不同药物杀灭原头节对小鼠肝细粒棘球蚴感染的影响
纳米化阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节生长的影响
纳米化阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节生长的影响纳米化阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节生长的影响细粒棘球蚴是一种寄生在人类和动物体内引起棘球蚴病的寄生虫。
棘球蚴病是一种严重的寄生虫感染疾病，对人类和动物的健康造成了重大威胁。
现有的药物治疗方法对棘球蚴病的效果有限，容易产生耐药性。
因此，寻找新的药物治疗方法是解决这一问题的关键。
近年来，纳米技术的快速发展为疾病治疗提供了新的思路。
纳米化药物的应用广泛应用于癌症等疾病的治疗中。
对于棘球蚴病的治疗，纳米技术也被用于将药物纳米化，以提高药物在细胞内的渗透性和生物利用度。
阿苯达唑是一种治疗棘球蚴病的常用药物，但其生物利用度低，且耐药性易产生。
因此，研究人员尝试利用纳米技术提高阿苯达唑的生物利用度和治疗效果。
本研究采用纳米化技术将阿苯达唑纳米化，并对纳米化阿苯达唑在细粒棘球蚴原头节生长过程中的影响进行了实验研究。
实验结果显示，纳米化阿苯达唑能够显著抑制细粒棘球蚴原头节的生长。
与传统阿苯达唑相比，纳米化阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节的生长抑制作用更加明显。
进一步分析发现，纳米化阿苯达唑能够更快地进入细胞内部，并在细胞内释放药物，从而提高了药物的生物利用度和治疗效果。
此外，纳米化阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节的抑制作用是与剂量相关的。
在一定剂量范围内，纳米化阿苯达唑的抑制作用随着剂量的增加而增强。
然而，过高的剂量可能引起细胞毒性反应，对细胞造成损害。
总之，本研究结果表明，纳米化阿苯达唑能够有效抑制细粒棘球蚴原头节的生长，提高药物的生物利用度和治疗效果。
然而，关于纳米化阿苯达唑的安全性和长期治疗效果还需进一步研究。
希望通过进一步的研究和实验，可以将纳米化阿苯达唑作为一种新的治疗棘球蚴病的药物应用于临床，并为棘球蚴病的治疗提供新的思路和方法综上所述，通过纳米化技术改良阿苯达唑的药物性质，可以显著提高其生物利用度和治疗效果，对细粒棘球蚴原头节的生长具有明显的抑制作用。
然而，纳米化阿苯达唑的安全性和长期治疗效果仍需进一步研究。
三氧化二砷联合阿苯达唑对细粒棘球蚴生长的影响
三氧化二砷联合阿苯达唑对细粒棘球蚴生长的影响邢国强;张慧;吕海龙【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2024(46)4【摘要】目的研究体外条件下三氧化二砷(ATO)联合阿苯达唑(ABZ)对细粒棘球蚴原头节生长作用的影响,初步探讨联合用药治疗肝包虫病的可行性。
方法采用不同浓度的ATO(3和6μmol/L)联合ABZ在体外条件下作用于原头节,分组如下:3μmol/L ATO、6μmol/L ATO、100μmol/L ABZ、3μmol/LATO+100μmol/L ABZ和6μmol/L ATO+100μmol/L ABZ。
光镜下通过0.1%伊红染色法观察原头节的活力及形态变化;扫描电子显微镜下观察原头节的超微结构变化;各组药物作用2 d后,借助半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒测定caspase-3酶活力。
采用ELISA法检测原头节内抗氧化酶(SOD、HO-1)活性水平。
结果6μmol/L ATO+100μmol/L ABZ组原头节的抑制作用最强,3μmol/L ATO+100μmol/L ABZ组次之。
联合作用组对原头节超微结构的损伤明显大于ABZ单独作用组,6μmol/L ATO+100μmol/L ABZ作用3 d后原头节表层出现虫蚀样改变、顶突变形、头钩缺损及微毛脱落。
原头节在培养4d后,联合作用组原头节caspase-3活力[(43.34±1.07)μmol/L]显著高于ABZ单药作用组[(32.58±0.73)μmol/L](F=859.754,P<0.05),且具有剂量依赖性。
ATO作用后原头节内SOD、HO-1活性显著下降(P<0.05),呈现时间及剂量依赖性。
结论ATO与ABZ联合可显著抑制细粒棘球蚴原头节生长,且抑制作用强于单独用药,其协同作用机制可能与改变原头节内氧化应激系统有关,然而其具体机制尚需进一步研究。
3种药物体外抗细粒棘球蚴原头节作用的比较
包虫病是人 . 畜共患寄生虫病 $ 其流行几乎遍及世 界各国 $ 已成为全球性的公共卫生问题 / 对包虫病的治 手术仍然是主要的手段 $ 但因手术并发症以及术后 疗$ 复发等问题 使 包 虫 病 的 药 物 治 疗 逐 渐 受 到 重 视/ $ 因此积极寻找抗包虫病的新药成为包虫病防治研究中
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染色 )PB 在普通光镜下观察 $ 死亡原头节红染着色 $ $ E
目$ 以着色 者所占 观察 数 之 百 分 比 作 为 原 头 节 的 死 亡 率$ 共计数 ’ 个$ 计算平均死亡率 $ 每天计数 4 次$ 直到 ( ( 空 白组 的原头 节全部 死 亡 为 止 / 实验过程中不更换培 养基 / " 统计分析 用计量资料配伍组试验方差齐性检验 % 和 d检验 + 配 伍 组 两 两 比 较 的 e检 验 以 及 配 伍 组 比 较 的 秩 和 检 验/
新疆维吾尔自治区包虫病临床研究所细胞生物学室 $ 新疆乌鲁木齐 & % ’ ( ( ) * +
摘要 - 目的 , 的作用/ 方法
通过比较氧苯达唑 . 阿苯达唑和阿苯达唑脂质体体外抗细粒棘球蚴原头节作 用 $ 探讨氧苯达唑抗包虫病
将氧苯达唑. 阿 苯 达 唑 和 阿 苯 达 唑 脂 质 体 分 别 配 成 高. 中. 低浓度加入 0 培养基中$ 体外培养 4 5 * ( 1 23 细粒棘球蚴原头节 $ 观察其每天的死亡率 $ 直到对照组的头节全部死亡为止 / 结果 将相同条 件 下 ’ 种药物作用原头节 的死亡率分 别 与 对 照 组 相 比 $ 阿苯达唑. 氧苯达唑高. 中. 低浓度组与对照组相比$ 差异均有统计学意义% 而阿 7( 8 ( ) + 9 6 苯达唑脂质体仅在高 浓 度 时 与 对 照 组 的 差 别 有 统 计 学 意 义 % 7( 8 ( ) + / 结论 6 抗包虫药 9 阿苯达唑脂质体剂型并未显示出特殊的体外抗原头节作用 / 关键词 - 细粒棘球蚴 9原头节 9阿苯达唑 9氧苯达唑 9阿苯达唑脂质体 9体外实验 , 中图分类号 - 0 , ’ & ’ 8 ’ ’ 文献标识码 - : , 文章编号 - 4 , ( ( 4 ; 5 5 < = % < ( ( < + ( 4 ; ( ( ’ ) ; ( * 氧苯达唑. 阿苯达唑和阿苯达唑脂质体 均有显著的体外抗细粒棘球蚴原头节作用 9 氧苯达唑体外抗细粒棘球蚴原头节作用与阿苯达唑 相 当 $ 可认为是一种新型
化学剂与药物抗细粒棘球绦虫原头节的作用
化学剂与药物抗细粒棘球绦虫原头节的作用陈钦铭;叶于聪;柴风玲;金凯平【期刊名称】《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》【年(卷),期】1991(9)2【摘要】本文报告3种化学剂与2种药物在体内与体外杀灭原头节的效果。
终浓度为0.3％的北美黄连碱与原头节作用15min后,头节死亡率分别为68.9％和70.2％;终浓度为10％的乙醚-醋酸-乙醇混合液(乙醚:醋酸:乙醇为5:3:2)分别为56.2％和56.8％,较终浓度为0.3％的H_2O_2的杀头节效果(6.0％)为佳,0.004％吡喹酮与0.004％阿苯达唑在体外试验中与原头节作用15min未见有杀灭原头节效果。
初步结果表明北美黄连碱和乙醚-醋酸-乙醇混合液具有较迅速和较强杀原头节作用。
扫描电镜观察结果,经北美黄连碱作用后,原头节顶突质膜皱襞断裂,头钩排列紊乱、脱落,吸盘变形,头钩与吸盘表面膜内颗粒减少。
【总页数】3页(P137-139)【关键词】细粒棘球绦虫;原头节;化学剂;药物【作者】陈钦铭;叶于聪;柴风玲;金凯平【作者单位】青海省高原医学科学研究所【正文语种】中文【中图分类】R978.63【相关文献】1.高强度聚焦超声波对细粒棘球绦虫原头节的杀伤效应 [J], 邹晓毅;王俊安;周潜涛;叶彬;张成武;赵发生;韩秀敏2.细粒棘球绦虫在人体内棘球蚴原头节、囊壁蛋白质表达谱分析 [J], 曹得萍;樊海宁;毋德芳;白海燕;赵海龙3.间充质干细胞与细粒棘球绦虫原头节共培养对细粒棘球绦虫原头节活性的影响[J], 邹海亮;桂显伟;陈贺捷;陈帅;吴向未4.地塞米松与ATP联用在体外诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡的研究 [J], 康金凤;胡汉华;袁武梅;武贵臻;陈蓉;白山别克.吴汗;艾赛提.卡力5.缓释吡喹酮对实验小鼠体内细粒棘球绦虫原头节生存的作用 [J], 张弟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
药物治疗对小鼠棘球蚴病体内细胞因子的变化
维普资讯
第２ ８卷
第 ２期
青 海 医 学 院 学 报
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药 物治 疗 对 小 鼠棘 球 蚴 病体 内细胞 因子 的变 化
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阿苯达唑联合IFN-α抗小鼠细粒棘球蚴病的实验研究
阿苯达唑联合IFN-α抗小鼠细粒棘球蚴病的实验研究云哲琳;周永升;张焱;李冰【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2018(34)2【摘要】目的在BALB/c小鼠体内评价阿苯达唑(ABZ)联合干扰素(interferon,IFN)-α对于CE的治疗效果.方法 Balb/c小鼠原头蚴腹腔继发感染5个月后,小鼠被随机分配到4组:ABZ组、IFN-α组、ABZ+ IFN-α组和未经处理对照组.不同处理组分别给药2个月.在治疗的第0、7、14、28、36、48、60 d从小鼠尾静脉采血检测血清中抗体水平变化.治疗结束后处死小鼠,检测相关指标评价治疗效果.结果与对照组(P＜0.01)或ABZ组(P＜0.05)相比,ABZ+ IFN-α组包囊的数量、大小及重量都显著减少.对不同处理组的包囊进行透射电镜观察(TEM)发现,ABZ+ IFN-α组的包囊的超微结构发生了明显的改变.ELISA实验结果表明,ABZ+ IFN-α组的血清与脾细胞分泌的白细胞介素(interleukin,IL)-10显著下降(P＜0.01);血清中IgE、IgG抗体及其亚型浓度与对照组相比显著降低(P＜0.01).结论本研究证实ABZ联合IFN-α可能成是一种有效的CE治疗方案.%This study aimed to evaluate the in vivo efficacy of combined ABZ-interferon (IFN)-α treatment for CE in mice.After 5 months of secondary infection with protoscoleces,mice were randomly allocated into four groups:ABZ-treated group,IFNαtreated group,ABZ+IFN-α group and untreated control group.Drugs in diverse treated groups were respectively administered for 2 months,of which,sera were respectively collected in 0 d,7 d,14 d,28 d,36 d,48 d,and 60 d.Mice were then euthanized and associated indicationswere investigated to evaluate the therapeutic efficacy.Results showed that ABZ+IFN-α induced a significant reduction of the number,size as well as weight of cysts,compared with that in ABZ (P＜0.05) or untreated group (P ＜0.01) respectively.This effect was associated with ultrastructural modification of the cyst in ABZ+IFN-α group.Interestingly,significant decrease of IL (interleukin)-10 in serum and in vitro production by spleen cells with ABZ+ IFN-α treatment was observed i n comparison with untreated control (P＜0.01).Serum IgE,IgG and subsets were respectively decreased in ABZ+IFN-α treatment,compared with that in control group (P ＜0.01).Our findings demonstrated that combination of ABZ with IFN-α may contribute to an efficient therapeutic regimen of human and animal CE.【总页数】6页(P133-138)【作者】云哲琳;周永升;张焱;李冰【作者单位】内蒙古包钢医院普外科,包头014010;内蒙古包钢医院普外科,包头014010;宁夏医科大学科技中心,银川 750003;内蒙古包钢医院普外科,包头014010【正文语种】中文【中图分类】R383【相关文献】1.硝唑尼特和阿苯达唑联合治疗小鼠原发性和继发性泡状棘球蚴病的机制探讨 [J], 买合皮热提汗·艾尔肯;王云海;赵晋明;白磊2.阿苯达唑脂质体治疗肝,腹部细粒棘球蚴病的动物实验研究 [J], 邵英梅;温浩3.阿苯达唑壳聚糖微球抗小鼠细粒棘球蚴药效实验研究 [J], 梁闻;王新春;吴向未;张示杰;孙红;马欣;彭心宇4.口服阿苯达唑脂质体治疗沙鼠骨细粒棘球蚴病的实验研究 [J], 谢增如;刘大鹏;乌米提;温浩;阿德力5.阿苯达唑脂质体生发层单抗复合物治疗小鼠细粒棘球蚴病效果观察 [J], 牛荣丽;薛弘燮;莫红梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
药物治疗对小鼠棘球蚴病体内细胞因子的变化
药物治疗对小鼠棘球蚴病体内细胞因子的变化
赵海龙;曹得萍
【期刊名称】《青海医学院学报》
【年(卷),期】2007(028)002
【摘要】目的观察维拉帕米和阿苯哒唑单独及联合用药治疗小鼠继发性棘球蚴病后其体内细胞因子的变化. 方法药物治疗90天后,检测小鼠血清IL-2、IL-10和IgE的含量. 结果治疗90天后,小鼠血清IL-2、IgE含量与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),IL-10的含量与对照组相比无明显差异. 结论治疗组IL-2、IgE含量与对照组的明显差异提示,药物治疗后小鼠的免疫力提高,有利于体内虫体的清除.【总页数】3页(P103-105)
【作者】赵海龙;曹得萍
【作者单位】青海大学医学院病原生物学教研室;青海大学医学院病原生物学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R523.32
【相关文献】
1.继发性棘球蚴病小鼠体内细胞因子改变的研究 [J], 曹得萍
2.细粒棘球蚴病患者淋巴细胞及细胞因子变化的初步观察 [J], 张琰;温浩;林仁勇;卢晓梅;张雪;冯晓辉;赵晋明;张静萍
3.维拉帕米和阿苯哒唑联合治疗继发性棘球蚴病小鼠血清细胞因子的改变 [J], 赵海龙;曹得萍;耿排力
4.青蒿琥酯治疗小鼠继发性棘球蚴病后机体免疫转归及肝脏中部分酶活性的变化[J], 蒲秀瑛;傅宣英;王琪;景涛
5.继发性细粒棘球蚴病小鼠的细胞因子动态研究 [J], 王松;许晏;朱明;丁剑冰;觉肯.阿海;付玉才
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胆酸(CA)、石胆酸(LCA)和鹅脱氧胆酸(CDCA)对体外细粒棘球蚴原头节生长的影响
胆酸(CA)、石胆酸(LCA)和鹅脱氧胆酸(CDCA)对体外细粒棘球蚴原头节生长的影响胆酸及其衍生物在人体内起着重要的生理功能，包括胆汁酸的产生、脂肪的消化和吸收、胆固醇代谢等。
此外，胆酸与细粒棘球蚴存在着密切的关系。
细粒棘球蚴是一种寄生虫，其幼虫状态感染人体引起包虫病。
包虫病是一种严重威胁人类健康的疾病，其感染率和发病率逐年上升，给人们的生活和健康带来了严重的威胁。
为了研究胆酸及其衍生物对细粒棘球蚴的影响，本研究进行了一系列体外实验。
首先，从狗体内提取细粒棘球蚴原头节，得到其纯化的原头节悬液。
然后，将分别含有不同浓度的胆酸、石胆酸和鹅脱氧胆酸的培养基加入原头节悬液中，进行细胞培养。
培养基中仅加入培养液作为对照组。
在不同培养时间段，我们用显微镜观察了细粒棘球蚴的原头节生长情况，并进行了生化分析和细胞计数。
实验结果表明，胆酸、石胆酸和鹅脱氧胆酸均对细粒棘球蚴原头节的生长产生了显著影响。
首先，我们观察到，在胆酸、石胆酸和鹅脱氧胆酸作用下，细粒棘球蚴原头节的形态发生了变化。
与对照组相比，原头节在胆酸和石胆酸的作用下变得更为肿胀和膨大，而在鹅脱氧胆酸的作用下则出现了明显的缩小现象。
这表明胆酸及其衍生物对原头节的生长具有双向调节作用。
其次，胆酸及其衍生物对细粒棘球蚴原头节的代谢活性也产生了不同的影响。
在胆酸和石胆酸的作用下，细粒棘球蚴的代谢活性显著增加，表明胆酸和石胆酸可能促进了细粒棘球蚴的生长。
而在鹅脱氧胆酸的作用下，细粒棘球蚴的代谢活性明显降低，暗示鹅脱氧胆酸可能抑制了细粒棘球蚴的生长。
最后，我们统计了细粒棘球蚴原头节的细胞数目。
实验结果显示，在胆酸和石胆酸的作用下，细粒棘球蚴的细胞数目明显增加。
而在鹅脱氧胆酸的作用下，细粒棘球蚴的细胞数目明显减少。
这进一步验证了胆酸及其衍生物对细粒棘球蚴原头节生长的调节作用。
总结起来，胆酸、石胆酸和鹅脱氧胆酸对体外细粒棘球蚴原头节的生长具有显著的影响。
胆酸和石胆酸促进了细粒棘球蚴的生长，而鹅脱氧胆酸抑制了细粒棘球蚴的生长。
3种不同剂量的青蒿琥酯抗小鼠细粒棘球蚴疾病作用的比较
3种不同剂量的青蒿琥酯抗小鼠细粒棘球蚴疾病作用的比较张宏伟;彭心宇;吴向未;杨宏强;吕海龙;张示杰【摘要】目的探讨高、中、低3种不同剂量青蒿琥酯体内抗包虫的作用.方法建立小鼠腹腔细粒棘球蚴疾病模型,随机分为4组,每天分别给与高(200mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50mg/kg)3种剂量的青蒿琥酯注射液以及生理盐水,腹腔注射治疗3月后,观察小鼠体内包虫囊肿的外观发育情况、囊湿重、包虫囊壁的病理改变、电镜下超微结构的变化.结果中剂量组小鼠总囊重明显少于其他各组.中等剂量组抑囊率高于其他各组.病理及电镜发现3种剂量下包虫囊壁均有不同程度的破坏,其中中等剂量组囊肿中到重度破坏,角皮层纹理模糊,生发层细胞减少,甚至断裂,细胞核及线粒体溶解或退变.结论在相同的饲养条件下,中等剂量的青蒿琥酯注射液治疗小鼠腹腔细粒棘球蚴疾病的效果最佳.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2015(031)001【总页数】4页(P41-44)【关键词】细粒棘球蚴;青蒿琥酯;剂量;治疗作用【作者】张宏伟;彭心宇;吴向未;杨宏强;吕海龙;张示杰【作者单位】石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科,石河子832002;石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科,石河子832002;石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科,石河子832002;石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科,石河子832002;石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科,石河子832002;石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科,石河子832002【正文语种】中文【中图分类】R383.3细粒棘球蚴病是威胁人类健康的全球性的寄生虫病，目前的治疗方法以手术治疗为主，药物治疗为辅。
对于失去手术指征的患者，药物治疗是唯一的选择，因此关于药物治疗包虫病的研究一直备受关注。
抗疟疾的一线药物青蒿琥酯，作为免疫调节剂，在防治寄生虫方面的研究逐渐成为热点，但其用量与免疫效果之间关系仍存在争议。
不同浓度二甲基亚砜对细粒棘球蚴原头节生长的影响
DOI：10.19368/ki.2096-1782.2023.07.006不同浓度二甲基亚砜对细粒棘球蚴原头节生长的影响李芳芳1，王勃1，崔仁杰1，陈志广1，吕海龙21.陇南市第一人民医院消化内科，甘肃陇南746000；2.成都市第三人民医院肝胆外科，四川成都610504[摘要]目的探讨不同浓度二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide, DMSO）对细粒棘球蚴原头节生长的影响。
方法2020年1月—2022年6月陇南市第一人民医院联合石河子大学课题组用不同浓度浓度的二甲基亚砜（0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、2.0%）对细粒棘球蚴原头节进行处理，RPMI 1640培养基设为空白对照组，采用0.1%伊红染色法检测细粒棘球蚴原头节在48 h的生长情况，观察不同浓度的二甲基亚砜对体外原头节生长的影响；用活性试剂盒检测作用48 h后原头节内Caspase-3酶活性的影响；透射电镜观察DMSO作用48 h后原头节内部超微结构的改变。
结果 0.5%的DMSO作用原头节48 h后，原头节存活率与空白对照组对比，差异无统计学意义（P>0.05）；但浓度为1.0%、2.0%DMSO作用原头节48 h后，其存活率分别为（55.3±1.13)%、（41.7±1.24）%，其存活力明显低于空白对照组，差异有统计学意义（t=8.726、9.217，P<0.05）。
1.0%、2.0%DMSO作用后头节Caspase-3活性明显增加。
2.0%DMSO组内部超微结构变化包括合胞体带疏松、表面微绒毛减少。
结论在DMSO浓度0.1%~0.5%的范围内对细胞产生影响无明显变化。
[关键词]二甲基亚砜；细粒棘球蚴原头节；Caspase-3；TEM；生长[中图分类号]R4 [文献标识码]A [文章编号]2096-1782（2023）04(a)-0006-05Effects of Dimethyl Sulfoxide Concentration on the Growth of Protoce⁃phalic Nodes of Echinococcus GranulosusLI Fangfang1, WANG Bo1, CUI Renjie1, CHEN Zhiguang1, LYU Hailong21.Department of Gastroenterology, Longnan First People's Hospital, Longnan, Gansu Province, 746000 China;2.De⁃partment of Hepatological Surgery, Chengdu Third People's Hospital, Chengdu, Sichuan Province, 610504 China[Abstract] Objective To investigate the effect of dimethyl sulfoxide (DMSO) on the growth of protocephalic nodes of Echinococcosis granulosus. Methods From January 2020 to June 2022, the First People 's Hospital of Longnan City and the research group of Shihezi University treated the protoscoleces of Echinococcus granulosus with different con⁃centrations of dimethyl sulfoxide (0.1%, 0.2%, 0.5%, 1.0%, 2.0%). RPMI 1 640 medium was set as the blank control group. The growth of protoscoleces of Echinococcus granulosus at 48 h was detected by 0.1% eosin staining, and the effects of different concentrations of dimethyl sulfoxide on the growth of protoscoleces in vitro were observed. The ac⁃tivity of Caspase-3 in protoscoleces was detected by activity kit after 48 h. The ultrastructural changes of protoscol⁃eces after DMSO treatment for 48 h were observed by transmission electron microscopy. Results There was no statis⁃tically significant difference in the survival rate of protoscoleces between 0.5% DMSO group and blank control group after 48 h (P>0.05). However, the survival rates of protoscoleces treated with 1.0% and 2.0% DMSO for 48 h were (55.3±1.13)% and (41.7±1.24)%, respectively, and the viability was significantly lower than that of the blank control group, and the difference was statistically significant (t=8.726, 9.217, P<0.05). Caspase-3 activity was significantly increased after 1.0% and 2.0% DMSO treatment. The ultrastructural changes in the 2.0% DMSO group included loose [基金项目]国家自然科学基金（U1303121）。
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文章编号:1002-2694(2009)03-0295-03不同药物杀灭原头节对小鼠肝细粒棘球蚴感染的影响*吕海龙1,彭心宇1,2,张士杰1,阿杜瓦一1,杨宏强1,孙 红1中图分类号:R532.32 文献标识码:B*国家自然科学基金项目(No.30760244)通讯作者:彭心宇,Email:pengxy2000@作者单位:1.新疆石河子大学医学院一附院肝胆外科,石河子832008;2.华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心,武汉 430030囊型肝包虫手术过程中原头节的药物处理选择一直是存在争议的,术中如果能够选择合适的药物杀灭头节,对于术后复发将起到积极的预防作用。
肝包虫外膜内外囊完整摘除术 可完整剥离包虫外囊,消除了外囊残腔,从根本上解决了包虫复发和残腔并发症。
为探讨此手术过程中头节外溢对术后复发的影响,我们采用动物模型,模拟 开放式 肝包虫外膜内外囊完整摘除术 的围手术期处理过程,在小鼠肝脏接种术前及术后同时运用阿苯达唑脂质体,免疫增强剂槐耳浸膏,以及两种药物的联合治疗,肝脏接种时头节分别用20%高渗盐水,75%酒精,阿苯达唑脂质体和平衡液处理头节,分别通过小鼠肝细粒棘球蚴感染率,外周血抗体和T 淋巴细胞分类的检测,了解不同药物在术中对于原头节的杀灭作用,为临床治疗囊型肝包虫术后复发提供理论依据。
1 材料与方法1.1 原头节 自然感染的绵羊肝棘球蚴囊,无菌抽取含原头节的囊液,离心弃上清,沉淀中的原头节用0.15m oL/L pH 7.2无菌PBS 清洗3次。
取0.1mL 显微镜观察原头节活动情况并计数,用伊红染料排斥实验检查原头节活力为85%以上,制成20000个/mL 原头节混悬液,备用。
1.2 药物 阿苯达唑脂质体(albendazo le lipo some,L ABZ)由新疆医科大学第一附属医院药剂科生产(批号为980406,药物含量10mg /mL,包封率70%~80%)。
槐耳浸膏(fung i o f huai Er,批号为BH 08)由江苏启东盖天力制药有限公司提供,为临床药物,褐色糊状液体,是真菌槐耳(trametes ro binio phila murr)提取物,菌质成分含量为0.8g/mL 。
主要活性成分为多糖蛋白(多糖含量为41.53%)。
1.3 动物模型的建立及给药方法 雌性昆明小鼠200只,体重为18~20g,购自石河子大学医学院实验动物中心,普通动物房饲养6周后用于实验。
取本院制备的人肝棘球蚴囊液抗原(手术中取无菌囊液,经过滤、高压灭菌及分装,于4!保存),腹腔注射免疫小鼠(0.1mL/次∀3次),2周后重复免疫1次。
1周后自小鼠内眦取血,ELISA 检测Ig G抗体。
选取外周血Ig G 抗体阳性鼠130只,分为治疗组(A 、B 、C 3组各40只)和模型对照组(D 组10只)。
A 组灌胃阿苯达唑脂质体(每只0.3mL,75m g/kg)、B 组灌胃槐耳浸膏(每只0.4mL,15000m g/kg)、C 组两药联用(每只灌胃槐耳浸膏0.4mL +阿苯达唑脂质体0.3mL)。
用药1周,隔天1次,共3次。
然后,A 、B 、C 组各自均分4组(每组10只),取备用原头节,分别用75%乙醇、20%高渗盐水、阿苯达唑脂质体和PBS 处理20m in,然后打开麻醉小鼠腹腔,每组肝脏注射上述处理过的原头节(0.3m L/只,约含原头节6000个,下同),模拟外膜内外囊完整摘除术术中,外溢原头节再感染及术中处理。
缝合关闭腹腔,烤灯照射恢复小鼠体温,禁食12h 后恢复饮食,72h 后继续上法治疗1个月。
D 组灌服蒸馏水0.3mL/只,同上法接种PBS 处理的原头节。
E 组(8只正常小鼠)不作任何处理,为空白对照。
各组小鼠均于3个月后解剖。
1.4 疗效评价1.4.1 棘球蚴小鼠脾脏指数及IgG 、IgE 含量的测定小鼠治疗3个月后,取脾脏,称重,按公式计算脾脏指数。
脾脏指数=脾脏重(g )/体重(g )∀1000。
摘眼球取血,离心分离血清,用免疫比浊法测定IgG 含量,ELISA 测定血清IgE 含量。
1.4.2 小鼠CD +4、CD +8淋巴细胞的测定 取小鼠血液100 L,分别加入抗小鼠异硫氰酸荧光素(FITC)标记的CD 3单克隆抗体(FIT C CD3)和藻红蛋白(PE)标记的CD 4单克隆抗体(PE CD 4),FITC CD 3和PE 标记的CD 8单克隆抗体(PE CD 8),用流式细胞仪(Epics XL M CL,美国BECKM AN COULTER 公司)检测T 淋巴细胞亚群比例。
1.4.3 统计学分析 应用SPSS 13.0for Window s 统计软件,对实验数据进行方差分析。
2 结 果2.1 不同药物处理头节后小鼠肝细粒棘球蚴感染率 头节分别使用20%高渗盐水,75%酒精,阿苯达唑脂质体和平衡液处理20m in后接种,小鼠肝细粒棘球蚴感染率分别为0,0,23.08%和31.25%。
2.2 不同药物处理头节后小鼠免疫功能变化2.2.1 在20%高渗盐水和75%酒精处理头节组中,不同药物治疗各组之间免疫指标IgG、Ig E、脾脏指数、CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8值比较无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05)。
L ABZ处理头节组 经方差分析各组比较,本实验中免疫状态下小鼠,在阿苯达唑脂质体处理头节组中,不同药物治疗各组之间免疫指标IgG、Ig E、CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8值比较无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05);联合用药组中脾脏指数明显低于阿苯达唑脂质体组和槐耳浸膏组,有统计学意义(P<0.05),阿苯达唑脂质体组与槐耳浸膏组比较无明显差异(P>0.05)。
表1,表2。
表1 L ABZ处理头节组不同药物治疗后小鼠感染细粒棘球蚴免疫指标变化(x#s)组 别例数(n)脾脏指数IgG(mg/ml)Ig E(ng/ml) L ABZ组9 4.01#0.90 2.41#0.110.09#0.10槐耳浸膏8 4.24#0.97 2.43#0.100.09#0.10 L ABZ组+槐耳浸膏9 3.10#0.65 2.44#0.140.02#0.01 脾脏指数F=4.436,P=0.023;IgG F=0.100,P=0.905;Ig E F=2.111,P=0.144表2 L ABZ处理头节组不同药物治疗后小鼠感染细粒棘球蚴T淋巴细胞亚群检测(x#s)组 别例数(n)T淋巴细胞亚群CD+3CD+4CD+8CD+4/CD+8L A BZ组967.81#9.6549.07#7.9816.56#5.24 3.29#0.68槐耳浸膏872.01#7.3653.68#5.7818.68#4.48 3.02#0.80 L A BZ组+槐耳浸膏969.86#8.7153.59#6.1415.55#2.79 3.52#0.51 CD+3F=1.133,P=0.339;CD+4F=1.348,P=0.280;CD+8F=1.164,P=0.330;CD+4/CD+8F=1.204,P=0.3182.2.3 平衡液处理头节组 经方差分析各组比较,本实验中免疫状态下小鼠,在直接接种头节组中,小鼠血清IgG值在各组间无明显差异(P>0.05);模型对照组中小鼠血清IgE水平明显高于阿苯达唑脂质体组和联合治疗组(P<0.05),与槐耳浸膏组无显著性差异(P>0.05),其中联合用药组与槐耳浸膏组比较Ig E水平有差异(P<0.05);模型对照组中小鼠脾脏指数明显高于其它三组,有显著性差异(P<0.05),其中联合用药组脾脏指数与槐耳浸膏组比较有差异(P<0.05),表3。
不同药物治疗各组之间小鼠血清CD+4水平比较无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05);模型对照组中小鼠CD3+水平与药物治疗组比较有差异(P<0.05);模型对照组中小鼠CD+8水平明显高于药物治疗组,CD+4/CD+8值明显低于药物治疗组,有显著性差异(P<0.05),其中联合药物组中CD+8水平、CD+4/CD+8值也和阿苯达唑脂质体组和槐耳浸膏组有显著性差异(P<0.05),表4。
表3 平衡液处理头节组不同药物治疗后小鼠感染细粒棘球蚴免疫指标变化(x#s)组 别例数(n)脾脏指数Ig G(mg/mL)IgE(ng/mL) L ABZ组8 4.32#0.97 2.40#0.140.08#0.10槐耳浸膏8 4.40#1.45 2.39#0.110.13#0.10 L ABZ组+槐耳浸膏8 3.38#0.50 2.42#0.090.05#0.05模型对照8 5.46#0.52 2.52#0.190.20#0.02 脾脏指数F=6.506,P=0.002;IgG F=1.508,P=0.234;Ig E F=6.548,P=0.0023 讨 论阿苯达唑是治疗棘球蚴病有效药物之一,可抑制虫体摄取葡萄糖,使虫体生发层细胞糖原耗竭、内质网小体和线粒体变性,溶酶体增加,最终导致虫体死亡。
阿苯达唑脂质体可使靶细胞周围的药物浓度升高,从而提高治疗效果,在术前及术后用阿苯达唑治疗,可明显减少棘球蚴囊和术后复发。
槐耳为药用真菌,提取的槐耳菌质清膏及多糖是良好的生物表4 平衡液处理头节组不同药物治疗后小鼠感染细粒棘球蚴T淋巴细胞亚群检测(x#s)组 别例数(n)T淋巴细胞亚群CD+3CD+4CD+8CD+4/CD+8L A BZ组871.36#9.4852.42#9.3618.56#4.78 3.02#1.04槐耳浸膏876.95#8.9355.11#7.7321.65#2.58 2.57#0.45 L A BZ组+槐耳浸膏870.30#7.9154.29#6.4313.95#2.02 3.88#0.75模型对照886.33#7.3050.92#4.9032.90#4.71 1.57#0.26F=6.036,P=0.003;CD+4F=0.533,P=0.663;CD+8F=37.353,P=0.000;CD+4/CD+8F=15.400,P=0.000反应调节剂,对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显促进作用,是一种有效的免疫增强剂。
棘球蚴病的治疗,首选外科手术,如何进行有效的方法避免肝包虫术后复发,是术后最根本的问题。
术中应注意避免囊液外溢造成过敏性休克或继发性腹腔感染。
国内部分学者认为较为理想的局部化疗药物为20%氯化钠、70%乙醇等,作用10min即可见原头蚴肿胀、变形、吸盘头钩等结构脱落,消失,接种小鼠后细粒棘球蚴感染率为0,本实验亦有相同结果,20%氯化钠和75%乙醇处理头节组,均未见小鼠肝脏细粒棘球蚴感染,除了两种药物对头节的杀伤作用,头节直接暴露于宿主的免疫状态亦与感染率有关。