食品中微生物的检验
食品微生物检验名词解释

食品微生物检验名词解释
食品微生物检验是指通过检测食品中存在的微生物种类、数量、活性等指标,来判断食品是否受到微生物污染,并保证食品安全。
在食品微生物检验中,常用的名词包括:
1. 细菌:指能够在食品上生长、繁殖的微生物,如沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
2. 病毒:指能够在食品中生长、繁殖的微生物,如流感病毒、艾滋病病毒等。
3. 真菌:指能够在食品上生长、繁殖的微生物,如霉菌、酵母菌等。
4. 寄生虫:指能够在食品中生长、繁殖的微生物,如阿米巴原虫、肠道蠕虫等。
5. 酶:指能够参与微生物代谢过程的微生物,如乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌等。
6. 指示剂:指用于指示微生物生长和活性的化学物质,如葡萄糖、乳糖、氨基酸等。
7. 培养基:指用于培养微生物的混合物,如蛋白质培养基、淀粉培养基等。
8. 采样:指从食品中提取样品的过程,常用的采样方法包括口腔采样、鼻腔采样、皮肤采样等。
9. 检验方法:指用于检测食品微生物的方法,包括分子生物学、免疫学、光学显微镜等。
10. 检验结果:指食品微生物检验过程中获取的检测结果,包括细菌总数、大肠杆菌计数、沙门氏菌鉴定等。
食品微生物检验对于保障食品安全至关重要。
在进行食品微生物检验时,需要严格遵守相关规定和标准,保证检测结果的准确性和可靠性。
同时,也需要不断
提高检验水平和技术,以应对不断变化的食品安全形势。
食品微生物检验标准

食品微生物检验标准食品微生物检验是食品安全监管的重要环节,通过对食品中微生物的检测,可以及时发现和控制食品中可能存在的微生物污染,保障食品的安全和卫生。
食品微生物检验标准是指对食品中微生物指标的要求和检测方法的规定,为食品生产企业和监管部门提供了操作指南和依据。
首先,食品微生物检验标准包括了对食品中常见微生物指标的要求,如大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
这些微生物指标的存在与否直接关系到食品是否受到污染,对人体健康是否构成危害。
因此,食品微生物检验标准对这些指标的限定值和检测方法都有详细的规定,以确保食品的安全性。
其次,食品微生物检验标准还包括了对检验方法的规定。
不同的微生物指标需要采用不同的检验方法,这些方法包括了培养基法、PCR法、荧光法等。
对于不同的食品样品,也有相应的检验方法要求,比如液体食品和固体食品的检验方法可能会有所不同。
食品微生物检验标准对这些检验方法的操作步骤、仪器设备、质量控制等都有详细规定,以保证检验结果的准确性和可靠性。
此外,食品微生物检验标准还对样品的采集、保存和运输等环节进行了规定。
样品的采集方法直接关系到检验结果的准确性,而样品的保存和运输则关系到样品是否受到污染或者变质。
因此,食品微生物检验标准对这些环节也有严格的要求,以确保样品的完整性和真实性。
总的来说,食品微生物检验标准是食品安全监管的重要依据,它的制定和执行对于保障食品安全和卫生具有重要意义。
食品生产企业应当严格按照食品微生物检验标准的要求进行生产和检验,监管部门也应当加强对食品微生物检验标准的执行和监督,共同维护食品安全和公众健康。
在实际操作中,食品生产企业应当建立健全的食品微生物检验体系,配备专业的检验人员和设备,严格按照食品微生物检验标准的要求进行检验,并及时采取控制措施,确保产品质量和安全。
监管部门则应当加强对食品微生物检验标准的宣传和培训,提高食品生产企业和从业人员的法规意识和技术水平,共同维护食品安全。
食品微生物检验方法手段

(2)液体培养基中培养特征的观察 主要是液体的浑浊度是否产生沉淀,液 体表面有无菌膜形成,有无附着菌环,培 养液的颜色以及是否产气等。 (3)半固体培养基中培养特征的观察 主要是其是否需氧及其运动情况,是在 上部还是在下部深层生长,是沿穿刺线生 长还是树根样生长。
(三)生化实验
各种微生物含有各自独特的酶系统,用于进行代谢活动, 在代谢过程中产生的产物也有各自的特点,可借此区别和 鉴定微生物的种类。利用这种特点可鉴别微生物。生化试 验或生化反应是通过利用生物化学的方法来测定微生物的 代谢产物、代谢方式和条件等来鉴别细菌的类别、属种的 试验。
(3)隔绝阻氧: 深层液体培养,用石蜡油封存,半固体 穿刺培养 (4)替代驱氧: 用CO2驱代氧,用氮气驱代氧,用真空驱 代氧,用氢气驱代氧,用混合气体驱代氧
2.培养结果的观察 各种微生物经过培养后,表现出一 定特征,这在食品微生物学检验中, 是鉴别微生物种类的重要依据。 (1)固体培养基上菌落形态特征的观 察 细菌在固体培养基上,经过一定时 间的培养,即可出现肉眼可见的菌落, 每种细菌都有一定的菌落形态和特征, 主要包括菌落的大小、形状、边缘形 态、颜色、透明度等 观察菌落的形态特征,通常先用肉 眼观察,再用放大镜仔细观察,必要 时可用低倍镜观察。
(2)细胞色素氧化酶试验 分子氧和细胞色素C,能氧化盐酸二甲基 对苯二胺,并和α-萘酚结合,生成吲哚 酚蓝(靛酚蓝),是蓝色反应。 (3)过氧化氢酶试验 过氧化氢酶又称接触酶,能将水分解而 释放氧气,大多数好氧或兼性厌氧微生物 能产生过氧化氢酶,一般厌氧微生物不产 生此酶(如乳酸细菌)
触酶试验 左侧阳性、右侧阴性为对照
食品中的微生物检测技术

食品中的微生物检测技术食品安全一直备受人们的关注,而微生物污染是造成食品安全问题的重要原因之一。
所以,对于食品中的微生物检测技术的研究和应用显得十分必要。
本文将探讨食品中的微生物检测技术及其在食品安全领域中的应用。
一、背景介绍食品中的微生物指的是在食品中生长和繁殖的微生物,包括细菌、真菌和病毒等。
在食品生产和加工过程中,微生物可能通过各种途径进入食品中,引发食物中毒甚至传播疾病。
因此,监测食品中的微生物污染是确保食品质量和食品安全的关键环节。
二、食品中的微生物检测技术及原理1. 传统培养法传统培养法是最常用的微生物检测方法之一。
它通过将食品样品放入富含营养物质的培养基中,利用食品中的微生物在适宜条件下生长并形成可见的微生物集落,从而实现对微生物的检测。
这种方法简单易行,能够检测多种微生物,但是存在检测时间长、有可能遗漏无法培养的微生物等缺点。
2. 分子生物学方法分子生物学方法是近年来食品中微生物检测技术的新兴领域。
通过检测微生物的DNA或RNA序列,可以准确快速地确定食品中的微生物种类和数量。
其中,PCR技术和测序技术是最常用的方法之一。
PCR技术可以放大微生物的DNA片段,并通过比对特定序列来识别微生物。
测序技术则可以进一步对PCR扩增的片段进行测序,从而得到更加详细的信息。
这些分子生物学方法具有高灵敏度、高特异性和高准确性的优势,但是在样品处理和设备要求方面相对较高。
三、食品中的微生物检测技术的应用1. 工业生产在食品工业中,微生物检测技术被广泛应用于食品原料的筛选和检验、发酵及酿造工艺的控制、食品添加剂的质量监测等方面。
通过及时检测微生物污染,可以避免微生物对生产过程的干扰,保证产品质量和安全。
2.食品检测机构食品检测机构必须依靠微生物检测技术来评估食品质量和安全。
通过对食品样品进行微生物检测并给出合理的检测结论,有助于保护消费者的权益,维护食品市场秩序。
3. 公共卫生监管监管部门应用微生物检测技术对市场上的食品进行检测和监控,并采取相应的措施来控制和预防微生物污染。
食品微生物检验的指标

食品微生物检验的指标食品在食用前的各个环节中,被微生物污染往往是不可避免的。
评价食品被微生物污染的程度,要采用微生物检验指标采进行。
常采用的微生物检验指标为三项细菌指标,即细菌数量(主要是菌落总数)、大肠菌群最近似数(MPN)和致病菌。
第一节菌落总数一、菌落总数的概念及卫生意义食品中细菌数量越多,则食品腐败变质的速度就越快,甚至可引起食用者的不良王应.如有人认为细菌数量达到100—1000万个/g时食品就可能引起食用者的食物中毒。
菌落:指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。
细菌数量的表示方法由于所采用的计数方法不同而有两种:菌落总数和细菌总数:1、菌落总数指一定数量或面积的食品样品,在一定条件下进行细菌培养,使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落,然后进行菌落计数所得的菌落数量。
通常以lg或1ml或lcm2样品中所含的菌落数量来表示。
按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
2、细菌总数指一定数量或面积的食品样品.经过适当的处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。
其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。
细菌总数也称细菌直接显微镜数。
通常以1g或1m1或lcm2—样品中的细菌总数来表示。
菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。
菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣二、菌落总数的常规检验方法菌落总数的常规检验方法(GB4789.2-84):一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。
食品微生物检验技术

引言:食品微生物检验技术是食品安全保障的重要环节之一。
微生物在食品中的存在可以引起食源性疾病和质量问题。
因此,在食品生产和加工过程中进行微生物检验是非常重要的,可以确保食品的安全和质量。
本文将为您介绍食品微生物检验技术的相关概念、应用和方法。
概述:食品微生物检验技术包括食品样品的微生物分离、鉴定和计数。
主要目的是检测食品中存在的微生物类型和数量,评估食品的健康风险和质量问题。
食品微生物检验技术广泛应用于食品加工厂、餐饮业、农产品贸易和监管部门等领域。
正文内容:一、微生物检验技术的分类1.定性检验技术:用于确定食品样品中是否存在特定微生物,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
2.定量检验技术:用于测定食品样品中微生物的数量,通常使用平板计数法、膜过滤法等常见方法。
3.毒性检验技术:用于检测食品中的毒素产生菌和毒素,例如肉毒杆菌等。
二、微生物检验技术的应用领域1.食品生产过程监测:检验食品生产过程中的原材料、中间产品和最终产品,确保食品符合卫生标准。
2.食品安全监测:对市售食品进行抽检,检测其中的微生物污染情况,保障食品安全。
3.食品质量评估:通过微生物检验,评估食品的口感、卫生状况和营养价值等质量指标。
4.食品卫生监管:监督和检验餐饮企业、食品加工厂、超市等食品销售场所的卫生状况,保障公众健康。
5.食品出口检验:对出口食品进行微生物检验,确保符合国际标准,避免贸易纠纷。
三、微生物检验技术的方法1.平板计数法:将食品样品均匀布于富养液琼脂培养基上,通过培养和计数菌落形成单位数量,从而得到食品中微生物的数量。
2.膜过滤法:将食品样品过滤到成膜过滤器上,然后将膜培养于琼脂平板上进行培养和计数。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA):通过特定抗体与细菌或其产生的毒素结合,形成特定反应,用于检测食品中的目标微生物或毒素。
4.PCR法:利用聚合酶链反应技术,直接在食品样品中扩增目标微生物的特定基因序列,从而进行检测和鉴定。
食品中的微生物检验技术

食品中的微生物检验技术食品安全是人们日常生活中非常重要的一环,而微生物检验技术在保障食品安全方面起着关键作用。
微生物污染可能导致食品中的疾病和食物中毒事件发生。
因此,对于食品中微生物的检验至关重要,以确保食品的质量和安全。
本文将探讨食品中常用的微生物检验技术,以及其在食品行业中的应用。
一、菌落计数法菌落计数法是一种常用的微生物检验技术,用于测量食品中微生物的数量和增长情况。
通常,该方法要求将食品样品制成适当的稀释液,并将其平均均匀地涂布在富营养培养基上,然后在适当的温度下培养一段时间。
随后,通过观察和计数不同菌落的数量来评估食品样品中微生物的数量和种类。
菌落计数法的优点在于操作简单、成本低廉且能获得准确的结果。
然而,它只能提供关于微生物总数的信息,而无法检测特定的病原微生物。
因此,在食品行业中该方法通常用于检测食品中的常见的微生物。
二、PCR技术PCR(聚合酶链式反应)技术在食品微生物检验中得到了广泛应用。
PCR可通过扩增和检测食品中微生物的DNA,从而确认食物是否受到微生物的污染。
此外,PCR还能帮助鉴定特定微生物的存在,包括常见的食源性病原体。
PCR技术的优点在于其高灵敏度、高特异性和快速检测结果。
然而,该方法也存在一些局限性,如对设备要求较高,同时需要针对目标微生物设计和合成特异性引物。
此外,PCR技术还需要进行核酸提取和预处理等繁琐的操作步骤。
三、快速检测方法为了满足食品生产厂商和监管机构对食品微生物检验结果的快速反馈需求,快速检测方法在食品行业中得到了广泛应用。
这些方法通常基于免疫学技术,如ELISA(酶联免疫吸附试验)和免疫层析技术。
快速检测方法的优点在于操作简单、结果快速,并且能够在实验室以外的场所进行。
此外,它们还具有较高的灵敏度和特异性。
然而,这些方法可能对微生物种类有一定的限制,且可能不如传统的培养方法准确。
四、基因测序技术基因测序技术在食品微生物检验中的应用越来越广泛。
通过对食品样品中微生物基因组的测序分析,可以更准确地鉴定微生物的种类和数量,以及评估其对人体健康的潜在威胁。
食品微生物检验和检测技术

食品微生物检验和检测技术食品微生物检验和检测技术是指对食品样品进行微生物检验和检测的技术方法。
微生物的污染对食品的质量与安全具有重要影响,因此必须对食品中的微生物进行检验和检测,确保食品的卫生安全。
1. 菌落计数法:菌落计数法是一种常用的食品微生物检验方法,通过将食品样品接种在适当的培养基上,培养一定时间后,根据菌落的形状、颜色、大小等特征进行计数。
菌落计数法可以测定食品中的总菌落数、霉菌数、大肠菌群数等指标,对于评估食品的卫生质量具有重要意义。
2. PCR法:PCR法是一种利用聚合酶链反应技术对食品中微生物进行检测的方法。
该方法通过寻找并扩增微生物DNA片段,利用特定的引物和聚合酶,在经过多次扩增反应后,可以检测到微生物DNA的存在与数量。
PCR法具有高灵敏度、高特异性和高效性的优点,能够快速准确地检测食品样品中的微生物。
3. ELISA法:ELISA法是一种常用的免疫学分析方法,可以通过检测食品样品中微生物所产生的抗原或抗体来确定微生物的存在与数量。
ELISA法具有灵敏度高、选择性好、简便快速等优点,广泛应用于食品微生物检测中。
4. 快速检测技术:快速检测技术是指通过分子生物学、免疫学等方法,结合微生物的快速培养和检测手段,能够在较短时间内对食品样品中的微生物进行快速检测的技术。
这些技术包括Butterfield法、PETRIfilm法、ATP生物发光法等,具有操作简便、敏感性高、准确性强等特点,可以大大缩短食品微生物检测的时间。
1. 食品卫生监督:食品微生物检验和检测技术能够对食品加工过程中的微生物污染进行监督与控制,保证食品的卫生质量,确保食品安全。
3. 疾病防控:食品微生物检验和检测技术可以对食品中的病原微生物进行及时检测,发现病原微生物污染的食品,采取相应的措施进行隔离与处理,防止疾病的传播与流行。
食品微生物检验和检测技术是保证食品安全、质量稳定以及疾病防控的重要手段和方法,对于保障广大人民群众的身体健康具有重要意义。
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食品中微生物的检验一、概念和分类微生物并不是生物学分类学上的专门名词,而是对所有形体微小,单细胞的或个体结构较为简单的多细胞的、甚至没有细胞结构的低等生物的统称。
微生物群体非常庞杂,种类繁多,包括细胞型和非细胞型两类。
凡具有细胞形态的微生物称为细胞型微生物。
细胞型微生物按细胞结构又分为原核微生物和真核微生物。
原核生物的主要特点:细胞内有明显的核区,但没有核膜包围;核区内含有一条双链DNA构成的染色体;能量代谢和很多合成代谢均在质膜上进行,核糖体分布在细胞之中;相对于原核微生物,真核微生物的细胞结构有了真正的细胞核,有多种细胞器;而病毒则不具有细胞结构,由核酸和蛋白质组成,可以认为是超显微的、没有细胞结构的、专性活细胞内寄生的实体。
它们在活细胞外具有一般化学大分子的特征,在宿主细胞内又具有生命特征。
可以作为了解的是,病毒可以通过细菌滤器,且对抗生素不敏感,对干扰素敏感。
二、细菌、霉菌、酵母菌和致病菌介绍细菌的细胞结构在原核生物中具有代表性,主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成,有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。
在自然界中细菌是分布最广、数量最多的一类生物,并与食品关系最为密切。
是食品理论、工业发酵和酿造研究的主要对象,也是导致食品腐败的主要类群。
细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状,分别被称为球菌、杆菌和螺旋菌。
霉菌是一些丝状真菌的统称。
在自然界分布极广,它的营养来源主要是糖类和少量氮、矿物盐等,极易在含糖的食品、饼干、面包和各种谷物、水果上生长。
经常会有食品会因为发生霉变而不能食用,还有些霉菌会产生毒性很大的毒素,比如黄曲霉素、黄米毒素、杂色曲霉素和展青霉素等等,都可能导致癌症,这类霉菌在大米和花生中最多。
由此,对霉菌的检测尤为重要。
霉菌菌体是由分支或不分支的菌丝组成,菌丝细胞均由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、核糖体以及内含物组成。
在固体培养基上,部分菌丝深入培养基内吸收养料,称为营养菌丝;另一部分则向空气生长,称为气生菌丝;有的气生菌丝发育到一定阶段分化为繁殖菌丝。
霉菌的菌落一般比细菌菌落大几倍到几十倍,同一种霉菌,在不同成分的培养基上形成的菌落特征可能有变化,但各种霉菌,在一定的培养基上形成的菌落大小、形状、颜色等却相对稳定。
菌落特征也是鉴定霉菌的重要依据之一。
酵母菌多数为单细胞,一般呈圆形、椭圆形、圆柱形或柠檬形,也有些酵母菌细胞与其子代细胞连在一起成为链状,形成假菌丝,称为假丝酵母。
酵母菌在适宜的培养基上形成的菌落与细菌相似,但比细菌菌落大而且厚,菌落表面湿润、粘稠、易被调起,有些种因培养时间太长使菌落表面皱缩。
三、培养基(北京陆桥)1、微生物的营养微生物同其他生物一样,需要不断地从外部环境中获取营养,才能够维持生命。
微生物细胞主要有水、有机物和无机盐等化学成份组成,不同的微生物种类其细胞的化学组成也不相同,而且含量也有差异。
因此,维持微生物生长所需要的化学元素的种类与含量也不相同。
一般来说细胞含有某种元素的量高则细胞对这种元素的需要量也就大,含量低则需要量也小。
这也是为什么我们不同的微生物培养要选择不同的培养基。
另外,同一种微生物在不同的培养基上的菌落形态也有差别,所以在选择培养基是要注意。
微生物所需要的营养物质按照它们在机体中的生理作用不同,可以分为碳源、氮源、无机盐和生长因子四种类型。
能被微生物用来构成细胞物质的或代谢产物中碳(氮)素来源的营养物质称为碳(氮)原物质;无机盐为微生物机体提供金属元素;有些微生物在含有氮源、碳源、无机盐的培养基上人不能生长,而需要添加某些生长因子,满足生长的需要,比如维生素、氨基酸、嘌呤碱基等。
我们经常用到营养物质:单糖、淀粉等(碳源);尿素、硫酸铵、蛋白胨、牛肉膏等(氮源);硫酸锌等(无机盐)。
2、培养基配制培养基是人工配制的合适于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,是进行微生物培养的基础。
配制培养基需要遵循一定的原则:第一,根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基;自养型微生物合成能力强,可以利用简单的无机物质合成复杂的细胞物质,其培养基可以由简单的无机物质组成。
而异样型微生物合成能力差,不能以无机物质作为唯一营养源,就要在培养基中添加一些有机物质(比如葡萄糖等)。
另外细菌和酵母菌对培养基的要求也不同,细菌一般用牛肉膏蛋白胨培养基培养,而酵母菌则用麦芽汁培养基培养。
第二,注意各种营养物质的浓度和配比;微生物生长所需要的营养物往往是在浓度合适的条件下才表现出良好的作用,浓度大时反而对微生物生长期抑制作用。
微生物只有在适合生长的条件下,才表现出应有的形态特征,而不适合的条件下生长,会是微生物的形态特征发生改变。
第三,将培养基的pH控制在一定的范围之内,满足不同类型微生物的生长繁殖或积累代谢产物。
各种微生物生长的最适pH各不相同,一般来说,细菌生长的pH在中性和微碱性之间(pH在7-7.5),酵母菌和霉菌生长的pH值通常是偏酸的(pH 在 4.5-6)。
另外由于微生物在生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累,会改变培养基的pH值,如果不及时控制,往往会导致生长停止。
因此,为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐。
3、培养基的类型及应用培养基的种类很多,按培养基组成物质的化学成分分为合成培养基和天然培养基;根据物理状态不同分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基(常用凝固剂有琼脂、明胶和硅胶,硅胶是由无几的硅酸钠和硅酸钾被盐酸及硫酸中和时凝聚而成的胶体,不含有机物,因而适合于用来分离和培养自养型微生物);根据培养基的特殊用途,可将培养基分成基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基等。
基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。
牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基;加富培养基:在普通培养基上加入其他营养物质,用以培养某种或某类营养要求苛刻的一样微生物;选择培养基:根据某种或某一类微生物的特殊营养需求或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。
利用这种培养基可以将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。
比如,我们在培养基中加入青霉素或者四环素等抗生素(生长抑制剂,抑制细菌和放线菌生长),可以分离酵母菌和霉菌;通过在培养基中加入结晶紫或提高培养基中氯化钠的浓度(7.5%),可以从混杂的微生物群体中分别分离出革兰氏阴性菌或葡萄球菌;加孔雀石绿可以分离出革兰氏阳性菌。
鉴别培养基:在普通培养基内加入某种试剂或化学药品,使得某种微生物在这个培养基上生长后,可以产生某种代谢产物,这种代谢产物可以与培养基中的特定试剂或化学药品起反应,产生某种明显的特征性变化。
根据这种特点来区分微生物。
比如:大肠菌群测定中,液体培养基中加入溴甲酚紫和发酵管,来指示微生物生长过程中是否产酸产气;伊红美蓝培养基是一种鉴别培养基,常用于检查乳制品和饮用水中是否含有致病性的肠道细菌,伊红为酸性染料,美蓝则为碱性染料。
当大肠杆菌发酵乳糖产生混合酸时,与伊红染色,再与美蓝结合生成紫黑色化合物。
在此培养基上生长的大肠杆菌形成呈紫黑色带金属光泽的小菌落。
而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。
不能发酵乳糖的细菌产碱性物较多,带负电荷,与美蓝结合,被染成蓝色菌落。
还可以加入明胶,看液化明胶的情况。
四、微生物检验食品中的微生物检验项目主要有四个:菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌、致病菌。
其中致病菌又主要包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌。
首先,我们看一下菌落总数的测定。
我们先弄清楚几个概念什么是菌落、菌落总数和细菌总数?我们都知道单个细菌用肉眼是看不见的,但是,当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,便会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
而菌落总数就是指食品经过检样处理,在一定条件下进行培养后(如培养基成分、培养温度和时间、PH、需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。
更确切地说即在需氧情况下,36℃±1℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
可见把菌落总数就等同于细菌总数是不确切的。
我们可以看看长在营养琼脂平板上最常见的菌落形态,当然并不是所有的菌落都会长的这么规则,而且也不是所有的菌落都会长的这么大,像葡萄酒、水这样的样品长出的菌落就会很小。
这就需要我们借助放大镜来观察,防止漏数菌落数。
弄清这几个概念后,我们就来看一下菌落总数测定的具体操作步骤:(1)以无菌操作,将检样25g(25ml)剪碎放于含有225ml,灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。
固体检样最好用均质器以8000-10000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
(2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1:100的稀释液。
(3)另取1ml灭菌吸管,按上面操作顺序,做10递增稀释液,如此每增加一次,即换用1支1ml灭菌吸管。
(4)根据样品卫生标准要求或对样本污染情况进行估计,选择2-3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1 ml稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
(5)稀释液移入平皿后,应及时(从检样稀释到倾注平板不超过20min)将凉至46℃左右营养琼脂培养基注入平皿内15ml,并转动平皿使混合均匀。
同时,将营养琼脂培养基倾入不加有1ml稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
(6)待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,。
取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。
在操作过程中要注意几个事项:1.操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的。
所用剪刀、镊子等器具也必须进行灭菌处理。
样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。
2.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。
固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。
3.倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响菌的生长,过低琼脂易于凝固而不能与菌液充分混匀。
如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。
4.倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。