PRDX2基因沉默促进结直肠癌细胞上皮-间质转化增强侵袭转移能力

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PAD4介导H3cit促结肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的机制研究

PAD4介导H3cit促结肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的机制研究王永琦;刘丽杰;何冬雷;陈勇【期刊名称】《局解手术学杂志》【年(卷),期】2024(33)4【摘要】目的探究肽基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)介导的瓜氨酸化组蛋白H3(H3cit)在结肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化中的作用及其相关机制。

方法收集我院30例结肠癌患者的血清和30例健康受试者的血清,ELISA检测血清中PAD4和H3cit水平,并分析两者相关性。

将oe-NC、过表达PAD4(oe-PAD4)和sh-NC、sh-NLRP3载体转染至人结肠癌SW480细胞中,并设为oe-NC组、oe-PAD4组、oe-PAD4+sh-NC组、oe-PAD4+sh-NLRP3组。

采用qRT-PCR检测PAD4、NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平;Western blot检测PAD4、H3cit、NLRP3、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖水平;Transwell检测细胞侵袭水平;ChIP-qPCR检测H3cit在NLRP3转录起始位点(TSS)的富集水平。

结果与健康受试者比较,结肠癌患者血清中PAD4和H3cit水平均升高,且两者呈正相关(P<0.05)。

与oe-NC组比较,oe-PAD4组PAD4、NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平升高,PAD4、H3cit、NLRP3、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低,细胞增殖、侵袭水平升高,H3cit在NLRP3 TSS区富集增加(P<0.05);与oe-PAD4+sh-NC组比较,oe-PAD4+sh-NLRP3组NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平降低,NLRP3和N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,细胞增殖、侵袭水平降低(P<0.05)。

GRHL2对结肠癌失巢凋亡和侵袭迁移的作用研究

GRHL2对结肠癌失巢凋亡和侵袭迁移的作用研究汪锦江;李佳曦;邓周峰;刘子梅;乔光磊;马俐君【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2022(26)6【摘要】目的探索沉默及回补粒状头样(GRHL)2基因后对人结肠癌HCT116细胞失巢凋亡和侵袭迁移功能的作用。

方法应用本课题组前期构建的GRHL2基因沉默及基因回补表达的结肠癌HCT116细胞株作为实验研究组,设为基因沉默组(GRHL2-KO)和基因回补组(GRHL2-OE),以结肠癌HCT116作为空白对照组(Control),采用qRT-PCR(Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction)和蛋白印迹技术(western blot)检测各组GRHL2的mRNA和蛋白表达;通过Calcein AM/EthD-1荧光双染法检测细胞失巢凋亡功能;应用划痕实验和侵袭迁移实验检测细胞迁移功能;Western blotting检测检测E-cadherin、N-cadherin和RAB25蛋白的表达。

结果与空白对照组相比,基因沉默组的mRNA和蛋白基本没有表达(P<0.0001),基因回补组与基因沉默组相比mRNA和蛋白表达明显上升(P<0.0001);失巢凋亡实验结果显示,与空白对照组相比,GRHL2沉默后,存活细胞率明显增加[Calcein AM:(147.25±20.06)%vs(343.50±6.62)%,P<0.001],失巢凋亡率明显减少[EthD-1:(72.12±9.19)%vs(53.96±5.35)%,P<0.01];GRHL2回补后存活细胞率明显下降[Calcein AM:(343.50±6.62)%vs(119.73±14.48)%,P<0.0001],细胞失巢凋亡率明显回升[EthD-1:(2.25±0.10)%vs(53.96±5.35)%,P<0.001];划痕实验和侵袭转移实验显示,基因沉默组细胞表现了更强的细胞迁移能力;Western blotting结果表明GRHL2的沉默抑制了对Ecadherin和RAB25蛋白的表达,而增加了N-cadherin的表达,GRHL2回补后E-cadherin和RAB25蛋白的表达上升,N-cadherin表达相对下降。

PRDM家族蛋白结构与功能研究进展

PRDM家族蛋白结构与功能研究进展赵生军;张勇;阎萍;郭宪【摘要】PRDM家族蛋白是具有一个PR结构域和数量不等锌指结构(除了PRDM11),广泛存在于灵长类、啮齿动物、鸟类和两栖动物中能够调控表观遗传的蛋白.部分PRDM蛋白家族成员的PR结构域具有组蛋白赖氨酸转移酶活性(HMT),影响表观遗传,PRDM蛋白锌指结构具有DNA、RNA、蛋白识别结合能力;另一部分PRDM家族成员虽然具有PR结构域,但不具有HMT活性,在癌症发生、原始生殖细胞特化、神经系统发育、造血、血管发展、胚胎发育中发挥重要作用.PRDM 家族蛋白通过甲基转移或募集染色体结构重塑复合物,调控基因表达和修改染色体结构,在细胞特化和疾病调控中起到重要作用.论文综述了PRDM家族蛋白结构与功能最新研究进展.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)005【总页数】6页(P1188-1193)【关键词】PRDM家族蛋白;表观遗传;PR结构域;锌指结构;组蛋白赖氨酸转移酶活性【作者】赵生军;张勇;阎萍;郭宪【作者单位】中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃省牦牛繁育工程重点实验室,兰州730050;甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;甘肃农业大学动物医学院,兰州730070;中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃省牦牛繁育工程重点实验室,兰州730050;中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃省牦牛繁育工程重点实验室,兰州730050【正文语种】中文【中图分类】Q51PRDM家族蛋白其肽链N末端有一个保守的PR结构域(PR domain)，以及有重复数量不等的C2H2型锌指蛋白结构(zinc finger)，但PRDM11无锌指结构[1]。

Fumasoni等[2]检测到PRDM家族在灵长类中有17个成员，在啮齿动物、鸟类和两栖动物中有16个成员，在真菌与植物中没有检测到PRDM。

17个成员具有异同点[3]，可以通过不同剪接或启动形成不同的分子结构。

siRNA介导COX-2基因沉默对大肠癌LoVo细胞侵袭及上皮间质转化的影响

siRNA介导COX-2基因沉默对大肠癌LoVo细胞侵袭及上皮间质转化的影响李明;谭诗云【摘要】目的探讨靶向沉默环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达对大肠癌LoVo细胞侵袭能力及上皮间质转化的影响.方法在体外COX-2 siRNA转染大肠癌LoVo细胞,RT-PCR及免疫印迹法验证转染后COX-2 mRNA及蛋白表达,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;免疫印迹法检测EMT标志物(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)、ERK/MAPK和PI3K/Akt通路相关蛋白(Akt、p-Akt、p-GSK-3β、ERK、p-ERK)及MMP-9表达的变化情况.结果 COX-2 siRNA转染大肠癌LoVo细胞后,COX-2 mRNA及蛋白表达下调,同时细胞侵袭能力降低;上皮标记物E-cadherin表达上调,同时间叶标记物Vimentin和Fibronectin表达下调;细胞总的ERK、Akt蛋白表达水平无明显改变,而p-ERK、p-Akt表达降低,同时,Akt下游效应蛋白p-GSK-3β表达也下调;MMP-9表达下调.结论 COX-2 siRNA转染有效抑制了大肠癌LoVo细胞COX-2表达,并可能通过阻滞细胞ERK/MAPK和PI3K/Akt通路,进而抑制EMT,下调MMP-9表达,降低细胞侵袭能力.【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2018(027)012【总页数】4页(P1363-1366)【关键词】大肠癌;小干扰RNA;环氧合酶-2;上皮间质转化;侵袭【作者】李明;谭诗云【作者单位】武汉大学人民医院消化内科消化系疾病湖北省重点实验室,湖北武汉430060;武汉大学人民医院消化内科消化系疾病湖北省重点实验室,湖北武汉430060【正文语种】中文【中图分类】R735.3+4大肠癌是临床上常见的消化道恶性肿瘤，其死亡率高居肿瘤相关死亡的第2位[1-2]。

PRDX2对氟尿嘧啶在结肠癌细胞中化疗敏感性的调控作用及机制研究

PRDX2寸5-氟尿腳定在结肠癌细胞中化疗敏感性的调控作用及机制研究结肠癌是目前肿瘤疾病中全球发病率较高的肿瘤，在我国的新发肿瘤病例及肿瘤死亡病因中均排第5位,并且结肠癌的发病率和死亡率仍然呈上升趋势。

目前结肠的治疗是以手术为主，辅以全身化疗。

全身辅助化疗的目的是为术后进一步消灭患者体内的微转移病灶，延长病人的生存时间，并且辅助化疗被认为是中晚期结肠癌患者综合治疗的重要环节。

5■氟尿II密唳（5-FU）是结肠癌化疗的首选药物，被广泛的运用于结肠癌的辅助化疗中。

患者对化疗药物的敏感性决定了化疗的疗效，许多病人常常因为对5・FU耐药导致治疗的失败。

因此研究影响化疗药物敏感性的分子生物机制，进一步筛选出更好的靶点以促进化疗药的敏感性在结肠癌的治疗中就显得尤为重要。

最近有研究表明,机体的活性氧（ROS）青除系统能降低人体对5・FU的药物敏感性。

过氧化还原蛋白（PRDXs）属于ROS青除系统，在肿瘤对抗ROS的过程中发挥了极为重要的作用,PRDX2是其中的一个重要成员。

有研究表明,PRDX2在结肠癌中过表达，并且下调PRDX可以促进结肠癌细胞的凋亡。

PRDX能清除体内过多的ROS并且能调控结肠癌细胞的凋亡，而ROS又与5-FU的药物敏感性有关,这些研究提示PRDX酣能对5-FU在结肠癌化疗中的敏感性产生影响。

而在结肠癌化疗中PRDX与5・FU的相互关系及其影响机制尚未有进一步的研究, 我们的研究就对此展开。

研究目的：探讨PRDX2寸5・FU在结肠癌中化疗敏感性的影响及其机制研究方法：1 •建立沉默PRDX2勺质粒载体并用慢病毒包装，通过Western blot筛选有效的质粒载体，通过RNA的提取和QT-PCF的检测验证慢病毒干扰后PRDX2勺敲减效率；通过慢病毒转染HT29和HCT116结肠癌细胞，分别建立空载病毒组(shCont组)和沉默PRDX2&(shPRDX2组)，通过荧光显微镜观察慢病毒转染率，采用Western blot检测慢病毒转染后PRDX蛋白水平的差异，用QRT-PC检测mRNA表达的差异。

PRDX1通过上皮间质转化促进结肠癌SW480细胞侵袭转移

PRDX1通过上皮间质转化促进结肠癌SW480细胞侵袭转移冯继红;冯冬冬;傅仲学【摘要】目的探讨过氧化还原酶1(Peroxiredoxin 1,PRDXl)在结肠癌上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)发生中的作用及其参与结肠癌侵袭转移的可能机制.方法通过慢病毒转染使结肠癌SW480细胞PRDX1过表达并通过Western blot检测验证;采用Transwell方法和细胞划痕实验检测细胞侵袭及转移能力的变化;免疫细胞荧光检测结肠癌SW480细胞EMT相关蛋白Twistl、E-cadherin及Vimentin的表达;Western blot方法检测EMT转录因子Twist1、EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Vimentin及转移相关蛋白MMP-9的表达.结果转染PRDX1组SW480细胞中PRDX1呈过表达;Transwell法和细胞划痕实验显示过表达PRDX1组细胞的侵袭及转移能力较对照组明显增强;免疫细胞荧光显示转染PRDX1组细胞其上皮细胞标记E-cadherin明显下调,间质标记Vimentin及EMT转录因子Twist1表达明显上调;Western blot结果表明过表达PRDX1组E-cadherin较对照组显著降低(P＜0.01),而Twist1、MMP-9、N-cadherin及Vim-entin较对照组显著升高(P＜0.05).结论 PRDX1可促进人结肠癌SW480细胞EMT的发生,从而增强结肠癌SW480细胞的侵袭、转移能力.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2015(038)001【总页数】7页(P67-73)【关键词】过氧化还原酶1;结肠癌;侵袭;转移;上皮间质转化【作者】冯继红;冯冬冬;傅仲学【作者单位】重庆医科大学附属第一医院胃肠外科,重庆400016;安徽省六安市寿县中医院心内科,安徽六安232200;重庆医科大学附属第一医院胃肠外科,重庆400016【正文语种】中文【中图分类】R735.3结肠癌是世界上最常见恶性肿瘤之一，其发生率和死亡率位居恶性肿瘤前列[1]。

PRDXs家族在结直肠癌中作用机制的研究进展

doi：10.3969/j.issn.l000484X.2020.23.024PRDXs家族在结直肠癌中作用机制的研究进展①丁婷婷张红冯继红②马虎(遵义医科大学附属医院肿瘤医院肿瘤科，遵义563003)中图分类号R735.34文献标志码A文章编号1000-484X(2020)23-2938-05[摘要]过氧化物氧化还原酶(PRDXs)家族是一类新近发现的具有过氧化氢酶活性的抗氧化蛋白，包括PRDX1、PRDX2、PRDX3、PRDX4、PRDX5及PRDX66个成员，广泛存在于生物体中，主要通过参与多个与活性氧族(ROS)相关的信号通路影响肿瘤细胞的生物学行为。

国内外研究发现PRDXs在多种肿瘤中表达上调,其表达与肿瘤的增殖、侵袭与转移密切相关。

近年PRDXs家族在结直肠癌(CRC)中的作用得到关注，其中PRDX1和PRDX2在CRC中发挥的关键作用及相关分子机制的研究成为目前研究热点。

本文就PRDXs家族成员分别在CRC中的生物学功能及其调控机制等进行综述，为寻找新的CRC生物治疗靶点提供科学依据。

[关键词]PRDXs；ROS；信号通路;结直肠肿瘤Advances in research on mechanism of action of PRDXs family in colorectal cancerDING Ting-Ting,ZHANG Hong,FENG Ji-Hong,MA Hu.Department of Oncology,Cancer Hospital,Affiliated Hospital of Zunyi Medical University,Zunyi563003,China[Abstract]The peroxiredoxins(PRDXs)family is a newly discovered antioxidant protein with catalase activity,including six members，PRDX1，PRDX2，PRDX3，PRDX4，PRDX5，and PRDX6.They are widely distributed in organisms，mainly affecting the biological behavior of tumor cells by participating in multiple signaling pathways related to reactive oxygen species(ROS).Domestic and foreign research have found that PRDXs are up-regulated in a variety of tumors，and their expressions are closely related to tumor proliferation，invasion and metastasis.In recent years，the PRDXs family has been paid attention to in colorectal cancer(CRC).Research on the key role of PRDX1and PRDX2in CRC and related molecular mechanisms have become current research hotspots.This article reviews the biological functions and regulatory mechanisms of PRDXs family members in CRC，and provides a scientific basis for finding new biotherapy targets for CRC.[Key words]PRDXs；ROS；Signaling pathway；Colorectal neoplasms结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是最常见的恶性肿瘤之一，其在美国占肿瘤高死亡率的第3位,且我国CRC的发病率和死亡率呈逐年上升趋势［1］。

PRDX2对结直肠癌细胞“干性”的调节作用及其机制研究的开题报告

PRDX2对结直肠癌细胞“干性”的调节作用及其机制研究的开题报告一、选题背景与意义结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，早期诊断和治疗是提高生存率的关键。

目前，随着肿瘤干细胞理论的提出，许多研究显示肿瘤干细胞是肿瘤复发和耐药的主要原因。

因此，调节肿瘤干细胞对于治疗结直肠癌具有重要意义。

PRDX2是一种过氧化氢酶，在肿瘤细胞中具有重要的抗氧化作用。

近期研究显示PRDX2与肿瘤干细胞的调节相关，然而PRDX2在结直肠癌干细胞上的具体作用及其分子机制仍不清楚。

因此，本研究拟通过对PRDX2在结直肠癌干细胞上的作用进行研究，进一步探讨PRDX2与结直肠癌干细胞的关系，为结直肠癌的治疗提供科学依据。

二、研究目的和内容1. 研究PRDX2在结直肠癌干细胞中的表达及其在肿瘤干细胞中的作用；2. 探讨PRDX2对结直肠癌干细胞“干性”（其自我更新和再生能力）的调节作用；3. 探究PRDX2在结直肠癌干细胞中的信号传导通路及其调节机制；4. 分析PRDX2在结直肠癌治疗中的潜在价值。

三、研究方法1. 采用肿瘤干细胞渗透法（tumorsphere assay）和免疫荧光染色等方法检测PRDX2在结直肠癌干细胞中的表达及其与“干性”之间的关系；2. 运用分子生物学技术对PRDX2在结直肠癌干细胞中的功能进行研究；3. 利用蛋白质组学技术分析PRDX2在结直肠癌干细胞中的信号传导通路；4. 结合临床数据分析PRDX2在结直肠癌治疗中的潜在价值。

四、预期结果通过本研究，我们预计获得以下结果：1. 确定PRDX2在结直肠癌干细胞中的表达水平和分布规律；2. 揭示PRDX2与结直肠癌干细胞“干性”的相关性；3. 发现PRDX2参与了结直肠癌干细胞的相关信号传导通路；4. 探明PRDX2在结直肠癌治疗中的突破点，为新药研发提供依据。

五、研究意义本研究的考察对象是结直肠癌干细胞中PRDX2的作用，对于探究结直肠癌生长和进展的分子机制有着重要的潜在价值。

沉默MACC1基因对人卵巢癌耐药细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

沉默MACC1基因对人卵巢癌耐药细胞增殖、凋亡和侵袭的影响邓佑兴;史惠蓉;李霞;张瑞涛【摘要】目的观察应用基因沉默技术抑制人卵巢癌耐药细胞结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达后,细胞增殖、凋亡和侵袭能力的变化及其分子机制.方法将人卵巢癌耐药细胞株SKOV-3/DDP分成空质粒组和转染组,分别转染空质粒p-super-EGFP、重组质粒p-super-EGFP-MACC1 shRNA,另取未经处理的SKOV-3/DDP 细胞作为空白对照组.采用RT-PCR方法检测各组MACC1 mRNA表达,Western blotting法检测MACC1蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,体外黏附试验检测细胞体外黏附力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western blotting法测定C-met、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达.结果与空白对照组和空质粒组比较,转染组MACC1 mRNA和蛋白表达减少,细胞48、72 h增殖能力减弱,细胞凋亡率增加,体外黏附和侵袭能力减弱,C-met、p-ERK1/2蛋白表达增加(P均<0.05),而空白对照组和空质粒组各指标差异无统计学意义(P均>0.05).结论 MACC1基因表达抑制后,SKOV-3/DDP的增殖、黏附和侵袭能力减弱,细胞凋亡增加,这可能与HGF/C-met和ERK通路受抑制有关.%Objective To observe the proliferation, apoptosis, and invasion changes of human ovarian cancer drug-resistant cell line after metastasis-associated in colon cancer-1 (MACC1) silencing by using gene silencing technique and its possible mechanism.Methods The human ovarian cancer drug-resistant SKOV-3/DDP cells were divided into the empty plasmid group and the transfection group, which were transfected with p-super-EGFP and p-super-EGFP-MACC1 shRNA.In addition, the untreated SKOV-3/DDP cellswere taken as the control group.The expression of MACC1 mRNA was detected by RT-PCR,Western blotting was used to detect the expression of MACC1 protein, MTT assay was used to detect cell proliferation, flow cytometry was used to detect the apoptosis, the adhesion test was used to detect the adhesion of cells in vitro, Transwell chamber was used to detect cell invasion, and the protein expression of C-met, ERK1/2 and p-ERK1/2 was detected by Western blotting.Results Compared with the blank control group and empty plasmid group, the MACC1 mRNA and protein levels were lower, the proliferation ability decreased at 48 and 72 h, apoptosis rate increased, the adhesion and invasion abilities increased, the expression of C-met, p-ERK1/2, MMP-2, MMP-9, and Caspase-3 decreased, and the expression of cleaved caspase-3 protein increased in the transfection group (all P<0.05).There was no statistically significant difference between the blank control group and empty plasmid group (all P>0.05).Conclusion Silencing MACC1 gene inhibits the proliferation, adhesion, and invasion abilities of SKOV-3/DDP cells, and promotes apoptosis, which may be related to the inhibition of HGF/C-met andERK1/2 pathway.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2017(057)026【总页数】4页(P21-24)【关键词】卵巢癌;结肠癌转移相关基因1;细胞增殖;细胞凋亡;细胞侵袭【作者】邓佑兴;史惠蓉;李霞;张瑞涛【作者单位】郑州市妇幼保健院,郑州 450052;郑州大学第一附属医院;郑州大学第一附属医院;郑州大学第一附属医院【正文语种】中文【中图分类】R737.31卵巢癌的病死率居妇科恶性肿瘤首位。

转移相关基因-2调控肿瘤侵袭转移的研究

转移相关基因-2调控肿瘤侵袭转移的研究
王超;周尘飞;张俊
【期刊名称】《临床肿瘤学杂志》
【年(卷),期】2016(021)008
【摘要】转移相关基因-2(MTA2)是转移相关基因家族成员之一,其蛋白质序列及功能结构域编码序列与MTA1具有高度同源性.MTA2参与构成核小体重构及组蛋白去乙酰化酶(NuRD)复合物,并可与多种转录因子相互作用,参与基因转录调控.MTA2在多种恶性肿瘤中异常表达,并与肿瘤恶性生物学行为密切相关,提示MTA2在肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用.本文将对MTA2在肿瘤中的表达情况、生物学功能以及在肿瘤侵袭、转移中的相关分子机制等进行综述.
【总页数】4页(P744-747)
【作者】王超;周尘飞;张俊
【作者单位】200025 上海上海交通大学医学院附属瑞金医院肿瘤科;200025 上海上海交通大学医学院附属瑞金医院肿瘤科;200025 上海上海交通大学医学院附属瑞金医院肿瘤科
【正文语种】中文
【中图分类】R730
【相关文献】
1.调控结直肠癌转移相关基因SATB2中重要miRNAs在直肠癌肿瘤进展中作用研究 [J], 王桂琦;谷敬锋;高英超;王园园
2.TFPI-2对恶性肿瘤细胞增殖凋亡侵袭转移调控作用的研究进展 [J], 魏熙胤;臧凤琳;孙保存
3.肿瘤相关巨噬细胞调控基质金属蛋白酶促口腔鳞癌细胞侵袭转移的实验研究 [J], 何梦颖;许小会;杨聪翀;周美玲;刘来奎
4.Cofilin调控恶性肿瘤侵袭转移的研究进展 [J], 陈建湘;王为服;王飞
5.中医药抑制肿瘤侵袭转移的IL-8-EMT调控机制研究进展 [J], 张云龙; 施俊
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ＺｕｎｙｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．ＺｕｎｙｉＧｕｉｚｈｏｕ５６３０９９，Ｃｈｉｎａ：２．ＣａｎｃｅｒＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｈｅＡｆｉｌｆｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｕｎｙｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＺｕｎｙｉＧｕｉｚｈｏｕ５６３０９９，Ｃｈｉｎａ；３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＺｕｎｙｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉ —
于伟娜，冯继红，丁陈波，高绍莹，徐林，袁建波，罗军敏
（１．遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地，贵州遵义
贵州遵义５６３０９９；３．遵义医学院医学检验系２０１１级学生，贵州遵义
Ｗｅｉｎａ，Ｆｅｎｇ，２ｏ，ＤｉｎｇＣｈｅｎｂｏ，ＧａｏＳｈａｏ￣，
，ＹｕａｎＪｉａｎｂｏ，ｈｔｏＪｕｎｍｉｎ
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＢａｓｅｏｆＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅＥｄｕｃａｔｉｏｎｏｆＧｕｉｚｈｏｕＰｒｏｖｉｎｃｅ，
第３８卷第ｉ期２０１５年２月
遵
义医学ຫໍສະໝຸດ 院学报Ｖ０１．３８Ｎｏ．１Ｆｅｂ．２０１５
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｕｎｙｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ＰＲＤＸ２基因沉默促进结直肠癌细胞上皮一间质转化增强侵袭转移能力
（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）和实时荧光定量ＰＣＲ（ｑＲＴ— ＰＣＲ）法分别检测两组细胞中ＰＲＤＸ２蛋白和ｍＲＮＡ表达；以５ｎｇ／ｍＬ的ＴＧＦ—Ｂ１作用两组细胞，在０、４８、７２ｈ观察两组细胞形态学变化０痕实验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室分别检测两组细胞体外迁移和侵袭能力；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ｑＲＴ—ＰＣＲ法检测Ｅ～ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｓｎａｉｌ、Ｔｗｉｓｔｌ和ＭＭＰ一９蛋白及ｍＲＮＡ表达。结果与对照组相比，
５６３０９９；２．遵义医学院附院附属肿瘤医院，
５６３０９９）
［摘要］目的探讨Ｐｅｒｏｘｉｒｅｄｏｘｉｎ２（ＰＲＤＸ２）基因沉默在结直肠癌细胞上皮一问质转化（ＥＭＴ）中的作用及其参与侵袭转移的可能机制。方法将带有抗性的对照ｓｈＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ—Ｃｏｎｔｒｏ１）和ＰＲＤＸ２ｓｈＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ—ＰＲＤＸ２）慢病毒颗粒分别转染结直肠癌ＳＷ４８０细胞，转染后细胞分为ＰＲＤＸ２沉默组（ｓｈＲＮＡ—ＰＲＤＸ２）和空载对照组（ｓｈＲＮＡ—Ｃｏｎｔｒｏ１）。采用免疫印迹法
ＰＲＤＸ２沉默组细胞ＰＲＤＸ２蛋白和ｍＲＮＡ的表达显著降低（Ｐ＜０．０５），成功建立ＰＲＤＸ２基因沉默稳定细胞株；经ＴＧＦ一６１作用后，ＰＲＤＸ２沉默组细胞呈纺锤体样间质细胞表型，且迁移和侵袭能力明显增强；Ｅ—ｅａｄｈｅｒｉｎ蛋白及ｍＲＮＡ水平表达显著下降，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｓｎａｉｌ、Ｔｗｉｓｔｌ和ＭＭＰ一９蛋白及ｍＲＮＡ表达水平均明显增加（Ｐ＜０．０５）。结论ＰＲＤＸ２基因沉默可促进结直肠癌ＳＷ４８０细胞发生ＥＭＴ，从而增强细胞的侵袭和转移能力，可能与其转录调节Ｓｎａｉｌ、Ｔｗｉｓｔｌ表达有关。［关键词］Ｐｅｒｏｘｉｒｅｄｏｘｉｎ２；基因沉默；结直肠癌；上皮一间质转化；侵袭转移［中图法分类号］Ｒ７３５．３［文献标志码］Ａ［文章编号］１０００－２７１５（２０１５）０１－００７４－０６
ＳｉｌｅｎｃｉｎｇｏｆＰＲＤＸ２ｐｒｏｍｏｔｅｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ— — ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓａｎｄｅｎｈａｎｃｅｓｔｈｅａｂｉｌｉｔｉｅｓｏｆｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓ