重量法 大蒜素重量检测法
HPLC法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的含量
8生物技术世界 BIOTECHWORLD大蒜素(三硫二丙烯,C6H10S3)为大蒜油中主要的有效成分,是大蒜类保健食品的主要功效成分,同时也是最重要的评价指标。
目前大蒜素的含量测定有重量法、滴定法、气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法等[1～7],高效液相色谱法以其分析准确性高、误差小、方便、普及率高。
本文建立了大蒜素有效成分含量HPLC测定方法,为大蒜油肠溶软胶囊制剂的研究奠定了基础。
1 仪器与试剂A g i l e n t 1100型高效液相色谱仪,紫外检测器,A g i l e n t chemstation色谱工作站;B3200S-T型超声仪(必能信超声上海仪器有限公司);AB204-N型电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
甲醇(色谱纯 美国天地(TEDIA)试剂公司);甲醇、正己烷、乙腈(分析纯 国药集团化学试剂有限公司 批号:2007122、20090721、20090411);超纯水(江苏康缘药业股份有限公司研究院提供)大蒜素对照品(规格:每支0.5ml,含量为88.4%,中国药品生物制品检定所批号:100384-200501) 大蒜油(吉安市华新天然植物有限公司 批号090323)2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱:Diamonsil C18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)流动相:(甲醇:水=85%:15%)柱 温:30℃流 速:1ml/min在此条件下,大蒜油样品的HPLC色谱图中大蒜素吸收峰可与其他成分的吸收峰达到基线分离,适于大蒜素的含量测定。
2.2 检测波长的选择精密称取大蒜素对照品适量,加甲醇制成30.2μg/ml的对照品溶液。
以甲醇作为空白对照,在200～300nm波长范围扫描,检测其吸收曲线及最大吸收波长(λmax),结果发现其光谱图中最大吸收波长为210nm左右,表明大蒜素在210nm有最大吸收,但是靠近末端吸收,参照文献254nm。
大蒜中大蒜素含量简便测定法
式中： ｄ 为总稀释倍数； １４１５０ 为 ＮＴＢ 在 ４１２ ｎｍ； １ ｃｍ 光径摩尔消光系数。
试验中采用不同浓度的半胱氨酸、不同的反应 时间、反应温度以及缓冲体系 ｐＨ 值进行测定， 比较 上述不同指标对测定的影响。
表 １ 试样中锌的测定结果
试样
测得值／ （μｇ／ｇ）
加入量／ （μｇ／ｇ）
测得值／ （μｇ／ｇ）
回收率／％ ＲＳＤ／％
奶粉 ４７．８
４０．０ ３９．１
９７．８ ０．８９
火腿 ３０．５
３０．０ ３１．３
１０４
１．７７
牛肉 ２２．７
２０．０ １８．９
９４．５ ２．９４
参考文献： ［１］ 陈丙卿．营养与食品卫生学（第四版）［Ｍ］．北京：人民卫生出
大蒜→去皮洗净→捣成蒜泥→酶解→乙醇浸 提→离心→清液 １．３．２ 大蒜素含量测定［７］ 取 ０．５ ｍＬ １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ 半胱氨 酸 溶 液 ， 加 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＤＴＮＢ 溶 液 １ ｍＬ， 用 ５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．５ 的 Ｔｒｉｓ－ ＨＣｌ 缓 冲 溶 液 稀 释 至 ５．０ ｍＬ， ２６ ℃保 温 １５ ｍｉｎ， ４１２ ｎｍ 波 长 测 定 其 吸 光 值 Ａ０。 取 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ 半胱氨酸溶液 ０．５ ｍＬ， 加 ０．５ ｍＬ 适量
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碳化后在 ５５０ ℃的马弗炉灰化 ３ ｈ， 灰分用 ＨＣｌ 加热 溶解， 过滤、洗涤， 转入 １００ ｍＬ 容量瓶中， 水稀释 至刻度。取适量试液， 按实验方法测其 Ｚｎ２＋含量及回 收率， 结果见表 １。
保健食品中大蒜素的测定
保健食品中大蒜素的测定保健食品中大蒜素的测定随着人们健康意识的增强，保健食品在市面上越来越受到人们的关注。
大蒜素作为一种常见的保健成分，具有抗氧化、降血脂、抗菌等多种功效。
因此，保健食品中的大蒜素的含量的测定就变得异常重要。
一、大蒜素的基本知识大蒜素是指大蒜中的有效成分，其主要的组成成分为亚硫酸化合物，其中以S-烯丙基半胱氨酸（alliin）和其分解产物S-烯丙基半胱氨酸（alli，酚烷二烯磺酸）为大蒜素的主要成分。
大蒜素有抗氧化、降血脂、抗菌等多种功效。
近年来，大蒜素被广泛应用于食品保健品、药物、化妆品和口腔用药等领域。
二、保健食品中大蒜素的检测方法由于大蒜素的存在形式和作用方式的差异，其检定方法也必然存在差异。
传统的大蒜素检测方法有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱（GC）、原子荧光光谱分析法等。
HPLC法是检测保健食品中大蒜素含量较为常用的方法，通常采用反相色谱柱进行分析。
首先将保健食品中的大蒜素提取出来，然后用HPLC进行检测。
该方法具有准确度高、重复性好、分离效果好等优点。
GC法即为气相色谱法，该法通过升温使分离出来的大蒜素挥发出来，通过光电离的方法对气相进行检测。
该方法需要严格控制温度和时间，分析时间较长，并且只能检测到有挥发性的大蒜素分子。
但该方法在实验室中广泛使用，其分离效果好、适合于精密分析等等。
原子荧光光谱分析法通过检测样品中各种元素的荧光信号来得出样品中大蒜素的含量。
该方法具有快速、精确、灵敏等特点，但需要设备和条件高，技术要求也更高。
三、大蒜素的其他检测方法除了传统的HPLC、GC、原子荧光光谱分析法之外，近年来还出现了一些新型的大蒜素检测方法。
例如：1. 生化分析法：生化分析法是通过对大蒜素降解产物的检测来判断大蒜素含量。
该方法具有提取条件简单、操作简单等优点。
2. 纳米材料技术：研究发现，大蒜素可以与金纳米颗粒等纳米材料形成稳定的复合物，使得其在检测中更加敏感。
这一技术具有灵敏度高、检测结果快速等特点。
保健食品中大蒜素色谱检测方法的研究
保健食品中大蒜素色谱检测方法的研究徐丽红;王建清;张巧艳;李晓敏;邱承海;袁利文【摘要】以固体类、液体类、半固体类3类保健食品为研究对象,建立了气相色谱法测定保健食品中大蒜素的主要功效成分二烯丙基三硫醚(DATS)、二烯丙基二硫醚(DADS)含量的检测方法.考察了不同提取溶剂、提取方式、提取温度、提取时间的影响,并对3类保健食品样品进行高低两水平的加标回收实验.试样以丙酮水溶液(体积比8 : 2 )恒温水浴(超声)提取,经PEG 20M色谱柱(30 m×0.32 mm× 0.5 μm)分离,氢火焰离子化检测器(FID)测定,内标法计算含量.DATS与DADS的检出限分别为5.0、1.5 mg/kg,加标回收率分别为91% ～109%、91% ～108%.重复性RSD为2.6% ～3.1%,再现性RSD为4.1% ～8.4%.将该法与HPLC相比较,结果无显著性差异.该方法简便快速,结果准确可靠,适用于多种保健食品中大蒜素含量的检测.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2010(029)008【总页数】5页(P802-806)【关键词】大蒜素;气相色谱法;氢火焰离子化检测器(FID);保健食品【作者】徐丽红;王建清;张巧艳;李晓敏;邱承海;袁利文【作者单位】农业部农产品质量监督检验测试中心,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江,杭州,310021;农业部农产品质量监督检验测试中心,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江,杭州,310021;农业部农产品质量监督检验测试中心,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江,杭州,310021;完美(中国)日用品有限公司,广东,中山,528402;完美(中国)日用品有限公司,广东,中山,528402;完美(中国)日用品有限公司,广东,中山,528402【正文语种】中文【中图分类】O657.71;S633.4大蒜素是大蒜的活性成分,具有抗菌、消炎、抗病毒、降血压、抗动脉粥样硬化、抗癌、抗氧化、提高机体免疫等功效[1-3],其主要成分为有机硫醚类化合物,其中二烯丙基三硫醚 (DATS)、二烯丙基二硫醚 (DADS)是最主要的活性成分。
2006G_CMS法检测保健食品_大蒜油中大蒜素_付松
[作者简介]付松(1955-),女,学士,主任技师,主要从事食品卫生理化检验研究。
【化学测定方法】GC/M S法检测保健食品)大蒜油中大蒜素付松,谢碧俊(四川省疾病预防控制中心,成都610031)[摘要]目的:建立大蒜油中大蒜素的GC/M S分析方法。
方法:样品用正己烷溶解定容后直接进样,大蒜素经HP-FFAP石英毛细管柱分离,用气相色谱-质谱联用仪(G C-M S)进行定性、定量分析。
结果:大蒜素浓度在01050~ 2100mg/m l范围内,线性关系良好,相关系数r=019990;高、中、低3种浓度的加标样品,平均回收率分别为103%, 9511%,100%;相对标准偏差(RSD)分别为2183%,1194%,2109%;本方法最低检出限为01005g/100g。
结论:本方法简便快速,结果准确可靠,适用于大蒜油中大蒜素的检测。
[关键词]大蒜素;GC/M S分析;保健食品[中图分类号]O65717+1[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(2006)12-1461-02大蒜素(三硫二丙烯,C6H10S3)是大蒜类保健食品的主要功效成分,它具有抗菌、抗氧化、降血脂、预防动脉硬化、提高免疫力等作用。
大蒜素含量已成为评价大蒜类保健食品功效成分的重要指标。
大蒜素的含量测定有重量法[1]、滴定法[2]、气相色谱法[3]、液相色谱法[4]、气相色谱-质谱法[5]等。
重量法和滴定法操作繁琐、费时,灵敏度低,准确性差;后3种方法则简便、快速、灵敏,气相色谱法和液相色谱法均依据峰的保留时间进行定性,而气相色谱-质谱法则依据物质结构特征进行定性,定性、定量准确可靠。
通过实验,建立了大蒜油中大蒜素的GC/M S分析方法,本方法简便、快速、灵敏、准确,用于保健食品大蒜油的检测,取得令人满意的结果。
1材料与方法111仪器与试剂HP GC6890/M S5973型气相色谱-质谱联用仪;大蒜素标准品(纯度9912%):用正己烷(分析纯)配制浓度为5100m g/m l的大蒜素标准储备液,置冰箱冷冻室(-18e)保存。
饲料添加剂(大蒜素)相对密度检测方法的探讨
１ ． ２ ． ３ 测 定步骤 将 相对 密度计 洗净 擦干 ，缓缓 放人 盛
有大 约１ ０ ０ ｍ ｌ 试样的 １ ０ ０ ｍ ｌ 量筒 中 ， 勿使相对 密度计 碰及量
筒 四周及 底部 ，将其 放人 ２ Ｏ ℃的冷藏 箱 内至少２ ｈ ，使 试 样 温度保 持在 ２ ０ ℃ ，待其 静止后 ，再 轻轻 按下 少许 ，然 后 待其 自然上 升 ，静 止并 无气 泡 冒出后 ，从水平 位 置观 察与液 面相交处 的刻度 ，即为试样的相对密度 。
。式 中 ：ｘ （ ２ ｏ ｏ ｃ ） 一试样 的相对 密度 ； ｍ一
试 样 的质量 ，单位为 只 ；ｌ Ｏ 一试 样定容体 积 ，单位 为ｍ ｌ ；
０ ． ９ ９ ８ ２ 一水 在２ ０ ￣ Ｃ时的密度 ，单位为ｇ ／ ｍｌ 。
１ ． ２ 比 重 计 法
１ ． ２ ． １ 原 理 比重计 浮在液 体 中 ，其本 身 的重力 跟它 排
准误 不 大于 ０ ． ０ ０ ０ ５ ，绝 对差 值 不大 于０ ． ０ ０ １ 。（ ４）由检测
大 蒜 素是 近年 来 发 展 起 来 的一 种 多 功 能 饲料 添 加 剂 ，以其作 用广 泛 、效 果显 著 、无 残 留 、抗 菌 、消炎 、 抗病 毒 、无 抗 药 性 、降血 压 、抗 动脉 粥 样 硬 化 、抗 氧 化 、提高 机体 免疫力 、降低 成本 和刺 激食 欲等优 点而 备
受养 殖户 和饲料 厂家 的青 睐 。 目前 ，大蒜 素相对 密度 的 研究 主要 在食 品和工 业检测 领域 ，饲 料添 加剂 大蒜索 没
数 据可 见 ， 比重计 法 检测结 果误 差较 小 。两种 方法 测定 结果 的绝 对差值 不大 于０ ． ０ ０ ３ 。两 种好方 法都 可 以用 于大
大蒜素检测方法
大蒜素研究进展21.GC及GC-MS联用最低检测限0.2ng 为避免被测物在高温条件下分解，柱温不易过高，适宜温度为70℃；GC-MS可以测出大蒜油中各种组分及含量最低检测限为0.005g/100g2. 高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法克服了气相色谱法中温度高, 不稳定的缺点, 柱温可控制在较低温度, 大蒜素的检测一般采用反相高效液相色谱法。
测定波长为240 nm。
该方法最低检测浓度为0. 18 g /mL3.定硫法定硫法的原理[ 16] 是大蒜中蒜氨酸的亚砜基和大蒜素的硫代亚砜基被浓硝酸氧化成硫酸离子, 与氯化钡反应形成硫酸钡沉淀, 根据硫酸钡的重量换算出大蒜素的含量。
在定硫法中, 氧化剂的用量, 酸度和沉淀剂用量等因素都会对测定结果产生影响。
氧化剂用量在2. 0~ 5. 0 mL之间较好, 氧化剂量过多或过少都会使测定结果偏低, 测定溶液的酸度值在2. 0~ 3. 0之间最佳, 沉淀剂用量在5~ 30 mL之间对测定结果影响较小。
在大蒜素保健食品中常用该方法进行大蒜素含量测定4.分光光度法在一定温度下大蒜素在蒜酶的作用下水解产生丙酮酸, 可以利用测定丙酮酸含量的方法测定大蒜中大蒜素的含量。
丙酮酸可以和2, 4- 二硝基苯肼作用生成丙酮酸- 2, 4 - 二硝基苯腙沉淀。
利用分光光度计对苯腙进行比色分析, 测出消光值D, 在D- C 标准曲线上找出对应的苯腙浓度, 从而换算出大蒜素的含量。
除此之外, 还可以通过测定半胱氨酸的含量从而计算出大蒜素含量。
其原理是基于一分子的大蒜素会与两分子的半胱氨酸发生反应, 可以通过过量的半胱氨酸与大蒜素反应, 用5, 5 -'二硫代双( 2- 硝基苯甲酸) 法测定反应前后半胱氨酸的量, 根据半胱氨酸减少量计算大蒜素含量。
结果为大蒜素平均含量0. 270 mmol/100g。
5. 其他方法除以上方法外, 还有生物检测法, 薄层扫描法, 硝酸汞沉淀法, 适用于定性分析。
保健食品中大蒜素的测定方法验证
保健食品中大蒜素的测定方法验证作者：刘昶李宁李镇宏来源：《健康周刊》2018年第04期【摘要】根据《保健食品检验与评价技术规范》2003版，通过GC-FID进行测定，对大蒜素的测定项目进行系统适用性试验、精密度试验、检测限、定量限、线性关系与线性范围考察、重复性试验、准确度试验（加样回收试验）的验证，通过重复性试验和回收率试验验证检验过程的回收率和重现性，并确定大蒜素的线性范围、定量限，用以确定GC-FID法的适用性及可控性。
【关键词】保健食品、大蒜素、方法学验证引言大蒜素（大蒜新素、garlicin）为三硫代烯丙醚类化合物，天然存在于百合科植物大蒜的鳞茎中。
对多种革兰氏阳性和阴性菌均有抗菌作用，对骨髓移植者并发巨细胞病毒感染有明显防治作用。
尚有降低血胆固醇、甘油三酯和脂蛋白以及抗血小板凝集、抗肿瘤作用，成为近年来较受关注的保健食品功效性成分和特征成分。
因此，对于第三方检测机构，以大蒜素等功效成分为例的保健食品的检测中蕴藏着大量的商机。
1 试验方法1.1 色谱条件HP-5柱（30m*250μm*0.25μm），程序升温：初始温度为50℃，以30℃/min的速率升至160℃，保持3分钟，以100℃/min的速率升至230℃，保持3分钟。
进样口温度180℃，分流比10：1；检测器温度180℃。
1.2 大蒜素标准液（1）储备液：准确称取大蒜素标准品适量，用正己烷稀釋，使得溶液浓度为10mg/mL。
（2）工作曲线：取标准储备液，用正己烷配制稀释成浓度为0.02，0.05，0.10，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00mg/mL的标准工作溶液。
1.3 供试品溶液称取1.0g样品（以大蒜软胶囊为例），于10mL量瓶中，加入5mL正己烷，超声提取30min，用正己烷定容，振摇后静置，经0.45μm滤膜过滤后待测。
2 结果与讨论2.1 精密度试验分别精密吸取大蒜素标准工作溶液的最高点和最低点各1μL，按测定方法重复进样6次，测定峰面积值。
保健食品中大蒜素的测定
保健食品中大蒜素的测定引言保健食品是一类具有特定成效的食品，以促进人体健康为目的。
大蒜作为一种常见的保健食品原料，含有丰富的大蒜素。
大蒜素是一种硫化物，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种保健成效，因此成为保健食品研究的重点成分之一。
本文将介绍保健食品中大蒜素的测定方法。
测定方法高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的测定大蒜素含量的方法。
其原理是利用高效液相色谱仪对样品中的大蒜素进行别离和定量。
下面是测定大蒜素含量的步骤：乙醇等，经过振荡和离心等步骤，得到待测样品溶液。
2.色谱条件设置：根据实验需要，选择适当的色谱柱和流动相，设置适宜的流速和检测波长。
3.样品注射：将待测样品溶液注射到高效液相色谱仪中，进行分析。
4.数据分析：根据色谱仪的输出结果，通过比拟样品峰面积与标准曲线的关系，计算出样品中大蒜素的含量。
毛细管电泳法毛细管电泳法是另一种常用的测定大蒜素含量的方法。
其原理是利用毛细管电泳仪对样品中的大蒜素进行别离和定量。
以下是该方法的步骤：乙醇等，经过振荡和离心等步骤，得到待测样品溶液。
2.电泳系统设置：调整毛细管电泳仪的电泳条件，包括电压、注射量、检测波长等。
3.样品注射：将待测样品溶液注射到毛细管电泳仪中，进行分析。
4.数据分析：根据毛细管电泳仪的输出结果，通过比拟样品峰面积与标准曲线的关系，计算出样品中大蒜素的含量。
结论保健食品中大蒜素的测定是对其功能成分进行定量分析的重要手段。
本文介绍了两种常用的测定方法，即高效液相色谱法和毛细管电泳法。
通过这些测定方法，可以准确、快速地确定保健食品中大蒜素的含量，为保健食品的研发和质量控制提供科学依据。
以上是对保健食品中大蒜素测定的简要介绍。
在实际操作中，还需要根据具体情况对方法进行优化和改良，以提高分析结果的准确性和灵敏度。
相信随着科技的进步和方法的不断改良，保健食品中大蒜素的测定方法将会变得更加简便、快速和可靠。
饲料添加剂大蒜素编制说明
“饲料添加剂大蒜素”编制说明一、任务来源及工作简况1、任务来源本标准是国家标准化管理委员会2014年下达的第二批国家标准制修订计划，编号为20141772-Q-469，项目名称为《饲料添加剂大蒜素》。
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。
2、制定本标准的必要性大蒜素是近年来发展起来的一种多功能饲料添加剂，以其作用广泛、效果显著、无残留、抗菌、消炎、抗病毒、无抗药性、降血压、抗动脉粥样硬化、抗氧化、提高机体免疫力、降低成本和刺激食欲等优点而备受养殖户和饲料厂家的青睐。
天然大蒜素油是由大蒜经过清洗、捣碎、提取过滤、蒸馏等工艺得到的产品。
大蒜转化为大蒜素油的成本很高，转化率不到1%。
当前饲料工业中使用的饲料添加剂大蒜素，一般是由人工合成的液体，饲料添加剂大蒜素（粉剂）是由饲料添加剂大蒜素被一定的载体吸附形成的，多为呈流动性的细小粉末。
饲料添加剂大蒜素是单质硫（硫磺）、硫化钠和氯丙烯为原料化学合成的以二烯丙基一硫醚、二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚和二烯丙基四硫醚为主要成分的硫醚类饲料添加剂大蒜素产品。
二烯丙基一硫醚在心脑血管疾病的防治上有良好的效果。
二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚性质稳定，杀菌力强。
二烯丙基四硫醚不稳定，久置会释放出硫和其它不明物质。
二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚之和约占大蒜素总含量的80%以上。
习惯上常把二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚称为大蒜素。
目前，大蒜素的研究主要在食品和农业检测领域。
大蒜素的主要检测方法有重量法、滴定法、分光光度法、气相色谱法、气相色谱-质谱法、高效液相色谱法等。
前三种方法操作繁琐，费时，灵敏度低，准确性差。
后三种方法相对简便、快捷。
气相色谱法、气相色谱-质谱法和高效液相色谱法三种方法相比较而言，目前文献中最常用的是气相色谱法。
一是因为气相色谱-质谱法仪器昂贵，操作要求高，二是因为二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚都没有紫外吸收，使用高效液相色谱法测定，检测灵敏度相对较差。
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大蒜素
【含量测定】硫酸钡重量法
（一）测定原理以浓硝酸将大蒜素中所含硫氧化成硫酸根，再与氯化钡作用生成硫酸钡沉淀，用重量法确定大蒜素中硫的含量。
（二）仪器（1）马福炉(2) 分析天平
（三）试剂（1）浓硝酸
（2）0.1%甲基橙指示剂
（3）15%氯化钡溶液
（4）10%氢氧化钠溶液
（5）1:1盐酸溶液
（四）操作
大蒜素粉剂精确称量大蒜素粉剂约0.8克，置于150 ml烧杯中，加入少许水润湿样品，分次加入浓硝酸10 ml，摇匀，等试样完全分解后置于50 ml容量瓶中加水定容，摇匀，以中速滤纸过滤，弃去最初5-10 ml滤液。
吸取试液20 ml于150 ml烧杯中，加0.1% 的甲基橙指示剂 3 滴，滴加10% 氢氧化钠溶液至红色，再用1:1 的盐酸滴至黄色,再多加 1 ml，于电炉上加热煮沸后,加入15% 氯化钡10ml,充分搅拌于90 ℃水浴中保湿 2 小时，用致密无灰滤纸过滤，以热水洗至无氯离子(以硝酸银溶液检验不混浊) 为止，沉淀连同滤纸置于已恒重的坩锅内，在电炉上碳化后,于马福炉中600 度灼烧30 分钟，取出于干燥器内冷却,称重。
[计算]
32.06
W ×——
233.29
S= ——————————×100%
20
G ×——× X
50
3 2 .0 6 ——硫（ S ）的分子量
2 3 3 . 2 9-------硫酸钡的分子量
W---------沉淀物重 (g)
G----称取样品重 (g)
X------ 为大蒜素原油的含硫量为 0 . 5 – 0 . 6。