实验性肾衰竭

10min,
测定管(ABCD) 测定管(ABCD) 0.02 0.5 0.5 4.0
各管加好混匀后置沸水锅中煮沸10min，流水中冷却 ③ 各管加好混匀后置沸水锅中煮沸 ，流水中冷却3min后 后 波长） 先以空白管调零， 测OD值（520nm波长）,先以空白管调零，再读取测定管值； 值 波长 先以空白管调零 再读取测定管值； 计算： ④ 计算：
实验报告的书写
实验目的 实验步骤（简明扼要） 实验步骤（简明扼要） 实验结果 实验项目 尿 尿液镜检 液 尿蛋白检查 检 尿量 查 血浆尿素氮测定 肾脏大体形态 分析讨论 中毒家兔 对照家兔
分 析 讨 论
根据本实验结果， 根据本实验结果，分析升汞引起急性肾功能衰竭的 机制 结合本实验结果， 结合本实验结果，分析各种现象产生的机理
实验性急性肾功能不全
武汉大学基础医学院 病生教研室
急 性 肾 功 能 不 全
（Acute Renal insufficiency, ARI） ）
各种病因引起双侧肾脏在短期内泌尿功 各种病因引起双侧肾脏在短期内泌尿功 双侧肾脏 能急剧降低， 能急剧降低，导致机体内环境出现严重紊乱 的病理生理过程。 的病理生理过程。
方法 每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm 10ml到离心管 ① 每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm 吸出上层血浆置于干净试管中备用； 吸出上层血浆置于干净试管中备用； ② 按下表加入试剂： 试剂（ml） 试剂（ml） 血浆 水 尿素氮标准液Ⅱ 尿素氮标准液Ⅱ DAM-TSC DAM酸混合液 空白管 0.5 0.5 4.0 标准管 0.1 0.4 0.5 4.0
实
验
目
的
了解实验性肾功能不全动物模型复制方法 观察升汞中毒家兔的一般状态，尿的变化、 观察升汞中毒家兔的一般状态，尿的变化、 血浆尿素氮水平以及肾脏大体形态改变 根据实验指标， 根据实验指标，分析讨论急性肾功能不全的 病理生理变化
实验动物及模型复制的原理
原 理
肾毒物HgCl2 引 肾毒物 起家兔肾小管变 坏死， 性、坏死，导致 严重的肾脏功能 不全。 不全。
头部 远心端
1
颈 总 动 脉
2
近心端 心脏
尿液镜检，计录管型数和细胞数（10个视野 个视野） （5）尿液镜检，计录管型数和细胞数（10个视野）
管型 （低倍镜） 低倍镜）
细胞 （高倍镜） 高倍镜）
（6）尿蛋白定性检查
取尿液3ml于试管中 取尿液3ml于试管中 3ml 酒精灯上加热至沸腾 若混浊，加入5%醋酸3 若混浊，加入5%醋酸3-5滴 5%醋酸 再煮沸 尿变清，尿内有尿酸盐 尿变清， 混浊加重，尿中有蛋白 混浊加重，
耻骨 联合
固定备皮： （2）固定备皮： 固定： 固定：
备皮： 备皮： 颈部正中：甲状软骨颈部正中：甲状软骨- 胸骨上缘 下腹正中：耻骨联合上1 下腹正中：耻骨联合上1～5cm
（3）膀胱插管收集尿液 ）
下腹部切口，分离组织， 下腹部切口，分离组织，暴露膀胱 注射器抽膀胱内尿3ml(备用 注射器抽膀胱内尿 备用) 备用 荷包缝合（膀胱无血管区） 荷包缝合（膀胱无血管区）
实验流程概括
1. 复制模型（已完成） 已完成） 2. 手术操作及检测指标
(1) 称重麻醉 腹腔注射 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg 乌拉坦， 乌拉坦 (2) 固定备皮： 固定备皮： (3) 膀胱插管收集尿液 (4) 左颈总动脉插管 (5) 尿液镜检，计录管型数和细胞数（ 10个视野） 尿液镜检，计录管型数和细胞数（ 个视野 个视野） (6) 尿蛋白定性检查 (7) 血浆尿素氮测定
观
察
指
标Leabharlann 与对照家兔做比较： 与对照家兔做比较：
临床变化 GFR下降、 GFR下降、尿 下降 量下降 尿成分改变 氮质血症 肾脏形态改 变 血液 颈动脉插管 肾脏 兔尸体解剖 对象 手术操作
指
标
尿量 尿液 膀胱插管 蛋白尿、 蛋白尿、血尿和管型 血浆尿素氮水平 肾脏色泽、体积、 肾脏色泽、体积、皮 质条纹等
C
膀胱插管
（4）左颈总动脉插管 分离 抗凝 插管
耳缘静脉 肝素(1ml/kg)
左颈总动脉 迷走神 经 颈内静脉 胸骨舌骨肌
胸锁乳突肌
左颈总动脉插管 1.结扎远心端 1.结扎远心端 2.夹闭近心端 2.夹闭近心端 3.远心端 45º剪口 约为管径的1/2 远心端， 剪口， 3.远心端，45 剪口，约为管径的1/2 4.朝心脏方向插管 4.朝心脏方向插管 2~3cm并固定 并固定
实
验
步 骤
1. 复制模型（已完成） 复制模型（已完成） 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 实验组 HgCl2 肌肉注射 对照组 NaCl 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 肌肉注射
2. 手术及操作 (1) 称重麻醉 腹腔注射 称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg 乌拉坦， 乌拉坦
剑突 部位： 部位：左下腹近腹中 线1cm 方法： 方法：与腹壁呈45° 进针， 进针，进入腹腔有 落空感，回抽无血、 落空感，回抽无血、 肠内容物， 肠内容物，缓慢推 注 效果判断：肌肉松弛， 效果判断：肌肉松弛， 自然卧倒， 自然卧倒，眼睑反 射迟钝， 射迟钝，钳夹皮肤 无反应等
（6）尿蛋白定性检查
程度 清晰 轻度白色浑浊 乳样浑浊 浑浊或少量碎片 絮状浑浊 等级 － ＋ ＋ ＋ ＋＋＋ ＋＋＋＋ 蛋白含量（ ） 蛋白含量（g%） <0.01 0.01~0.05 0.05~0.2 0.2~0.5 >0.5
（7）血浆尿素氮测定
原理：血液中尿素在强酸条件下与二乙酰原理：血液中尿素在强酸条件下与二乙酰-肟和 氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成红色复合物， 氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成红色复合物， 颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系， 颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系，用分光光 度计测定OD值 可计算出尿素氮含量。 度计测定OD值，可计算出尿素氮含量。 OD
血浆尿素氮(mg%)= 血浆尿素氮 测定管光密度(Du) 测定管光密度 标准管光密度(Ds) 标准管光密度 100 = ×0.002× × 0.02 Du ×10 Ds
（8）形态学观察
①将家兔处死（耳缘静脉注入空气5~10ml）,取出肾脏； 将家兔处死（耳缘静脉注入空气 ） 取出肾脏； ②观察并比较两组家兔肾脏的大体形态，如体积大小，表 观察并比较两组家兔肾脏的大体形态，如体积大小， 面色泽，皮质条纹及色泽等。 面色泽，皮质条纹及色泽等。