大蒜中大蒜素含量简便测定法
大蒜中大蒜素含量简便测定法
式中： ｄ 为总稀释倍数； １４１５０ 为 ＮＴＢ 在 ４１２ ｎｍ； １ ｃｍ 光径摩尔消光系数。
试验中采用不同浓度的半胱氨酸、不同的反应 时间、反应温度以及缓冲体系 ｐＨ 值进行测定， 比较 上述不同指标对测定的影响。
表 １ 试样中锌的测定结果
试样
测得值／ （μｇ／ｇ）
加入量／ （μｇ／ｇ）
测得值／ （μｇ／ｇ）
回收率／％ ＲＳＤ／％
奶粉 ４７．８
４０．０ ３９．１
９７．８ ０．８９
火腿 ３０．５
３０．０ ３１．３
１０４
１．７７
牛肉 ２２．７
２０．０ １８．９
９４．５ ２．９４
参考文献： ［１］ 陈丙卿．营养与食品卫生学（第四版）［Ｍ］．北京：人民卫生出
大蒜→去皮洗净→捣成蒜泥→酶解→乙醇浸 提→离心→清液 １．３．２ 大蒜素含量测定［７］ 取 ０．５ ｍＬ １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ 半胱氨 酸 溶 液 ， 加 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＤＴＮＢ 溶 液 １ ｍＬ， 用 ５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．５ 的 Ｔｒｉｓ－ ＨＣｌ 缓 冲 溶 液 稀 释 至 ５．０ ｍＬ， ２６ ℃保 温 １５ ｍｉｎ， ４１２ ｎｍ 波 长 测 定 其 吸 光 值 Ａ０。 取 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ 半胱氨酸溶液 ０．５ ｍＬ， 加 ０．５ ｍＬ 适量
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碳化后在 ５５０ ℃的马弗炉灰化 ３ ｈ， 灰分用 ＨＣｌ 加热 溶解， 过滤、洗涤， 转入 １００ ｍＬ 容量瓶中， 水稀释 至刻度。取适量试液， 按实验方法测其 Ｚｎ２＋含量及回 收率， 结果见表 １。
高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量
高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量韩贵芝;王文军;王芳【摘要】[目的]通过有机萃取法中萃取剂的选择、用量和萃取时间等条件的优化处理,建立大蒜中大蒜素含量测定的分析方法.[方法]将新鲜大蒜捣碎、酶解后,分别用乙醇和乙酸乙酯作为萃取剂萃取得到大蒜素溶液.用高效液相色谱仪分析样品中大蒜素的含量,确定最佳萃取剂;通过对不同时间段提取物检测对比,确定最佳萃取时间.[结果]以乙醇作为萃取剂提取大蒜素,大蒜素的平均浓度可以达到28.85μg/mL,乙酸乙酯提取组中的大蒜素平均浓度为13.24 μg/mL;经对比分析,乙醇提取大蒜素的最佳萃取时间为3.0h.[结论]乙醇作为实验室常用的化学试剂具有低毒、无污染、高效的提取效果,可为医药、食品等实验室对大蒜素的提取开发和利用提供参考.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(000)007【总页数】3页(P57-58,72)【关键词】乙醇;乙酸乙酯;大蒜素;萃取时间优化【作者】韩贵芝;王文军;王芳【作者单位】济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013;济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013;济宁医学院公共卫生学院,山东济宁272013【正文语种】中文【中图分类】S41-33大蒜为百合科葱属植物，在我国有2 000多年的种植历史。
大蒜属药食同源植物，其鳞茎中富含钙、铁、锌、锗等元素以及多种必需氨基酸[1-5]，具有较高的食用和药用价值，能有效防治高血压等疾病。
在传统医学中，大蒜也是一味中草药，能够激发免疫功能，诱生出干扰素，抑制生成肿瘤坏死因子，降低致癌物的作用，具有提高人体免疫功能的重要作用[6]。
大蒜中的有机含硫化合物——大蒜素，其化学名称是二烯丙基三硫化物(DATS)。
新鲜完整的大蒜中并不含大蒜素，只含有其前体物质——蒜氨酸。
蒜氨酸存于大蒜的细胞质中，但当大蒜的细胞破碎后，液泡内的内源蒜酶被释放并与蒜氨酸接触，经酶解生成大蒜素。
现代医学研究得出，大蒜素的药理作用包含以下几种：抗微生物、抗肿瘤、抗寄生虫、抗溃疡、抗衰老、降血压、降血脂、提高机体免疫力等[7-8]。
大蒜中大蒜素的提取及含量测定
大蒜中大蒜素的提取及含量测定摘要：大蒜素是大蒜中的主要活性成分，是大蒜破碎后，蒜氨酸在蒜酶催化作用下产生的一种具有生物活性的有机硫化物，具有抗菌消炎、降血压、降血脂、防癌等作用，可用于多种疾病的防治，在临床上的应用也越来越广泛，作为药物或保健品开发具有广阔前景[1]。
大蒜素的提取方法可以分为三类：水蒸气蒸馏法、溶剂萃取及超临界流体萃取[2-3]，但是采用水蒸气蒸馏得到的提取物中大蒜素含量很低，导致提取物的活性很低。
超临界萃取法提取率高、品质好，但生产成本高、设备复杂、操作技术难度大[4]。
综合考虑在有机溶剂萃取法的基础上，以乙醇为提取剂萃取大蒜素，研究确定了其最佳工艺参数。
用硫酸钡沉淀法测定大蒜素的含量。
关键词：大蒜素、提取、含量测定Extraction and Determination of allicin in garlic(Yunnan Agricultural University College of Basic Science andInformation Engineer,Kunming 650201)ABSTRACT：Allicin is the main active ingredient in garlic,crushed garlic alliin in the garlic enzyme catalysis of a biologically active organic sulfides,With antibacterial anti-inflammatory role in lowering blood pressure, lowering blood pressure, anti-cancer,Can be used for the prevention and treatment of many diseases,Clinical application is more and more widely, and has broad prospects for development as drugs or health products .Allicin extraction methods can be divided into three categories:Steam distillation, solvent extraction and supercritical fluid extraction method,However, the extract obtained by steam distillation and the allicin content is low, resulting in low activity of the extracts.Supercritical extraction extraction rate, the quality is good, but the high cost of production, complex equipment operation prehensive consideration on the basis of the organic solvent extraction, ethanol extraction solvent extraction of allicin, research to determine the optimum parameters. Determination of allicin content of barium sulfate precipitation method.Key words: Allicin;Extract ;Content ;determination大蒜中大蒜素的提取含量及测定1 引言研究意义：通过以大蒜为原料来提取大蒜素，大蒜素的提取方法可以分为三类：水蒸气蒸馏法、溶剂萃取及超临界流体萃取[2-3]，但是采用水蒸气蒸馏得到的提取物中大蒜素含量很低，导致提取物的活性很低。
大蒜素检测方法
大蒜素研究进展21.GC及GC-MS联用最低检测限0.2ng 为避免被测物在高温条件下分解，柱温不易过高，适宜温度为70℃；GC-MS可以测出大蒜油中各种组分及含量最低检测限为0.005g/100g2. 高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法克服了气相色谱法中温度高, 不稳定的缺点, 柱温可控制在较低温度, 大蒜素的检测一般采用反相高效液相色谱法。
测定波长为240 nm。
该方法最低检测浓度为0. 18 g /mL3.定硫法定硫法的原理[ 16] 是大蒜中蒜氨酸的亚砜基和大蒜素的硫代亚砜基被浓硝酸氧化成硫酸离子, 与氯化钡反应形成硫酸钡沉淀, 根据硫酸钡的重量换算出大蒜素的含量。
在定硫法中, 氧化剂的用量, 酸度和沉淀剂用量等因素都会对测定结果产生影响。
氧化剂用量在2. 0~ 5. 0 mL之间较好, 氧化剂量过多或过少都会使测定结果偏低, 测定溶液的酸度值在2. 0~ 3. 0之间最佳, 沉淀剂用量在5~ 30 mL之间对测定结果影响较小。
在大蒜素保健食品中常用该方法进行大蒜素含量测定4.分光光度法在一定温度下大蒜素在蒜酶的作用下水解产生丙酮酸, 可以利用测定丙酮酸含量的方法测定大蒜中大蒜素的含量。
丙酮酸可以和2, 4- 二硝基苯肼作用生成丙酮酸- 2, 4 - 二硝基苯腙沉淀。
利用分光光度计对苯腙进行比色分析, 测出消光值D, 在D- C 标准曲线上找出对应的苯腙浓度, 从而换算出大蒜素的含量。
除此之外, 还可以通过测定半胱氨酸的含量从而计算出大蒜素含量。
其原理是基于一分子的大蒜素会与两分子的半胱氨酸发生反应, 可以通过过量的半胱氨酸与大蒜素反应, 用5, 5 -'二硫代双( 2- 硝基苯甲酸) 法测定反应前后半胱氨酸的量, 根据半胱氨酸减少量计算大蒜素含量。
结果为大蒜素平均含量0. 270 mmol/100g。
5. 其他方法除以上方法外, 还有生物检测法, 薄层扫描法, 硝酸汞沉淀法, 适用于定性分析。
大蒜素含量计算公式推导方法
大蒜素含量计算公式推导方法
大蒜素是指大蒜中含有的一种强效生物活性成分。
下面是大蒜素含量计算公式的推导方法：
1. 首先需要了解大蒜素的化学式：C6H10S2。
2. 大蒜素含量的计算，需要先测定大蒜素的含量，一般的测定方法是高效液相色谱法（HPLC）。
测定出大蒜素在溶液中的浓度。
3. 然后，需要知道大蒜素的摩尔质量，即11
4.2g/mol。
4. 接下来，将大蒜素的浓度换算成摩尔质量的浓度，即将浓度除以摩尔质量：C（mol/L）=浓度（g/L）÷摩尔质量（g/mol）。
5. 再将大蒜素的摩尔浓度转换成质量百分比，乘以摩尔质量，并乘以100%：质量百分比=摩尔浓度×摩尔质量×100%。
6. 最后，可以根据这个计算出大蒜素的含量。
以上是大蒜素含量计算公式的推导方法。
需要注意的是，在进行计算时需要严格按照化学计算规则进行，避免出现计算错误。
此外，不同的大蒜品种、生长环境和处理方法都会对大蒜素含量产生影响，因此进行大蒜素含量的测定时，需要选择适当的样本和方法，确保测定结果的准确性。
一种大蒜素的提取方法
一种大蒜素的提取方法大蒜素是一种具有广泛生物活性的天然产物，其具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化、降血脂、促进免疫等多种功效。
因此，大蒜素的提取方法一直备受关注。
目前常见的大蒜素提取方法包括溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法、酶解提取法等。
下面将详细介绍其中一种大蒜素提取方法。
1.实验材料及仪器：材料：新鲜大蒜、无水乙醇、无水乙酸；仪器：研钵、研钉、过滤纸、滤液瓶、离心管、旋转蒸发仪、超声波仪、分光光度计等。
2.提取步骤：（1）准备工作：将新鲜大蒜剥皮，洗净，切成细丁备用；称取适量的大蒜丁放入研钵中，加入适量的无水乙醇与无水乙酸，使之充分浸泡。
（2）提取大蒜素：将研钵放入超声波仪，开启超声波功能，进行超声波提取。
超声波的作用可以加速大蒜素的溶解和传递，提高提取效率。
超声波提取的参数一般为50-80℃的温度，20-40分钟的时间。
（3）离心分离：将超声波提取液倒入离心管中，然后对提取液进行离心分离。
通过离心作用，将大蒜素与固体渣滓分离开来。
一般可以选择高速离心3000-5000转，10-15分钟。
（4）浓缩：将分离后的大蒜素乙醇液倒入旋转蒸发仪中，进行浓缩。
旋转蒸发仪通过转动烧杯，加速溶剂的挥发，使得大蒜素得以浓缩。
（5）冷冻干燥：将浓缩后的大蒜素溶液置于低温(-20℃)的冷冻干燥器中，进行冷冻干燥。
冷冻干燥是将溶液中的水分冻结，然后通过低压下的真空处理，使水分直接从固态变成气态，以实现干燥的目的。
（6）称量、保存：将冷冻干燥后得到的无水大蒜素称量，进行保存。
一般可以使用干燥密封瓶等保存容器进行保存，避免大蒜素与空气中的氧气、湿度接触。
3.提取效果评价：（1）蒜素含量测定：通过分光光度计等仪器对提取得到的大蒜素进行含量测定。
根据大蒜素的特征吸收峰在245nm处，以此为波长进行测定。
（2）其他指标评价：如需进一步评价提取效果，还可以对大蒜素的抗菌活性、抗氧化活性、抗肿瘤活性等进行检测。
总结：该提取方法是一种常规的大蒜素提取方法，通过超声波的作用加速大蒜素的溶解，具有简单、高效的特点。
2005大蒜中大蒜素等含硫化合物的GC_MS法测定_李雪
大蒜中大蒜素等含硫化合物的GC/M S 法测定李 雪 李英峰 刘必前(中国科学院化学研究所 北京 100080)摘 要 对大蒜中的有效成分)))大蒜素进行提取,并利用气相色谱-质谱联用仪对大蒜中的大蒜素进行测定。
确定大蒜素的成分主要包含二烯丙基一硫醚,二烯丙基二硫醚,二烯丙基三硫醚等在内的多种含硫化合物。
关键词 大蒜素 气相色谱-质谱联用法 乙醇提取法引言大蒜(Alium sativum L)是百合科葱属的多年生草本植物1,以鳞茎、花茎、嫩叶为主要产品。
我国是大蒜的主要生产国,约占世界总产量的1/4,鲜蒜及其加工制品除供国内消费外,还大量出口日本、东南亚等国家2。
我国人民食用大蒜主要作为调味品,大蒜的医药保健功效远远没有得到有效的利用,造成大量的浪费。
大蒜作为一种高效中草药绿色添加剂可应用于饲料工业,在畜牧养殖业中有重要作用,可增加饲料的适口性,有效促进畜禽地生长3;可提高生产效益,降低成本;改善畜牧产品品质,保护环境。
大蒜在医药领域具有抗菌消炎作用,能够增强肝脏解毒功能4,具有防治心血管疾病5,防治糖尿病的功能,能够起到防癌抗癌作用,有抗衰老的作用6。
由于大蒜具有较高的营养保健功效,使得提取以及测定大蒜中有效成分的工作显得尤为重要。
自从1840年德国化学家Theodor Wertheim 开始大蒜成分的研究以来,全世界的化学及医药科技工作者已弄清大蒜中的许多化学成分及其降解产物。
大蒜的食疗价值,主要是大蒜中的有效成分)))大蒜素在起作用。
大蒜素并非单一组分组成,它是由20多种易挥发物组成,主要有大蒜新素(C 6H 10O 2S),大蒜辣素(C 6H 10OS 2)及多种烯丙基,丙基,甲基组成的硫醚化合物7。
据生物化学分析证明,新鲜大蒜中并不含有大蒜素,而含有它的前体)))蒜氨酸。
蒜氨酸以稳定无臭的形式与多糖类结合在一起存在于大蒜中,蒜氨酸和蒜氨酸酶分别存在于大蒜细胞组织的不同部位,蒜氨酸及亚砜类化合物存在于细胞溶胶中,而蒜氨酸酶存在于液泡中。
药用大蒜油中大蒜素的含量测定
大蒜油中大蒜素的含量可以作为环境监测的一项指标，通过对其含量的测定，可以评估环境污染程度 和土壤质量状况。
06
结论
研究成果总结
成功建立了高效液相色谱法测定药用大 蒜油中大蒜素含量的方法，该方法具有 操作简便、准确度高、重现性好等优点。
通过对不同产地、不同品种的药用大蒜油进 行测定，发现大蒜素含量存在一定差异，其 中以某地产药用大蒜油的大蒜素含量最高。
药用大蒜油中大蒜素的含量 测定
目录
• 引言 • 大蒜油中大蒜素的提取方法 • 大蒜油中大蒜素的含量测定方法 • 大蒜油中大蒜素含量的影响因素
目录
• 大蒜油中大蒜素含量测定的实际 应用
• 结论
01
引言
目的和背景
目的
准确测定药用大蒜油中大蒜素的含量，为药品质量控制和临床应用提供依据。
背景
大蒜素是大蒜中的主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。药 用大蒜油是大蒜素的重要来源之一，其含量直接影响药品质量和治疗效果。因此 ，对药用大蒜油中大蒜素的含量进行准确测定具有重要意义。
相关工作
已有研究
已有研究表明，不同产地、品种、加工方法等对药用大蒜油中大蒜素的含量有一定影响。 因此，需要建立一种准确、可靠的测定方法，以实现对药用大蒜油中大蒜素含量的有效
控制。
研究现状
目前，关于药用大蒜油中大蒜素含量测定的研究主要集中在提取方法、纯化技术、检测 手段等方面。其中，高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）是 最常用的检测方法。然而，这些方法在操作过程、仪器设备等方面存在一定的局限性，
提取时间也是影响大蒜素提取效率的重要因素。较短的提取时间可能导致提取不完全，而长时间的提取则可能导致大 蒜素的结构发生变化。因此，需要根据实际情况选择合适的提取时间。
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ＺＨＵ Ｎｉ， ＹＩＮＧ Ｈｕｉ－ ｆａｎｇ
（Ａｅ ｔｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｅ ｄｉｃａ ｌ Ｃｏｌｌｅ ｇｅ ， Ｘｉａ ｎｎｉｎｇ Ｃｏｌｌｅ ｇｅ ， Ｘｉａ ｎｎｉｎｇ ４３７１００） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ａ ｓ ｉｍｐｌｅ ｓ ｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ａｌｌｉｃｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｇａｒｌｉｃｓ ｗａｓ
版社，２０００：４４－ ４７ ［２］ Ｌｅｍｏｓ Ｖａｌｆｒｅｄｏ Ａｚｅｖｅｄｏ， Ｓａｎｔｏｓ Ｗａｌｔｅｒ Ｎｅｉ Ｌｏｐｅｓ ｄｏｓ，
Ｓａｎｔｏｓ Ｊｕｒａｃｉｒ Ｓｉｌｖａ， ｅｔ ａｌ． Ｏｎ － ｌｉｎｅ ｐｒｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｕｓｉｎｇ ａ ｍｉｎｉｃｏｌｕｍｎ ｏｆ ｐｏｌｙｕｒｅｔｈａｎｅ ｆｏａｍ ｌｏａｄｅｄ
稀 释 的 待 测 液 ， ２６ ℃保 温 １５ ｍｉｎ 后 加 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＤＴＮＢ 溶 液 １ ｍＬ， 用 ５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．５ 的 Ｔｒｉｓ － ＨＣｌ 缓 冲 溶 液 稀 释 至 ５．０ ｍＬ， ２６ ℃下 保 温 １５ ｍｉｎ， ４１２ ｎｍ 波长测定半胱氨酸吸光值 Ａ， 大 蒜素含量计 算 方 法如下：
表 １ 试样中锌的测定结果
试样
测得值／ （μｇ／ｇ）
加入量／ （μｇ／ｇ）
测得值／ （μｇ／ｇ）
回收率／％ ＲＳＤ／％
奶粉 ４７．８
４０．０ ３９．１
９７．８ ０．８９
火腿 ３０．５
３０．０ ３１．３
１０４
１．７７
牛肉 ２２．７
２０．０ １８．９
９４．５ ２．９４
参考文献： ［１］ 陈丙卿．营养与食品卫生学（第四版）［Ｍ］．北京：人民卫生出
Ｎｏ． ８． ２００８ ２０３
食品安 添全 加与 剂检测
ｍｉｎ 最 佳 。 ２．３ 温度对测定结果的影响
反应体系温度对半胱氨酸与大蒜素的稳定性及
Ｔｒｉｓ－ ＨＣｌ 缓冲溶液缓冲能力有一定影响。调节不同反
应温度进行试验， 结果如表 ２。
表 ２ 不同反应温度下 Ａ０， Ａ， △Ａ 吸光值变化
温度／℃ ２０
ｗｉｔｈ Ｍｅ － ＢＴＡＢｒ ｆｏｒ ｚｉｎｃ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｂｙ Ｆｌａｍｅ Ａｔｏｍｉｃ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ． Ａｎａｌｙｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ，２００３，４８１ （２）：２８３－ ２９０ ［３］ Ｌｏ Ｃｏｃｏ Ｆ， Ｃｅｃｃｏｎ Ｌ， Ｃｉｒａｏｌｏ Ｌ， Ｎｏｖｅｌｌｉ Ｖ， ｅｔ ａｌ． Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｄｍｉｕｍ（ＩＩ） ａｎｄ ｚｉｎｃ（ＩＩ） ｉｎ ｏｌｉｖｅ ｏｉｌｓ ｂｙ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｐｏｔｅｎｔｉｏｍｅｔｒｉｃ ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｆｏｏｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ， ２００３，１４（１）：５５－ ５９ ［４］ Ｌｉ ｚｈｏｎｇ， Ｙａｎｇ Ｇｕａｎｇｙｕ， Ｗａｎｇ Ｂａｏｘｉｎｇ， ｅｔ．ａｌ． Ｄｅｔｅｒ － ｍｉ ＝ ｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｍｅｔａｌ ｉｏｎｓ ｉｎ ｔｏｂａｃｃｏ ａｓ ｔｈｅｉｒ ２ － （２ － ｑｕｉｎｏｌｉｎｙｌａｚｏ） － ５ － ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｈｅｎｏｌ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ｒｅｖｅｒｓｅｄ－ ｐｈａｓｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｗｉｔｈ ＵＶ－ ＶＩＳ ｄｅｔｅｃ＝ ｔｉｏｎ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ａ，２００２，９７１（１－ ２）：２４３－ ２４８ ［５］ 刘 佳 铭，林 旋，李 顺 发．催 化 过 氧 化 氢 氧 化 杨 梅 红 色 素 褪 色光度法测定痕量锌．分析化学，２００２，３０（１１）：１３３７－ １３４０ ［６］ 陈 宁 生，丁 纯 梅，王 世 银．动 力 学 光 度 法 测 定 痕 量 锌 的 研 究．理化检验－ 化学分册，２００２，３８（２）：７０－ ７
ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ． Ｔｈｅ ｍａｉｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｒｅｓ ｕｌｔｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｓ ｔｅｉｎｅ， ｒｅａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ， ｒｅａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｐＨ ｖａｌｕｅ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓ ｔｉｇａｔｅｄ． Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｍｅａｓ ｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ａｒｌｌｉｃｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｓ ｕｇｇｅｓ ｔｅｄ ｓ ｏ ａｓ ｔｏ ｉｎｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ａｃｃｕｒａｃｙ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｍｅａｓ ｕｒｅｍｅｎｔ．
食品安 添全 加与 剂检测
大蒜中大蒜素含量简便测定法
朱 薿， 应惠芳 （咸宁学院医学院病原系， 咸宁 ４３７１００）
摘要： 采用一种快速简便的分光光度法测定大蒜中的大蒜素含量。研究测定过程中半胱氨酸反应浓
度、反应时间、反应温度及反应体系 ｐＨ 值等因素对测定结果的影响。优选出最佳测定条件， 提高测
定的准确性和重现性。
２０２ Ｎｏ． ８． ２００８
食品安全与检测
大蒜素（Ａｌｌｉｃｉｎ）为 有 机 硫 醚 化 合 物 ， 是 百 合 科 葱 属植物大蒜地下鳞茎的主要生物活性成分。它因能 进入细胞并与细胞内一些截留巯基化合 物（如谷胱甘 肽、２－ 氮－ ５ 羟基苯 甲 酸 酯 等）相 互 作 用［１］而 具 有 抗 肿 瘤、抗病毒、抗菌、降低胆固醇、降血压血脂、抗血 小板聚集、预防心血管疾病、抗衰老及记忆力下降、 解 毒 等 多 种 生 理 活 性［２－ ３］， 备 受 人 们 关 注 。 目 前 ， 国 内外测定大蒜中大蒜素含量的方法主要有气相色谱 法、高效液相色谱法、气－ 质联用法、紫外分光光度 法、定硫法、硝酸汞法等［４］。这些 测定方法或仪器设 备昂贵或操作技术复杂。本文采用一种简单、快速的 分光光度法， 在大蒜中大蒜素含量的分析中取得满 意结果。
０．８
０．７
吸光值
０．６
０．５
Ａ０
Ａ
０．４
△Ａ
０．３
０．２
０．１
０ １ ２ ５ １０ １５ ２０ ３０ ４０ ５０ ６０ 时 间／ｍｉｎ 图 １ Ａ０， Ａ， △Ａ 吸光值随时间变化图
由 图 １ 可 见 ， 随 时 间 延 长 Ａ０ 变 化 不 明 显 ， 表 明 Ａ０ 受 半 胱 氨 酸 与 ＤＴＮＢ 显 色 时 间 影 响 不 大 ； Ａ 值 先 下 降 后 趋 于 恒 定 ， △Ａ 值 先 上 升 到 反 应 １５ ｍｉｎ 后 趋 于 稳 定 ， 说 明 大 蒜 素 与 半 胱 氨 酸 反 应 １５ ｍｉｎ 后 反 应 完 全 。 综 合 考 虑 ， 显 色 ５ ｍｉｎ， 反 应 时 间 １５
大蒜→去皮洗净→捣成蒜泥→酶解→乙醇浸 提→离心→清液 １．３．２ 大蒜素含量测定［７］ 取 ０．５ ｍＬ １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ 半胱氨 酸 溶 液 ， 加 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ ＤＴＮＢ 溶 液 １ ｍＬ， 用 ５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．５ 的 Ｔｒｉｓ－ ＨＣｌ 缓 冲 溶 液 稀 释 至 ５．０ ｍＬ， ２６ ℃保 温 １５ ｍｉｎ， ４１２ ｎｍ 波 长 测 定 其 吸 光 值 Ａ０。 取 １．０ ｍｍｏｌ／Ｌ 半胱氨酸溶液 ０．５ ｍＬ， 加 ０．５ ｍＬ 适量
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： Ｓ ｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ； ｇａｒｌｉｃ； ａｌｌｉｃｉｎ； ５，５＇ － ｄｉｔｈｉｏ－ ｂｉｓ （２－ ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ）
收稿日期： ２００７－ １２－ ０３ 基金项目： 湖北省教育厅科研项目（Ｄ２００６２８０１０）。 作者简介： 朱薿（１９８３—）， 女， 湖北咸宁人， 硕士， 助教， 研究方向为医学微生物与微生物制药。
关键词： 分光光度法； 大蒜； 大蒜素； ５，５＇－ 二硫代双（２－ 硝基苯甲酸）
中图分类号： ＴＳ： １００５－ ９９８９（２００８）０８－ ０２０２－ ０３
Ｓ ｉｍｐｌｅ ｍｅ ｔｈｏｄ ｆｏｒ ｒａ ｐｉｄ ｄｅ ｔｅ ｒｍｉｎａ ｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌｌｉｃｉｎ ｉｎ ｇａ ｒｌｉｃ
表 １ 各初始半胱氨酸浓度下吸光值变化
半胱氨酸浓度／（ｍｍｏｌ／Ｌ） ０．０５ ０．１ ０．１５ ０．２ ０．３
吸光值 Ａ０
０．４２０ ０．７２８ １．１７２ １．２５０ １．４７０
２．２ 反应时间对测定的影响 由于半胱氨酸和大蒜素分别含巯基和硫醚基而
使得两者生物学性状不稳定， 因此， 在测定过程中， 半胱氨酸与 ＤＴＮＢ 显色时间和与大蒜素反应时间控制 显得格外重要。考察 Ａ０、Ａ、△Ａ 吸光值随时间变化 情况， 见图 １。
Ｃａｌｌｉｃｉｎ（ｍｍｏｌ／ｍＬ）＝△Ａ４１２×ｄ／（２×１４１５０） △Ａ４１２＝Ａ０－ Ａ
式中： ｄ 为总稀释倍数； １４１５０ 为 ＮＴＢ 在 ４１２ ｎｍ； １ ｃｍ 光径摩尔消光系数。
试验中采用不同浓度的半胱氨酸、不同的反应 时间、反应温度以及缓冲体系 ｐＨ 值进行测定， 比较 上述不同指标对测定的影响。