蔬菜中硫代葡萄糖苷的比较分析
不同萝卜品种幼苗中硫代葡萄糖苷含量与组分分析

不同萝卜品种幼苗中硫代葡萄糖苷含量与组分分析张丽;何洪巨;赵学志;陈翠蓉;郑鹏婧【摘要】以20个不同萝卜品种为试材,采用高效液相色谱法(HPLC)研究了幼苗期硫代葡萄糖苷的含量与组成.结果表明:不同品种幼苗中总硫苷含量不同,其中,秋白萝卜>春白萝卜>樱桃萝卜.进一步对硫苷组成进行分析,发现了9种不同的硫苷,其中,4种硫苷属于脂肪族,4种属于吲哚族,1种属于芳香族硫苷.不同类型品种幼苗中的硫苷组成不尽相同.秋白及4个春白萝卜品种中含有上述9种硫苷;春白萝卜品种二年子和花知中含有8种硫苷,缺少1个吲哚族硫苷-1-甲氧基吲哚-3-甲基硫代葡萄糖苷;而所有樱桃萝卜品种中均缺少1个脂肪族硫苷-4-甲硫基丁基硫代葡萄糖苷.在对不同萝卜品种幼苗中各种硫苷所占总硫苷百分比分析时发现:秋白萝卜品种(除夏季外)及春白萝卜品种的幼苗中均以4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷为主,该类型的硫苷占总量的45%~77%,其次是吲哚-3-甲基硫代葡萄糖苷,夏季品种中上述两种硫苷的含量相当.樱桃萝卜幼苗中的硫苷以吲哚-3-甲基硫代葡萄糖苷为主(42%~72%).在以上几种硫苷中,4-甲硫基-3-丁烯基硫苷是秋白萝卜与春白萝卜中的主要硫苷,在硫代葡萄糖苷酶的作用下,可被转化成异硫氰酸盐.该物质是一种解毒酶的诱发剂,在肝癌细胞系中起解毒作用[3].上述研究结果为萝卜的品种改良及高硫苷含量萝卜新品种的选育提供了重要信息.%Glucosinolates composition and contents were evaluated in radish seedlings of 20 genotypes including three groups- autumn-white radish, spring-white radish and cherry radish. The total glucosinolate content varied with the groups. The autumn-white varieties had the highest total glucosinolate content, followed by spring-white varieties and cherry radishes. Nine types of glucosinolates were identified in the radish seedlings. And the aromatic glucosinolates werereported in radish for the first time. The main glucosinolate in autumn-white radish and spring-white radish was 4-methylthio-3-butenyl-glucosinolates which made up 45% -77% of the total amount. In cherry radish,the indol-3-mehtyl glucosinolate was the predominant glucosinolate which made up 42% -72% of the total amount. 4-methylthio-3-butenyl-glucosinolates,the main glucosinolate in white radish seedlings, is benefit for human's health as a detoxification in the hepatoma cell line.【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2012(027)004【总页数】5页(P107-111)【关键词】萝卜;幼苗;硫代葡萄糖苷【作者】张丽;何洪巨;赵学志;陈翠蓉;郑鹏婧【作者单位】北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097【正文语种】中文【中图分类】S631.1硫代葡萄糖苷(Glucosinolates,简称硫苷,GSL)是一类重要的生物活性物质,这种物质经植物黑芥子酶(Myrosinase)或胃肠微生物水解后会产生一系列具有生物活性的水解产物—异硫氰酸酯(Isothiocyanates)[1-2]。
菜籽饼中硫葡萄糖甙的研究

般说 来 , O T的 毒性 , 比鸡 敏 感 , 比猪 对 Z 鸭 鸡
敏感 。
皮壳 中有芥子酶 , 在榨油时, 包裹着芥子酶的浓 缩 体破 裂 , 而 释放 出 芥子 酶 来 , 子甙 令 芥子 从 芥 酶接解 , 而促使芥子甙降解 , 从 生成有毒的异硫
氰 酸 酯 (T 、 唑 烷 硫 酮 ( Z 、 氰 酸 酯 IC) 嗯 O T) 硫 (C ) S N 和腈 类 ( C 。 即 使 在 菜 籽 加 工 中 , R N) 由 于高 温 处 理使 酶 失 活 , 在 作 为饲 料 时 , 可 受 但 仍 动物肠 道 中微 生 物 的作 用 或其 它 十字 花科 青 绿
b:
CH2 CHCHCH2 = 。
是最高的, 达到 1 gk , 当于鱼粉的一半 , m /g 相 是 大 豆 的 l 。菜籽 粕 中蛋 白质 的含量虽 然不 如 O倍 豆粕 , 但菜籽粕 的蛋 白质的质量优于大豆粕…。
菜 籽饼 粕 中的蛋 白质 氨基 酸齐 全 , 比例合 理 , 营
菜籽 粕 中的抗 营养 因子 主要 有 : 代葡 萄糖 甙及 硫 其分解 产物 , 植酸 、芥 酸 、单 宁 、芥子 碱 、粗 纤 维等 , 中影 响 最 大 的是 硫 代 葡萄 糖 苷 , 其 也就 是 通常所 说 的“ 毒素 ” 。油菜 籽饼 粕 中含有 3~ % 8
( 中的硫代葡萄糖甙、 粕) 植酸、 宁、 单 芥子碱、 皂
的总硫甙( 硫葡萄糖甙 、异硫氰酸酯 , 唑烷硫酮 。 素等毒物和抗营养因子存在 , 以及 由于制油加工 腈类 的总和 ) 2 硫 代葡萄 糖甙 结构特 点 时不脱 除皮壳 , 造成菜籽饼 ( ) 粕 中粗纤维含量 偏高 , 口性差等 , 适 使其利用受到很大限制。对 硫代葡萄糖甙( l o nl e,S 又称芥子 Gu s o t G ) e i as 菜 籽饼 的副作 用 , 、 猪 鸡尤 为敏感 。 因此 , 利用菜 甙 , 主要 分 布 于油菜 的柔软 组 织 中 , 菜 籽饼 粕 是 籽饼 饲 喂畜 禽前 必 须 进行 脱 毒 处 理 。现 对 菜籽 的主要抗 营养 因子。实 际上它本 身并无 毒性 , 只 经芥子 酶 的催 化才 分解成 一 饼中的主要抗营养因子硫葡 萄糖甙及相应处理 是在 有水 的情 况下 ,
乙烯利对小白菜硫代葡萄糖苷含量的影响

福建农林 大学学报(自然科学版 )
J o u r n a l o f F u j i a n A g r i c u l t u r e a n d F o es r t r y U n i v e r s i t y( N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n )
硫代葡萄糖苷的检测

硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser 等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同,可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷(侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸),芳香族硫代葡萄糖苷(侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸)及吲哚族硫代葡萄糖苷(侧链来源于色氨酸)。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物,但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
(1)在食品中赋予产品特殊的风味,从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味,雪菜味等。
(2)硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等,这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收,从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷,它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中,最重要的是十字花科,所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中,但主要存在于种子中。
另外,许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%,在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500~2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5~6种以上的硫代葡萄糖苷,其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定(一)、分光光度法一、原理:GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖,用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量,计算出GS的含量。
硫甙

硫代葡萄糖苷及其降解产物(一)概况硫葡萄糖苷的分子通式硫代葡萄糖苷(glucosino1ate)是一类葡萄糖衍生物的总称。
广泛存在于十字花科、白花菜科等植物的叶、茎和种子中。
含有硫葡萄糖苷的饲料作物可分为两大类:饲草作物,包括白菜、甘蓝、萝卜、芜菁等和油籽作物,包括油菜籽、芥菜籽等。
不同的硫代葡萄糖苷具有不同的R-基团,它们可分为饱和脂肪烃、不饱和脂肪烃、芳香烃和杂环四大类。
迄今为止已鉴定出109种硫代葡萄糖苷表8-1。
主要硫代葡萄糖苷的分子式和名称在油菜籽中已发现11种硫葡萄糖苷。
主要的有8种,它们是:徐义俊等(1982)用硫酸钙重量法测定了中国不同品种油菜籽中总硫葡萄糖苷的含量,并测定了中国主要油菜品种106个,其中白菜型19个,芥菜型8个,甘蓝型79个油菜籽中的硫葡萄糖苷含量。
结果表明,白菜型油菜籽中含量最低,平均4.04%(无油风干基,下同);芥菜型次之,平均4.85%;甘蓝型最高,平均6.13%。
同样类型中,春油莱硫葡萄糖苷含量都低于冬油莱,如白菜型春油菜为3.67%,冬油菜为4.09%;芥菜型春油菜为4.21%,冬油菜为5.47%;甘蓝型春油莱为4.77%,冬油菜6.17%。
(二)硫葡萄糖苷的降解Bell等人(1984)认为,硫葡萄糖苷本身并不具毒性,而其各种降解产物是有毒的。
油菜籽中与硫葡萄糖苷并存的还有芥子酶(myrosinaseEC),油菜籽在榨油加工过程中或被动物或人体摄入后,该酶与硫葡萄苷接触而使其水解。
Cahn(1964)报道了硫葡萄糖苷的降解途径(图硫葡萄糖苷的降解途径)。
硫葡萄糖苷的降解途径硫葡萄糖苷经芥子酶降解为葡萄糖、硫酸氢根离子及配糖体。
因降解条件的不同,配糖体可降解为硫氰酸酯、异硫氰酸酯(isothiocyanates缩略语ITC)或脱去硫原子形成腈(nitrile缩略语CN),某些R-基团含有羟基的ITC可自动环化为嗯唑烷硫酮(oxazo-lidinethione,缩略语OZT)。
硫代葡萄糖苷的检测

硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同,可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷(侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸),芳香族硫代葡萄糖苷(侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸)及吲哚族硫代葡萄糖苷(侧链来源于色氨酸)。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物,但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
(1)在食品中赋予产品特殊的风味,从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味,雪菜味等。
(2)硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等,这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收,从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷,它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中,最重要的是十字花科,所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中,但主要存在于种子中。
另外,许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%,在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500~2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5~6种以上的硫代葡萄糖苷,其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定(一)、分光光度法一、原理:GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖,用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量,计算出GS的含量。
硫代葡萄糖苷的抗营养效应与机理

Gs l )是 一 种 含 硫 的 阴 离 子 亲 水 性 植 物
禽 标 识 加 挂 、 散 养 户 畜 禽 免 疫 档 案 建
立 、动 物 疫 情 报 告 等 公 益 性 任 务 。 要 与 村 级 动 物 防 疫 员 签 订 基 层 动 物 防 疫 1作 责 任 书 ,明 确其 权 利 义务 。
识 , 以便 提 高 菜 籽 饼 粕 在 饲 料 中 的 利
用价 值 。
次 生 代 谢 产 物 。广 泛 存 在 于 芸 苔 属 植 物 籽 实 或 粗 饲 料 中 .其 含 量 和 组 成 因 植 物 种 类 、栽 培 方 法 和 气 候 环 境 等 条 件 不 同而变化 很大 。菜籽 饼粕 粗蛋 白
洲纳 入 动物 防疫 队伍 整体 培 训 计划 , 制 定 系 统 完 善 的 培 训 方 案 。 要 增 强 培
要 发 挥 先 进 乡 镇 的 典 型 示 范 作 用 和 引 导 作 用 ,通 过 现 场 会 、经 验 交 流
对 于 严 肃 村 级 动 物 防 疫 员 的 T 作 纪 律
的村 级 动 物 防疫员 给予 表 彰 、奖 励 ; 对 完 不 成 T 作 任 务 的 。 给 予 相 应 的 处
罚 。 要 坚 持 人 员 的 动 态 管 理 机 制 ,对
各 乡 镇 要 加 强 村 级 动 物 防 疫 员 培 训 ,运 用 理 论 培 训 和 实 践 锻 炼 等 方 式 , 着 力 培 养 一 支 适 应 重 大 动 物 疫 病 防 控 T 作 需 要 的 村 级 动 物 防 疫 员 队 伍 。 要 :
圳 的 针 对 性 和 实 用 性 ,切 实 提 高 村 级 动 物 防疫 员 业务 素 质 和 T 作 能 力 。
西兰花中硫代葡萄糖苷的研究进展

西兰花中硫代葡萄糖苷的研究进展摘要在内源芥子酶作用下硫代葡萄糖苷可以水解为不同活性物质,发挥不同的生理功能,具有较强的抗癌活性,是西兰花中重要的次生代谢产物,受到广泛的观注。
主要从抗癌功能和抗氧化功能2个方面阐述西兰花中硫代葡萄糖苷的生物学功能,对其研究进展进行综述。
关键词西兰花;硫代葡萄糖苷;结构;生物学功能;抗癌;抗氧化西兰花是十字花科中的一个变种,含有大量的抗氧化物质如黄酮类、多酚类和维生素物质,也含有丰富的人体必需的营养素,同时还含有抗癌物质硫代葡萄糖苷,可以起到预防前列腺癌、胃肠道癌、肺癌的作用[1-3]。
现对西兰花中硫代葡萄糖苷的结构和生物学功能研究进展进行概述。
1 硫代葡萄糖苷的结构与含量硫代葡萄糖苷是西兰花重要的次生代谢产物。
硫代葡萄糖苷的分子结构由2个部分组成,β-D-葡萄糖部分(简称葡萄糖部分)和非糖部分[4-5]。
二者通过硫苷键相连,硫代葡萄糖苷的基本结构如图1所示。
硫代葡萄糖苷既无毒性也无生物活性,在内源芥子酶作用下可水解为具有不同生理功能的活性物质[6]。
西兰花中硫代葡萄糖苷含量一般在500~2 000 μg/g,种类为5种以上。
不同品种、同一品种的不同生长期或者同一株西兰花的不同部位,硫代葡萄糖苷的含量变化都很大。
其在嫩芽中的含量是成熟植株或花中含量的10~100倍。
2 硫代葡萄糖苷的生物学功能2.1 硫代葡萄糖苷的抗癌功能西兰花中含有的异硫氰酸盐类可以抗氧化、延缓衰老,并且有非常强的抗癌防癌作用,在西兰花中含量最多的莱菔硫烷为异硫代氰酸盐衍生物,是目前发现的在蔬菜中含有的预防癌症最好的物质之一,其在十字花科中广泛存在,其抗癌机理比较复杂,可能是多种机制联合作用的结果。
另外,不同的异硫代氰酸盐物质其防癌抗癌的作用方式也千差万别,如2-丙烯基异硫代氰酸盐是通过促进阶段酶的体内脱毒,丙烯基异硫代氰酸盐是通过抑制癌细胞原的形成,而莱菔硫烷的作用机理为诱导体内阶段Ⅱ酶起到抗癌的作用。
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蔬菜中硫代葡萄糖苷的比较分析1.绪论硫代葡萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物,广泛分布于十字花科植物中。
不同的栽培种、不同的生理阶段、不同的组织部位以及不同的栽培条件,都会使植物中含有的硫代葡萄糖苷的含量和成分有所变化植物体中硫代葡萄糖苷和葡萄糖硫苷酶(俗称黑芥子酶)形成硫代葡萄糖苷葡萄糖硫苷酶体系。
在完整的植物中,硫代葡萄糖苷存在于细胞的液泡中,葡萄糖硫苷酶存在于特定的蛋白体中,两者相互分离,但当组织和细胞受到损伤时,葡萄糖硫苷酶就会被释放出来,葡萄糖硫苷酶将硫代葡萄糖苷水解,产生异硫代氰酸盐等降解产物。
采后的一系列处理会影响植物中硫代葡萄糖苷的含量。
近年来的研究发现,硫代葡萄糖苷的降解产物异硫代氰酸盐作为一种化学预防剂,能抑制阶段Ⅰ酶(phase Ⅰenzyme),诱导阶段Ⅱ酶(phaseⅡenzyme),以阻遏和抑制因子从而防止癌症的发生。
许多研究表明,常吃水果和蔬菜是一种很好的饮食习惯。
早在19世纪80年代,国际委员会(N ationalDiets Nutrition and Cancer Committees)建议多吃十字花科蔬菜,因为十字花科蔬菜可以预防癌症。
流行病学数据已表明,富含十字花科蔬菜的饮食,如西兰花、花椰菜、甘兰等能减小许多癌症的发病率。
Kohlmeier 和Su发现常吃花椰菜可以降低大肠癌和直肠癌发生的可能性,Michaud等人发现可以减少膀胱癌的发生, Cohen等人发现可以减少前列腺癌的发生。
现在一致认为,十字花科植物的重要抗癌活性成分前体是硫代葡萄糖苷。
目前对硫代葡萄糖苷的鉴定方法主要是高效液相色谱法,气相色谱法等。
2.硫代葡萄糖苷简介2.1 硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同,可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷(侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸),芳香族硫代葡萄糖苷(侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸)及吲哚族硫代葡萄糖苷(侧链来源于色氨酸)。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
2.2硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物,但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
(1)在食品中赋予产品特殊的风味,从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味,雪菜味等。
(2)硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等,这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收,从而引起甲状腺肿大。
2.3 硫代葡萄糖苷的降解产物硫苷本身是一稳定的化合物,但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下,会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内,当植物的器官受损或对植物加工时它们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物、化学特性。
硫苷的降解产物如5-乙烯基噁唑硫酮及硫氰酸盐等,这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和对碘的吸收,从而引起甲状腺肿大。
硫代葡萄糖苷的最初酶解产物是D葡萄糖和不稳定的糖苷配基。
根据侧链的不同,这些物质随后重新排列生成异硫代氰酸盐、硫代氰酸盐和羟基腈等化合物。
硫代葡萄糖苷酶在人体肠道中也有存在。
所以,即使植物中的葡萄糖苷酶被破坏(例如蔬菜煮过后),硫代葡萄糖苷在体内仍能分解。
但是,由于硫代葡萄糖苷和它们的一些降解产物是水溶性的,有研究表明煮10 min,甘蓝中葡萄糖苷的含量可能降低30%~50%[1]。
不同种类的植物,葡糖糖硫苷酶的活性不同。
柠檬酸会对硫代葡萄糖苷的酶解产生影响。
硫代葡萄糖苷在无酶(如加温、加压) 的条件下也会发生降解,其降解过程十分复杂,主要产物是腈类化合物和异硫氰酸酯,反应产物和反应速度与外界条件有关。
温度高,降解反应速度快,生成腈的量大。
硫代葡萄糖苷的反应速度与体系的含水量有关,体系的含水量低,要在较高温度下发生反应,且降解反应速度较慢。
2.4硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷,它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中,最重要的是十字花科,所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中,但主要存在于种子中。
另外,许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%,在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500~2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5~6种以上的硫代葡萄糖苷,其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
2.5硫代葡萄糖苷的测定1分离硫代葡萄糖苷的方法有气液色谱(GLC)法,离子交换法和高效液相色谱(HPLC)法,硫代葡萄糖苷的分离最初通过气液色谱法,首先得到硫代葡萄糖苷的三甲基硅烷化衍生物,并除去硫酸盐基团,但一些硫代葡萄糖苷经过衍生化产生许多其他产物。
这种方法后来经进一步改进,用硫解酶将硫酸盐除去,但由于酶的作用受pH值、时间、温度和酶浓度的影响,所以,产物也受到上述因素的影响。
Betz, Fox等在亲水性阴离子存在的情况下,利用离子对高效液相色谱法、逆相高效液相色谱法分离完整的硫代葡萄糖苷。
此方法可以回收完整的硫代葡萄糖苷,但缺点是通过离子对高效液相色谱法分离得到的片断含有大量的高度亲水的相反离子,这些离子对后来的质谱、核磁共振等分析会产生干扰。
HPLC法主要用沸腾的甲醇溶液提取样品中的硫代葡萄糖苷,并将提取的GS溶液用离子交换柱进行预处理,然后用配备紫外检测器的反相高效液相色谱(RP-HPLC)仪测定。
在此方法中,选用了硫代葡萄糖苷类化合物中的一种,即带有一个结晶水的黑芥子硫苷(相对分子质量415.49)作为定量分析的内标物。
经过多个国际权威实验室的协同试验,共同确定了16种以上硫代葡萄糖苷类化合物的仪器保留时间,将色谱图上各类硫代葡萄糖苷的峰面积根据内标物峰面积校正,计算得到其单独含量,累加得到硫代葡萄糖苷类化合物的总量,均以umol/g为单位。
该方法已于1992年被确认为国际标准(ISO),目前是加拿大谷物委员会(CGC)谷物研究实验室(GRL)出具加拿大双低油菜籽年度质量分析报告时所使用的基准方法。
这种方法的优点是能对蔬菜样品中的各种GS进行定性和定量分析。
本实验介绍分光光度法测定GS总量的方法。
3.实验数据分析3.1葡萄糖标准曲线的绘制葡萄糖标准曲线的绘制:取6支10mL刻度试管,依次加入葡萄糖标准溶液(每mL相当于1mg葡萄糖)0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mL,用蒸馏水补足至1.0mL,加入3,5-二硝基水杨酸3mL混匀,于沸水浴中保温10min后取出,冷却至室温后定溶至10mL,于530nm处测吸光值以葡萄糖量为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
23 -0.2-0.100.10.20.30.40.50.60.70.80.9100.10.20.30.40.50.600.0330.2480.5840.780.94y = 2.0791x-0.0890R^2 = 0.9675葡萄糖标准溶液体积(mL)吸光度图1.葡萄糖标准曲线 3.2样品GS 总量测定3.2.1数据整理表1.样品吸光度原始数据样品吸光度A 值灭酶管 酶解管油菜帮 0.163 0.295红萝卜心 0.300 0.410青萝卜 0.583 0.650大头菜叶 0.313 0.405白萝卜皮 0.037 0.413 大头菜心 0.038 0.137白萝卜 0.118 0.176油菜叶 0.133 0.242紫甘蓝 0.314 0.594表2.样品吸光度对应质量 样品 灭酶管吸光度对应质量m 1(mg ) 酶解管吸光度度对应质量m 2(mg )油菜帮 0.429 0.185红萝卜心 0.187 0.240青萝卜 0.323 0.355大头菜叶 0.193 0.238白萝卜皮0.061 0.241大头菜心0.061 0.109白萝卜0.010 0.127油菜叶0.107 0.159紫甘蓝0.194 0.245 3.2计算GS=(m1-m2)×50×2.207/m×100%式中: m1—灭酶管从标准曲线上查得的相应葡萄糖量,mgm2—酶解管从标准曲线上查得的相应葡萄糖量,mgm—样品质量,mg2.207——是硫葡萄糖转化为硫葡萄糖苷的系数将表2数据代入上式得出结果如下表(其中m=500mg):表3.样品中GS总量样品GS总量(%)油菜帮 2.91红萝卜心 1.17青萝卜0.71大头菜叶0.99白萝卜皮 3.97大头菜心 1.06白萝卜 2.58油菜叶 1.15紫甘蓝 1.133.3误差分析3.3.1标准曲线的制作绘制的标准曲线不过原点,可能是由于测量时参比溶液的配制不准确,引入了少量影响光吸收物质。
3.3.2硫代葡萄糖苷含量的测定测定结果中,有的测定值不合理。
可能是在样品研磨中并转移至比色瓶过程中,由于研磨及在空气中停留时间过长,还有研磨时产生的热,使芥子酶作用于植物体,即灭酶处理的样品在灭酶前有部分葡萄糖苷已被酶解,缩小灭酶前后的差值及人为的偶然误差引起。
44.结论如表3所示,白萝卜皮、油菜帮中硫代葡萄糖苷含量高;红心萝卜、油菜叶中硫代葡萄糖苷含量也较高;青萝卜中的硫代葡萄糖苷含量最少。
而且同一蔬菜各部位分布差异大,其中在茎部含量较多,叶部较少,如油菜。
由此可知不同的栽培种,不同的生理阶段,不同的组织部位,及不同的生长条件等都会使植物中含有的硫代葡萄糖苷含量和成分有所不同。
参考文献5。