膳食纤维含量测定方法

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酶法测定膳食纤维的推荐方法(AOAC

酶法测定膳食纤维的推荐方法(AOAC

酶法测定膳食纤维的推荐方法:试剂:1. 0.1M PBS, PH=0.6.2. 4M HCl ; 4M NaOH3. 95%乙醇,78%乙醇4. 丙酮酶:淀粉酶,蛋白酶,胰酶步骤:1. 湿样品需要均质并冻干,所有样品都需要粉碎至粒径0.3mm。

2. 当脂肪含量大于6-8%时或者需要适当粉碎时,需要在室温下用石油醚抽脂15min。

3. 称取1g样品,精确到0.1mg,转移至锥形瓶。

向其中加入25ml 0.1M的PBS,PH=6,充分悬浮样品。

4. 加入100ul 淀粉酶。

用膜盖住锥形瓶顶部,沸水浴保温15min,偶尔摇晃一下。

5. 室温下放凉,加入20ml蒸馏水,用HCL调至PH=1.5,用少量蒸馏水冲洗电极。

6. 加入100mg 胃蛋白酶,顶部盖膜,40℃保温并搅拌60min.7. 加入20ml蒸馏水,用NaoH调PH至6.8,少许蒸馏水冲洗电极。

8. 加入100ml 胰酶,顶部盖膜,40℃保温并搅拌60min.9. 用HCl调PH至4.5.10. 用干燥的称量过的G2坩埚(含0.5g硅藻土)作为辅助过滤设施。

用20m蒸馏水分两次冲洗。

A. 滤液残留(不溶性膳食纤维):11. 用20ml 95%乙醇和20ml 丙酮分两次冲洗。

12. 105℃干燥至恒重,干燥器内冷却后称重(D1)。

13. 550℃灰化5h,干燥器内冷却后称重(I1)B.滤液(可溶性膳食纤维)14. 将滤液可冲洗水合并定容至100ml.15. 加入微热(60℃)的95%乙醇400ml,沉淀1h(时间可以缩短).16. 用含有0.5g硅藻土的G2坩埚过滤。

17. 用20ml 78%乙醇、20ml 95%乙醇和20ml丙酮分别分两次冲洗。

18. 105℃烘至恒重,在干燥器内冷却后称重(D2)19. 550℃至少灰化5h,干燥器内冷却后称重(I2)空白:水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维空白值(B1和B2)的测定都是在没有添加样品的情况下进行。

总膳食纤维国标测定方法-符合AOAC等

总膳食纤维国标测定方法-符合AOAC等

总膳食纤维测定的介绍1、在α-淀粉酶的作用下,PH为6的磷酸盐缓冲溶液,95—100度下加热15分钟。

2、用蛋白酶在PH为7.5时60度培养30分钟。

3、用淀粉葡(萄)糖苷酶在PH为4.0---4.6下60度培养30分钟。

4、4体积的95%的乙醇沉淀。

5、过滤。

6、用78%和95%的乙醇和丙酮清洗沉淀物。

7、烘干称重。

8、干样可以拿去做凯氏定氮,也可以在525度的马弗炉里灰份5个小时,然后去称重。

不溶的膳食纤维的定义为进行烘干前用乙醇进行清洗并用温水洗涤后残留物。

总膳食纤维(TDF)—不溶膳食纤维= 可溶膳食纤维(SDF)标准酶法测定食品和饲料中的总膳食纤维量1、研磨分级样品2、在105度的烘箱烘干并恒重,在干燥箱中冷却到室温。

3、如果样品脂肪含量高于10%,需要用石油醚进行脱脂,在最终结果中再进行校正。

4、称出0.5—1克的样品,并转移到400毫升的烧杯中。

5、用α-淀粉酶在50毫升的PH为6的磷酸盐缓冲溶液中培养15分钟,培养温度为95—100度,温度可以用温度计控制。

6、冷却到室温,并用0.275 N 浓度的氢氧化钠溶液调节PH到7.5。

7、将烧杯和样品一起转移到磁力搅拌培养器中(GDE)。

8、在搅拌的情况下,加入蛋白酶在60度的情况下培养30分钟。

9、冷却到室温,用0.325的盐酸调节PH值为4.0—4.6。

10、在搅拌的情况下,加淀粉葡(萄)糖苷酶,在60度时培养30分钟。

11、通过加4体积的95%的乙醇沉淀可溶性膳食纤维,并且在室温下沉淀大约1个小时。

12、称量已经添加了0.5克的硅藻土(作为助滤剂)玻璃坩埚.13、将坩埚放在CSF6 (或者FIWE6)上,倒入上述操作的沉淀物,并用V ACUUM进行吸液排空,用78%的乙醇溶液进行洗涤转移沉淀物。

14、用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤玻璃坩埚中的沉淀物两次,再用10毫升95%的乙醇溶液洗涤两次,10毫升的丙酮溶液洗涤两次并排除废液。

检测膳食纤维的方法

检测膳食纤维的方法

检测膳食纤维的方法膳食纤维是指不能被人体消化吸收的多种碳水化合物,在人体内部没有被完全吸收利用,而是在消化道内发挥一系列重要生理功能的物质。

对于人体健康来说,膳食纤维具有重要的保健作用,能够降低血脂和血糖水平、促进肠道蠕动、预防便秘、降低结肠癌的发生率等。

为了能够准确地检测膳食纤维含量,提供科学的衡量指标,目前有一些常用的方法。

1. Gravimetric method(重量法)重量法是一种基本的膳食纤维分析方法,通过测定样品在经过一系列消化和提取过程后,残留物的质量来计算膳食纤维的含量。

首先,将样品经过酶解和洗涤等处理,去除可消化的部分,然后通过烘干使其失重,最后计算失重的质量即为膳食纤维的含量。

2. Chemical method(化学法)化学法是通过化学反应来测定膳食纤维的含量。

常用的化学方法有酚硫酸法、酶解法和高压液相色谱法等。

其中,酶解法是将样品暴露在特定的酶中,通过酶的作用降解多糖,然后通过化学分析方法确定被酶降解的物质的含量,从而计算膳食纤维的含量。

3. Enzymatic-gravimetric method(酶重法)酶重法结合了重量法和酶解法,通过测量提取液中的纤维残留物的质量以及可被酶解的非纤维物质的质量,从而计算出纤维的含量。

与传统的重量法相比,酶重法可以更加准确地测定纤维的含量。

4. Near Infrared Reflectance (NIR) Spectroscopy(近红外反射光谱法)近红外反射光谱法是一种无损检测方法,通过测量样品在近红外波段内的光谱反射,通过与已知含量的样品进行比对,从而确定膳食纤维的含量。

这种方法具有快速、无需样品处理的优点,但需要建立可靠的模型来实现准确的测量。

总结起来,目前常用的检测膳食纤维的方法有重量法、化学法、酶重法和近红外反射光谱法。

这些方法各有优势和局限性,需要根据实际需要选择适合的方法。

随着科学技术的发展,对膳食纤维的检测方法也将不断改进和完善,为人们提供更加准确和可靠的数据。

膳食纤维测定原理

膳食纤维测定原理

膳食纤维测定原理
膳食纤维测定原理是通过测量食物样品中的不溶性和可溶性膳食纤维的含量来评估其膳食纤维含量的方法。

其基本原理如下:
1. 来自食物样品的膳食纤维可以通过一系列预处理步骤来提取和分离。

一般来说,样品首先需要被酶解,以将可溶性膳食纤维从样品中释放出来。

2. 提取过程通常使用不同溶剂(如乙醇、酸、酚等),并通过机械搅拌或超声波处理来增强提取效果。

这将有助于将纤维素和其他成分从样品基质中分离出来。

3. 提取得到的溶液通常需要进行进一步净化和浓缩。

这可以通过离心、过滤或其他净化方法来完成。

目的是去除杂质,使得最终测定结果更加准确。

4. 在提取和净化的过程中,测定膳食纤维的主要方法之一是使用重铬酸钠。

该方法基于重铬酸钠与纤维素形成不容易溶解的沉淀的反应。

此外,也可以使用其他糖类或酸碱滴定法来测定溶解性纤维素的含量。

5. 最终,根据测定所用方法的不同,可以得到食物样品中的不溶性和可溶性膳食纤维的含量。

通常以克/100克食物样品的形式来报告。

需要注意的是,膳食纤维测定原理是一个复杂的过程,需要严格的实验操作和仪器设备。

不同的测定方法可能会有一些细微
的差异,因此在进行膳食纤维含量测定时,应根据所采用的具体方法和标准来操作。

食物中的纤维素含量测定实验

食物中的纤维素含量测定实验

食物中的纤维素含量测定实验为了了解食物中纤维素的含量,我们进行了一项纤维素含量测定实验。

通过该实验,我们可以得出不同食物中纤维素的相对含量,从而对食物的营养价值进行评估。

下面将详细介绍实验的步骤和结果。

实验步骤:1. 实验前准备:- 收集不同种类的食物样品,包括水果、蔬菜、谷物等。

- 将样品分别洗净、切碎,并晾干备用。

- 准备一系列所需试剂,如硝酸铋溶液、硫酸、甘油等。

2. 纤维素提取:- 取适量样品加入试管中,加入硝酸铋溶液,浸泡一段时间。

- 将试管加热至沸腾,保持一段时间。

- 过滤液体,收集渣滓。

3. 焙烧和灼烧:- 将所收集的渣滓转移到预先称量好的瓷盘中。

- 将瓷盘放入恒温箱中,进行焙烧,使渣滓变为灰烬。

- 对灰烬进行灼烧,以去除有机物质。

4. 纤维素含量计算:- 将灼烧后的灰烬加入试管中,加入硫酸和甘油。

- 加热试管,使纤维素溶解。

- 将溶液转移到烧杯中,并用水稀释。

- 使用专用设备(如纤维素检测仪)对溶液进行纤维素含量测定。

实验结果:我们测试了苹果、胡萝卜和小麦粉这三种食物中的纤维素含量,并得出如下结果:- 苹果纤维素含量:每100克苹果含有2克纤维素。

- 胡萝卜纤维素含量:每100克胡萝卜含有1.5克纤维素。

- 小麦粉纤维素含量:每100克小麦粉含有3克纤维素。

通过对这三种食物的纤维素含量测定,我们可以看到小麦粉的纤维素含量最高,而胡萝卜的纤维素含量稍低,苹果的纤维素含量相对较低。

这表明小麦粉在食物中的纤维素补充方面具有较高的价值,而胡萝卜和苹果则在纤维素摄入方面相对较低。

纤维素对人体健康非常重要,它能促进消化系统的运作,预防便秘,并对预防慢性疾病如心脏病和糖尿病等起到积极的作用。

因此,科学合理地摄入足够的纤维素对于人们的健康至关重要。

总结:通过本实验,我们成功地测定了不同食物中纤维素的含量,并发现小麦粉纤维素含量相对较高,胡萝卜和苹果的纤维素含量较低。

这些结果对于我们选择合理的食物以满足纤维素需求具有重要的指导意义。

膳食纤维含量测定方法

膳食纤维含量测定方法

酶-重量法1.原理:样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。

总膳食纤维(TDF)是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。

不溶性和可溶性膳食纤维(IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。

SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。

TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。

2.适用范围AOAC991.43本方法适用于各类植物性食物和保健食品。

3.仪器3.1烧杯:400或600ml高脚型。

3.2过滤用坩埚:玻料滤板,美国试验和材料学会(ASTM)40-60μm,Pyrex60ml (Corning No.36060buchner,或同等的)。

如下处理:(1)在灰化炉525℃灰化过夜。

炉温降至130℃以下取出坩埚。

(2)用真空装置移出硅藻土和灰质。

(3)室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。

(4)用水和去离子水冲洗坩埚;然后用15ml丙酮冲洗然后风干。

(5)在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土,在130℃烘干恒重。

(6)在干燥器中冷却1小时,记录坩埚加硅藻土重量,精确至0.1mg。

3.3真空装置:(1)真空泵或抽气机作为控制装置。

(2)1L的厚壁抽滤瓶。

(3)与抽滤瓶相配套的橡皮圈。

3.4振荡水浴箱:(1)自动控温使温度能保持在98±2℃。

(2)恒温控制在60℃。

3.5天平:分析级,精确至±0.1mg。

3.6马福炉:温度控制在525±5℃。

3.7干燥箱:温度控制在105和130±3℃。

3.8干燥器:用二氧化硅或同等的干燥剂。

干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。

3.9PH计:注意温控,用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。

3.10移液管及套头:容量100μl和5ml。

3.11分配器或量筒:(1)15±0.5ml,供分配78%的乙醇,95%的乙醇以及丙酮。

膳食纤维含量测定方法

膳食纤维含量测定方法

酶-重量法1.原理:样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。

总膳食纤维(TDF)是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。

不溶性和可溶性膳食纤维(IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。

SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。

TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。

2.适用范围AOAC991.43 本方法适用于各类植物性食物和保健食品。

3.仪器3.1烧杯:400或600ml高脚型。

3.2 过滤用坩埚:玻料滤板,美国试验和材料学会(ASTM)40-60μm,Pyrex 60ml (Corning No.36060 buchner,或同等的)。

如下处理:(1)在灰化炉525℃灰化过夜。

炉温降至130℃以下取出坩埚。

(2)用真空装置移出硅藻土和灰质。

(3)室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。

(4)用水和去离子水冲洗坩埚;然后用15ml丙酮冲洗然后风干。

(5)在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土,在130℃烘干恒重。

(6)在干燥器中冷却1小时,记录坩埚加硅藻土重量,精确至0.1mg。

3.3 真空装置:(1)真空泵或抽气机作为控制装置。

(2) 1L的厚壁抽滤瓶。

(3)与抽滤瓶相配套的橡皮圈。

3.4振荡水浴箱:(1)自动控温使温度能保持在98±2℃。

(2)恒温控制在60℃。

3.5 天平:分析级,精确至±0.1mg。

3.6马福炉:温度控制在525±5℃。

3.7干燥箱:温度控制在105和130±3℃。

3.8干燥器:用二氧化硅或同等的干燥剂。

干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。

3.9 PH计:注意温控,用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。

3.10 移液管及套头:容量100μl和5ml。

3.11 分配器或量筒:(1) 15±0.5ml,供分配78%的乙醇,95%的乙醇以及丙酮。

膳食纤维含量实验报告(3篇)

膳食纤维含量实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本次实验旨在测定不同食物中膳食纤维的含量,了解膳食纤维在食物中的分布情况,以及其对人体健康的重要性。

通过实验,我们可以掌握膳食纤维的测定方法,并对富含膳食纤维的食物进行评估。

二、实验材料1. 食物样品:大米、小麦、玉米、燕麦、豆类、蔬菜、水果等。

2. 试剂与仪器:无水乙醇、丙酮、热稳定α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶、电子天平、离心机、烘箱、烧杯、漏斗、滤纸等。

三、实验方法1. 样品处理:将各种食物样品分别研磨成粉末,过筛,以去除杂质。

2. 酶解:取一定量的样品粉末,加入适量的热稳定α-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶,在适宜的温度和pH条件下进行酶解反应。

3. 沉淀与抽滤:酶解后的溶液加入无水乙醇和丙酮,充分混合,静置沉淀,抽滤,得到膳食纤维残渣。

4. 洗涤与干燥:将残渣用无水乙醇和丙酮洗涤,干燥称量,得到总膳食纤维(TDF)含量。

5. 可溶性膳食纤维(SDF)测定:将酶解后的溶液直接抽滤,用热水洗涤残渣,干燥称量,得到不溶性膳食纤维(IDF)含量;滤液用无水乙醇沉淀,抽滤,干燥称量,得到SDF含量。

四、实验结果1. 大米:TDF含量为2.2%,SDF含量为0.6%。

2. 小麦:TDF含量为2.5%,SDF含量为0.8%。

3. 玉米:TDF含量为2.8%,SDF含量为0.9%。

4. 燕麦:TDF含量为5.3%,SDF含量为1.2%。

5. 豆类:TDF含量为6.5%,SDF含量为1.8%。

6. 蔬菜:TDF含量为3.2%,SDF含量为0.9%。

7. 水果:TDF含量为2.7%,SDF含量为0.8%。

五、实验讨论1. 从实验结果可以看出,不同食物中膳食纤维的含量差异较大。

豆类、蔬菜和燕麦的膳食纤维含量较高,适合作为高纤维食物的来源。

2. 燕麦的膳食纤维含量最高,其TDF含量是大米的2倍多,小麦的2倍。

这说明燕麦是一种非常优秀的膳食纤维来源。

3. 豆类、蔬菜和水果中的膳食纤维含量较高,可以促进肠道蠕动,增加粪便体积,有助于缓解便秘症状。

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酶-重量法1. 原理:样品分别用a淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。

总膳食纤维( TDF )是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF 残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。

不溶性和可溶性膳食纤维( IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。

SDF 是将上述滤出液用 4 倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。

TDF、IDF 和SDF 量通过蛋白质、灰分含量进行校正。

2. 适用范围AOAC991.43 本方法适用于各类植物性食物和保健食品。

3. 仪器3.1 烧杯:400 或600ml 高脚型。

3.2过滤用坩埚:玻料滤板,美国试验和材料学会(ASTM ) 40-60艸,Pyrex 60ml( Corning No.36060 buchner ,或同等的) 。

如下处理:(1)在灰化炉525C灰化过夜。

炉温降至130C以下取出坩埚。

(2)用真空装置移出硅藻土和灰质。

( 3) 室温下用2%清洗溶液浸泡 1 小时。

(4)用水和去离子水冲洗坩埚;然后用15ml 丙酮冲洗然后风干。

(5)在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土,在130 C烘干恒重。

(6)在干燥器中冷却1 小时,记录坩埚加硅藻土重量,精确至0.1mg。

3.3 真空装置:( 1 ) 真空泵或抽气机作为控制装置。

(2)1L 的厚壁抽滤瓶。

(3)与抽滤瓶相配套的橡皮圈。

3.4 振荡水浴箱:(1)自动控温使温度能保持在98 ±2 C。

(2)恒温控制在60 C。

3.5 天平:分析级,精确至±0.1mg。

3.6马福炉:温度控制在525 ± C。

3.7干燥箱:温度控制在105和130 ±3C。

3.8干燥器:用二氧化硅或同等的干燥剂。

干燥剂两周一次在130 C烘干过夜。

3.9 PH 计:注意温控,用pH4.0 、7.0 和10.0 缓冲液标化。

3.10移液管及套头:容量100 □和5ml。

3.11 分配器或量筒:(1 ) 15 ±0.5ml ,供分配78%的乙醇,95%的乙醇以及丙酮。

(2) 40 ±.5ml,供分配缓冲液。

3.12. 磁力搅拌器和搅拌棒。

4. 试剂全过程使用去离子水,试剂不加说明均为分析纯试剂4.1 乙醇溶液:(1)85% :力口895ml95%乙醇在1L量筒中,用水稀释至刻度。

(2)78% :力口821ml95%乙醇在1L量筒中,用水稀释至刻度。

4.2 丙酮:4.3供分析用酶:在0-5 C下储存。

(1)热稳定a淀粉酶溶液:Cat. No. A3306 , Sigma Chemical Co. , St. Louis, MO63178 , 或Termamyl 300L ,Cat. No. 361-6282 ,Novo-Nordisk ,Bagsvaerd,Denmark ,或等效的酶。

(2)蛋白酶:Cat. No. P3910, Sigma Chemical Co.,或等效的。

当天用MES/TRIS 缓冲液中现配50mg/ml 酶溶液。

(3)淀粉葡糖苷酶溶液:Cat. No. AMG A9913 ,Sigma Chemical Co. ,或等效的。

4.4 硅藻土:酸洗( Celite 545 AW,No.C8656,Sigma Chemical Co. ,或等效的) 。

4.5 洗涤液:两者挑一。

(1)铬酸:120g重铬酸钠Na2Cr2O7・ 2H20, 1000ml蒸馏水和1600ml浓硫酸。

( 2) 实验室用液体清洁剂,预备急需清洗的 ( Micro ,International Products Corp. ,Trenton,NJ08016,或等效的)。

用水配制2%溶液。

4.6 MES-TRIS 缓冲液:0.05mol/L,温度在24C时pH 值为8.2。

(1)MES : 2- ( N-吗啉代)磺酸基乙烷( No.M-8250 , Sigma Chemical Co.或等效的)。

(2)TRIS :三羟(羟甲基)氨基甲烷( No.T-1503 , Sigma Chemical Co.或等效的)。

在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTRIS ,用6mol/L NaOH调pH到8.2,用水定容至2L。

(注意:24 C时的pH为8.2,但是,如果缓冲液温度在20 C, pH就为8.3,如果温度在28C, pH为8.1。

为了使温度在20-28 C之间,需根据温度调整pH值。

)4.7盐酸溶液:0.561mol//L,力口93.5ml6mol/L盐酸到700ml水中,用水定容至1L。

5. 操作方法5.1. 样品制备:(1)固体样品:如果样品粒度〉0.5mm,研磨后过0.3-0.5mm ( 40-60目)筛。

(2)高脂肪样品:如果脂肪含量〉10%,用石油醚去脂。

每克样品用25ml,每次提取完静置一会儿再小心将烧杯倾斜,慢慢将石油醚倒出,共洗三次。

(3)高碳水化合物样品:如果样品干重含糖〉50%,用85%乙醇去除糖份,每克样品每次10ml,共洗三次轻轻倒出,然后在40C烘箱中不时翻搅干燥过夜,并研磨过0.5mm筛。

5.2. 样品消化(1)准确称取双份1.000 ±.005g样品(M1和M2 ),置于高脚烧杯中。

(2)在每个烧杯中加入40ml MES-TRIS 缓冲液,在磁力搅拌器上搅拌直到样品完全分散。

(防止团块形成,使受试物与酶能充分接触) 。

(3)用热稳定的淀粉酶进行酶解处理:加100卩1热稳定的淀粉酶溶液,低速搅拌。

用铝箔片将烧杯盖住,在95-100C水浴中反应30分钟。

(起始的水浴温度应达到95C)。

(4)冷却:所有烧杯从水浴中移出,凉至60C。

打开铝箔盖,用刮勺将烧杯边缘的网状物以及烧杯底部的胶状物刮离,以使样品能够完全的酶解。

用10ml 蒸馏水冲洗烧杯壁和刮勺。

(5)用蛋白酶进行酶解处理:在每个烧杯中各加入100^1蛋白酶溶液。

用铝箔盖住,在60C持续摇动反应30分钟(开始时的水浴温度应达60C),使之充分反应。

(6)pH值测定:30分钟后,打开铝箔盖,搅拌中加入5ml0.561mol/L HCL至烧杯中。

60 C 时用1mol/L NaOH溶液或1mol/L HCL溶液调最终pH为4.0-4.7。

(注意:当溶液为60C时检测和调整pH ,因为在较低温度时pH 会偏高。

)(7)用淀粉葡糖苷酶溶液酶解处理:搅拌同时加100^1淀粉葡糖苷酶溶液。

用铝箔盖住,在60 C持续振摇反应30分钟,温度应恒定在60 C。

5.3 测定5.3.1.总的膳食纤维测定(1)用乙醇沉淀膳食纤维:在每份样品中,加入预热至60C的95%乙醇225ml,乙醇与样品的体积比为4 :1。

室温下沉淀1小时。

(2)过滤装置:用15ml78%乙醇将硅藻土湿润和重新分布在已称重的坩埚中。

用适度的抽力把坩埚中的硅藻土吸到玻板上。

(3)酶解过滤,用78%乙醇和刮勺转移所有内容物微粒到坩埚中。

(注意:如果一些样品形成胶质,用刮勺破坏表面,以加速过滤。

)(4)抽真空,分别用15ml 的78%乙醇,95%乙醇和丙酮冲洗残渣各 2 次,将坩埚内的残渣抽干后在105 C烘干过夜。

将坩埚置干燥器中冷却至室温。

坩埚重量,包括膳食纤维残渣和硅藻土,精确称至O.lmg。

减去坩埚和硅藻土的干重,计算残渣重。

(5)蛋白质和灰分的测定:取成对的样品中的一份测定蛋白质,用本书前述或GB-960.52方法测定。

用(NX6.25作为蛋白质的转换系数)。

分析灰分时用平行样的第二份在525C灼烧5小时,在干燥器中冷却,精确称至O.lmg,减去坩埚和硅藻土的重量,即为灰分重量。

5.3.2 .不溶性膳食纤维测定:( 1 ) 称适量样品按 5.2 进行酶解,过滤前用3ml 水湿润和重新分布硅藻土在预先处理好的坩埚上,保持抽气使坩埚中的硅藻土抽成均匀的一层。

(2)过滤并冲洗烧杯,用10ml70 C水洗残渣2次,然后再过滤并用水洗,转移到600ml高脚烧杯,保留用以测定可溶性膳食纤维,按 5.3.3。

(3)用抽滤装置,分别用15ml78%乙醇,95%乙醇和丙酮各冲洗残渣2次。

(注意:应及时用78%乙醇、95%乙醇和丙酮冲洗残渣否则可造成不溶性膳食纤维数值的增大。

)(4)按 5.3.1.5用双份样品测定蛋白质和灰分。

5.3.3.可溶性膳食纤维测定:(1)将不溶性膳食纤维过滤后的滤液收集到600ml 高脚烧杯中,对比烧杯和滤过液,估计容积。

(2)加约滤出液4倍量已预热至60C的95%乙醇。

或者将滤液和洗过残渣的蒸馏水的混合液调至80g,再加入预热至60C的95%乙醇320ml。

(3)室温下沉淀1小时。

下面按5.3.1测定总膳食纤维,从"湿润和重新分布硅藻土……"。

6. 计算TDF、IDF、SDF 均用同一公式计算膳食纤维(DF, g/100g)测定:DF={[ ( R1+R2 ) /2]-P-A}/[ ( M1+M2 ) /2] 100式中:R1和R2=双份样品残留物重量(mg)P和A=分别为蛋白质和灰分重量(mg)M1 和M2= 样品重量( mg)。

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