接种猪瘟兔化弱毒株的永生化猪血管内皮细胞传代情况研究
仔猪猪瘟免疫程序与免疫效果的研究
用则受到影响。
血清连续倍 比稀释 ，然后每孔加入 １ ％猪瘟抗原致敏 红细胞
次免疫 ， 有母源抗体干扰 ， 但建立基础免疫 ， 形成免疫记忆， 二次 免疫时 ， 再次免疫应答， 产生抗体较长时间保持较高水平。在疫
２ ｍＬ ５ ，置微 量 振 荡器 上 振 荡 ２ ｉ，０Ｃ恒 温 保 温 箱作 用 ｍｎ ３ ￣
一
２ 监 测 方 法
ｃ组免疫保护率达到 ８ ． ％， ５２ 达到有效免疫保护标准 。 ０ 存在免疫保护空缺 时间，仔猪 ２ ５日龄母源抗体 已有 ８％仔 ０ 猪消退到较低 水平 ， 仔猪首次免疫在 ６ ０日龄左 右 ， 仔猪一般 较长时 间没 有母 源抗体保 护 ， 没有主动免疫 产生 ， 也 尤其在 疫 区易受到猪瘟病 毒攻击 ， 导致猪瘟发生 。 Ｄ组免疫保护率 为 ９ ． ％， ０７ 免疫猪群 获得保 护 ， ０ 与科学
４ 结 果讨 论
Ｂ组 ： 春季突击 防疫 ， 怀母 猪 ， 月 龄仔 猪用猪瘟兔 化弱毒 空 ２ 疫苗每头猪按 １ 头份剂量肌 肉注射 ， 常年对漏免母猪和新生
２月龄仔猪 补针 。
Ａ组免疫保 护率为 ６． ％，怀孕母猪和新生仔猪不 能 ７０ ６ 适时补针。２月龄仔猪首免一次虽没有母 源抗 体干扰 ， 但初 次免疫应答 ， 产生抗体少 ， 而且持续 时间短 ， 当猪群的有效 免
１ ｈ室温下静置观察结果 。 ．， ５ 判定标准按 常规方法进行 。 每批
猪瘟野毒与疫苗弱毒鉴别方法的研究进展
猪瘟野毒与疫苗弱毒鉴别方法的研究进展杭柏林;胡建和;王青;史杰;李杰;朱王飞【摘要】概述了当前鉴别猪瘟强弱毒的几种方法,即免疫学方法(胶体金免疫层析技术、单克隆抗体法和单抗-酶联免疫吸附试验)、核酸检测方法(RT-PCR技术、RT-PCR与其他方法的结合)和动物试验方法.同时提出了鉴别猪瘟强弱毒方法的发展方向.%This paper mainly summarizes differential methods of wild-type and vaccine virus of classical swine fever, which are immunology methods(GICA, McAb and McAb-ELISA), nucleic acid detection methods(RT-PCR and combination approach of RT-PCR with other methods) and animal test method.And the potential development directions of differential methods of wild-type and vaccine virus of classical swine fever are also proposed in this paper.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2011(039)002【总页数】3页(P138-140)【关键词】猪瘟病毒;野毒;弱毒;鉴别诊断【作者】杭柏林;胡建和;王青;史杰;李杰;朱王飞【作者单位】河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南省新乡市畜产品质量监测检验中心,河南,新乡;河南省新乡市畜产品质量监测检验中心,河南,新乡;江苏省扬州市出入境检验检疫局,江苏,扬州,225000【正文语种】中文【中图分类】S855.9猪瘟是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的猪的一种高度接触性传染病，常给养猪业造成严重的经济损失［1］。
猪瘟诊断方法研究进展探析
猪瘟诊断方法研究进展探析摘要概述了猪瘟诊断方法的研究进展，包括血清学诊断方法和病原学诊断方法，为猪瘟诊断方法的实际应用提供了技术帮助。
关键词猪瘟；诊断方法；血清学；病原学中图分类号 s858.285.3 文献标识码 a 文章编号 1007-5739（2009）05-0215-01猪瘟（classical swine fever，csf）是由猪瘟病毒引起的一种高度传染性的疫病，农业部将其列为一类传染病。
猪瘟临床可分为急性型、亚急性型、慢性型、非典型型猪瘟，以出血性败血症变化为特征。
猪是猪瘟病毒的唯一易感动物，本病流行广，传染快，死亡率高，一年四季均可发生。
本病自 1833 年在美国俄亥俄州发现以来，流行世界各地，给养猪业造成了不同程度的经济损失。
要控制猪瘟的流行和发生，必须强化猪瘟诊断方法的研究，数十年来，各国学者的倾力研究，促进了猪瘟诊断方法的的日趋完善和突破，为猪瘟的控制和消灭提供了良好的技术工具。
1 血清学诊断方法猪瘟elisa试验是世界动物卫生组织推荐的血清抗体检测方法。
clavijo等利用csfv e2基因表达产物制成单克隆抗体，建立了竞争elisa方法，利用此方法对临床健康猪和试验感染猪血清2 000份进行检测。
结果表明其特异性和敏感性分别达到100%和86%，并能在人工感染后21d检测到抗体。
周宗元等[1]应用猪瘟兔化弱毒抗原与hrp-spa建立了hrp-spa-elisa方法检测csfv抗体。
周广森等[2]应用hrp-spa-elisa对某猪场40份母猪血清和240份仔猪血清进行检测，发现母猪中有10%隐性猪瘟感染者，仔猪中有3.7%的隐性猪瘟感染者，证明了隐性猪瘟的母猪是垂直传播和水平传播的传染源。
shannon等[3]报道抗原捕获elisa能够检测2种不同株csfv感染的病猪血液和组织中的抗体。
余兴龙等[4]以在大肠杆菌中高效表达的csfv e2基因主要抗原编码区（me2）基因产物为抗原，以hrp标记的兔抗猪igg为二抗，建立了检测csfv抗体的间接elisa方法，试验证实用重组me2蛋白作为诊断猪瘟的抗原，具有特异性高、易纯化和成本低等优点。
关于猪瘟兔化弱毒疫苗的探讨
关于猪瘟兔化 弱毒疫苗 的探 讨
马艳 荣
（ １ ． 新疆农业大学，新疆乌鲁木齐 ８ ３ ０ ０ ３ ２ ； ８ ３ ０ ０ ３ ２ ） ２ ． 新疆维吾尔 自治 区动物卫生监督所 ，新疆乌鲁木齐
猪 瘟兔 化 弱毒 株具 有 稳定 的遗 传 特性 。将其 接 种在 家兔 的体 使 得 猪产 生 不 同的猪 瘟免 疫 抗体 ，但 是 人们 也 同样 建 立规 模化 的 内 ，对 家 兔产 生 的影 响仅 是 引起 家兔 产 生热 反应 ，对家 兔 的生 命 猪 场 ，进 而 适 合 本 场 的 猪 瘟 免 疫 程 序 。 猪瘟 免 疫 接 种 有 很 多 厅 ｊ １ ＿ ｆ 免 疫 要汁 不 会造 成 威胁 。随着 家兔 传 代 ，其 特征 性反 应 率相 应增 加 ，传 代 法 ，其 中 ，超前 免疫 是 一种 有效 的接种 方 法 ，利 用超 Ｉ 至４ ３ ０ 代 时特 征 性热 反 应率 高 达９ ７ ％，传代 至 ９ ８ ５ 代 时其 遗传 性 仍 意把 握接 种 时机 ，在 疫 苗接 种 之前 坍 记不 可吸 吮 初乳 ，这是 接种 未改变 。利用猪体反复对该疫苗进行传代 ，发现猪瘟兔化弱毒株 成 功 的关 键 ，此 外 ，接 种使 一 定要 很好 的把握 接 种剂 量 ，是 川 优
的毒力 并 未反 强 ，连 续 传代 ３ ０ 次左 右 ，仍然 维 持弱 毒 这一 特性 ， 体 现该 株 的遗传稳 定 性 ２ 使 用优 质疫苗 接种
在 给 猪进 行 猪瘟 兔弱 化 疫苗 的接种 时 ，接 种 的疫 苗质 小 岛 经 过 研 究 实 践 证 明 ，猪 瘟 兔 化 弱 毒 疫 苗 是 一 株 非 常 安 全 的 则 会 导致 接 种失 败 ，由于接 种 质量 不 高 ，免疫 剂 量存 存 问题 ， 导 疫 苗 ，用 次疫 苗 对猪 进 行接 种后 ，只会 表现 轻 微 的发热 及病 毒 血 致 猪 对病 毒 的侵 染不 能 抵制 。经过 病 毒侵 染 的猪 会通 过 两种 方 式 症 ，不 会 引起猪 的死 亡和 其他疾 病 的发生 ；对 于怀 孕２ 个 月左 右 的 进行 传播 。其一 是 经胎 盘垂 直 传播 ，此传 播方 式 导致 仔 猪还 未 母 猪 进行 接 种该 疫 苗不 会 引起母 猪 的流 产及 死 胎 ；对不 同品种 不 生就 会死 亡 。其 二 ，母 猪 一旦 在 怀孕 期 间感染 病 毒 ，死 胎 的排 …
猪瘟实验室诊断技术研究进展
性。
２ Ｄ Ｄ７ ０ ９
畜牧 兽医
试验综述
４ ２ 新城疫病毒 强化试验 ．
ＣＦ ’ Ｓ Ｖ感染猪 睾丸细 技术 、 荧光 能 量 共振 转 移 和核 酸 杂 交技 术 相 结 胞 后 ，不 能使细胞 发 生致细胞 病变 （Ｐ ） Ｃ Ｅ ，当把 合 ，采 用 荧 光 定 量 Ｐ Ｒ 技术 对 Ｃ Ｆ 进 行 快 速 定 Ｃ ＳＶ
一
１ ＣＦ ＳＶ的 分 离鉴 定
量 高 的组 织 ，研 磨 后 制 成 ２ １％的 混 合 匀 桨 ， ％～ ０ 肾原 代 细胞 系和 睾 丸细 胞 系 （Ｋ １、Ｐ － ａ Ｔ ， Ｐ 一５ Ｋ ２ 、Ｓ ）
温 １ ，连 续 测 温 ５ｄ后 ，对 所 有 家兔 用 兔 化 次 ９ ，若对 照组 中 ２只 以上家兔 出现定型热或 轻 ６ｈ
热 反 应 ， 则 说 明 病 料 中不 含 Ｃ Ｆ野 毒 ，反 之 试 验 Ｓ
采疑似病猪 的扁桃 体 、脾脏、淋 巴结等含毒 Ｃ Ｆ弱 毒 静 脉 注 射 ， 同样 每 ６ｈ测 温 １次 ，连 续 Ｓ
用 ０４ ｍ 滤 膜 过 滤 后 ，接 种 于 敏 感 性 最 强 的 猪 型热反应 ，则试验成立 。若试 验组家兔 出现定型 ．５ 然 后 利 用 Ｃ Ｆ荧光 抗 体 试 验 或 免疫 酶 染 色试 验 检 组家 兔 不 发 生 定 型热 反应 ， 说 明病 料 中含 Ｃ Ｆ野 Ｓ Ｓ
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文献标识码
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文章本文介绍了几种猪瘟的实验室诊断方法， 括病毒分 离和动物接种 摘 包 血清学及
９
西南大学21春[0886]《兽医生物制品学》在线作业答案
![西南大学21春[0886]《兽医生物制品学》在线作业答案](https://img.taocdn.com/s3/m/1c581deb0b4c2e3f56276320.png)
单项选择题
1、制作新城疫油乳剂灭活苗时，用于新城疫病毒液灭活的甲醛浓度为（）。
.3%
.1%
.0.01%
.0.1%
2、下列关于强菌（毒）种的叙述，不正确的是（）。
.可直接用于诊断制品、抗病血清、灭活疫苗、弱毒疫苗的制造。
.用作人工弱毒株的原始毒种
.用于微生物、免疫学及动物传染学等研究
.常从疾病流行地区的典型患病动物体内分离
3、下列不属于生物制品有效性范畴的是（）。
.用于预防疾病应有效
.用于治疗疾病应有效
.用于诊断和监测应准确
.用于畜禽副反应低
4、下列不能用于增殖病毒的是（）。
.动物
.禽胚
.细胞
.培养基
5、下列关于弱毒疫苗株的叙述中，不正确的是（）。
.可由微生物自然强毒株通过物理、化学或生物途径选育。
.具有良好的免疫原性和遗传特性。
.也可从自然界筛选具有良好免疫原性的自然弱毒株。
.彻底丧失了对原宿主动物的致病力。
6、下列属于异源疫苗的是（）。
.猪瘟兔化弱毒兔体组织活疫苗（预防猪瘟）
.麻疹疫苗（预防犬瘟热）
.鸡新城疫I系活疫苗（预防鸡新城疫）
.鸡传染性法氏囊病低毒力活疫苗（预防鸡传染性法氏囊病）。
猪瘟兔化弱毒原理
猪瘟兔化弱毒原理
近几年，我国猪瘟疫情频频爆发，给养猪业带来了巨大的损失。
为了
缓解猪瘟的疫情，科学家们通过研究病毒的特性，发展出了猪瘟兔化
弱毒疫苗。
那么，什么是猪瘟兔化弱毒原理呢？
1. 猪瘟病毒的特性
猪瘟病毒属于口蹄疫病毒科，是一种具有高度传染性和致死率的病毒。
它能够在猪群中快速传播，对生猪的生长和发展造成重大影响。
2. 兔化弱毒疫苗的制备
兔化弱毒疫苗是以猪瘟病毒为基础，通过经过多次传代和逐渐消弱后，再经过免疫兔子制备而成。
制备得到的兔化弱毒疫苗已经失去了原有
猪源病毒的致病性和传染性，但依然具有良好的免疫原性。
3. 兔化弱毒原理
兔化弱毒疫苗接种后进入猪体内，能够刺激猪体产生免疫反应，并生
成针对猪瘟病毒的抗体。
病毒复制对猪体损害小，能够大幅提高免疫
的成功率。
4. 猪瘟兔化弱毒疫苗的应用
猪瘟兔化弱毒疫苗是目前猪瘟控制的常用方法之一，不仅能够刺激猪
体产生有效的免疫反应，而且能够减轻病毒对猪的危害，进而达到抗
病的目的。
总的来说，猪瘟兔化弱毒原理的制备和应用是一项有效的疾病防控措施。
希望大家在平时的养猪管理中，注重生猪的防疫工作，确保猪群
的健康和稳定发展。
猪瘟DIVA疫苗研究现状
猪瘟DIVA疫苗研究现状作者：赵启祖来源：《兽医导刊》 2017年第11期一、养猪业是中国畜牧业的脊柱产业2012-2016 年国家统计局公布，肉类总产量，猪肉占63.76%，是主要消费肉类产品；全国年均生猪出栏量达到46020.6 万头；年均生猪出栏量达到70804.4 万头；年均生猪总产量达到11.6825 亿头，按照数据来看，中国的养猪量占据了世界养猪总量的一半以上。
养猪业的发展直接影响了国家经济和民众生活水平的提高。
生猪养殖模式多样、生物安全水平不高，养殖成本过高，导致疫病防治成本居高不下。
如今集约化、现代化、规模化、专业化养猪，已经逐渐成为发展趋势。
1990 年以前，我国90%猪场是散养猪场；到2002 年，有500 头以上的猪场大约占到10% ；到2015 年达到了44% ；预估到2020 年能够达到52% 左右。
据不完全统计，我国因病死亡猪的数量占饲养总数的8% ～ 10%，其中有一定比例的死亡是由于猪瘟引起的。
二、猪瘟兔化弱毒疫苗C 株- 猪瘟兔化弱毒疫苗，简称“C 株”（C-strain）。
20 世纪60 年代C 株从中国被引入东欧和亚洲友邦，被称为“K”株或“LC”（lapinizedChinese strain）株。
后传到西欧和拉美各国，Riems 株就是C 株的一个变种。
猪瘟兔化弱毒疫苗性能好、安全、免疫效果好，是国际公认的安全有效的弱毒疫苗，对世界猪瘟的预防控制作出了重大贡献。
三、中国猪瘟疫苗的生产与使用1. 猪瘟兔化弱毒疫苗自上世纪50 年代末大规模使用以来，是我国免疫覆盖率最高的疫苗，养猪人最认可的疫苗。
2. 疫苗从最初的兔脾脏组织苗，逐渐发展乳兔组织苗、原代细胞培养苗（包括猪、羊和牛细胞）。
3. 大规模化生产的牛睾丸原代细胞培养疫苗。
4. 目前中国猪瘟疫苗的生产企业有44 家，生产疫苗品种有10 个，包括猪瘟活疫苗（兔源）、猪瘟活疫苗（乳兔源）、猪瘟活疫苗（细胞源）、猪瘟活疫苗（传代细胞）、猪瘟耐热保护剂活疫苗（活疫苗）、猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）、猪瘟- 猪丹毒- 猪多杀性巴氏杆菌三联活疫苗（细胞源或兔源+G4T10 株+EO630 株）、高致病性繁殖与呼吸综合征- 猪瘟二联活疫苗（TJM-F92 株）、政府采购专用猪瘟活疫苗（脾淋源）、政府采购专用猪瘟活疫苗（细胞源）。
兽医传染病考试题(含参考答案)
兽医传染病考试题（含参考答案）一、单选题（共32题，每题1分，共32分）1.关于猪瘟病毒野毒株，下列描述正确的是：A、毒力差异不大，都是强毒B、毒力差异很大，有强、中、低、无毒株及持续感染毒株之分C、毒力差异情况还没有充分的研究D、毒力差异很大，不是强毒、就是弱毒正确答案：B2.大肠杆菌革兰染色观察，其颜色、大小、形态为：A、红色、中等大小、杆菌B、蓝紫色、大杆菌C、红色、大杆菌D、蓝紫色、中等大小、杆菌正确答案：A3.关于鸡毒支原体感染的传播途径，正确的描述是：A、主要经消化道传播B、既能经呼吸道水平传播，也能经带菌的种蛋垂直传播C、只能经呼吸道传播D、只能经带菌的种蛋传播正确答案：B4.我国农业农村部关于新城疫强制免疫的规定，要求血凝抑制抗体效价达到多少认为合格。
A、26B、27C、28D、25正确答案：A5.下列（）选项，是名词传染的要点A、病程的发展阶段B、能排出病原体的时期C、病原与机体的斗争过程D、特殊类型的疾病E、排出病原的动物机体正确答案：C6.在动物群体中，（）以上个体具有特异性抵抗力时，就不会发生相应疫病的大规模流行。
A、30%B、100%C、50%D、70%E、80%正确答案：E7.口蹄疫病毒分类地位属于A、黄病毒科B、微RNA病毒科C、疱疹病毒D、正粘病毒科正确答案：B8.禽霍乱最突出的症状表现为：A、圆圈运动B、剧烈腹泻C、关节炎D、鼻窦炎正确答案：B9.传染性法氏囊病最具诊断意义的病理变化是：A、皮下干燥、脱水B、肌肉条状或斑点状出血C、肾脏肿大，外观花斑状D、法氏囊黏膜出血，囊内有粘液正确答案：D10.禽伤寒的示病性病理变化是A、花斑肾B、虎斑心C、青铜肝D、脾坏死正确答案：C11.圆环病毒导致的猪多系统衰竭综合征主要发生在：A、妊娠期B、哺乳期C、保育期D、肥育期正确答案：C12.（）的鸡，对传染性法氏囊病最易感。
A、2-15周龄B、3-6周龄C、1周龄以内D、成年正确答案：B13.在我国农业部公布的动物疫病名录中，口蹄疫被列为：A、二类传染病B、一类传染病C、名录之外D、三类传染病正确答案：B14.关于经典蓝耳病的发病特点，表述错误的是：A、母猪死亡率较低，妊娠母猪预产前1周流产或早产B、肥猪病亡率高，皮肤呈暗紫红色C、乳猪死亡率高，呼吸表现突出D、母猪和仔猪症状较严重正确答案：B15.母畜患布鲁菌病的最常见症状是A、应激反应增强B、腹泻C、流产D、咳嗽正确答案：C16.关于猪繁殖与呼吸综合征病毒，表述错误的是：A、基因组稳定B、可引起严重致病感染C、可引起隐性感染/持续感染D、在巨噬细胞中复制正确答案：A17.大肠杆菌病的易感动物为：A、各种动物均易感，老龄畜禽更易感B、各种动物均易感，幼龄畜禽更易感C、各种动物均易感，青年畜禽更易感D、各种动物均不易感正确答案：B18.小反刍兽疫病毒的分类地位是：A、正黏病毒科、流感病毒属B、嵌杯病毒科、嵌杯病毒属C、副黏病毒科、麻疹病毒属D、副黏病毒科、副黏病毒属正确答案：C19.在农业农村部公布的动物疫病分类名录中，猪瘟被列入：A、名录之外B、二类传染病C、三类传染病D、一类传染病正确答案：D20.关于支原体，描述正确的是：A、对培养基要求，生长迅速B、无细胞壁C、能形成芽孢D、有荚膜正确答案：B21.关于巴氏杆菌病，下列表述正确的是A、幼龄动物最易感B、成年动物最易感C、各种年龄动物都不易感D、各种年龄动物同等易感正确答案：B22.关于动物对伪狂犬病毒的易感性，表述正确的是：A、兔鼠、犬猫、牛羊、猪均易感B、兔鼠、犬猫、牛羊、猪均不易感C、兔鼠、牛羊易感，猪、犬猫均不易感D、猪、犬猫均易感，兔鼠、牛羊不易感正确答案：A23.下列（）选项，是名词传染病的要点A、病原与机体的斗争过程B、特殊类型的疾病C、病程的发展阶段D、排出病原的动物机体E、能排出病原体的时期正确答案：B24.雏鸡白痢主要导致（）鸡死亡A、1日龄B、3周龄以下C、3周龄以上D、成年正确答案：B25.锁喉风的突出病变是A、咽喉部肌肉强直收缩B、咽喉部周围结缔组织呈胶胨样水肿C、咽喉部呈锁形青铜色D、咽喉部见风字形图案正确答案：B26.鸡白痢检疫净化最常用的方法是：A、全血平板凝集试验B、血凝抑制试验C、琼脂扩散试验D、核酸检测正确答案：A27.口蹄疫的示病性病理剖检变化是A、胃、肠黏膜出血性炎症B、蹄部皮肤见到水疱C、虎斑心D、败血症正确答案：C28.正确解读猪圆环病毒病实验室检测结果的依据，不包括：A、猪只遗传性状如：种属、品系、性别B、生产指标如：采食量、日增重、死淘率C、实验室检测数据如：病毒载量变化D、健康指标如：体温、精神、呼吸、粪便正确答案：A29.控制传染性法氏囊病疫情，最经济、高效的措施是：A、发病初期，饮用高浓度清热解毒口服液B、发病初期，接种法氏囊疫苗C、发病中后期，使用抗传染性法氏囊病高免卵黄抗体D、发病初期，注射抗传染性法氏囊病高免卵黄抗体正确答案：D30.（）系统特别适宜布鲁菌生长繁殖A、消化B、呼吸C、运动D、生殖正确答案：D31.大肠杆菌的染色、大小、形态为A、革兰阴性、中等大小、杆菌B、革兰阴性、小杆菌C、革兰阳性、大杆菌D、革兰阳性、中等大小、杆菌正确答案：A32.下列不适合做猪流行性腹泻病原检测的病料：A、心血B、肠系膜淋巴结C、粪便D、肠黏膜正确答案：A二、多选题（共43题，每题1分，共43分）1.关于猪流行性腹泻的流行病学，下列描述正确的是：A、各日龄猪均易感B、新生仔猪发病最严重C、肥育猪发病最严重D、繁殖母猪病死率最高正确答案：AB2.产地检疫包括：A、铁路检疫B、公路检疫C、畜禽出场检疫D、乡镇集市检疫正确答案：CD3.布鲁菌是A、严格细胞内寄生菌B、严格需氧菌C、兼性细胞内寄生菌D、需氧或兼性厌氧菌正确答案：CD4.典型急性型猪瘟的病理变化包括：A、肾脏斑点状出血，严重者呈“雀斑肾”样B、盲结肠黏膜坏死、溃疡，呈“扣状肿”C、淋巴结肿大，切面周边出血呈“大理石”样D、脾脏出血性梗死，呈“锯齿”样正确答案：ACD5.大肠杆菌引起的仔猪疾病有：A、仔猪红痢B、仔猪水肿病C、仔猪白痢D、仔猪黄痢正确答案：BCD6.执行检疫的机构包括：A、畜牧兽医局B、农业农村局C、国家质量监督检验检疫总局（分局）D、动物卫生监督机构正确答案：CD7.预防仔猪黄痢，主要从（）方面入手A、增加大肠杆菌数量B、降低仔猪抵抗力C、提高仔猪抵抗力D、减少大肠杆菌数量正确答案：CD8.链球菌病的传播途径，主要经A、呼吸道感染B、受损的皮肤及粘膜感染C、尿道感染D、消化道感染正确答案：AB9.关于非洲猪瘟病毒，描述正确的选项包括A、抵抗力强B、结构复杂C、抵抗力弱D、基因组大正确答案：ABD10.口蹄疫的易感动物有：A、牛B、马C、羊D、猪正确答案：ACD11.按宿主范围将沙门菌分类为：A、非宿主适应性沙门菌B、肠道沙门菌C、宿主适应性沙门菌D、田纳西沙门菌正确答案：AC12.防制畜禽结核病的措施，主要包括A、培育健康群B、积极治疗患病动物C、防止病原传入D、检疫、淘汰阳性动物正确答案：ACD13.鸡新城疫病鸡消化系统的病理剖检变化，主要表现为：A、嗉囊空虚或充满稀薄酸臭的液体和气体B、肠道黏膜淋巴集合滤泡肿胀出血、溃疡C、腺胃黏膜、特别是腺胃乳头出血D、盲肠扁桃体肿胀出血正确答案：ABCD14.关于鸡传染性支气管炎病毒肾型变异毒株感染雏鸡，下列描述正确的是：A、法氏囊高度肿大、出血B、症状表现呈两段性，第1阶段鸡群有轻微呼吸啰音、第2阶段拉灰白色水样稀便C、肾小管和输尿管内有尿酸盐沉积D、肾脏肿大正确答案：BCD15.依病原体抗原结构将禽沙门菌病分类为:A、鸡伤寒B、鸡白痢C、海德堡沙门菌D、禽副伤寒正确答案：ABD16.禽大肠杆菌病剖检变化的“经典三炎”是指：A、肝周炎B、气囊炎C、心包炎D、关节炎正确答案：ABC17.关于猪流行性腹泻的病理剖检变化，下列描述正确的是：A、脾脏高度肿大B、小肠绒毛萎缩、变短C、肠管扩张，肠壁变薄，肠腔充满黄色液状内容物D、肠系膜淋巴结水肿正确答案：BCD18.防治鸡毒支原体感染，下列哪些药物可以选用：A、泰妙菌素B、增效磺胺C、泰乐菌素D、多西环素正确答案：ACD19.小反刍兽疫的特征表现包括：A、高热稽留、鼻眼分泌物增加B、肺炎C、口腔糜烂D、腹泻正确答案：ABCD20.关于鸡毒支原体感染的危害，描述正确的是：A、诱发儿童顽固性支气管炎B、降低生长发育速度C、增加死淘率D、诱发多种疾病正确答案：BCD21.动物口蹄疫的结局可表现为：A、成年动物良性经过B、羔羊、犊牛、乳猪，常发生心肌炎而死亡C、妊娠母畜可发生流产D、经常发生败血症死亡正确答案：ABC22.非洲猪瘟的剖检变化主要表现在下列那些方面A、脾脏严重肿大B、淋巴结出血、水肿C、肾脏点状出血D、皮肤出血、坏死斑块正确答案：ABCD23.猪流行性腹泻的症状表现主要包括：A、腹泻B、发烧C、呕吐D、耳朵变蓝正确答案：AC24.关于非洲猪瘟病毒，描述正确的选项包括A、非洲猪瘟病毒主要在单核细胞、巨噬细胞中复制B、非洲猪瘟病毒主要在T、B淋巴细胞中复制C、非洲猪瘟病毒不感染T、B淋巴细胞D、非洲猪瘟病毒不感染单核细胞、巨噬细胞正确答案：AC25.鸡新城疫Ⅳ系弱毒疫苗的接种方法包括：A、点眼B、滴鼻C、气雾D、饮水正确答案：ABCD26.实施动物检疫要求：A、机构具备职能B、工作过程符合程序C、人员具有资格D、结论符合规定正确答案：ABCD27.小反刍兽疫的疫情处理措施包括：A、扑杀染疫动物并进行无害化处理B、立即上报动物卫生监督机构C、严格消毒被污染的环境D、积极治疗患病动物正确答案：ABC28.小反刍兽疫的自然宿主包括：A、牛B、兔子C、山羊D、绵羊正确答案：CD29.关于猪支原体肺炎，表述正确的是：A、隐性感染比例很高B、经常继发其他呼吸道病C、降低生长发育速度D、危害人类健康正确答案：ABC30.发生疫情时的扑灭措施包括：A、迅速隔离、消毒疫点，对疫点内动物分类处置B、早发现C、快诊断D、适当上报疫情正确答案：ABCD31.巴氏杆菌的培养生长特性包括：A、在血液/血清培养基上生长良好B、不能在人工营养培养基上生长C、在普通营养培养基上生长贫瘠D、在血液培养基上生长的菌落不溶血正确答案：ACD32.关于猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株，表述正确的有：A、我国流行的PRRSV毒株大多数是美洲原型B、我国流行的PRRSV毒株大多数是欧洲原型C、LV是欧洲PRRSV分离毒株的原型D、VR-2332是北美PRRSV分离株的原型正确答案：ACD33.关于副猪嗜血杆菌病，下列描述正确的是A、副猪嗜血杆菌血清型复杂B、饲料中缺乏血红素可诱发副猪嗜血杆菌病C、在环境温度偏低时可能诱发副猪嗜血杆菌病D、副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道中的共栖菌正确答案：ACD34.结核病的免疫特点是（）A、不产生免疫B、抗结核免疫主要是体液免疫C、带菌免疫D、抗结核免疫主要是细胞免疫正确答案：CD35.国境口岸检疫包括：A、旅客携带动物检疫B、国际邮包检疫C、过境检疫D、进出境检疫正确答案：ABCD36.易感羊群感染小反刍兽疫表现为A、病死率低B、病死率高C、发病率高D、发病率低正确答案：BC37.构成传染病概念的关键词包括：A、潜伏期和临诊表现B、病原微生物C、大群死亡D、疾病E、传染性正确答案：ABDE38.临床综合(现场)诊断包括：A、病理解剖学诊断B、临床症状诊断C、病料涂片镜检D、流行病学诊断正确答案：ABD39.新城疫血凝抑制试验中，4单位病毒起什么作用？A、稀释红细胞B、维持等渗条件C、被抗体中和D、凝聚红细胞正确答案：CD40.传染性法氏囊病的主要危害是：A、鸡群产蛋率降低B、鸡只免疫抑制C、鸡群死淘率增加D、威胁人类健康正确答案：BC41.猪圆环病毒病包括：A、蓝耳病B、猪皮炎肾病综合征C、流行性腹泻D、断奶仔猪多系统衰竭综合征正确答案：BD42.以下那些措施有利于防控禽沙门菌病A、种蛋按制度消毒B、种鸡群检疫净化C、挑选健雏、剔除弱雏D、加强饲养管理正确答案：ABCD43.关于伪狂犬病的传播途径，表述正确的包括：A、犬猫常经消化道感染B、不能经皮肤伤口传播C、可经空气飞沫传播D、妊娠母猪感染病毒可经过胎盘感染胎儿正确答案：ACD三、判断题（共36题，每题1分，共36分）1.妊娠母猪接种猪瘟兔化弱毒疫苗时，猪瘟疫苗病毒可通过胎盘导致胎儿死亡形成木乃伊。
散养生猪猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的监测研究
每 ０ 在 现 ， 猪 的重 大 动 物 疫 病 防控 也 趋 于 本 相 同 （ 重 相 差 不 超 过 ２０ｋ ） ５ ４ 疫 组 。 组 １ 头 ． 阉 割 时分 别 按 猪 瘟 对 体 ． ｇ ，３ — ０ １龄 未 经 免 疫 的仔 猪 ８ 头 。 为 供 试 猪 。 ３ ０ 作
需 要 防 疫 的生 猪 疫 病 有 多 种 ， 目前 散 牧 兰州生物药 厂生产。
养 户 最 基 本 的 是 要 做 好 猪 瘟 和 口 蹄 １３ 试 剂 ．
１ 材 料 和 方 法
Ｄ、 Ｆ ３ 为 猪 瘟 一 丹 毒 二 联 Ｅ、 组 猪 苗 防疫 组 ， 行 边 劁 边 防 。每 组 １头 ， 实 ０ 三 组 按 常 规 剂 量 接 种 口蹄 疫 疫 苗 ， 同 时 分 别 按 １２ ３ 剂 量 接 种 猪 瘟 一 丹 、 、倍 猪 ． Ｇ、 组 为 ２ 疫 苗 错 开 时 间 免 Ｈ２ 种 疫 苗 、猪瘟 一 丹 毒 二 联 苗 ２ 剂量 接 猪 倍 种 。 隔 １ 后 进行 口蹄疫 疫 苗 常 规 剂 间 周
进行 口蹄疫 疫苗常规 剂量的免疫接种 。 分８ 。通过 正向间接血凝 （ＨＡ） 共 组 Ｐ 试验检测猪 瘟抗 体 ， 结果表 明： 对散 养 生猪 同时进 行猪瘟 和 口蹄疫 双针 防疫 的免疫效果 确实 ， 可 是
行 的 。 且 不 同 免 疫 剂 量 猪 瘟 疫 苗 在 接 种 后 产 生 的抗 体 水 平 略 有 不 同 ， 量 大 的 ， 一 定 剂 则 时 间后 抗 体 水 平 相 对 高 些 ， 实 际 工 作 中 ． 在 为避 免 疫 苗本 身 质 量 、 苗 保 管 等 因素 导 致 疫 防 疫质 量 下 降 ， 们 建 议 猪 瘟 采 用 ２ 我 头份 剂量 规 范 实施 免 疫 接 种 。
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２ ℃ 备 用 ］ Ｏ 。
固定后 的 细胞单 多克 隆抗 体 ，７℃ 温育 １ｈ ０ ０ ｌＬ ｐ ． ３ ， ． １ｍｏ／ Ｈ７ ２的
Ｐ Ｓ缓 冲液 冲洗后 ， 油封 片 。或 与 Ｃ Ｆ 的 单 克 Ｂ 甘 Ｓ Ｖ
隆 抗 体温育 ， Ｓ 封闭后 ， Ｆ Ｔ ＢＡ 经 Ｉ Ｃ标 记 的抗 鼠抗体
（ ｉｍａ 司）温 育 、 片 。用 Ｎｉｏ Ｓｇ 公 封 ｋ ｎ荧 光 显微 镜 于 波 长为 ４ ５ｎ 激发 光下 观察 。 ９ ｍ ］ １ ２ ３ 流式 细 胞 仪 样 品制 备 根 据 细 胞 试 验 条 件 ． ．
一
此， 能否 找到 比牛 睾 丸 原 代 细 胞 更好 的 生产 猪 瘟 兔 化弱 毒疫 苗的传 代 细胞 ， 成 为 猪瘟 兔 化 弱 毒 疫 苗 已 作 为全 国强制 性 免 疫 用 疫 苗 的 急 需 。鉴 于此 ， 展 开 了用 我们建 立 的永 生化猪 血 管 内皮 细胞 增殖 Ｃ株 病 毒 的的研究 ， 以了 解 永 生化 猪 血 管 内皮 细 胞 接 种猪
猪瘟 （ ｌｓｉ ｌ ｗｉｅｆｖ ｒＣ Ｆ 是 由猪瘟 病毒 Ｃ ａ ｓ ａ ｎ ｅ ， Ｓ ） ｃ ｓ ｅ
１ １ ２ 主要仪 器设 备 ．．
１ ２ 方 法 ．
Ｃ ２培养 箱 ； ｋ ｎ荧 光显 ０ Ｎｉｏ
（ ｌ ｓ ａ ｗｉｅｆｖ ｒｖｒ ｓ ｃ Ｆ 引 起 的高 度 接 Ｃ ａ ｉ ｌｓ ｎ ｅ ｅ ｉ ， Ｓ Ｖ） ｓｃ ｕ
动物 医学进 展 ， ０ ０ ３ （ ） １一 ５ ２ １ ，１ ７ ： ｌ１
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖ ｅ ｅ ｉ ｒ ｅ ｉ ｉ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎａ ｙ Ｍ ｄ ｃｎｅ
接种 猪 瘟 兔化 弱 毒 株 的永 生化 猪 血 管 内皮 细胞 传 代 情 况 研 究
谭 晓妮 ， 张彦 明 ， 张 旭 ， 邓 力
本研 究为 永 生化猪 血 管 内皮 细胞 生产 猪瘟 兔化 弱毒 疫 苗奠 定 了基 础 。 关键 词 ： 瘟 兔化弱 毒株 （ Ｌ ； 生化 猪血 管 内皮 细胞 ； 态 变化 ； 猪 ＨＣ Ｖ） 永 形 细胞传 代
中 国 分 类 号 ：８ ２ ６ １ Ｑ １ ． ￥５．５ ； ８３ １ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ７５ ３ （ ０ ０ ０ —０ ｉ０ １ ０ — ０ ８ ２ １ ） ７０ １ － ５
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
１ １ １ 细胞 与 毒 株 永 生 化 猪 血 管 内皮 细 胞 系 ． ． （ ＵＶ Ｃ 由西 北 农 林 科 技 大 学 动 物 医 学 院 张 彦 明 Ｓ Ｅ ）
表 明 ， 种猪 瘟兔化 弱毒 后 ２ 接 Ｏ代 （ ９ 第 Ｏ代 永 生化猪 血 管 内皮 细胞 ） 细胞 与 正 常的形 态相 似 ， 传 至接 毒后 的 但
３ ５代 （ １ ５代 永 生化 猪 血 管 内皮 细胞 ） ， 第 ０ 时 细胞 稍 有 拉 长 现 象 。各代 次 细胞 中都 有猪 瘟 兔 化 弱毒 的检 出。
微镜 ； 凝胶 成像 系统 ； ｉ—ａ Ｃ ＢｏｒｄＰ Ｒ仪 。
触性传 染病 ， 特 征 是 小血 管 的 变化 所 导 致 的 内脏 其
器官 中的多发 性 出血 、 坏死 Ｌ ， １ 给养 猪 业 造成 了 巨 大 ］ 经济损 失 。我 国从 ２ 世 纪 ６ Ｏ Ｏ年代 开 始采 用猪 瘟 兔 化 弱毒 疫苗预 防接 种 来 防 控 猪 瘟 ， 得 了显 著 的成 取 效 。在 异源 原代 细胞 中增殖 的猪 瘟 兔化 弱毒疫 苗 株 （ Ｌ 是 我 国 主 要 的 弱 毒 疫 苗 Ｌ 。但 近 年 来 普 ＨＣ Ｖ） ２ ］ 遍 反映 牛睾丸 原代 细胞 生产 的猪 瘟 兔化 弱 毒疫 苗 的 毒 价不稳 定 ， 病 毒 滴 度 较 低 ， 疫 效果 不 确 实 ， 且 免 给 猪 瘟计划 免疫 接 种 带 来 了 困难 。此外 ， 国际 上 提 倡
生产疫 苗 时 ， 传代 细胞 的 ， 量 不 用原 代 细胞 。因 有 尽
１ ２ １ 永 生化 猪血 管 内皮 细胞 的培 养 、 毒 及 连 续 ． ． 接
传代 条 件 用 ＤＭＥ （ 糖 ） 养 液 加 １ ０ ｍＬ Ｌ Ｍ 高 培 ０ ／ 无 牛病 毒性腹 泻病 毒抗 体 的胎 牛血 清 作 为永 生化 猪 血 管 内皮细胞 的培 养 液 （ｐ ７ ２ 。待 细 胞 铺 长 成 Ｈ ． ）
（ 北 农 林 科 技 大 学 动 物 医学 院 ， 西 杨 陵 ７ ２０ ） 西 陕 １ １ ０
摘 要 ： 传 至 ７ 在 Ｏ代 的永 生化猪 血 管 内皮 细胞接 种猪 瘟 兔化 弱 毒 ， ２ｈ后 收取 细 胞上 清 液 并对 处 理 的 ７
细胞进行 传代 培养 ， 别检 测 第 ７ 、５ ８ 、 ０ １ ０ １ ５代 接毒 细胞 中病 毒 ， 分 Ｏ ７ 、 Ｏ ９ 、０ 、 ０ 观察 各代 细胞 的生 长情 况 。结果
６ ～８ 单层 时 接毒 ，７℃感染 １ｈ后 ， Ｏ Ｏ ３ 吸取 多余 毒液 ， Ｄ Ｈａ ｋ 经 － ｎ ｓ洗 涤 ， 维 持 液 （ Ｈ ． ～ ７ ８ 加 ｐ ７６ ．）
培养 ， 持液含 ２ ／ 维 ０ｍＬ Ｌ的胎 牛血 清 。 １ ２ ２ 免疫 荧光检 测 方 法 ．． 将 细胞 培 养 在盖 片 上 ， 在接 毒后 不 同时间 ， ０ ０ Ｉ Ｈ ． 用 ． Ｉｍｏ／Ｌ ｐ ７ ２的 Ｐ Ｓ Ｂ 缓 冲 液 （ ８ ５ｇ Ｌ的 Ｎａ １ 冲 洗 。放 入 纯 丙 酮 中 含 ． ／ Ｃ ） 固定 １ ｉ ， ５ｒ ｎ 自然干 燥后 用 于 免疫 荧 光 检 测 或 存 于 ａ