硫代葡萄糖苷的检测
芥子油苷检测
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芥子油苷检测
芥子油苷（Glucosinolate）又称硫代葡萄糖苷、硫苷，是十字花科蔬菜中的一种重要的次生代谢产物，根据侧链基团的不同，可以把硫苷分为脂肪族、芳香族和吲哚族三大类。
硫苷在芥子酶的作用下容易水解产生异硫氰酸醋、硫氰酸醋等不同化合物，这些降解产物具有较强抗菌作用及可通过诱导泛醌还原酶的活性成为致癌物质的阻断剂。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱（HPLC）和液质联用（LC-MS）技术，可高效、精准的检测芥子油苷的含量变化。
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HPLC和LC-MS测定芥子油苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 芥子油苷含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
硫代葡萄糖甙总量速测方法氯化钯法
断提高认识的基础上迅速开展起来了。全国各油 菜育种单位相继开展了低硫甙油菜新品种的选 育工作，以开发应用这一植物蛋白资源。因此，国 家制定了油菜籽中硫甙含量的标准，在此标准中 规定油菜籽（饼）中硫甙含量≤４５．００斗ｔｏｏｌ／ｇ。所 以掌握准确可靠的油菜籽（饼）中硫甙含量的分析 测试技术，在油菜育种、良种繁殖、区域试验、收 购及饼粕利用等工作中都成为非常重要的一个 组成部分。 １． 目前常用的方法
２０枷ｍｉｎ，中间搅动两次，取出静置冷却后，用水
稀释至１０ｍｌ摇匀。 ３．２经过滤后取０．５ＩＩｌｌ放人另一带塞的５ｍｌ或 １０ｍｌ试管中，并加入０．１％羧甲基纤维素钠溶液 ２ｍｌ，（硫甙钯络合物是胶状沉淀物，影响光度的测 定。加入分散剂羧甲基纤维素钠溶液，使比色液
社，２００６． ［２］李培武，扬湄，张文。陈洪，等．油菜硫甙检测技术研究 及进展［Ｊ）．油菜品质检测技术手册，２００３．８． ［３］吴谋成，黄荣汉．油菜籽中硫代葡萄糖甙总量的快速 测定［Ｊ］．华中农业学报，１９８３，（３）：ｉ－９． ［４３丁小霞，李培武．李光明。杨艳燕。等．傅里叶变换近红 外光谱技术测定完整油菜籽中芥酸和硫甙含量［Ｊ］．中国 油料作物学报，２００４，（９）：６－１１．
万方数据
前处理过程繁琐；使用试剂、药品成本高；分析时 间长，不适合于一般基层育种单位和收购单位大
（硫甙提取物与氯化钯反应生成有色产物依硫甙 的多少分别呈不同的颜色，颜色越深，表明硫甙
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的检测1 硫代葡萄糖苷的简介硫代葡萄糖苷 ( 以下简称硫苷）是主要分布于十字花科和刺山柑植物中的含硫次生代谢产物。
由β- D- 硫葡萄糖基、硫化肟基团和来源于氨基酸的可变侧链 R 组成。
其生物合成途径分为三部分：前体氨基酸侧链延伸、核心结构形成及次级侧链的修饰。
硫苷以稳定化合物的形式分布于植物营养器官和生殖器官中，当植物组织受到破坏时，分布于细胞质的黑芥子酶将液泡中的硫苷分解成腈、异硫氰酸酯、硫氰酸酯、恶唑烷酮等多种降解产物，反应产物因硫苷种类、金属离子、pH 值等而不同，其过程十分复杂。
2 硫苷生理功能2.1增强植物抗逆性硫苷及其降解产物具有抵御草食动物、抗病虫及抗病原微生物能力，在植物的防卫反应中发挥重要的作用。
硫苷降解产物烯丙基异硫氰酸酯、2- 苯乙基异硫氰酸酯、n- 丁基异硫氰酸酯及 1-氰基 - 2- 苯乙烷对芸苔属专食性昆虫卵具有致死作用。
其中 2- 苯乙基异硫氰酸酯致死剂量最低，烯丙基异硫氰酸酯、n- 丁基异硫氰酸酯次之，1- 氰基- 2- 苯乙烷最高。
较适应寄主植物中异硫氰酸酯含量比适应寄主植物高，因而可推测硫苷组成及浓度对专食性昆虫有影响。
异硫氰酸酯对土传病虫害防治效果因其含量、病虫对其敏感性，在土壤中的释放速率及残留时间等而不同。
当植株中 2- 苯乙基硫苷含量增加时，蚜虫数量减少，植株抗虫性增强。
2.2诱虫作用硫苷是黄曲条跳甲进行寄主选择的主要因素，同一蔬菜品种中硫苷含量与其选择性呈显著相关。
除此之外，硫苷还能刺激小菜蛾产卵，其产卵量与硫苷含量变化趋势基本相符。
因而，硫苷具有诱虫作用。
2.3致甲状腺肿大硫苷是菜籽饼中最主要的抗营养因子，其降解产物异硫酸氰盐及恶唑烷酮能够引起畜禽甲状腺肿大，并且甲状腺受损存在种间差异。
2.4抗癌吲哚族硫苷降解产物对 S180 小鼠具有抗肿瘤作用。
葡萄糖莱菔子苷（硫苷中一种）降解产物萝卜硫素是蔬菜抗癌效果最好的植物活性物质，诱导人或动物体内 Phase酶II (如谷光苷肽 - S- 转移酶、苯醌还原酶和UDP- 葡萄糖醛酸转移酶)数量的增加，抑制 Pha-seI 酶的产生，从而阻断致癌物产生的代谢途径，抑制癌细胞分裂和生长。
紫白菜花青素和硫代葡萄糖苷含量测定及其近红外光谱快速测定模型研究
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对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究的开题报告
对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究的开题报告题目：对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究一、研究背景硫代葡萄糖甙是一类在许多植物以及动物体内广泛存在的化合物，具有广泛的药理活性。
辣根是一种常见的调味料，其中含有丰富的硫代葡萄糖甙，如异硫氰酸烯丙酯酶等，具有抗菌、抗氧化、防癌等生物活性。
因此，对辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定及水解条件的研究，既有重要的理论意义，也具有重要的应用价值。
二、研究内容1.硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定：采用丙酮沉淀法、硅胶柱层析法等方法分离得到辣根中的硫代葡萄糖甙，并利用紫外光谱、红外光谱、核磁共振、高分辨质谱等手段对其进行鉴定。
2.硫代葡萄糖甙的水解条件研究：采用不同的水解条件（如不同pH 值、温度、酶种类等），对硫代葡萄糖甙进行水解反应，通过高效液相色谱法等手段对水解产物进行分离鉴定，并对比不同水解条件下的产物种类和产率变化。
三、研究意义1.为辣根中硫代葡萄糖甙的提取与利用奠定基础，为进一步开发利用其生物活性提供参考。
2.丰富硫代葡萄糖甙的化学性质和应用价值，为其在药物、医学、食品等领域的开发利用提供理论支持。
3.对辣根中的生物活性成分开展深入研究，丰富物质基础与技术手段，为提高我国药品、食品等产业的竞争力和发展水平提供支撑。
四、研究方法1.辣根中硫代葡萄糖甙的提取：采用浸提和超声辅助提取方法。
2.硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定：丙酮沉淀法、硅胶柱层析法、紫外光谱、红外光谱、核磁共振、高分辨质谱等手段。
3.硫代葡萄糖甙的水解条件研究：不同pH值、温度、酶种类等条件下进行水解反应，通过高效液相色谱法等手段对水解产物进行分离鉴定。
五、预期成果1. 辣根中硫代葡萄糖甙的纯化与鉴定方法。
2. 辣根中硫代葡萄糖甙的水解条件研究数据。
3. 硫代葡萄糖甙水解产物结构和产率的变化规律。
4. 对辣根中的生物活性成分开展深入研究，为其在药物、医学、食品等领域的开发利用提供理论支持。
青花菜硫代葡萄糖苷含量测定及其近红外光谱快速测定模型研究
青花菜硫代葡萄糖苷含量测定及其近红外光谱快速测定模型探究摘要：硫代葡萄糖苷是青花菜中一种重要的营养成分，对于青花菜质量的评估具有重要意义。
本探究通过对青花菜中硫代葡萄糖苷含量的化学测定和近红外光谱快速测定两种方法的比较，建立了一种基于近红外光谱的青花菜硫代葡萄糖苷含量快速测定模型。
起首，通过基于氯化铵溶液提取和硫酸亚铁还原的方法，接受高效液相色谱法确定了青花菜中硫代葡萄糖苷的含量。
结果表明，最佳提取条件为：氯化铵溶液的浓度为80%，提取温度为60℃，提取时间为30min，青花菜的破坏程度为40目。
接下来，收集了160个青花菜样本的近红外光谱数据，并进行了预处理和特征提取。
最后，接受支持向量机、随机森林和偏最小二乘回归三种模型对数据进行建模和优化，得到了基于偏最小二乘回归模型的最佳猜测结果。
该模型的猜测精度达到了96.87%，同时具有较高的速度和好用性，可以作为青花菜硫代葡萄糖苷含量快速测定的可行方法。
关键词：青花菜；硫代葡萄糖苷；近红外光谱；高效液相色谱；偏最小二乘回归；猜测模型。
青花菜硫代葡萄糖苷是一种富含硫元素的营养成分，具有很高的营养价值和生理活性，对人体健康有浩繁好处。
因此，青花菜中硫代葡萄糖苷含量的测定对于青花菜质量的评估和营养价值的确定具有重要意义。
传统的测定青花菜中硫代葡萄糖苷含量的方法是接受高效液相色谱法，该方法检测灵敏度高、精度较好、可靠性较高，但需要耗费大量的时间和精力，操作复杂，成本较高。
近年来，随着近红外光谱技术的不息进步，其快速、无损、精准的特点，为青花菜中硫代葡萄糖苷含量的测定提供了一种新的方法。
本探究接受基于氯化铵溶液提取和硫酸亚铁还原的方法，确定了青花菜中硫代葡萄糖苷的含量，并比较了化学测定和近红外光谱测定两种方法的差异。
结果表明，两种方法的测定结果具有很高的一致性，且近红外光谱测定具有更高的速度和效率。
为了建立一种基于近红外光谱的青花菜硫代葡萄糖苷含量快速测定模型，本探究收集了160个青花菜样本的近红外光谱数据，并对数据进行了预处理和特征提取。
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同，可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷（侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸），芳香族硫代葡萄糖苷（侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸）及吲哚族硫代葡萄糖苷（侧链来源于色氨酸）。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物，但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
（1）在食品中赋予产品特殊的风味，从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味，雪菜味等。
（2）硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等，这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收，从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷，它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中，但主要存在于种子中。
另外，许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%，在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500～2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5～6种以上的硫代葡萄糖苷，其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定（一）、分光光度法一、原理：GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖，用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量，计算出GS的含量。
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser 等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同，可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷（侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸），芳香族硫代葡萄糖苷（侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸）及吲哚族硫代葡萄糖苷（侧链来源于色氨酸）。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物，但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
（1）在食品中赋予产品特殊的风味，从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味，雪菜味等。
（2）硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等，这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收，从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷，它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中，但主要存在于种子中。
另外，许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%，在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500～2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5～6种以上的硫代葡萄糖苷，其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定（一）、分光光度法一、原理：GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖，用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量，计算出GS的含量。
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硫代葡萄糖苷的检测
1 硫代葡萄糖苷的简介
硫代葡萄糖苷 ( 以下简称硫苷）是主要分布于十字花科和刺山柑植物中的含硫次生代谢产物。
由β- D- 硫葡萄糖基、硫化肟基团和来源于氨基酸的可变侧链 R 组成。
其生物合成途径分为三部分：前体氨基酸侧链延伸、核心结构形成及次级侧链的修饰。
硫苷以稳定化合物的形式分布于植物营养器官和生殖器官中，当植物组织受到破坏时，分布于细胞质的黑芥子酶将液泡中的硫苷分解成腈、异硫氰酸酯、硫氰酸酯、恶唑烷酮等多种降解产物，反应产物因硫苷种类、金属离子、pH 值等而不同，其过程十分复杂。
2 硫苷生理功能
2.1增强植物抗逆性
硫苷及其降解产物具有抵御草食动物、抗病虫及抗病原微生物能力，在植物的防卫反应中发挥重要的作用。
硫苷降解产物烯丙基异硫氰酸酯、2- 苯乙基异硫氰酸酯、n- 丁基异硫氰酸酯及 1-氰基 - 2- 苯乙烷对芸苔属专食性昆虫卵具有致死作用。
其中 2- 苯乙基异硫氰酸酯致死剂量最低，烯丙基异硫氰酸酯、n- 丁基异硫氰酸酯次之，1- 氰基- 2- 苯乙烷最高。
较适应寄主植物中异硫氰酸酯含量比适应寄主植物高，因而可推测硫苷组成及浓度对专食性昆虫有影响。
异硫氰酸酯对土传病虫害防治效果因其含量、病虫对其敏感性，在土壤中的释放速率及残留时间等而不同。
当植株中 2- 苯乙基硫苷含量增加时，蚜虫数量减少，植株抗虫性增强。
2.2诱虫作用
硫苷是黄曲条跳甲进行寄主选择的主要因素，同一蔬菜品种中硫苷含量与其选择性呈显著相关。
除此之外，硫苷还能刺激小菜蛾产卵，其产卵量与硫苷含量变化趋势基本相符。
因而，硫苷具有诱虫作用。
2.3致甲状腺肿大
硫苷是菜籽饼中最主要的抗营养因子，其降解产物异硫酸氰盐及恶唑烷酮能够引起畜禽甲状腺肿大，并且甲状腺受损存在种间差异。
2.4抗癌
吲哚族硫苷降解产物对 S180 小鼠具有抗肿瘤作用。
葡萄糖莱菔子苷（硫苷中一种）降解产物萝卜硫素是蔬菜抗癌效果最好的植物活性物质，诱导人或动物体内 Phase酶II (如谷光苷肽 - S- 转移酶、苯醌还原酶和UDP- 葡萄糖醛酸转移酶)数量的增加，抑制 Pha-seI 酶的产生，从而阻断致癌物产生的代谢途径，抑制癌细胞分裂和生长。
3 检测方法：
原子吸收法
本法可测定umol/g量的硫代荀萄糖普。
重量法、容量法、侧葡萄糖法、氯化肥法气相色谱法和液相色谱法.这些方法有的操作繁复，费时，所需样品量大，再现性差，
有的需要昂贵的酶试剂，而各种方法的结果又难以比较，正如Uppstrom[”在1985年国际油菜分析化学讨论会上指出的有关硫普总量的测定，需要解决的问题很多.将欲测的有机物直接(或将其转化为某种化合物后)与金属离子反应，再用原子吸收法测定反应产物中(或未反应的)过量金属离子，即可求得有机物的含量.这种方法既可扩大原子吸收法的应用范围，又可解决一些有机分析方法要用纯有机化合物做标准的困难.本文用这种方法测定了油菜籽中硫代葡萄搪普(以下简称硫普).硫普分子虽然复杂，但经酶解后，均能无例外地定量产生等摩尔的H2SO4，而测定so4-目前一般被认为是较可靠的方法，因此若用巳知量的钡离子溶液与其反应，然后用原子吸收法测量过量的钡离子，即可间接求得硫普的含量。
实验部分：
1仪器与试剂
zeeman原子吸收分光光度计，离心机，超级恒温槽.0.01000mol/L钡标准溶液:称取l.9734gBaCo:溶于20mL2mol/L的HCI中，用水稀释至IL，用时再稀释为1.00mmol/L.0.0l000mol/LSO三一标准溶液:称取1.4204gNa:50。
溶于少量水中，再稀释成1L,用时再稀释成1.00mmo1/L.油菜籽:江苏省农科院经作所提供.
2工作条件
用单纯型方法选定的最佳测定条件如下.波长:553.6nm，狭缝:1.3nm，灯电流:20mA，燃烧器高度7mm，乙炔流量2.5L/min.
3分析步骤
将一定体积含so4近中性试样溶液，移入已校正过的l0mL离心管中，加入2.00mLI.00mmol/L的Ba离子标准溶液，沸水浴5min，取出冷至室温，用水稀释至4.OmL，摇匀，在3500rPm.下离心lmin，用原子吸收法测定溶液中过量的Ba离子.
4样品分析
4.1工作曲线
往预先校正过的10mL离心试管中，分别加入1.00mol/L的so42-标准溶液。
0.00、0.40、0.80、1.20、l.60mL，再分别加入2.00mL的l.00mmol/L的Ba离子标准溶液，摇匀、沸水浴5min，取出冷至室温。
用水稀释至4.00mL，摇匀，在3500rPm下离心lmin.用原子吸收法测定溶液中过量的Ba离子.
5结果和讨论
5.1酸度试验结果表明，pH值为4一8时对测定无影响，故试样的测定酸度为pH5、7。
5.2加.热时间为改善BaSO4的沉淀晶形，.沉淀后，沸水浴加热5、60min，对结果无影响，故加热时间定为5、l0min.
5.3离心时间与速度为使BaSO4。
快速沉降，用不同的离心速度和时间进行试验，当转速为3500rPm时，离心lmin即可得到满意的结果.由此可说明，在所述条件下，可不用分离BaSO4。
，也能得到满意的结果。
甲醇回流提取法
原理：采用甲醇法提取西兰花中硫代葡萄糖苷, 利用重量法测定其中硫代葡萄糖苷的含量, 得出硫代葡萄糖苷最佳提取条件。
1 材料与设备
1.1 主要实验材料
新鲜西兰花（市售）、定量滤纸（中速）、瓷坩埚、牛津杯（内径 6mm、外径 8mm、高 10mm）、移液枪等。
无水甲醇、醋酸钡、氯化钡、浓盐酸、抗生素（硫酸链霉素）。
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、白葡萄球菌（white staphylococcus）、枯草芽孢杆菌（Bacil-lus subtilis）、大肠杆菌（Escherichia coli）（以上菌种来自于哈尔滨医科大学）。
1.2 主要实验设备
粉碎机、马福炉、电热恒温鼓风干燥箱、微电脑控制生化培养箱、电热恒温培养箱、立式自动电热压力蒸汽灭菌器、高压灭菌锅、无菌操作台。
2 实验方法
2.1 工艺流程
2.1.1 硫代葡萄糖苷的提取工艺流程西兰花→洗涤→切片→干燥→粉碎称重（西兰花蕾部位）→甲醇加热回流→加入 Pb(AC)2→静止→离心→滤液（硫代葡萄糖苷的粗提物）。
2.1.2 硫代葡萄糖苷的测定工艺流程（采用重量法测定，参考吴谋成[6]、褚庆华[7]的测定方法，略有改动）：上述滤液→加入 Ba(AC)2，过滤→除甲醇→加入 BaCl2、HCl→沸水浴→静止过夜→过滤→灰化至衡重→称重→计算硫代葡萄糖苷含量（同时做空白）。
操作要点如下：
（1）切片：切片厚度在 0.5cm 左右。
（2）加入 Ba（AC）2目的：除去样品液中游离硫酸根离子的干扰。
（3）加入 BaCl2、HCl：采用酸水解工艺将硫代葡萄糖苷水解为 ITCS，游离硫酸根与钡离子结合生成硫酸钡沉淀。
（4）过滤：采用定量滤纸。
2.2 测定方法。