药用大蒜油中大蒜素的含量测定

保健食品中大蒜素的测定

随着人们健康意识的增强，保健食品在市面上越来越受到人们的关注。大蒜素作为一种常见的保健成分，具有抗氧化、降血脂、抗菌等多种功效。因此，保健食品中的大蒜素的含量的测定就变得异常重要。

一、大蒜素的基本知识

大蒜素是指大蒜中的有效成分，其主要的组成成分为亚硫酸化合物，其中以S-烯丙基半胱氨酸（alliin）和其分解产物S-烯丙基半胱氨酸（alli，酚烷二烯磺酸）为大蒜素的主要成分。

大蒜素有抗氧化、降血脂、抗菌等多种功效。近年来，大蒜素被广泛应用于食品保健品、药物、化妆品和口腔用药等领域。

二、保健食品中大蒜素的检测方法

由于大蒜素的存在形式和作用方式的差异，其检定方法也必然存在差异。传统的大蒜素检测方法有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱（GC）、原子荧光光谱分析法等。

HPLC法是检测保健食品中大蒜素含量较为常用的方法，通常采用反相色谱柱进行分析。首先将保健食品中的大蒜素提取出来，然后用HPLC进行检测。该方法具有准确度高、重复性好、分离效果好等优点。 GC法即为气相色谱法，该法通过升温使分离出来的大蒜素挥发出来，通过光电离的方法对气相进行检测。该方法需要严格控制温度和时间，分析时间较长，并且只能检测到有挥发性的大蒜素分子。但该方法在实验室中广泛使用，其分离效果好、适合于精密分析等等。

原子荧光光谱分析法通过检测样品中各种元素的荧光信号来得出样品中大蒜素的含量。该方法具有快速、精确、灵敏等特点，但需要设备和条件高，技术要求也更高。

三、大蒜素的其他检测方法

除了传统的HPLC、GC、原子荧光光谱分析法之外，近年来还出现了一些新型的大蒜素检测方法。例如：

1. 生化分析法：生化分析法是通过对大蒜素降解产物的检测来判断大蒜素含量。该方法具有提取条件简单、操作简单等优点。

2. 纳米材料技术：研究发现，大蒜素可以与金纳米颗粒等纳米材料形成稳定的复合物，使得其在检测中更加敏感。这一技术具有灵敏度高、检测结果快速等特点。

大蒜素

1.大蒜素的提取工艺

1.1 提取方法大蒜素的提取方法主要有水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法、超临界萃取法及超声、微波辅助提取等。

1.1.1 水蒸气蒸馏法

其原理是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥发性的有机物质中( 大蒜油具有一定挥发性) , 使该有机物在低于100 ℃的温度下随水蒸气一起蒸馏出来, 再经进一步分离获得较纯物质。

本法的一般工艺流程为:大蒜去皮→洗净→加水捣碎→酶解→水蒸气蒸馏→油水分离→大蒜油孙淑爱[1]等探讨了蒸馏法提取大蒜油的适宜条件。按照大蒜油的生产步骤和影响因素, 选择大蒜的破碎粒径、蒜酶激活剂—亚铁离子的浓度、发酵温度和蒸馏提取时间这4 个因素, 在三水平下对大蒜油的产率进行比较。结果表明, 大蒜的破碎粒径为0.2 mm、亚铁离子的浓度为10

mmol/L、发酵温度在33 ℃、蒸馏提取时间为120 min 时, 大蒜油的产率最高, 为0.49 %。水蒸气蒸馏法具有设备简单, 成本低、稳定性好等特点, 是最常用的方法之一。但是因发酵和蒸馏温度相对较高, 蒜氨酸酶的活性下降, 大蒜素有损失, 使出油率较低。而且所得的蒜油有一股熟味, 不够清新。

1.1.2 溶剂萃取法大蒜油微溶于水, 易溶于乙醇、苯、乙醚等有机溶剂, 利用这一性质可以用有机溶剂将大蒜油浸提出来。该法得到的大蒜油与水蒸气蒸馏获得的大蒜油没有明显的区别。有机溶剂的选择是关键, 要求该溶剂对大蒜油的溶解性好, 浸提结束后易于分离,

沸点差异显著,不含其它不良气味和溶剂残留。

溶剂法的一般流程为:大蒜去皮→洗净→捣碎→酶解→溶剂萃取→蒸馏分离→回收溶剂→大蒜油陈彬[2]等研究了用乙醚萃取法提取大蒜中的有机硫化物, 采用正交试验法考察了操作条件对提取物得率的影响, 确定了影响产物得率的主要因素为酶解温度、酶解时间、酶解pH、加水量以及离心pH 值。确定的

高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量

韩贵芝;王文军;王芳

【摘要】[目的]通过有机萃取法中萃取剂的选择、用量和萃取时间等条件的优化处理,建立大蒜中大蒜素含量测定的分析方法.[方法]将新鲜大蒜捣碎、酶解后,分别用乙醇和乙酸乙酯作为萃取剂萃取得到大蒜素溶液.用高效液相色谱仪分析样品中大蒜素的含量,确定最佳萃取剂;通过对不同时间段提取物检测对比,确定最佳萃取时间.[结果]以乙醇作为萃取剂提取大蒜素,大蒜素的平均浓度可以达到28.85μg/mL,乙酸乙酯提取组中的大蒜素平均浓度为13.24 μg/mL;经对比分析,乙醇提取大蒜素的最佳萃取时间为3.0h.[结论]乙醇作为实验室常用的化学试剂具有低毒、无污染、高效的提取效果,可为医药、食品等实验室对大蒜素的提取开发和利用提供参考.

【期刊名称】《安徽农业科学》

【年(卷),期】2016(000)007

【总页数】3页(P57-58,72)

【关键词】乙醇;乙酸乙酯;大蒜素;萃取时间优化

【作者】韩贵芝;王文军;王芳

【作者单位】济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013;济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013;济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013

【正文语种】中文

【中图分类】S41-33 大蒜为百合科葱属植物，在我国有2 000多年的种植历史。大蒜属药食同源植物，其鳞茎中富含钙、铁、锌、锗等元素以及多种必需氨基酸[1-5]，具有较高的食用和药用价值，能有效防治高血压等疾病。在传统医学中，大蒜也是一味中草药，能够激发免疫功能，诱生出干扰素，抑制生成肿瘤坏死因子，降低致癌物的作用，具有提高人体免疫功能的重要作用[6]。大蒜中的有机含硫化合物——大蒜素，其化学名称是二烯丙基三硫化物(DATS)。新鲜完整的大蒜中并不含大蒜素，只含有其前体物质——蒜氨酸。蒜氨酸存于大蒜的细胞质中，但当大蒜的细胞破碎后，液泡内的内源蒜酶被释放并与蒜氨酸接触，经酶解生成大蒜素。现代医学研究得出，大蒜素的药理作用包含以下几种：抗微生物、抗肿瘤、抗寄生虫、抗溃疡、抗衰老、降血压、降血脂、提高机体免疫力等[7-8]。大蒜素使用安全，不良反应少，具有广阔的应用前景。因此，大蒜素的开发和研究越来越受到人们的重视。

保健食品中大蒜素的测定 2

保健食品中大蒜素的测定

引言

保健食品是一类具有特定成效的食品，以促进人体健康为目的。大蒜作为一种常见的保健食品原料，含有丰富的大蒜素。大蒜素是一种硫化物，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种保健成效，因此成为保健食品研究的重点成分之一。本文将介绍保健食品中大蒜素的测定方法。

测定方法

高效液相色谱法

高效液相色谱法是一种常用的测定大蒜素含量的方法。其原理是利用高效液相色谱仪对样品中的大蒜素进行别离和定量。下面是测定大蒜素含量的步骤： 1. 样品制备：将保健食品样品参加适量的溶剂中，如甲醇、乙醇等，经过振荡和离心等步骤，得到待测样品溶液。

2. 色谱条件设置：根据实验需要，选择适当的色谱柱和流动相，设置适宜的流速和检测波长。

3. 样品注射：将待测样品溶液注射到高效液相色谱仪中，进行分析。

4. 数据分析：根据色谱仪的输出结果，通过比拟样品峰面积与标准曲线的关系，计算出样品中大蒜素的含量。

毛细管电泳法

毛细管电泳法是另一种常用的测定大蒜素含量的方法。其原理是利用毛细管电泳仪对样品中的大蒜素进行别离和定量。以下是该方法的步骤： 1. 样品制备：将保健食品样品参加适量的溶剂中，如甲醇、乙醇等，经过振荡和离心等步骤，得到待测样品溶液。

2. 电泳系统设置：调整毛细管电泳仪的电泳条件，包括电压、注射量、检测波长等。

3. 样品注射：将待测样品溶液注射到毛细管电泳仪中，进行分析。

4. 数据分析：根据毛细管电泳仪的输出结果，通过比拟样品峰面积与标准曲线的关系，计算出样品中大蒜素的含量。

结论

保健食品中大蒜素的测定是对其功能成分进行定量分析的重要手段。本文介绍了两种常用的测定方法，即高效液相色谱法和毛细管电泳法。通过这些测定方法，可以准确、快速地确定保健食品中大蒜素的含量，为保健食品的研发和质量控制提供科学依据。以上是对保健食品中大蒜素测定的简要介绍。在实际操作中，还需要根据具体情况对方法进行优化和改良，以提高分析结果的准确性和灵敏度。相信随着科技的进步和方法的不断改良，保健食品中大蒜素的测定方法将会变得更加简便、快速和可靠。

保健食品中大蒜素的测定 3

附件：

一、保健食品中大蒜素的测定

1 范围

本方法适用于以大蒜及其制品为原料的保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，Ｃ6H１0S3）的含量测定。

本方法最低检出浓度为0.04３0mg/mL;取１０0mg试样，提取定容5.0ｍL时，试样中大蒜素最低检出质量浓度为０.２0g/１00g。

本方法最佳线性范围： 0.320mg/mL～3.0０ mg/ｍL。

2 原理：根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取,用气相色谱仪分析,采用外标法定量。

3 试剂

除特殊说明,所用试剂均为分析纯。

3.1 无水乙醇

3.2 正己烷

3.3 标准溶液:称取0.1000g标准品,置于１0mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度，该溶液中含大蒜素浓度为１0.０mg/mＬ。此溶液可在冰箱中保存七天。取该溶液１.0ｍＬ,置于10mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,此溶液含大蒜素浓度为1.０mg/mL。

4 仪器

4.1 气相色谱仪:附氢火焰(FID)检测器

４．2 数据处理机或积分仪

4．3 分析天平:万分之一

4.4 超声清洗机

4.5 离心机:３000r/miｎ

5 分析方法

5．１试样提取

5.1.1 固体试样:称取试样适量(相当于含大蒜素5ｍg，精确至0.00１g),加无水乙醇适量,密塞,超声70miｎ，取出冷却，加正己烷定容（调节大蒜素含量约为1mg/mL）,振摇，静置分层后，取上层溶液进样。

５.1.２液体试样吸取试样适量(相当于含大蒜素5mg，精确至0.0０1ｇ）,置于分液漏斗中，加5mL正己烷振摇提取1min,静置(或离心)分层后,取上层溶液进样。

5.2 气相色谱参考条件

5.2.1 色谱柱：HP-5(30m×０.25mｍ)

5.2.2 柱箱温度：100℃（3mｉｎ)min)10(℃200℃150℃/min20℃/min10

5．2.3 进样口温度:22０℃

大蒜成分检测报告内容

1. 引言

大蒜作为一种常见食材和药材，具有丰富的营养价值和较强的药用功能。为了更好地了解大蒜的成分组成，本报告通过对大蒜样品进行检测和分析，以便详细了解大蒜中的主要成分及其含量。

2. 实验方法

2.1 样品准备

从市场上购买了10个新鲜、外观完好的大蒜，去掉外层薄皮并洗净，待用于后续检测。

2.2 成分检测

将洗净的大蒜样品切碎并使用溶剂提取，随后采用以下方法进行大蒜成分的检测：

1. 按照经典方法使用UV-Vis分光光度计测量大蒜中的总多酚含量，以评估其抗氧化活性；

2. 使用高效液相色谱仪（HPLC）进行主要活性成分（例如大蒜素、大蒜酚等）的检测。

3. 实验结果

3.1 大蒜中的总多酚含量使用UV-Vis分光光度计对提取的大蒜样品进行分析，测得其总多酚含量为10.5 ± 0.2 mg GAE/g 大蒜（以干重计）。多酚有助于抗氧化，对人体具有多种保健作用。

3.2 大蒜中的主要活性成分

使用HPLC对大蒜样品进行分析，测得大蒜中含有以下主要活性成分：

- 大蒜素：浓度为120 ± 5 μg/g 大蒜；

- 大蒜酚：浓度为80 ± 3 μg/g 大蒜；

- 大蒜甲硫醇：浓度为60 ± 2 μg/g 大蒜。

4. 讨论

本次实验结果表明，大蒜中的总多酚含量为10.5 ± 0.2 mg GAE/g

大蒜，表明大蒜具有较强的抗氧化性能，有助于清除自由基，减少氧化损伤。此外，大蒜中的主要活性成分包括大蒜素、大蒜酚和大蒜甲硫醇，这些成分被广泛研究并证实具有抗菌、抗炎、降脂等多种药用功效。

然而，本次实验只针对10个样品进行了检测，样本数量较少，无法代表所有大蒜的成分含量。此外，由于实验条件的限制和技术手段的局限性，可能还有其他未检测到的成分存在于大蒜中。因此，后续的研究可以考虑增加样本数量和采用更多的检测方法，以获取更全面、准确的大蒜成分分析结果。 5. 结论

本次大蒜成分检测结果表明，大蒜中含有丰富的总多酚、大蒜素、大蒜酚和大蒜甲硫醇等活性成分。这些成分赋予大蒜抗氧化、抗菌、抗炎、降脂等多种药用功效。然而，本次实验结果仅代表测得样本的情况，还需要进一步研究来全面了解大蒜的成分组成及其有效成分的生物利用度，以指导大蒜的合理使用和开发利用。

药品大蒜油标准

大蒜一直以来被认为是一种具有抗菌、抗病毒等医疗作用的食品，而大蒜油则是一种从大蒜中提取出的精华物质，因其具有一定的药用价值，被广泛地用于医药科技领域。在中国，针对大蒜油的生产和销售，也已经出台了一系列的药品大蒜油标准，以确保其质量和安全性符合国家标准。

首先，药品大蒜油标准对于大蒜油的提取方法、石油醚提取量等方面做出了明确规定。其中，大蒜油的提取方法可以采用各类适宜的技术手段进行，但必须保持操作简单、易于掌握的原则。同时，大蒜油中的石油醚提取量应控制在一定范围内，以保证其安全性。

其次，药品大蒜油标准对大蒜油中有害成分的限量也进行了明确规定。例如，大蒜油中的二羟化苯醌含量应不超过20ppm，汞含量不超过0.05mg/kg等。这些限量值的制定，保证了大蒜油的质量，同时也保障了人体健康。

此外，药品大蒜油标准在质量控制方面也有严格的要求。大蒜油的检测应符合国家标准规定，并应定期对其进行质量监测，以确保大蒜油品质的稳定性和可追溯性。

总之，药品大蒜油标准的出台，保障了大蒜油在医药科技领域的质量和安全。同时，这些标准的使用不仅有利于提高药品大蒜油的质量和安全性，也对于整个大蒜油市场的健康发展有着积极的作用。因此，我们应该充分认识到这些标准的重要性，并在生产和销售过程中，严格遵照标准要求，不断推进大蒜油产业的升级发展。

大蒜素的介绍

大蒜 ( A lli um sa ti vum L)为单叶子植物百合科葱属植物蒜的

鳞茎, 在我国已有 2000多年的种植历史, 我国是世界上生产大

蒜的主要国家之一, 目前我国大蒜种植面积约占世界的 40 % -

50%,山东金乡、苍山、河南中牟、江苏徐州等地已成为我国重要

的大蒜出口基地, 年出口大蒜约 25万吨。大蒜营养丰富, 每

100g克新鲜大蒜中含: 蛋白质 4 1 4g、脂肪 012g、碳水化合物 23g、

钙 5mg、铁 0 、 4m g、硫胺素 0 、24mg、核黄素 0 、03m g、烟酸 0 、9mg、

维生素 C 3m g、粗纤维 0 、7g、大蒜油 0 、2g ,还含有 30多种挥发性

含硫化合物。

大蒜素 ( A lli m i n)又称大蒜油, 是从大蒜球茎中分离出的一

种化合物, 具有强烈的辛辣刺激味。大蒜素是大蒜的主要活性

成分, 具有抗菌消炎、降血压、降血脂、抑制血小板聚集、减少冠

状动脉硬化、抑制体内 N - 亚硝胺合成, 防癌治癌、抗病毒等多

种功效。大蒜素可用于医药, 对呼吸道、消化道、脑膜炎、肠道疾

病, 有效率达 80% - 95%;还可用于兽药、农药和食品添加剂等。

近年来, 大蒜素在养殖业中已被开发利用, 饲料中大蒜素可作为

杀菌剂、杀虫剂等。研究发现,这些功能和大蒜中的含硫氨基酸

及其分解后形成的一系列含硫化合物有关, 目前对大蒜素的提

取和应用已成为大蒜研究的热点。

大蒜素的提取

目前, 大蒜素的提取工艺主要有: 水蒸气蒸馏法、溶剂萃取

法、超临界 CO2萃取法、真空微波辅助萃取法等。

1、水蒸气蒸馏法

其原理是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥

发性的有机物质中 (大蒜油具有一定挥发性 ) ,使该有机物在低

于 100e 的温度下随水蒸气一起蒸馏出来, 再经进一步分离获得

HPLC测定独头蒜和大蒜中的蒜氨酸和大蒜素

科研动态　

ＫｅｙａｎｄＯｎｇｔａ　

ＨＰＬＣ测定独头蒜和大蒜中的蒜氨酸和大蒜素　

谭志静　

【摘　要】　为准确、快速、方便地测定大蒜中的蒜氨酸和大蒜素，采用反相高效液相６ｇｔ￣（Ｒｐ—ＨＰＬＣ）．Ｗａｔｅｒｓ￥ｙｒ１２３ｒｌｅｔｒｙ　

Ｃ１８（４．６ｍｍ　ｉ．ｄ．　１５０ｍｍ，５ｐ，ｍ）色谱柱，蒜氨酸检测波长２１４　ＦＬｒｌＯ、大蒜素检测波长２５４／／１＂／１，流动相：甲醇：￣ｇ（３０：７０）．流速　０．８ｍｌ／ｍｉｎ，结果蒜氨酸在Ｏ．Ｏ１￣０．３５ｍｇ／ｍｌ，呈良好的线性关系，相关系数＝９９．６，平均回收率（９９．８５＋１．５３）％。　

大蒜为百合科葱属植物，新鲜大蒜每１００克含水分７０　

克、糖７．２克、蛋白质４．４克、脂肪０＿３克、钙５毫克、磷４４毫　

克、铁０．４毫克、维生索Ｂ１０．２４毫克、维生素Ｂ２０．０３毫克、尼　

克酸０．９毫克、维生素Ｃ　３毫克，此外还含有镁及多种微量　

元素等。大蒜含有丰富的营养物质且具有抗肿瘤、保护心血　

管系统、降低血糖等功效【１】。大蒜之所以具有广泛的药理作　

用，原因在于大蒜含有的生物活性物质——含硫化合物。蒜　

氨酸（Ｓ一烯丙基一Ｉ，＿半胱氨酸，Ａｌｌｉｉｎ）是大蒜中的一种主要含　

硫氨基酸。今采用高效液相色谱法对独头蒜和大蒜中蒜氨酸　

和大蒜素的含量进行测定，为大蒜的应用提供科学依据。　

一、材料与方法　

１．原料　

新鲜独头蒜和大蒜，购于本地市场。　

２．主要仪器　

Ｗａｔｅｒｓ１５２５高效液相色谱仪，２４８７双波长紫外检测器，　

Ｂｒｅｅｚｅ色谱数据处理工作站，微波炉，高速冷冻离心机。组织　

捣碎机。　

３．主要试剂　蒜氨酸，大蒜素（纯度９０％），Ｈｕｋａ公司。甲醇色谱纯，水　

为超纯水，其余试剂均为分析纯。　

４．蒜氨酸和大蒜素标准溶液的配制　

（１）精密称取蒜氨酸５毫克，定容至５毫升，配制成浓度　

为９００１ｘｇ／毫升的蒜氨酸溶液。再稀释成４００、３００、２２５、１８０、　

１５０、９０１ｘｇ／ｍ毫升的标准溶液。　

高效液相色谱法测定大蒜素片中DADS和DATS的含量

116 No.2 Mar.2 21分析仪器 AnalyticalInstrumentation2 21 年第2 期

高效液相色谱法测定大蒜素片中

DADS和DATS的含量

李天昊1李若琦1黄雪婷⑵ 陈梅兰

"1.浙江树人大学生物与环境工程学院，杭州310015$.江苏常州大学，常州213164)

摘要：建立并使用高效液相色谱法测定药用大蒜素片中二烯丙基二硫醚(Diallyl disulfide,DADS)以及二烯丙基三硫醚(Diallyl trisulfide,DATS)的含量。实验使用H ypesiL ODS C18柱进行色谱分离，流动相由甲醇/水/ 甲酸组成，比例为85 > 15 > 0. 1'测定波长是225nm,流速为1. 0 mg/L。实验结果表明，DADS在1. 0〜16. 0 mg/L 浓度的范围内和峰面积有较好的线性关系，R2 = 0 . 9991 O DATS在1〜4 0 mg/L浓度的范围内和峰面积有较好的线性关系，R2 = 0 . 9994O DADS的回收率在91. 2 0 %〜98 8 0 % ,DATS的回收率在94. 74%〜1 0 6. 39%。关键词：大蒜素二烯丙基二硫醚二烯丙基三硫醚高效液相色谱法(HPLC)DOI：1 0 . 3969/j. issn. 1 0 0 1 — 232x. 2 021. 0 2. 0 26

Determination of DADS and DATS in highly concentrated allicin tablets by HPLC. Li Tianhao1 , Li Ruo-

qi 1 , Huang Xueting2 , Chen Meilan1% (1. College of Biological and Environmental Engineering , Zhejiang Shuren University , Hangzhou 31 0 0 15 , China ; 2. College of P etro chemi cal , Jiangsu Changzhou