毛细管电泳操作规程
毛细管电泳操作手册

毛细管电泳操作手册一.毛细管紫外检测器简介分高压电源(左侧)与毛细管检测主机(右侧)(紫外检测器)。
1.高压电源设置高压电源分离电压范围在0-30 kV,最高设置不能超过25 kV,参考文献中如若提及分离电压在30 kV,务必不要将本高压电源也设置在30 kV。
2.毛细管检测主机主机分毛细管系统、进样系统、和紫外检测系统。
a.毛细管系统主要包括:缓冲池、冲洗器、毛细管、高压电极。
缓冲池是两个高约3.5 cm 的玻璃瓶,用于乘装运行缓冲液。
冲洗器包括弹簧压力器和2.5 mL的医用注射器,注射器中乘装与缓冲池中一样的运行缓冲液,依靠弹簧压力将运行缓冲液推入毛细管中。
毛细管主要用的是未涂层的50 µm口径石英毛细管,有效长度在50 cm左右。
高压电极的作用是将高压电源产生的高压传输到两个缓冲池中形成电回路。
b.进样系统为一可伸缩的高度进样杆,一般进样升到最高点,所产生的高度差提供0.5 psi的进样压力。
c.紫外检测系统提供各个波长的紫外光,可根据所做物质的紫外吸收最大波长进行手动调节。
二.毛细管电泳的日常维护以及注意事项1.毛细管每次使用之前必须检查正负铂丝电极是否断裂——用手指轻轻挑动电极;2.毛细管电泳使用完毕后一定要将干燥硅胶置入主机内,如若变红,须烘箱干燥后再放入;3.毛细管主机内部不能用水清洗,只能在关机状态下用酒精浸泡的脱脂棉擦拭,或用小毛刷扫除主机内部的灰尘;4.非正常情况下不要将紫外检测器的暗池打开,以免损坏紫外光接收器;5.高压电源与主机非正常情况下不要轻易移动位置;6.实验中手法保持轻盈,毛细管较易折断,主机窗门轻开轻关;7.实验结束后一定要将高压电源和主机的插头都拔掉,也不要将试验样品留在主机内部的样品架上,要保持主机内部无任何附加的化学试剂;8.下雨天或者潮湿天气不要开机,高压电源对湿度比较敏感,湿度较大的情况下开机可能会使高压电源击穿,造成仪器损坏;9.寒暑假实验室无人的情况下要将毛细管主机及高压电源用干净的实验服盖住,门窗关好,保持实验室无人的状态下也干燥;10.若仪器长时间不用,须定时在不插电关机状态下将毛细管冲洗一次,以免毛细管堵塞。
毛细管电泳标准操作规程

毛细管电泳仪毛细管电泳标准操作规程开机前准备:如进一个样品,取样品瓶七个,分别用记号笔标号,1.2.4.6.7.8.号,分别用移液枪加入1号:氢氧化钠溶液(PH=9.3纯化、消除杂离子),加盖2号:水,加盖4号:缓冲溶液,加盖5号:缓冲溶液,加盖6号:缓冲溶液,加盖7号:样品溶液,加盖(加样前过滤净化)8号:空,不加盖(废液瓶)9号:空瓶,加盖(气冲洗)(注意:各个样品瓶加样完成后超声15分钟以上,加盖,瓶盖盖严平整,3号空位,49号空位,11-48号共可装载38个样品)打开仪器电源打开软件,进入instrument,选择inti进行初始化方法编辑进入method,选择eidt entire method ,选择前两项后确认,填写实验名称并确认,设置毛细管两端与瓶底距离为4mm,设置柱温盒温度,选择inlet(进口)为4号,outlet(出口)为5号,确认。
Inlet 换成7号(样品),选择加压时间(即进样时间),再将7号换成5or6号。
进入Preconditioning,选择eidrt,设置1行,inlet为2号,outlet为8号,模式flush,2号,时间1min;2行flrsh,,inlet 换为1号,时间5min,3行wait,时间5min,4行flush,5号,时间20min(同次测定2,3行可省略)。
进样模式,设置进样压力50mbar,时间4sec,确认。
Swith设置为on,正负调节为postive,电压值30kv,确认。
设置检测波长,带宽,确认,收集为off。
确认。
保存方法。
样品注册,选择小瓶图标,选择sample information ,选择样品瓶号,输入样品信息,确认,关机进入instrument,,选择maintenance进行维护。
选择inlet,设置为2号(即水瓶),再点击蓝色气瓶图标,flash(10-20min)。
选择inlet,设置为号9号,(即气冲洗瓶)再点击蓝色气瓶图标,flash(5-20min)。
高效毛细管电泳使用说明

高效毛细管电泳使用说明
1.毛细管的冲洗方法
首先用双手拇指将压力冲洗装置的顶推盘压下,旋转一个角度,使其固定住。
然后将毛细管盖连同毛细管从高压端取出放到装有冲洗液的顶端处,并一同放到下盒盖中,盖上上盒盖后,再用双手拇指将顶推盘旋转回原来角度,使其顶住注射器推杆,即可进行毛细管冲洗。
2.施加高压方法
初次升压时,必须先将电压调节扭6逆时针旋到底后,再按高压启动扭3,并缓慢逆时针旋转高压扭6至所须电压值。
如果发生异常立即按高压关断扭5,排除故障后,再重新升压。
3.电迁移进样的方法
把电压调到所需电压。
掀开上盖,把样品瓶放在样品瓶托盘上,将毛细管的一端从放在样品瓶托盘上的缓冲液瓶里抽出,插进样品瓶里,盖上上盖。
然后立即按高压启动扭,待达到预定时间后,掀开上盖,将毛细管从样品瓶抽出,插入缓冲液瓶里。
立即盖上上盖,把电压上升到工作电压,开始数据采集。
维护与保养
1 .长时间不使用的试剂不得存放于仪器托盘中,特别是盐酸,有可能造
成仪器部件的腐蚀,和仪器内的湿度增加。
2 .未涂层的毛细管长时间不用,要先用水清洗,再用空气吹干。
3 .长时间不使用仪器,在停机之前必须使样品及缓冲溶液托盘处于
Load状态。
4 .仪器要注意防尘和防潮。
毛细管电泳仪安全操作及保养规程

毛细管电泳仪安全操作及保养规程毛细管电泳仪经常用于生物学、化学和医学研究中。
正确的使用和保养对于确保实验准确且安全至关重要。
本文档将详细介绍毛细管电泳仪的操作规程以及保养细节,以便用户能够安全高效地进行实验。
毛细管电泳仪安全操作规程1. 实验前的准备工作1.1 确认所需试剂是否齐全。
在进行实验前,必须确认实验所需试剂均已准备就绪,以免在实验中遇到问题而耽误时间和资源。
1.2 检查毛细管电泳仪是否处于正常状态。
检查毛细管电泳仪的部件是否完好无损、是否固定牢靠,是否与电池或电源连通正常。
1.3 穿戴实验防护装备。
在进行实验前,应穿戴实验室防护服、手套和护目镜等必要的防护装备。
2. 操作流程2.1 设置毛细管电泳仪参数。
根据实验要求,设置电泳仪的电压、温度、电流等参数,确保实验能够顺利进行。
2.2 在毛细管内加入训练缓冲液。
将毛细管放入其所在仪器中,并在毛细管内加入训练缓冲液。
2.3 垂直插入样品。
将样品垂直插入毛细管中,注意不要弯曲样品,否则可能会影响实验结果。
2.4 开启电源并启动操作。
将电泳仪接通电源,启动其操作程序,开始进行毛细管电泳实验。
2.5 监测实验结果。
在实验过程中,应时刻关注电泳结果并注意测量浓度值,以便及时停止实验或调整参数进行实验。
2.6 停止电泳并关闭仪器。
在实验完成后,关闭电泳仪器,并取出毛细管,清除残留缓冲液和样品。
3. 操作注意事项3.1 注意保持洁净状态。
进行实验时,应保证样品、毛细管和仪器都处于干净状态,防止杂质干扰试验结果。
3.2 注意电泳过程中的安全。
在进行实验过程中,注意电泳过程中的高压、高温等安全问题,防止意外事故的发生。
3.3 注意实验数据的准确性。
在进行实验过程中,应注意实时记录实验数据,保证实验参数准确可靠。
毛细管电泳仪保养规程毛细管电泳仪的保养可以提高其寿命和稳定性,并确保实验数据的准确性。
下面是毛细管电泳仪的保养细节。
1. 日常保养1.1 定期清洁仪器。
毛细管电泳操作规程

毛细管电泳操作规程1.实验前的准备a.仔细检查实验仪器和设备的工作状态,确保其正常运转。
b.准备所需的试剂和溶液,并根据规定的浓度配制好实验用溶液。
c.对毛细管进行修整,包括清洗和填充。
2.毛细管安装a.将毛细管正确地安装到电泳仪上,并确认其连接牢固。
b.检查毛细管的末端是否光滑且无毛刺。
3.毛细管填充a.将填充溶液填充到毛细管内部,直至溶液充满毛细管并超出一段长度。
b.将毛细管两端的截止器插入,防止溶液泄漏。
4.电解质的调节a.根据样品类型和分析目的,选择合适的电解质和其浓度。
b.使用注射器或微型泵将电解质注入毛细管内,需要确保注入的电解质完全润湿毛细管内壁。
5.样品处理和注入a.根据分析要求,选择合适的样品预处理方法。
b.使用注射器或微型泵将处理好的样品注入至毛细管内,确保注入顺利并不产生气泡。
6.电场的施加a.将毛细管的两端插入到电泳仪中相应的电极槽中,并确保与电极接触良好。
b.根据需要选择合适的电场强度和方向。
c.将电场施加到毛细管上并调节到所需的程度。
7.数据记录与分析a.开始电泳后,记录关键时间点的数据,如电流强度、电离峰大小等。
b.根据实验结果进行数据分析和处理,如峰面积计算、峰高度对比等。
c.按照标准操作规程进行结果的判断和报告撰写。
8.实验结束后的清洁a.实验结束后,及时关闭电泳仪和电源,并拔出毛细管。
b.用适当的清洗剂清洗毛细管和电泳仪的部件。
c.将实验室恢复到干净整洁的状态。
在进行毛细管电泳实验时,操作人员应始终保持专注并按照规程进行操作。
同时,还需要密切关注实验过程中的安全问题,如电解质的燃烧和毒性等。
实验结束后,需要对实验设备和试剂进行正确的存储和处理,以确保实验室的安全。
总之,毛细管电泳操作规程是保证实验顺利进行和结果准确的关键。
操作人员应熟悉规程内容并遵守实验室安全操作规范,确保实验的成功进行。
毛细管电泳仪标准操作规程

BECKMAN P/ACE MDQ毛细管电泳仪标准操作规程一、开机1. 接通电源,打开毛细管电泳仪开关,打开计算机,点击桌面32 Karat操作软件图标,点击DAD检测器图标,进入毛细管电泳仪控制界面。
2. 将分别装有0.1mol/L盐酸水溶液、lmol/L 氢氧化钠水溶液、运行缓冲液A、重蒸水依次放入左边缓冲液托盘(Inlet)并记录对应的位置。
3. 将装有运行缓冲液A及空的缓冲液瓶放入右边缓冲液托盘(Outlet),记录对应的位置。
4. 将装有待检测样品的缓冲液瓶放入左侧样品托盘,记录对应的位置。
5. 检查卡盘和样品托盘是否正确安装。
关好托盘盖,注意直接控制图象屏幕上是否显示卡盘和托盘该已安装好。
此时应能听到制冷剂开始循环的声音。
二、石英毛细管的处理1. 在直接控制屏幕上点击压力区域,出现对话框。
2. 设置Pressure、Duration、Direction、Pressure Type、Tray Positions等参数。
点击OK,瓶子移到指定的位置,开始冲洗。
三、编辑方法1. 先进入32 Karat主窗口,用鼠标右键单击所建立的仪器,选择Open Offline,几秒钟后会打开仪器离机窗口。
2. 从文件菜单选择File Method New,在方法菜单选择Method Instrument Setup进入方法的仪器控制和数据采集模块。
选择其中一个为“Initial Condition”(初始条件)的选项卡,进入初始条件对话框。
在这个对话框中输入用于仪器开始方法运行时的参数。
四、编辑sequence1. 从仪器窗口选择File / Sequence / New,打开序列向导,按要求选择2. 点击Finish,出现新建的序列表。
3.另存Sequence.五、系统运行1. 在系统运行前,检查仪器的状态:检测器配置是否正确;灯是否点着;样品和缓冲液放置是否放置正确。
2. 从菜单选择 Control / Single Run 或点击图标打开单个运行对话框。
毛细管电泳法的使用方法

毛细管电泳法的使用方法毛细管电泳法是一种分离和分析化学物质的常用方法,它基于物质在电场中的运动速度差异而实现分离。
适用于各种复杂样品的分析,包括生物样品、环境样品和食品样品等。
本文将介绍毛细管电泳法的使用方法。
一、实验准备1. 仪器准备:毛细管电泳仪和电泳装置是进行毛细管电泳分析的关键设备。
确保仪器完好无损,并根据仪器的使用说明进行正确操作和维护。
2. 毛细管准备:选择适当的毛细管,一般为无机硅玻璃或石英毛细管。
根据分析需求,选择不同内径和长度的毛细管。
3. 缓冲溶液准备:根据分析的目标物质的性质,选择合适的缓冲溶液。
常用的缓冲溶液包括磷酸盐缓冲液、乙酸缓冲液等。
根据需要,可以添加其他辅助剂来改善分离效果。
二、样品制备1. 样品处理:根据分析目标,选择合适的处理方法。
常见的样品处理方法包括离心、过滤、稀释、萃取等。
2. 样品溶解:将处理后的样品溶解于适当的溶剂中,并进行必要的稀释。
保证样品的浓度范围适合毛细管电泳的检测方法。
3. 样品准备:将样品注入样品瓶中,并保持封闭状态,以防止污染和样品损失。
三、实验操作1. 建立分析方法:根据样品性质和目标物质的不同,确定最适合的毛细管电泳分析方法。
包括电泳条件的选择、运行缓冲溶液的优化以及检测参数的设置等。
2. 毛细管填充:在进行毛细管电泳之前,需要将毛细管填充成电泳缓冲液中的一种或多种成分。
常用的填充方法包括静态填充法、动态填充法和电泳填充法。
3. 毛细管电泳条件的设定:根据样品的性质和分析目标的要求,设定合适的毛细管电泳条件,包括电压、电流、温度、电泳缓冲液的浓度和pH值等。
4. 样品注入和分析:将样品通过母液喷射装置或静态注射装置注入到填充好的毛细管中,然后开启电源,进行电泳分析。
5. 检测和数据分析:通过检测器对分离后的化合物进行检测,并记录峰的峰高和峰面积等参数。
利用这些数据进行数据分析和结果解释。
四、实验注意事项1. 仪器操作:严格按照仪器的使用说明进行操作,保证实验安全和设备的长期稳定性。
毛细管电泳仪的操作指南和分离条件设置技巧

毛细管电泳仪的操作指南和分离条件设置技巧毛细管电泳是一种常用于分离和检测生物大分子的技术。
毛细管电泳仪是进行毛细管电泳实验的重要仪器,准确的操作和合理的分离条件设置对于实验的成功和结果的准确性至关重要。
本文将为您介绍毛细管电泳仪的操作指南和分离条件设置的技巧。
I. 毛细管电泳仪操作指南毛细管电泳仪操作指南包括样品准备、仪器预热和校准、样品注入和分离过程等步骤。
1. 样品准备样品的准备是毛细管电泳的第一步,对于不同的样品可以选择不同的处理方法。
常见的样品处理包括蛋白质的脱盐和浓缩、核酸的纯化等。
在样品处理过程中,要注意保证样品的纯度和浓度,以免对后续的分离和检测造成影响。
2. 仪器预热和校准在进行毛细管电泳实验前,需要预热和校准仪器。
预热的目的是使仪器温度达到设定的实验温度,通常在室内使用的毛细管电泳仪温度范围为15-30摄氏度。
校准的目的是确保仪器的稳定性和准确性,包括流速的校准、电场的校准等。
3. 样品注入样品注入是将处理好的样品导入毛细管的过程。
样品注入可以采用手动或自动注射的方式。
在样品注入过程中,要注意使样品均匀注入毛细管内,并避免产生气泡。
4. 分离分离过程是毛细管电泳的关键步骤。
在分离过程中,通过控制电压和电流来实现样品分离。
通常,高电压和电流可以加快分离速度,但也容易产生热量,影响分离结果。
因此,在分离过程中,要根据样品性质和分离要求来选择合适的电压和电流条件。
II. 分离条件设置技巧合理的分离条件的设置对于毛细管电泳实验的成功和结果的准确性至关重要。
以下是一些分离条件设置的技巧。
1. 电压和电流设置电压和电流的设置是影响分离速度和分离效果的重要因素。
一般情况下,较高的电压和电流可以加快分离速度,但也容易产生热量,影响分离结果。
因此,在设置电压和电流时,要根据样品的性质和分离要求来选择合适的数值。
2. 缓冲液选择缓冲液是毛细管电泳中重要的组成部分,可以影响分离效果和样品的稳定性。
在选择缓冲液时,要考虑到样品的性质和分离要求,不同的样品可能需要不同的缓冲液pH值和离子浓度。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
BECKMAN P/ACE MDQ毛细管电泳操作规程
1、开机
1.1 接通电源,打开毛细管电泳仪开关,打开计算机,点击桌面32 Karat操作软件图标,点击DAD检测器图标,进入毛细管电泳仪控制界面。
1.2 将分别装有0.1mol/L 盐酸水溶液、lmol/L 氢氧化钠水溶液、运行缓冲液A、重蒸水依次放入左边缓冲液托盘(Inlet)并记录对应的位置。
1.3 将装有运行缓冲液A及空的缓冲液瓶放入右边缓冲液托盘(Outlet),记录对应的位置。
1.4 将装有待检测样品的缓冲液瓶放入左侧样品托盘,记录对应的位置。
1.5 检查卡盘和样品托盘是否正确安装。
关好托盘盖,注意直接控制图象屏幕上是否显示卡盘和托盘该已安装好。
此时应能听到制冷剂开始循环的声音。
2、石英毛细管的处理
2.1 在直接控制屏幕上点击压力区域,出现对话框。
2.2 设置Pressure、Duration、Direction、Pressure Type、Tray Positions等参数。
点击OK,瓶子移到指定的位置,开始冲洗。
按照以下表格的步骤依次进行冲洗。
冲洗完成后,毛细管已处理好,毛细管中充满运行缓冲液。
溶液 Inlet Outlet Pressure Time
重蒸水 E1 B1 25 0.5
0.1 mol/L 盐酸 C1 B1 20 2
重蒸水 E1 B1 20 0.5
lmol/L 氢氧化钠水溶液 D1 B1 20 2
重蒸水 E1 B1 20 0.5
运行缓冲液A A1 B1 20 2
3、方法编辑
3.1 先进入32 Karat 主窗口,用鼠标右键单击所建立的仪器,选择Open Offline,几秒钟后会打开仪器离机窗口。
3.2从文件菜单选择File Method New,在方法菜单选择Method Instrument Setup 进入方法的仪器控制和数据采集模块。
选择其中一个为“Initial Condition”(初始条件)的选项卡,进入初始条件对话框。
在这个对话框中输入用于仪器开始方法运行时的参数。
4、序列的建立
4.1 从仪器窗口选择File / Sequence / New,打开序列向导,按要求选择。
4.2 点击Finish,出现新建的序列表。
5、系统运行
5.1 在系统运行前,检查仪器的状态:检测器配置是否正确;灯是否点着;样品和缓冲液放置是否放置正确。
5.2 从菜单选择Control / Single Run 或点击图标打开单个运行对话框。
5.3 在仪器窗口的工具条上点击绿色的双箭头打开运行序列对话框。
6、关机
6.1 关闭氘灯。
6.2 点击Load,使托盘回到原始位置。
6.3 打开托盘盖,待冷凝液回流后关闭控制界面。
6.4 关闭毛细管电泳仪开关,关闭计算机,切断电源。
7、注意事项
仪器运行过程中产生高压,严禁打开托盘盖。