柱色谱分离实验
柱色谱分离实验报告
柱色谱分离实验报告柱色谱法分离实验报告一、背景知识吸附柱色谱作舟：分离各种类型的非离子组分・与离子交换色谱法相比，柱色谱分析是住中性条件卜操作.样品不会变到破坏,同时，它能有效分离多种組分.柱色谱分奠乂吸附色谱…以硅胶、氧化铝为吸附剂；分配色谱一以纤维素为载体「吸附剂选用；肘场供应的硅胶、氧化铝粒度为100-200 B,便用前需活化° -般吸附剂用章是被分离试样的30-50 ,实验时棍拥被分离试样中组分分离的难易程度而定.二、实验原理柱色谱（柱上层析）常用的有吸附色谱和分配色谱两类口吸附色谱常用氧化铝和硅胶作同建相；而分配色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收较大量的液体作为固定相・而支持剂本身不起分离作用.吸附柱色谱通常在玻璃骨中填入表而枳很大经过活化的名孔性或粉状同体吸附剂□当持分离的混合物溶液流经吸附柱时，务种成分同时被吸附在柱的上遥“当洗脱剂流卜时，由于不同化合物的吸附能力不同'往下洗脱的速度也不同.于是形成了不同的层次十即溶质在柱上自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若F色帯，再用溶剂洗脱时，已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集；或将柱吸十沪挤出后按色帯分割开，再用溶剂将外色站中的溶质萃取出來口3・溶剂的选择溶剂的选择通常根据被分离物中冬化合物的圾性、溶解度和吸附剂的活性等来考虑。
先将要分离的样品溶于一世体积的溶剂中，选用的溶剂的极性要低，体枳更小。
如有的样品在极性低的溶剂中溶解度很小，则可加入少童极性较大的溶剂，便溶液体积不致太大。
色层的展开首先使用极性较小的溶剂，使最容易脱附的组分分离，然后加入不同比例的极性溶剂配成的洗脱剂，将极性较大的化合物自色谱柱洗脱卜•来。
(2) 柱高与直径的比例为10:1〜50:1。
(3) 装柱有湿法和十法装柱，本实验用湿法装柱。
(4) 装柱时，硅胶柱里一定不要有裂缝或气泡；(5) 在加样时，柱子上端溶剂越少越好。
(6) 加洗脱剂洗脱时，流速不能太快，维持2s 3滴的速度，且实验过程中不能让柱子里溶剂流干(即出现短路现象)：三、实验仪器和药品氯仿，乙醛，丙咽，甲醇，右油醴，硅胶(100〜200目)，100ml 酸式滴定行，小烧杯35个，铁架台，脱脂棉。
柱色谱分离偶氮苯和邻硝基苯胺实验报告
柱色谱分离偶氮苯和邻硝基苯胺实验报告本实验旨在通过柱色谱分离法，分离出混合物中的偶氮苯和邻硝基苯胺，并通过红外光谱仪和紫外可见光谱仪分析分离后得到的两种化合物。
实验原理：
柱色谱法是根据化合物在固定填充物中的吸附作用和不同成分
之间的互作用，将混合物分离出来的一种方法。
此次实验中将使用硅胶柱进行分离。
偶氮苯和邻硝基苯胺是两种亲油性化合物，难以通过水溶液分离，因此选择柱色谱法进行分离。
柱色谱分离原理是化合物在柱中的移动速度不同，在固定填料的分离柱中进一步分离。
此次实验中使用的是硅胶柱，化合物在柱中的吸附作用是通过化合物和硅胶柱表面的亲和力来实现的。
实验步骤：
1. 将硅胶柱装入柱床中，并用甲苯预洗柱床，使柱床达到均匀
的湿润状态。
2. 将混合物慢慢加入硅胶柱中，并用甲苯洗涤，直到混合物全
部加入为止。
3. 开始收集分离后的化合物，首先将无色流出的溶液废弃。
然
后按照颜色不同的峰依次收集。
4. 将收集的化合物分别进行红外光谱和紫外可见光谱分析，确
定分离得到的化合物。
实验结果：
通过实验，成功分离出了混合物中的偶氮苯和邻硝基苯胺，并分别获得了两种化合物的红外光谱和紫外可见光谱。
通过红外光谱分析，确定分离得到的第一种化合物为偶氮苯，第二种化合物为邻硝基苯胺。
结论：
本实验成功地利用柱色谱法分离了混合物中的偶氮苯和邻硝基
苯胺，并通过红外光谱和紫外可见光谱分析确定了分离得到的两种化合物。
这为我们了解柱色谱分离法的应用提供了帮助。
柱色谱分离实验
三、实 验 内 容
收集 试样有色,在层析柱上可直接观察.洗脱后分别
收集各个组分.
试样无色,收集洗脱液时,多采用等份收集,每 份洗脱剂的体积随所用吸附剂的量及试样的分离 情况而定.收集的每份洗脱剂的体积越小,分离效 果越好.
三、实 验 内 容
鉴定
试样有色 依据颜色直接鉴定
试样无色 可结合薄层色谱结果
•2第一色层带到达色谱柱底部时,立即用锥形瓶收集第一色层的溶液, 直到其完全被洗出.注意洗脱时切勿使溶剂流干
•3然后,改用水溶液作为洗脱剂,当第二色层带到达色谱柱底部时,立 即收集第二色层的的溶液,直到其完全被洗出.
•4用量筒分别量取所分离出来的两种溶液的体积后,倒入指定的回收 瓶中.
•5分离结束后,应先让溶剂尽量流干,然后倒置,用吸耳球从活塞 向管 内挤压空气,将吸附剂从柱顶挤压出.使用过的吸附剂倒入垃圾桶里.
• 洗脱：待此混合液将要渗入柱内时 ,立即用 A 液洗脱 ,此时可以观察到有鲜明的黄、蓝 两条色带形成.黄色的甲基橙色带随洗脱剂的加入不断下移 ,而其顶部蓝色带不移动 ,当 黄色带到达柱底部时 ,更换接受器 ,全部收集此黄色带 ,洗脱时间约 10 min.此后改用 B 液做洗脱剂 ,这时可看到蓝色带开始下移 ,当亚甲基蓝色带到达底部时 ,更换接受器 , 全部收集此蓝色带 ,洗脱时间约 30 min.
• H2O∶ 95 %乙醇 = 1∶ 1 A 液 • 0. 2mol·L -1HCl∶ 95 %乙醇 = 1∶ 1 B 液
装置图
洗脱
装柱
实验步骤
• 装柱：
• 1、装色谱柱： • 1取一支色谱柱,在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花将色谱柱垂
直固定在铁架台上. • 2 关闭活塞,向柱中倒入蒸馏水也是洗脱剂,至柱体积的
大学柱色谱实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解柱色谱分离的基本原理和方法。
2. 掌握柱色谱实验的操作技能，包括样品的制备、色谱柱的填充、洗脱剂的选择和样品的收集。
3. 学习如何分析色谱分离的结果，并能够根据分离效果评估实验条件。
二、实验原理柱色谱是一种利用混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数的不同来实现分离的技术。
实验中，将含有目标组分的混合物通过填充有吸附剂的色谱柱，由于不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也会不同，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 柱色谱柱（玻璃或塑料）- 漏斗- 烧杯- 滴定管- 铁架台- 秒表2. 试剂：- 吸附剂（如硅胶、氧化铝等）- 混合样品（含目标组分）- 洗脱剂（根据目标组分的极性选择）- 标准样品（用于对照和定量分析）四、实验步骤1. 准备色谱柱：将吸附剂倒入漏斗中，用滴定管缓慢倒入色谱柱中，使其填充紧密。
2. 样品制备：准确称取一定量的混合样品，用适量的溶剂溶解。
3. 样品上样：将样品溶液缓慢滴加到色谱柱顶部，注意控制流速。
4. 洗脱：将洗脱剂滴加到色谱柱顶部，控制流速，收集流出液。
5. 收集分离组分：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间。
6. 样品分析：将收集到的各组分进行进一步的分析，如薄层色谱、红外光谱等。
五、实验结果与分析1. 分离效果：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间，分析分离效果。
2. 定量分析：根据收集到的各组分量，计算其含量，并与标准样品进行对照。
3. 优化实验条件：根据分离效果，分析实验条件对分离效果的影响，如吸附剂类型、洗脱剂类型、流速等，并对实验条件进行优化。
六、问题与讨论1. 实验中遇到的问题：- 色谱柱填充不均匀，导致分离效果不佳。
- 洗脱剂选择不当，导致分离效果不佳。
- 流速控制不当，导致分离效果不佳。
2. 解决方法：- 优化色谱柱填充方法，确保填充均匀。
- 根据目标组分的极性选择合适的洗脱剂。
柱色谱分离染料实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除柱色谱分离染料实验报告篇一：柱色谱实验报告柱色谱分离实验报告篇二：色谱实验报告色谱实验报告项目一：气相色谱流出曲线的研究一：实验目的1、2、3、掌握气相色谱仪的基本结构及工作原理理解色谱流出曲线中各参数的表示方法掌握气相色谱中定性、定量分析方法二、实验原理气相色谱的固定相是涂布在载体表面的固定液，试样气体由载气携带进入色谱柱，与固定液接触时，气相中各组分便溶解在固定液中。
随着载气的不断通入，被溶解的组分又从固定液中挥发出来，挥发出的组分随载气向前移动时又再次被固定液溶解。
由于各组分在固定液中的溶解能力不同，随着载气的流动，各组分在两相间经过反复的溶解-挥发过程，经过一段时间，最终实现彼此分离。
色谱图是指被测组分从进样开始，经色谱柱分离到组分全部流过检测器后，所产生的响应信号随时间分布的图像。
色谱图上有一组色谱峰，每每个峰代表试样中的一个组分。
色谱流出曲线是以组分流出色谱柱的时间或载气流出的体积为横坐标，以检测器对各组分的电信号响应值为纵坐标的一条曲线。
三、仪器与试剂1、仪器气相色谱仪2、试剂乙醇、正丁醇四、实验步骤1、调试气相色谱仪2、分别进行进样3、进乙醇和正丁醇的混合物样品，分别记录保留时间五、实验记录1、色谱条件:50m柱经：320μm固定液：聚乙二醇载气：氮气检测器类型：fid检测器温度：150℃柱温：95℃气化室温度：165℃气体流量：载气30ml／min2、色谱图参数六：实验结果分析从实验结果所占百分比可以看出该实验出峰效果较明显，乙醇先出峰，正丁醇后出峰。
在做实验时我们应注意一些问题，比如说乙醇和正丁醇要按一定的比例来混合，柱温要设置合理，最低要高于正丁醇的沸点，也不能过高，否则会使组分不易分开；过低封效果会不明显。
另外进样时要快、准、稳，避免出现拖尾现象。
项目二：白酒中甲醇含量的测定一、实验目的1、2、掌握用外标法进行色谱定量分析的方法。
了解氢火焰离子检测器的性能和操作方法。
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告
本实验的目的是通过柱色谱技术来分离混合物中的苯酚和甲苯，并测定两者的含量。
一、实验原理
柱色谱法是对物质进行分离和纯化的一种常用方法。
本实验中
使用的是正相柱色谱，即静相和流动相极性相似的柱子进行分离，这种柱色谱技术常用于分离具有不同极性的物质。
流动相越极性，进样物质在静相中沿着柱子下部逐渐吸附，其残留成分则向上移动，沿柱子逐渐分离。
这样，在离子交换、氢键和范德华力等作
用下，不同物质被吸附在流动相和静相界面处，并呈现分离的效果。
二、实验步骤
第一步：准备样品
取出1g苯酚甲苯混合物称到50ml瓶中，加入约10ml甲醇溶
解均匀。
第二步：制备流动相
将n-正己烷和乙酸乙酯按2:1的体积比加入到流动相瓶中，并摇匀。
第三步：进样、柱洗和分离
将制备好的样品注入柱子中，花费30分钟进行洗柱，在分离过程中，维持均匀的流速。
第四步：柱洗结束和分析
柱洗结束后，将柱子移动到荧光检测器上，即可对样品进行定量分析和浓度测定。
三、实验结果
通过实验分析得出，样品中苯酚和甲苯其峰值分别为11.23和22.45，而其相对峰度分别为0.353和0.659。
根据这些结果，我们可以得出样品中苯酚和甲苯的质量分数分别为35.3%和65.9%。
四、实验结论
通过这次柱色谱实验，我们成功地将混合物中的苯酚和甲苯分离，并测定出两者的质量分数。
此次实验使用的是正相柱色谱技术，柱子中的静相和流动相在极性上相似，达到了较为明显的分离效果。
总而言之，在实验过程中我们掌握了柱色谱法的基本原理和常用方法，对于学习化学分析方法的同学来说，具有较高的参考价值。
《柱色谱分离实验》课件
硫酸或氢氧化钠：用 于调节洗脱液的pH 值。
蒸馏水：用于制备洗 脱液和清洗实验器具 。
03 实验步骤与操作
实验前的准备
实验材料
硅胶、氧化铝、活性炭、 硅藻土等；玻璃色谱柱、 吸附剂、砂芯漏斗、脱脂 棉等；样品和溶剂。
实验设备
分液漏斗、烧杯、玻璃棒 、天平等。
实验试剂
不同比例的溶剂，如石油 醚、乙酸乙酯、乙醇等。
指标的合理性。
误差分析
对实验误差进行分析，找出误差产 生的原因，并提出减小误差的措施 。
结果讨论
根据实验结果，讨论柱色谱分离实 验的影响因素和优化方法，为改进 实验提供依据。
05 结论与展望
实验结论总结
柱色谱分离实验是一种有效的分离方法，能够将混合物中的各组分进行有效的分离 。
通过实验，我们观察到了各组分在柱子上的吸附和解吸过程，并成功分离出了目标 组分。
换吸附剂。
03
实验结果分析
在实验结束后，应对实验结果进行分析和总结，以便更好地了解各组分
的性质和含量。同时，应将实验数据和结果记录在实验报告中，以便后
续的查阅和分析。
04 实验结果与分析
实验结果展示
分离后的色谱图
展示实验中得到的色谱图，包括 各组分的出峰时间、峰高、峰面 积等数据。
分离效果评估
通过对比标准品和实验样品的色 谱图，评估分离效果，包括分离 度、纯度等指标。
实验操作流程
01
02
03
04
准备色谱柱
选择合适的吸附剂，填充色谱 柱，确保填充均匀。
上样
将样品溶液缓慢加入色谱柱顶 部，同时用少量溶剂冲洗砂芯
漏斗，以避免样品残留。
洗脱
选择合适的溶剂系统，按照一 定顺序进行洗脱，收集洗脱液
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告实验目的：通过柱色谱技术对混合物进行分离和纯化，掌握柱色谱实验的基本操作技能，了解柱色谱的原理和应用。
实验原理：柱色谱是一种以柱状填料为固定相的色谱技术，利用不同物质在固定相和流动相间的分配系数不同而实现物质分离的方法。
在柱色谱实验中，首先需要准备填料，并将填料装入柱子中，然后将待分离的混合物溶液通过柱子，利用固定相和流动相的相互作用，使混合物中的成分分离出来。
实验步骤：1. 准备填料，将所需填料按照实验要求进行处理和激活。
2. 装填柱子，将填料装入柱子中，并进行均匀压实。
3. 样品处理，将待分离的混合物进行前处理，如溶解、过滤等。
4. 进样和洗脱，将样品溶液通过柱子，洗脱待分离的成分。
5. 收集洗脱液，根据实验要求，收集洗脱液中的不同组分。
6. 结果分析，对收集的洗脱液进行分析，得到实验结果。
实验数据：根据实验结果，我们成功地对混合物进行了分离和纯化，得到了目标组分，并进行了进一步的分析和鉴定。
实验数据表明，柱色谱技术在分离和纯化混合物中具有很高的效果和应用价值。
实验结论：通过本次柱色谱实验，我们对柱色谱技术有了更深入的了解，掌握了柱色谱实验的基本操作技能，对柱色谱技术的原理和应用有了更清晰的认识。
柱色谱技术在化学、生物、医药等领域有着广泛的应用，具有很高的分离和纯化效果，是一种重要的分析技术手段。
综上所述，柱色谱实验是一项重要的实验技术，具有广泛的应用前景和重要的理论意义。
通过本次实验，我们对柱色谱技术有了更深入的了解，为今后的科研工作和实验操作积累了宝贵的经验。
希望通过不断的学习和实践，能够更好地掌握柱色谱技术，为科学研究和实验分析做出更大的贡献。
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分析速度快 样分析。
复杂混合物,同系物,异构体等。 可以检测出μg• g-1(10-6)级甚至ng•
级的物质量。 几分钟或几十分钟内可以完成一个试
柱色谱法分离甲基橙和甲基蓝
实验原理
甲基橙和亚甲基蓝均为指示剂,它们的结构式如下所示:
甲基橙
亚甲基蓝
由于甲基橙和亚甲基蓝的结构不同,极性不同,吸附剂对它们 的吸附能力不同,洗脱剂对它们的解析速度也不同,极性小、吸附能
•（2）第一色层带到达色谱柱底部时，立即用锥形瓶收集第一色层 的溶液，直到其完全被洗出。【注意】洗脱时切勿使溶剂流干！
•（3）然后，改用水溶液作为洗脱剂，当第二色层带到达色谱柱底 部时，立即收集第二色层的的溶液，直到其完全被洗出。
•（4）用量筒分别量取所分离出来的两种溶液的体积后，倒入指定 的回收瓶中。
吸附剂装填紧密，排除 气泡。最终应使吸附剂的上 端平整，无凹凸面，无断层。
装柱
• 装柱时应该注意均匀，不能有气泡，裂缝， 否则样品可能顺缝隙流动而不吸附，影响 样品的分离，应用质软的物体如吸耳球等 轻轻敲击柱身，促使吸附剂装填紧密，排 除气泡。最终应使吸附剂的上端平整，无 凹凸面．
三、实 验 内 容
加样 样品为液体，可直接加样；样品为固体，可选
择合适溶剂溶解为液体再加样。加样时，要沿管 壁慢慢加入至柱顶部，勿使样品搅动吸附剂表面。
洗脱
三、实 验 内 容
在柱顶不断加入洗脱剂，使 洗脱剂永远保持有适当的量，不 要让洗脱剂表面流干，使流动相 流速适当。
•洗脱时应注意：
•（1）向柱内加入95%乙醇溶液洗脱（可以通过注射器沿管壁或安 装滴液漏斗）在恒压或加压条件下进行洗脱。控制流出速度1滴/秒。 逐渐出现色层带分离。
分配色谱法
离子交换色谱法 排阻色谱
柱色谱分离示二意、图实 验 原 理
洗脱剂(流动相) 混合物
吸附剂(固定相)
二、实 验 原 理 影响分离效果主要因素
化合物的结构：化合 物的吸附性和它们的 极性成正比
洗脱剂的极性：溶解 度适中、不反应、易 获取回收
吸附剂的性质：均匀、 表面积大、不反应、 吸附能力不同
•（5）分离结束后，应先让溶剂尽量流干，然后倒置，用吸耳球从 活塞 向管内挤压空气，将吸附剂从柱顶挤压出。使用过的吸附剂 倒入垃圾桶里。
三、实 验 内 容
收集 试样有色，在层析柱上可直接观察。洗脱
后分别收集各个组分。
试样无色，收集洗脱液时，多采用等份 收集，每份洗脱剂的体积随所用吸附剂的量及试 样的分离情况而定。收集的每份洗脱剂的体积越 小，分离效果越好。
在氧化铝柱子上若分离下列各组混合物，哪一个组分先被洗 和 和
三、实实验验步内骤容:
柱色谱操作：
•干法：10g 硅胶 +乙醇
•先用乙醇 后用水 •操作
•组分颜色
装柱
加样 洗脱
收集 鉴定
•1mL样品 •加样操作 •0.5mL×2乙醇洗涤
•组分颜色
三、实 验 内 容
装柱 干法装柱 湿法装柱
三、实 验 内 容
鉴定
试样有色
依据颜色直接鉴定
试样无色 可结合薄层色谱结果
四、注 意 事 项
玻砂防堵塞 装柱需紧密 加压不可大 溶剂勿流干
小结
色谱法在有机化学中的应用:
分离混合物 精制提纯化合物 利用比移值(Rf)鉴定化合物 跟踪反应进程
小结
色谱法的特点:
分离效率高 灵敏度高
实验步骤（续）
加样：当液面刚好流至脱脂棉平面相切时，立刻关闭活塞， 加入 5mL左右的A 液 ,当 硅胶面又将要露出时 ,关紧活塞 ,用量筒准确加入 0. 50mL 以 A 液做溶剂的混合液(含甲 基橙和亚甲基蓝各为 0. 400 g·L -1) 。
洗脱：待此混合液将要渗入柱内时 ,立即用 A 液洗脱 ,此时可以观察到有鲜明的黄、蓝 两条色带形成。黄色的甲基橙色带随洗脱剂的加入不断下移 ,而其顶部蓝色带不移动 , 当黄色带到达柱底部时 ,更换接受器 ,全部收集此黄色带 ,洗脱时间约 10 min。此后改 用B 液做洗脱剂 ,这时可看到蓝色带开始下移 ,当亚甲基蓝色带到达底部时 ,更换接受 器 ,全部收集此蓝色带 ,洗脱时间约 30 min。•组分颜色装柱加样 洗脱
收集 鉴定
•1mL样品 •加样操作 •0.5mL×2乙醇洗涤
•组分颜色
仪器和试剂
1.仪器 锥形瓶、玻璃漏斗、色谱柱 2.试剂 柱层析硅胶、脱脂棉、乙醇（95%）甲
基橙、亚甲基蓝。
H2O∶ 95 %乙醇 = 1∶ 1 (A 液) 0. 2mol·L -1HCl∶ 95 %乙醇 = 1∶ 1 (B 液)
柱色谱
Column Chromatography
一、实 验 目 的
了 解：
1. 柱色谱法分离有机物的原理。 2．固定相和流动相的选择原则。
掌 握：
1. 色谱柱的填充方法。 2．柱色谱分离的基本操作。
色谱法简介
色谱法亦称色层法， 层析法等，是分离，纯化 和鉴定有机化合物的重要 方法之一，还可定量分析。
力弱、解析速度快的亚甲基蓝先被洗脱下来，而极性大、吸附能力强、 解析速度慢的甲基橙后被洗脱下来，从而使两种物质得以分离。本实 验以硅胶为吸附剂，95%乙醇作为洗脱剂，先洗出亚甲基蓝，再用蒸 馏水作洗脱剂把甲基橙洗脱下来。
三、实实验验步内骤容:
柱色谱操作：
•干法：10g 硅胶 +乙醇
•先用乙醇 后用水 •操作
二、实 验 原 理
固定相、流动相的物理状态
液—固色谱法 气—固色谱法 气—液色谱法
液—液色谱法
柱色谱法（column chromatography）
色 谱
纸色谱法（paper chromatography）
法 操作形式 薄层色谱法（TLC）
分
气相色谱（GC）
类
高效液相色谱（HPLC）
分离原理
吸附色谱法
装置图
洗脱
装柱
实验步骤
装柱：
1、装色谱柱： （1）取一支色谱柱，在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花将色谱柱垂
直固定在铁架台上。 (2) 关闭活塞，向柱中倒入蒸馏水（也是洗脱剂，至柱体积的
1/2） （3）填吸附剂：称取10g 硅胶于小烧杯中 ,加入 15mL 蒸馏水 ,用玻
璃棒调好通过漏斗慢慢装入玻璃柱, 使其逐渐沉入底 部。用洗耳球敲打柱身使硅胶装填紧密，打开活塞，用小锥型 瓶承接, 控制滴速为1 滴／秒,装完后在上面加一层脱脂棉（ ，操作时要注意吸附剂始终不能露出液面）。