需有机试剂少，但检测时间长，检测限较高；超高效液相色谱串联质谱法检测限较低，灵敏度高，检测时间短。
日常检测工作中，可根据水样具体情况，选择合适的检测方法。
关键词：二氯乙酸；三氯乙酸；生活饮用水Comparison Between Ultra High Performance LiquidChromatography Tandem Mass Spectrometry and Ion Chromatography for the Determination of Dichloroacetic Acid and Trichloroacetic Acid in Drinking WaterKOU Fei(Zhengzhou Water Supply Investment Holdings Company Limited, Zhengzhou 450000, China) Abstract: Objective: Dichloroacetic acid and trichloroacetic acid in drinking water were determined by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry and ion chromatography respectively, and their detection performance was compared.. Method: The liquid chromatography tandem mass spectrometry sample was filtered through a filter membrane, and acetonitrile/0.05% acetic acid aqueous solution was used as the mobile phase for gradient elution. The detection was performed using a triple quadrupole mass spectrometer detector, and quantitative analysis was performed based on retention time and characteristic ion peaks. The ion chromatography method used KOH as the eluent, IonPac AS19 analysis column and IonPac AG19 protection column, with a gradient elution of 8～40 mmol·L-1, and conductivity detector detection. Compare the two methods based on indicators such as detection time, accuracy, precision, and detection limit. Result: The linearity of the two methods for determining dichloroacetic acid and trichloroacetic acid was good. The detection limit of dichloroacetic acid by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrum was 0.000 6 mg·L-1, and the detection limit of trichloroacetic acid was 0.001 8 mg·L-1, with a detection time of 4.5 min; the detection limit of ion chromatography for dichloroacetic acid is 0.001 2 mg·L-1, and for trichloroacetic acid is 0.002 2 mg·L-1, with a detection time of 32 min. The precision and accuracy of both methods meet the experimental requirements. Conclusion: Dichloroacetic acid and trichloroacetic acid in drinking water can be qualitatively and quantitatively analyzed by the above two methods. Ion chromatography生活饮用水的安全越来越受到人们的重视，随着饮用水消毒技术的发展，氯化消毒、臭氧消毒、二氧化氯等消毒技术的应用越来越广泛。
Waters 产品分类
3
高效液相色谱仪
主要分为两大类
1、1500系列 2、Alliance系统
©2011 Waters Corporation
4
1500系列液相
515 （单泵）+Empower软件 1515（单泵）+Breeze软件 1525（二元） +Breeze软件
©2011 Waters Corporation
5
Alliance
Alliance e2695
©2011 Waters Corporation
6
超高效液相色谱（UPLC）
UPLC H-Class
UPLC I-Class
©2011 Waters Corporation
7
超高效合相色谱（UPCC）
©2011 Waters Corporation
12
串四极
TQD+Empower软件
Xevo TQD Xevo TQ-S Micro Xevo TQ
Xevo
TQ-S
©2011 Waters Corporation
13
高分辩
Xevo G2-S Tof Xevo G2-S Qtof Synapt G2-Si MS Synapt G2-Si HDMS MALDI Synapt G2-Si MS MALDI Synapt G2-Si HDMS
再次重新定义色谱科学 2012.3.12
©2011 Waters Corporation
8
GPC/APC
GPC 液相+示差检测器+GPC软件 ACQUITY APC ---超高效凝胶色谱仪 （超高效聚合物色谱系统）
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD
超高效液相质谱联用仪操作规程
一、目的：为了安全、规范、正确使用超高效液相质谱联用仪，特制订本操作规程。
二、范围：仅适用于沃特世超高效液相质谱联用仪。
三、环境要求：温度20 ～25℃，相对湿度低于65% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。
四、操作步骤：
1.完整开机顺序：开氩气、氮气→开电脑主机→自动进样器→泵→柱温箱→检测器→质谱（注：开电脑主机后等待2～3分钟，开自动进样器后需要开机自检通过后再打开其他模块，质谱开启后需要等待3～5分钟使得自检通过）
2.抽真空：桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件，点击Mass Tune ，选择Vacuum项下pump开始抽真空。
（注：观察Diagnostics 界面下Turbo Speed 抽真空速度要达到80%以上，压力在1.30-e-5左右。
抽真空的状态至少4小时以上。
）
3.日常开机顺序：液相：灌注流动相和洗针液
质谱：开气（开氮气）、电（开高压 operate）、流动相（设置流动相流速和比例）
五、软件操作规范流程：
工作软件操作流程概述：
5.1调用已有项目选择C:\Mass Data\*****.PRO项目
5.2准备液相一般流程为：准备流动相>准备样品>灌注二元泵>灌注自动进样器>建立液相方法>平衡系统
5.3准备质谱一般流程为：计算化合物单同位素质量数>用Intellistart开始调谐>查看Intellistart中自动生成的质谱方法
5.4建立液相方法在液相方法编辑窗口（Inlet Method），单击Inlet，编辑参数，单击OK, 选择File > Save As 保存方法。
单击 Load Method ，平衡液相系统。
5.5建立样品列表
5.5.1. 在Masslynx 主窗口，选择 File > New 建立一个空白的样品表Sample list或打开一个已有的SAMPLE LIST。
Sample list的使用与Windows EXCEL表格类似。
5.5.2. File Name栏：输入文件名，如training 001.建议以3位数字结尾。
5.5.3. File Text栏：输入样品信息
5.5.4. MS File 栏：选择质谱方法
5.5.5. Inlet File栏：选择液相方法
5.5.
6. Bottle栏：输入样品瓶的位置
5.5.7. Inject Volume栏：输入进样体积
5.5.8. 可右键> Add, 增加样品表的行数
5.5.9. 保存样品表：File > Save As，输入样品表名称，将样品表保存在项目的sampledb文件夹下，建议使用有规律的命名，如检测项目或操作人加年月。
5.6 样品采集与处理点击开始进行图谱采集。
5.7 报告输出
5.8关机与维护
5.8.1日常关机：完成实验后，应根据色谱柱的使用说明或维护指南，对色谱柱进行冲洗保存。
一般如果流动相中有缓冲盐必须先将缓冲盐用高水相冲洗掉，再从高水相过渡到高有机相（如95%以上乙腈），冲洗10倍以上柱体积，停流速。
关质谱：关高压（STANDBY） > 等待去溶剂气温度降低至100度以下 > 关氮气。
5.8.2 彻底关机：①先完成日常关机；②泄真空: tune page > vacuum > vent > 当涡轮分子泵转速降到40以下时，仪器会自动关闭机械泵电源；③退出软件，计算机关机；④关质谱电源 > 关所有UPLC电源；⑤关闭UPS电源。
六、使用注意事项
6.1使用后须认真履行使用登记制度，保存实验数据并填写仪器使用记录表。
6.2所有流动相都要求经0.22um过滤器过滤，水相要用前新配，并不得超过两天。
样品必需使用0.22μm的膜过滤。
6.3长时间待机，注意关闭PDA检测器的氘灯。
6.4氩气少开，不用时可以关掉。
6.5清洗锥孔时，要关闭高压和锥孔阀门，↓箭头向下即关闭，←箭头向左即打开。
操作时必须全程佩戴无尘手套，清洗锥孔时，锥孔头要保持向上。
6.6氮气的废液要随时观察，满了就要倒掉；质谱的废液管不能放到废液的液面以下。