浅谈动物寄生虫病防治现状与现代生物技术

浅谈动物寄生虫病防治现状与现代生物技术关键词: 寄生虫病防治现状现代生物技术新疆正处在西部大开发的好机遇，随着我区畜牧业的发展，农业和农村经济有了一定的发展，人们生活水平在逐渐提高。

要保证我区畜牧业的持续稳定发展，必须不断地提高畜禽疫病的防治水平。

新疆是一个社会、经济、生活条件相对落后，土地面积大，某些偏僻的地区缺乏防病意识，因此，畜、禽寄生虫病种类多、分布广、流行严重、防治难度大，严重制约我区畜牧业的发展。

分析我区畜禽寄生虫病防治现状，明确新世纪努力地目标，采用现代生物技术，对提高我区畜禽寄生虫病防治水平将有积极的意义。

1 寄生虫病防治现状近年来，我区畜、禽寄生虫病防治水平有了一定的提高，由于一系列防治技术的研究和应用，一些重要的畜禽寄生虫病得到有效的控制，对保障人、畜健康，推动畜牧业发展发挥了重要作用。

1.1 寄生虫病的诊断方面1.1.1 根据症状和流行病学特点进行诊断在基层广大兽医工作者一般根据某种寄生虫病特有的临床症状，如脑包虫病的“回旋运动”、疥癣病的“剧痒”、球虫病的“球虫性腹泻”或消瘦、贫血、营养不良等寄生虫性特意症状来初诊；或调查了解某种寄生虫病的大体分布、流行现状、流行的有关环节和因素来综合分析，做出综合诊断。

大多数寄生虫病，如消化道蠕虫病或绦虫蚴病，一般具有慢性消耗性、不显症状等特点；在大力发展规模化养殖条件下，畜、禽寄生虫病的流行因素也在变化；生物源性的寄生虫病，如肝片吸虫病等将会减少直至获得控制，而土源性寄生虫病，如球虫病、蛔虫病、鞭虫病等和一些通过接触性传播的寄生虫病，如螨虫病等将会有所增加。

故上述诊断的弊病是当某些寄生虫病缺少特征性的症状或流行因素、条件变异时难以做出诊断。

1.1.2 实验室内病原检查直到现在，室内病原检查法在我区农、牧区的畜、禽寄生虫病的诊断上是最常用的诊断手段。

对某些寄生虫病可以起到决定性的作用。

许多蠕虫类寄生于宿主消化道或呼吸系统，虫体的某一个发育阶段即卵、幼虫、孕节等常随粪便排出。

粪便中的卵、幼虫，常用涂片、浮集、沉淀和幼虫分离、幼虫培养等方法可检出；在实际疾病诊断过程中，大多数消化道蠕虫病的诊断基本上采用实验室内粪便检查法来做出诊断。

针对一些寄生虫病的病原诊断方法，我区在采用较先进的方法，如采用尼龙筛集卵等方法改进粪便毛蚴孵化法、适当调整饱和溶液来提高虫卵浮集法的检出率等，提高了病原诊断的敏感性、节省人力物力。

但室内粪便检查法仍然有一些检出速率低、操作繁琐、当感染率低时容易漏诊等弊病。

1.1.3 血清学诊断随着畜、禽寄生虫病血清学诊断研究的快速发展，一些常用的血清学诊断技术如ELISA、IHA、Dot—ELISA等都被应用于畜、禽寄生虫病诊断。

通过制备纯化的虫体抗原、分泌抗原或构建诊断试剂盒，以提高诊断效率。

单克隆抗体技术、PCR技术等现代生物技术也在寄生虫病诊断中开始提倡应用。

但有些偏僻区，由于经费短缺、实验条件差和实验设备不完善、缺少科研人员或技术员等原因无法应用血清学诊断，另外血清学诊断本身也监测技术特异性、敏感性还不够理想，不够规范化、标准化等局限性。

1.2 治疗药物化学药物治疗仍是目前寄生虫病防治的主要手段。

兽用寄生虫病治疗药物的研制与开发滞后，经常或长期使用化药，尤其是长期地重复应用一种药物，将导致一些畜、禽产品药物残留严重或产生抗药性。

在我区蠕虫类病最常用的药物有，内寄生虫药：硫双二硫粉、丙硫咪唑（肠虫净）、左咪唑、敌百虫、吡喹酮、越霉素、潮霉素、伊维菌素（伊力佳）、阿维菌素（阿力佳）。

外寄生虫药：敌百虫、双甲脒、二嗪农(螨力克)、敌敌畏、菊酯类药、阿维菌素（阿力佳）。

梨形虫病最常用的药物有，三氮脒、咪唑苯脲、锥黄素（吖啶黄）、喹啉脲（阿卡普林）等。

如据调查球虫病在鸡、兔、牛、羊等多种家畜集约化的场均有感染，其感染率高、无季节性、感染频繁的特点，这与球虫的抗药性有关。

1.3 疫苗防治寄生虫虫体大，抗原性复杂，疫苗研究难度大。

虽寄生虫学者探讨了死苗、活苗(物理、化学方法或鸡胚传代致弱苗、异种虫体苗、弱毒苗、强毒苗)、纯化虫体抗原苗、抗独特型抗体疫苗、人工合成肽、虫体细胞苗、基因重组抗原和DNA疫苗等，但目前已在兽医领域里应用的有日本血吸虫基因工程苗和重组BCG 疫苗、球虫疫苗、猪囊虫细胞苗和羊细粒棘球蚴基因工程苗、锥虫疫苗、牛双芽巴贝斯虫苗、牛泰勒虫苗、弓形虫疫减毒活虫疫苗等。

总的来讲，寄生虫疫苗几乎在研制开发阶段，具有一定程度的局限性。

1.4 防制策略研究目前，针对不同寄生虫病的流行特点，因地制宜地提出不同寄生虫病的防制对策，控制了一些重要寄生虫病的传播，保障了人畜健康，促进了疫区经济的发展。

如在牧区通过安全放牧和轮牧等措施的实施，有效地降低了牛、羊消化道线虫病的感染率；在梨形虫流行的疫区，经过对传播蜱类的积极防治，牛双芽巴贝斯虫病和马巴贝斯虫病得到了一定的控制。

一些寄生虫病感染率和发病率明显下降，如牛羊肝片吸虫病、家畜肺线虫病、羊扩展莫尼茨绦虫病、牛羊东毕吸虫病。

同时由于受社会、经济、生态、环境等因素影响，也有一些畜禽寄生虫病的发病率还相当高，有的还呈上升的趋势，如各种家畜的蛔虫病和鸡球虫病、双腔吸虫病、家畜棘球蚴病、疥螨病、牛皮蝇病、鞭虫病等，急待研究并需要更有效的防制策略。

在大力发展规模化养殖条件下，畜、禽寄生虫病的流行因素也在变化；生物源性的寄生虫病，如肝片吸虫病、禽类前殖吸虫病等逐渐减少，而土源性寄生虫病，如球虫病、蛔虫病、鞭虫病等和一些通过接触性传播的寄生虫病，如螨虫病等渐渐增加。

人类专有的寄生虫病将逐渐减少，而人畜共患寄生虫病渐渐增加，如弓形虫病、包虫病等。

宠物和野生动物种类和数量的增多或随着人类交流和流动日趋频繁，患病动物及带虫媒介可能从流行区带至非流行区，引发新病流行或老病复发。

故时代要求在规模化养殖条件下畜、禽寄生虫病防治技术和防治策略研究。

2 现代生物技术的应用经寄生虫功能基因组学、蛋白质组学、病原分子结构与功能研究，应用寄生虫功能基因的常规分离技术(PCR技术、核酸探针、免疫筛选文库技术等)、特异基因筛选技术(消减杂交、差异显示、酵母双杂交系统)、分离、克隆与寄生虫生长、发育、入侵、致病、免疫逃避、耐药性等相关的功能基因，研究评估基因的生物学功能，为研制、开发高效、安全的抗寄生虫病疫苗和新治疗药物，建立特异、敏感的诊断监测技术奠定基础。

2.1 现代生物技术在寄生虫病诊断上的应用诊断方法的发展趋势是高度特异性、高度敏感性、方法标准化、试剂商品化、简便、快速、费用低廉。

2.1.1 现代流行病学调查对新时期畜、禽寄生虫病的流行现状、特点进行正确诊断，并因地制宜提出行之有效的综合防治策略和措施。

流行病学调查方法上采用PCR诊断法、基因型分离（如隐孢子虫或新孢子虫的诊断）和核酸探针等。

弓形虫病的P30抗原是弓形虫的主要表面抗原，具有很强的抗原活性。

纯化的P30已用作单一抗原检测急性和慢性弓形虫病，其敏感性比全虫抗原为高。

用PCR技术可检测出每微升血样中2个弓形虫水平。

有人将PCR与非放射性标记探针技术结合检测粪便中微小隐孢子虫，具有敏感性高、特异性强，操作相对简单，且无放射性污染等优点，可用于隐孢子虫的流行病学调查和临床诊断。

有人采用两对可区别致病性与非致病性溶组织内阿米巴的引物，进行PCR检测，认为此方法是确定阿米巴现症感染最敏感和特异的方法，也可用于流行病学调查；有人以PCR技术诊断黑热病（利氏曼虫病），可检测到1 μl中利什曼原虫的DNA。

2.1.2 血清学诊断传统诊断技术(病原和血清学诊断技术)在未来几年畜禽寄生虫病诊断中仍将占主导地位。

现代生物技术发展日新月异，为寄生虫病免疫学研究提供了强有力的武器。

精制单克隆抗体或具有诊断价值的基因重组抗原，应用于诊断，以提高诊断方法的特异性、敏感性。

单克隆抗体和重组抗原被应用于畜、禽寄生虫病的免疫诊断和免疫机理研究、保护性相关抗原分析和分离，及诊断抗原编码基因、保护性抗原编码基因的分离。

应用SDS—PAGE、West—blotting、免疫亲和层析技术等分析分离弓形虫、旋毛虫等寄生虫诊断、免疫保护相关抗原。

开展了锥虫抗原变异、寄生虫隐蔽抗原、免疫逃避相关抗原研究及其相关基因的分析与分离。

探讨寄生虫与宿主之间的关系，如隐孢子虫免疫机理研究。

克隆、表达、纯化的重组抗原用于诊断，如：用弓形虫P30、牛双芽巴贝斯虫RAP-1 、牛瑟氏泰勒虫P33 、牛新孢子虫P43/P36、马巴贝斯虫病的P48、EMA-1、EMA-2 等重组抗原作为检测抗原，用于ELISA 或IFAT免疫实验，检测相应的未知抗体（诊断）。

2.2现代生物技术在寄生虫防治上的应用基因工程技术等现代生物学技术的应用，研发了抗寄生虫病新药物和寄生虫基因工程疫苗，从而克服了以往遗留下的寄生虫病防治中的弊病，提高了寄生虫病的综合防治水平。

2.2.1 现代药物治疗目前我国畜禽寄生虫病防治主要以药物防治为主，研究开发高效、低毒、广谱的抗寄生虫新药将有巨大的市场。

基因工程技术等现代生物学技术，研发了抗寄生病新药，如氯氰碘柳胺、阿维菌素类药(爱比菌素、伊维菌素、多拉菌素、塞拉菌系、埃普利诺菌素等)、吡喹酮等，一些特定寄生虫病的高效、安全的防治药物如地克珠利、百球清、咪唑苯脲、三氯苯达唑、咪唑类药(丙硫苯咪唑、苯硫咪唑、亚砜眯唑)、苯胍类药(苯硫咪胍、尼妥必敏)、除虫菊酯类药，一些先进的给药新技术或药物新制剂如反刍兽瘤胃控释或缓释剂、皮下包埋缓释剂、皮下注射用缓释剂、透皮吸收剂(滴剂、浇泼剂、涂抹剂等)、矫味引诱剂、微囊剂、饮水剂、复配药、轮换用药等，相继在现场应用，有效地减轻畜、禽寄生虫病造成的危害。

寄生虫耐药现象普遍存在，这几年，一些耐药性的检测技术如RAPD、mRNA差异显示、粪便虫卵减少试验、虫卵孵化试验和体外杀虫试验等已建立，有的已应用于防治实践。

2.2.2 基因工程苗寄生虫虫体大，抗原性复杂，疫苗研究难度大。

由于基因工程苗具有安全、可大量生产制备等特点，部分基因工程疫苗已经动物试验证明可诱导较高免疫保护作用，近几年寄生虫基因工程疫苗(包括基因重组抗原和DNA疫苗)研究已成为疫苗研究的热门。

在这一研究领域，我国虽然起步较晚，但发展很快。

国内已构建了日本血吸虫、球虫、弓形虫、旋毛虫、囊虫、细粒棘球蚴、镰形扇头蜱等重要寄生虫不同发育阶段的虫体cDNA文库；几十条重要寄生虫功能基因(血吸虫、球虫、囊虫、弓形虫、隐孢子虫、新孢子虫、旋毛虫、牛皮蝇、微小牛蜱等)已被克隆，部分基因已在大肠杆菌、家蚕杆状病毒等原核或真核系统中表达；多种寄生虫基因重组抗原或DNA疫苗已应用于动物免疫保护试验，并证明能诱导部分免疫保护作用，有深入研究的价值。

多项研究成果、技术已申报了发明专利。