细胞凋亡周期
细胞周期与细胞凋亡
细胞周期与细胞凋亡细胞是构成生命体的基本单位，它们经历着一个连续的循环，被称为细胞周期。
细胞周期由不同的阶段组成，包括有丝分裂期和间期。
细胞周期的调控对于生物体的正常发育和疾病的发生具有重要的影响。
与细胞周期相对的是细胞凋亡，这是一种程序性细胞死亡的过程，旨在维持组织的稳态和清除受损细胞。
本文将探讨细胞周期和细胞凋亡的基本概念、调控机制以及两者之间的关系。
一、细胞周期的基本概念细胞周期是指从一个细胞产生到其后代产生的完整循环。
简而言之，细胞周期可以分为有丝分裂期和间期两个主要阶段。
有丝分裂期包括有丝分裂前期、有丝分裂期、有丝分裂后期等子阶段。
在有丝分裂前期，细胞的染色体开始凝缩并变得可见。
有丝分裂期是细胞核分裂的过程，包括纺锤体形成、染色体对分以及核膜的破裂等。
最后一个阶段是有丝分裂后期，细胞膜分裂完成，并最终形成两个新的细胞。
二、细胞周期的调控机制细胞周期的调控机制非常复杂，涉及到多个细胞周期蛋白激酶、转录因子和相关的信号通路。
一个关键的调控复合物被称为Cyclin-CDK复合物，这是一个由Cyclin蛋白和Cyclin依赖性激酶(CDK)组成的复合物。
CDK的活性依赖于Cyclin的结合，不同类型的Cyclin会在细胞周期的不同阶段表达。
此外，细胞周期还受到其他因素的调控，如细胞生长和DNA损伤等。
三、细胞凋亡的基本概念细胞凋亡是一种自然发生的细胞死亡过程，它是组织稳态的关键保障和维持机制。
细胞凋亡通常可以通过细胞内的一系列信号通路来激活，如线粒体通路、死亡受体通路和内源性通路等。
在细胞凋亡的过程中，细胞会经历细胞质收缩、核膜破裂、DNA降解等一系列特征性变化。
四、细胞周期与细胞凋亡的关系细胞周期和细胞凋亡是细胞生命的两个基本过程，它们之间存在着复杂的相互作用。
一方面，细胞周期的调控可以影响细胞凋亡的发生。
在细胞周期的不同阶段，细胞对于凋亡刺激的敏感性存在差异。
例如，在有丝分裂前期，细胞对于凋亡刺激比较耐受。
细胞周期与细胞凋亡
在有丝分裂后期，着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为独立 的子染色体，导致染色体数目加倍。
有丝分裂及其意义
有丝分裂定义
有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式，具有周期性，分为间期和分裂期。其特点是在细胞分裂前有纺锤 丝形成，故称为有丝分裂。
有丝分裂意义
有丝分裂对于生物体的生长、发育和繁殖具有重要意义。它保证了亲代和子代细胞遗传性状的稳定性，同时实现 了遗传物质在子代细胞中的均等分配。此外，有丝分裂还是生物体生长的基础，通过细胞增殖和分化形成各种组 织和器官。
05
疾病中异常现象及临床意义
肿瘤发生发展过程中异常现象举例
细胞周期失控
肿瘤细胞常常出现细胞周期检 查点失效，导致细胞无限制增 殖。
凋亡抑制
肿瘤细胞通过抑制凋亡相关基 因的表达，逃避凋亡命运，实 现永生化。
基因组不稳定
肿瘤细胞基因组不稳定，出现 大量突变，进一步促进肿瘤的 发展。
神经退行性疾病中异常现象举例
，为人类的健康事业做出更大的贡献。
THANK YOU
感谢聆听
02
细胞凋亡途径与机制
细胞凋亡概念及生物学意义
细胞凋亡定义
细胞凋亡是一种基因控制的、有序的细胞死亡过程，涉及一系列形态学和生物 化学变化。
生物学意义
细胞凋亡在维持组织稳态、胚胎发育、免疫应答以及疾病发生发展中发挥重要 作用。通过清除损伤、老化或多余的细胞，细胞凋亡有助于维持组织器官的正 常结构和功能。
针对这些异常现象可能采取治疗策略
恢复细胞周期检查点功能
通过药物或其他手段恢复肿瘤细胞周期 检查点的功能，阻止细胞无限制增殖。
VS
诱导肿瘤细胞凋亡
利用凋亡诱导剂激活肿瘤细胞凋亡通路， 促使肿瘤细胞死亡。
细胞的凋亡与细胞周期调控
细胞的凋亡与细胞周期调控细胞是构成生物体的基本单位，它们通过一系列复杂的生物化学过程维持生命的运转。
细胞的生命周期包括细胞周期和细胞凋亡两个重要过程。
细胞周期调控是细胞在生命周期中不断复制和分裂的过程，而细胞凋亡则是细胞在受到损伤或发生异常时主动死亡的过程。
这两个过程密切相关，共同维持着生物体的正常生长和发育。
细胞周期是指细胞从一个分裂产生的细胞到下一次分裂产生的细胞之间的时间间隔。
细胞周期可以分为G1期、S期、G2期和M期四个阶段。
G1期是细胞在分裂前的生长期，细胞通过摄取营养物质和合成生物大分子来增长体积和质量。
S期是DNA复制期，细胞在这个阶段复制其基因组，确保每个新细胞都有完整的遗传信息。
G2期是细胞复制完成后的准备期，细胞在这个阶段继续增长并合成必要的蛋白质和细胞器。
M期是细胞分裂期，包括有丝分裂和无丝分裂两种方式。
细胞周期的调控是由一系列蛋白质激酶和激酶抑制剂相互作用而实现的，它们在不同阶段的细胞周期中起到重要的调控作用。
细胞凋亡是细胞主动死亡的一种程序性死亡方式，也被称为程序性细胞死亡。
细胞凋亡在生物体的正常发育和维持组织稳态中起着重要作用。
细胞凋亡的过程包括细胞膜的破裂、细胞核的碎裂和细胞质的分解。
细胞凋亡的调控是一个复杂的过程，涉及多种信号通路和调控因子。
其中，Bcl-2家族蛋白质是细胞凋亡调控的关键因子之一，它们通过调控线粒体膜电位和释放线粒体内的细胞凋亡相关蛋白质来影响细胞凋亡的发生。
此外，细胞凋亡还受到细胞外信号的调控，如细胞因子和生长因子的作用。
细胞的凋亡和细胞周期调控之间存在着密切的联系。
在正常情况下，细胞周期调控可以防止细胞凋亡的发生。
当细胞受到损伤或发生异常时，细胞周期调控会被打破，细胞无法继续进入下一个阶段，从而触发细胞凋亡的程序。
细胞凋亡的发生可以清除受损细胞，防止异常细胞的进一步繁殖和扩散，维持组织和器官的稳态。
然而，当细胞周期调控失去平衡或细胞凋亡调控受到干扰时，就会导致疾病的发生。
细胞凋亡和细胞周期的调控和信号传导机制
细胞凋亡和细胞周期的调控和信号传导机制细胞是生命体系的基本单位。
在生物体的发育和维护过程中，细胞需要遵循一定的生长和分裂规律。
其中细胞周期和细胞凋亡是最为基本的两种细胞行为。
细胞周期是指细胞从分裂到再生一个新细胞的过程，而细胞凋亡则是细胞主动死亡的过程。
这两种过程的规律和机制的了解对于许多疾病的治疗和研究都具有非常重要的意义。
本文将对细胞周期和细胞凋亡的调控和信号传导机制进行介绍。
一、细胞周期调控和信号传导机制1. 细胞周期的四个阶段细胞周期分为四个阶段：G1期、S期、G2期和M期。
G1期是细胞末次分裂后到DNA复制开始的一个时期，这个时期是细胞可以共沉积配体吸收营养物质的一段生长发育期，由于细胞代谢和复制准备的过程，故G1阶段为整个细胞周期中的最长期。
S期是核内DNA复制的期间，G2期为S期到有丝分裂前的间隔期间，M期是细胞周期的有丝分裂期，完成有丝分裂，分裂成为两个相同的细胞。
2. 细胞周期调控细胞周期的进展是通过CDK蛋白激酶的活化和解除来控制的。
激酶能够与细胞周期蛋白进行特异性配对，并引起细胞周期蛋白的磷酸化。
当细胞周期蛋白与CDK激酶结合后，CDK激酶则会引起细胞周期蛋白的磷酸化和激活。
3. 细胞周期的信号传导生长因子信号和环境信号都可影响细胞周期的进展速度。
例如，生长因子与特定受体结合，可激活Ras信号转导路径，最终导致与细胞周期有关的蛋白激酶CDK的激活。
环境信号也能影响细胞周期的进展，例如，过量的辐射或一些化学物质都能引起细胞周期的停滞或抑制。
二、细胞凋亡调控和信号传导机制1. 细胞凋亡的三大途径细胞凋亡是程序性细胞死亡，凋亡的方式主要有三个途径：内质网应激途径、线粒体途径和死受体途径。
在内质网应激过程中，内质网早期蛋白（ER）的异常积聚可引起细胞周期阻滞和细胞凋亡。
线粒体途径包括线粒体膜潜在分裂和Bcl-2家族蛋白质表达调节。
死受体途径是通过受体-配体作用引起一系列生化反应，并最终激活真核酸酶，导致DNA降解和凋亡。
生物中的细胞周期与凋亡
生物中的细胞周期与凋亡细胞是生命的基本单位，而细胞周期和细胞凋亡是细胞生命中两个极为重要的过程。
细胞周期是指从一个细胞分裂到下一个细胞分裂的整个过程。
一个典型的细胞周期包括四个阶段：G1期、S期、G2期和M期。
在G1期，细胞正在增长，细胞器和分子正在进行复制。
在这个阶段，细胞需要决定是否进入下一个阶段，即S期。
如果细胞决定进入S期，它就会开始复制其DNA。
在S期，细胞复制其DNA，并准备进入下一个阶段，G2期。
在G2期，细胞再次增长并准备进入M期。
在M期，细胞进行有丝分裂或无丝分裂，将其DNA平均地分配到两个新细胞中，并最终分裂成两个新细胞。
细胞周期对生命的维持是极为重要的。
正常的细胞周期对我们的身体健康非常重要，因为它帮助我们的组织、器官和身体部位正常生长和更新。
不同类型的细胞不同的周期长度，例如皮肤细胞约为24小时，肠道上皮细胞约为2至3天，肝脏细胞长达1至2年。
在某些情况下，细胞周期可能发生异常，导致癌症等疾病的发生。
当细胞周期发生异常时，可能会导致细胞凋亡。
细胞凋亡是一个非常重要的生物学过程，它是一个自我毁灭过程，可帮助体内细胞维护平衡，并消除受损或不需要的细胞。
相比于细胞死亡，细胞凋亡是一种有序且可控的过程。
细胞凋亡可以通过两个不同的途径实现：外源性途径和内源性途径。
外源性凋亡途径在细胞的外部发生，由于细胞周围环境的变化，如细胞暴露于化学物质、辐射等有害物质，也可能引起细胞凋亡。
内源性凋亡途径可由细胞内部产生信号引起，这些信号是在细胞周期异常或细胞损伤或其他细胞病理学状况下产生的。
当这些内在信号引起细胞凋亡时，依赖的途径是线粒体途径。
线粒体途径的分子调控网络非常复杂，包括许多的蛋白质以及多种信号分子。
当细胞受到刺激时，这些信号分子会激活一系列的受体，在受体的介导下，信号转移到线粒体，使线粒体的膜通透性发生改变，释放出线粒体内部的多种信号物质，这些信号物质进一步引发一系列的下一步反应，最终导致细胞死亡。
细胞周期和细胞凋亡的互动关系
细胞周期和细胞凋亡的互动关系细胞是构成生命的基本单位，它们不断地进行着生长、分裂和死亡的过程。
细胞周期和细胞凋亡是细胞生命周期中两个重要的节段。
细胞周期包括几个阶段，分别为G1期、S期、G2期和M 期，其中M期又分为几个子阶段。
细胞凋亡是指细胞在开启自我毁灭程序后，死亡并被清除的过程。
这两个过程在细胞生命周期中互相影响，同时也受许多内外因素的调节。
细胞周期的G1期是细胞生命周期中最长的阶段，这个阶段不仅决定了细胞生命的长度，也是细胞凋亡过程的关键时间点。
如果细胞没有通过G1期的监测，那么细胞将会停滞在G1期，或者进入细胞凋亡程序。
细胞在G1期的监测是由细胞周期调控系统完成的，这个系统可以通过检测细胞内环境的状态来决定细胞是否可以继续前行。
如果细胞内环境存在异常，细胞将被迫进入细胞凋亡过程，许多因素都可以影响这个过程，比如DNA损伤等。
当细胞处于细胞周期的S期阶段时，它会复制DNA，并且进行完整性的检测。
如果存在DNA损伤，那么会有许多机制调控细胞的DNA修复和保护。
在DNA复制过程中也可能出现误差，这时候细胞会进行基因转录和蛋白质修复等过程，来保证DNA的完整性和准确性。
然而，如果细胞复制的DNA碰到较大的障碍，如致命性DNA损伤或者是某些病原体的感染，那么它可能会进入细胞凋亡程序。
G2期也是一个重要的监测阶段，它的任务是确保所有DNA已经复制完毕，细胞内的环境也已经准备好进入细胞分裂程序。
如果有异常，细胞可能会进入细胞凋亡，以避免不稳定的生物过程继续进行下去。
M期是细胞周期中最短的阶段，它可以分为几个子阶段，包括有丝分裂和无丝分裂等，这些过程是细胞分裂所必须的步骤。
如果细胞分裂过程出现异常，如染色体丢失、破裂，胞质分裂异常等，那么细胞可能进入细胞凋亡程序。
最后，细细胞凋亡也是一种主动的生物过程，其可以由外源性和内源性因子引起。
细胞凋亡不仅是细胞死亡的一种方式，同时也是调控身体发育和维持机体内部稳态的重要过程。
细胞周期与细胞凋亡
细胞周期与细胞凋亡细胞是构成生物体的基本单位，细胞周期与细胞凋亡是细胞生命周期中两个重要的过程。
细胞周期是指细胞从分裂至再次分裂的整个过程，而细胞凋亡是指细胞主动死亡的过程。
本文将详细探讨细胞周期与细胞凋亡的定义、机制以及它们在生物体中的作用。
一、细胞周期细胞周期是细胞生命周期中的一个重要阶段，通常被分为四个阶段：G1期（细胞生长期）、S期（DNA复制期）、G2期（前期）和M期（有丝分裂期）。
这四个阶段紧密相连，因此形成了一个循环。
细胞周期的各个阶段以及转变的控制机制受到多种细胞因子、激素、营养物质等的调控。
1. G1期G1期是细胞周期的第一个阶段，也是细胞最为活跃的阶段。
在这个阶段，细胞进行生长、分化和合成DNA的准备工作。
这个阶段的持续时间因细胞类型和外部刺激而异。
G1期结束后，细胞将进入S期。
2. S期S期是细胞周期的第二个阶段，也是DNA复制的阶段。
在这个阶段，细胞的DNA复制酶活性增强，使得细胞能够合成新的DNA分子。
S期结束后，细胞将进入G2期。
3. G2期G2期是细胞周期的第三个阶段，也是细胞对S期完成的DNA进行检查和修复的阶段。
在这个阶段，细胞会检测是否有DNA损伤，以确保细胞在进入有丝分裂前的DNA完整性。
如果发现DNA损伤，细胞会进行相应的修复。
4. M期M期是细胞周期的最后一个阶段，也是有丝分裂的阶段。
在这个阶段，细胞的染色体复制以及有丝分裂的准备工作都完成了。
细胞将进行核分裂和细胞质分裂，将复制后的染色体平均分配给两个新细胞。
M期结束后，细胞再次进入G1期，细胞周期循环继续。
二、细胞凋亡细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式，与细胞周期紧密相关。
细胞凋亡是一种主动性的细胞死亡过程，当细胞受到一些内外环境刺激时，会启动凋亡信号通路，触发细胞内的自毁程序，最终导致细胞死亡。
细胞凋亡的主要特点是细胞内的DNA断裂和核染色质凝集。
细胞凋亡可通过两个主要的通路来实现：内源性通路（也称为线粒体通路）和外源性通路（也称为死亡受体通路）。
细胞凋亡与细胞周期关系研究
细胞凋亡与细胞周期关系研究近些年来，随着生物技术的发展，人们对细胞的研究越来越深入。
其中，细胞周期与细胞凋亡的关系备受关注。
细胞周期是指细胞自生长至分裂再到死亡的整个生命周期，而细胞凋亡则是指因某种原因导致细胞自主死亡的现象。
那么，细胞周期与细胞凋亡之间存在着什么样的关系呢？一、细胞周期与细胞凋亡的基本概念在人的生长发育过程中，细胞的增殖和死亡不断发生。
当细胞增殖速度大于凋亡速度时，人体组织和器官会逐渐扩大，反之则会逐渐萎缩。
而细胞周期和细胞凋亡分别是控制细胞增殖与死亡的两个关键过程。
细胞周期是指细胞从一个生长阶段到下一个分裂阶段的过程。
它可以分为四个基本阶段：G1（细胞生长）、S（DNA复制）、G2（准备分裂）、M（细胞分裂）。
不同类型的细胞其周期长短不一，通常周期长的细胞更容易发生癌变。
细胞凋亡则是一种有目的的自我死亡现象。
当细胞受损或者DNA损伤过大时，细胞通过某些信号通路启动凋亡程序，自我死亡，从而避免细胞癌化等异常病变。
细胞凋亡可以分为两种类型：胶原溶解性凋亡和凝集性凋亡。
二、细胞周期与细胞凋亡是否存有联系？有研究表明，细胞周期与细胞凋亡存在一些联系。
1. G1期和凋亡在G1期内，细胞会接受来自体内外物质的信号，根据细胞情况来决定是否进入S期进行DNA复制。
如果在G1期内细胞受到DNA损伤等严重影响，细胞就会尝试进行凋亡来避免病变的发生。
这种现象也表明了G1期是DNA修复的重要阶段。
2. G2期和凋亡G2期是细胞分裂的第三个阶段，在此阶段细胞会准备完成分裂的必备物质，以确保准确分裂。
如果细胞在此阶段遇到比较严重的DNA损伤，细胞就有可能选择进入凋亡程序，而不是继续分裂。
此外，研究还发现，在一些特殊的情况下，细胞在G2期也可能触发癌变的敏感阶段。
3. M期和凋亡M期是指细胞真正开始分裂的过程，细胞会分成两个完全相同的女儿细胞。
在此期间，细胞内的各项机制都变得异常活跃，而细胞凋亡的发生也可能随时出现。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
3细胞凋亡之 caspase检测
• 背景知识
– 细胞凋亡过程中，胞内主要蛋白通常被降解，调节这一过程 的蛋白叫做Caspase（半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶） – Caspase 3是参与DNA维护和调控细胞的重要组分，即Caspase 3激活==细胞凋亡
细胞凋亡之 凋亡相关酶检测
名称
Caspase-1
品牌
CST CST
细胞凋亡之 caspase-3
Jurkat T-Cells
6 µM camptothecin for 4 h
untreated
细胞凋亡之 caspase-3
Jurkat T-Cells
Mouse Thymocytes
固定、破膜过程
细胞凋亡之 caspase-3
产品编号
9602S
原理：JC-1有有单体和多聚体两种存在形式，高浓度时多聚体，发红色荧光（FL2检测）， 低浓度时单体形式，发绿色荧光（FL-1检测）。 正常细胞：膜电位正常，JC-1靠线粒体膜极性进入线粒体内，随浓度升高多聚体，红光 凋亡细胞：线粒体膜电位去极化，JC-1从线粒体释放，浓度降低，转为单体，绿光 通过检测绿色和红色荧光：
细胞
检测方法
免疫荧光
TUNEL法 Annexin V/PI Caspase 通路 线粒体膜电位
核酸
细胞膜 胞内通路
线粒体
细胞生命活动之：细胞周期
2.1细胞周期
细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为 间期与分裂期两个阶段。
2.1.1细胞周期检测原理
利用特殊的荧光染料(PI等)与 细胞内DNA碱基结合，被这些 荧光染料染色的细胞在激光 照射下发射出荧光，荧光强 度与DNA含量成正比。流式细 胞仪通过测定细胞的荧光强 度推算出细胞的DNA含量。
•实验用2种染料 FITC-dUTP染色凋亡细胞：检测凋亡。 •在流式细胞仪488nm激发下，PI发射 约623nm荧光，FITC发射520nm荧光。
PI 染色总 DNA ：得到细胞周期的信息；
Tunel方法
二步法
•PI染色检测细胞周期 •FITC染色检测凋亡 （如果不需要周期信息， 则可不做PI染色步骤）
Caspase-10
Caspase-11 Caspase-12
凋亡反应
AEVD
细胞凋亡之caspase-3
产品编号
9665S 9664S
产品名称
Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb Caspase-3 (8G10) Rabbit mAb
包装规格
100ul 100ul
包装规格
100Tests 25T/100T/ 400T 100Tests 100Tests 100Tests
品牌
R&D Biovision 美天旎 BD BD
细胞膜变化的检测：Annexin V/PI
优点：简便、快速、准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞 样本设置：
1. 空白对照：辅助判断管，即不加Annexin V/PI，但用它调电压的话，电压偏高， 即根据它确定的阴阳性界限是偏低的。 2. 阴性对照：未诱导的，Annexin V/PI双染，细胞绝大部分都 在双阴性区域，用它来确定两荧光通道的电压，这是为了排除非 特异性结合。 3. 单阳样本：诱导凋亡，Annexin V单染，用来调补偿 4. 单阳样本：诱导凋亡，PI单染，用来调补偿
FAQ常见问题回复
3 当样本表达GFP（绿色荧光蛋白），还能使用Annexin-FITC吗？
推荐使用Annexin V-APC/7-AAD染色
FAQ常见问题回复
4.贴壁细胞酶消化，应注意哪些事项？
0.25%胰酶消化：过渡消化损伤细胞，可在消化时加2%BSA防过渡消化 胰酶含EDTA(钙离子螯合剂）：标记Annexin V前用1xPBS或1xbinding buffer洗脱，清除EDTA,以免螯合钙离子，影响Annexin V结合
结果分析
正常细胞周期分析
肿瘤组织中的各种DNA倍体
肿瘤细胞
细胞周期与肿瘤
辅助肿瘤早期诊断与鉴别诊断
细胞周期与药物研发研Fra bibliotek药物对细胞周期的影响
细胞凋亡之 核内DNA事件
原理： TdT: 脱氧核糖核苷酸末端转移酶 dUTP:三磷酸脱氧尿甘
细胞凋亡之 核内DNA事件
通过DNA末端转移酶将带标记的 dNTP （多为dUTP）接到DNA片段 的3’-OH端，再通过酶联显色或荧 光检测定量分析结果。
通常检测方法：FCM IHC
Tunel方法
一步法
产品名称
Cleaved Caspase-3 (Asp175) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 )
包装规格
100ul
品牌
CST
269518
550821
Human/Mouse Cleaved Caspase-3 Alexa Fluor® 488 Antibody
PE Rabbit Anti- Active Caspase-3
注意事项：
1. 细胞制备或储存时细胞膜损伤，造成假阳性 2. 贴壁细胞消化时避免使用EDTA，螯合钙离子
FAQ常见问题回复
1. 是否 Annexin V Kits 可以检测小鼠或其他物种?
Annexin V试剂盒可以检测多种属
2. 这个试剂盒是否可用于贴壁细胞、固定或冻存的细胞、 或组织?
No.
上述样本的细胞细胞膜都会或多或少受到损害，这样的样本建议用免 疫荧光技术
60T 30T 50T
BD R&D Biovision
FCM IHC IHC
不同时期凋亡的检测指标的选择
早期：Annexin V
早中期：Cytochrome C 和线粒体相关 中晚期：Caspase-3, 8, 9, other proteins 晚期：DNA Fragment
检测水平
100tests
100tests
R&D
BD
通过酶和底物显色进行Caspase酶活检测试剂盒
4细胞凋亡之 核内DNA事件
凋亡晚期特征
—DNA内切酶活性被激活升高，双链DNA在核小 体之间切断形成~185bp为基数的有序片段。 检测方法 —Tunel流式法:通过在核酸片段末端标记优势计 算凋亡百分比 —末端转移酶标记技术
功能
辅助促炎症
底物特异性
YVAD
Caspase-2
Caspase-3 Caspase-4 Caspase-5 Caspase-6 Caspase-7 Caspase-8 Caspase-9
凋亡反应
凋亡反应 辅助促炎症 辅助促炎症 凋亡反应 凋亡反应 凋亡反应 凋亡反应
VDVAD
DEXD LEVD WEHD VEID IETD LEHD 检测原理：是通过特异性抗体 检测全长或者剪切后的Caspase 活性。 WB IF IHC ELISA FLOW
产品编号
84024
84026 Sc-211521 73881
产品名称
Fluo - 3, AM
Fluo - 3, AM Fluo-3 Fluo 3-AM
包装规格
1mg
50ugX20 1mg 1mg
品牌
Anaspec
Anaspec SantaCruz Sigma
线粒体事件
JC-1检测线粒体膜电位变化（JC-1是一种阳离子脂质荧光染料）
5. 是否与细胞表面标记兼容?
只要Ca离子不影响该表面Marker就可以同时做
2 细胞凋亡之线粒体
FLUO-3/AM检测钙离子流： 凋亡早期，线粒体膜内 钙离子外流到胞浆，细 胞膜外钙离子内流。
Fluo-3-Am为高度特异性Ca2+荧光指示剂，是膜通透性染料，可以灵敏地反映 细胞内游离钙离子浓度的变化 Fluo-3-Am本身荧光弱，进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯，成为脂溶的 Fluo-3留在细胞内，当Fluo-3与细胞内游离钙结合后产生较强荧光。
细胞生命活动之 --细胞凋亡、细胞周期
细胞凋亡（ Apoptosis）概念
为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序 死亡。是机体主动、高度有序清除无用细胞过程。是 生物体中一种普遍存在的现象。
与细胞坏死 (Necrosis) 相区别，坏死是细胞受到强 烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。
流式检测结果
定性(细胞群的偏移）定量（细胞群的荧光强度）检测线粒体膜电位的变化
产品编号
88060 SC-364116
产品名称
JC-1 JC-1
包装规格
5mg 1mg
品牌
Anaspec SantaCruz
551302
1130
JC-1
JC-1
1mg
5mg
BD
Biovision
优点：操作简单，试剂直接加入细胞中，20分钟后检测
• 样本最关键的就是减少碎片（EDTA/不可过度吹打/离心rpm） • PI既能与DNA结合，又能与RNA结合，所以要用RNase降解 • PI质量及RNase所加量很重要，建议用商品化试剂 • 污染脱氧核糖核酸酶会降解DNA，故玻璃器皿和试剂要干净灭菌
细胞周期样本检测
注意事项： 1. 进样速度：一般检测细胞浓度调整为2E5–2E6/ml，进样速度为低速。若 峰形较宽，可能就是进样速度太快 2. 仪器质控定期做，尽可能排除因机器设置引起的峰形加宽 3. 排除粘连细胞（FL2-A/FL2-W） 通过电压脉冲信号的宽度和面积区别实体组织标本中的粘连细胞群体，最 大程度的减少粘连细胞带来的假阳性结果
31
核内DNA事件之 明星产品
产品编号
4812-30-K