以没食子酸为对照品 ( FC酚法)总酚的含量测定方法
总酚与单宁的测定
一、单宁红葡萄酒颜色的稳定很大程度上取决于单宁荷花色素苷发生的缩合反应，由于这种物质的存在，葡萄酒成熟过程中的颜色趋于稳定。
单宁也是呈味物质，它与多糖和肽缩合，使酒更为柔和。
有氧时缩合为浅黄色，有收敛性;无氧时为棕红色，无收敛性。
1、 高锰酸钾氧化法① 原理：利用酒中的单宁色素和其他非挥发性还原物质，在酸性条件下，能被高锰酸钾所氧化，而酒中的单宁色素又能被活性炭吸附除掉，据此测出酒中单宁色素的含量。
② 试剂a.0.1mol/L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）标准溶液：称取3.3g 高锰酸钾，溶于100m L 水中，缓缓煮沸15min ，冷却后用水稀释至1000mL ，置于暗处保存一周。
以4号玻璃漏斗过滤于干燥的棕色瓶中。
标定：准确称取0.2g （准确至0.0002g ）于105～110℃烘至恒重的基准草酸钠置入250m L 三角瓶中，加100m L （8+92）硫酸溶液溶解，加热至60～70℃，趁热用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈粉红色。
同时做空白试验。
计算公式如下：高锰酸钾浓度（1/5KMnO 4，mol/L ）=m/((V-V 0)*0.06700)式中 m-----草酸钠的质量，gV -----测定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mLV 0----空白试验消耗高锰酸钾溶液的体积，m L0.06700-----消耗1mL 1mol/L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）标准溶液相当于草酸钠的质量，g/mmol b.0.05mol /L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）溶液：将0.1mol/L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）标准溶液稀释至原浓度的1/2c.靛红纸试剂（靛蓝二黄酸钠，靛胭脂）：称取靛红1.5g ，溶于50m L 硫酸中，用水稀释至1000m L 。
桃金娘根中没食子酸和总多酚含量测定
桃金娘根中没食子酸和总多酚含量测定目的测定桃金娘根中没食子酸和总多酚的含量。
方法没食子酸的含量测定采用超高效液相色谱法。
色谱条件：以甲醇-0.5%磷酸（15︰85）为流动相，采用二级管阵列检测器（PDA）检测，检测波长为215 nm，流速为0.2 mL/min。
总多酚的含量测定采用分光光度法，以没食子酸为对照品，福林酚试剂为显色剂，在748 nm波长下进行测定。
结果没食子酸在3.853～115.6 μg/mL（r = 0.9999）浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，回收率为98.73%～100.76%。
总多酚分析的线性范围为1.0～7.0 μg/mL（r = 0.9995），回收率为98.04%～101.17%。
结论该方法简便、快速、重现性好，可用于桃金娘根的质量控制及定量分析。
[Abstract] Objective To determine the content of gallic acid and total polyphenol in Radix Rhodomyrti. Methods Gallic acid in Radix Rhodomyrti was determined by ultra performance liquid chromatography （UPLC）with photo-diode-array （PDA）at 215 nm，and the mobile phase was methol-0.5% phosphate acid solustion （15∶85）at a flow rate of 0.2 mL/min. The content of total polyphenol was analyzed by spectrophotometry at 748 nm，gallic acid was selected as the reference substance. The colour-developing agent was Folin-Ciocalteu′s phenol reagent. Results The linear range for gallic acid and total polyphenol was 3.853-115.6 μg/mL （r = 0.9999）and 1.0-7.0 μg/mL （r = 0.9995）respectively. The recovery rate of gallic acid was 98.73%-100.76% and recovery rate of total polyphenol was 98.04%-101.17%. Conclusion The method is simple，rapid and good reproducible，can be used for quality control and quantitative analysis of Radix Rhodomyrti.[Key words] Radix Rhodomyrti；Gallic acid；Total polyphenol；UPLC；Spectrophotometry桃金娘[Rhodomyrtus tomentosa（Ait.）Hassk]是一种优良的野生植物资源，尤盛产于中国和日本的南部等地区[1-2]；桃金娘根（Radix Rhodomyrti）为桃金娘的干燥根，含有黄酮苷、花色苷等黄酮类成分以及植物多糖成分和没食子酸等化合物多种活性成分[3-5]，以“通经活血、收敛止血”功效收载于《兽药国家标准（化学药品、中药卷）第一册》中[6]。
福林-酚比色法测定桑椹中总多酚
福林-酚比色法测定桑椹中总多酚李巨秀，王柏玉【摘要】摘要：以桑椹为原料，没食子酸为标准物质研究了用福林-酚比色法测定桑椹提取液中多酚类物质含量的最适反应条件。
结果表明，当福林-酚试剂与质量分数为12%的Na2CO3溶液体积比为1:2、反应温度20℃、反应时间2h时，总多酚的含量与吸光度呈良好的线性关系，测定方法的平均回收率为97.63%，相对标准偏差(RSD)为4.5%。
该方法具有所用试剂量少、操作方便、灵敏度高、精密度高、稳定性高等优点，适宜桑椹样品总多酚含量的测定。
【期刊名称】食品科学【年(卷),期】2009(030)018【总页数】4【关键词】桑椹；Folin-Ciocaileu；比色；总多酚含量桑椹(Fructus mori L.)为桑科植物桑的果实，富含多酚类化合物，是桑椹中一类重要的生物活性物质，其主要成分是花色苷[1-2]。
据大量研究报道，多酚化合物具有清除自由基、抗动脉硬化、降血脂、防止衰老和肿瘤等功能[3-6]，已经成为当前功能性食品研究的热点。
近年来对于苹果、葡萄、茶叶等的多酚物质的研究较多和深入[7-9]，而对桑椹多酚研究的报道较少。
陕西有大面积的桑椹种植区，研究桑椹中的多酚化合物，对提高桑椹经济价值，增加桑蚕业的附加值具有一定的推动作用。
多酚含量的测定方法有高锰酸钾法、酒石酸分光光度法、原子吸收法、紫外分光光度法等。
各种方法都有局限性，有的操作繁杂、费时，有的测定结果的重复性差，有的测定的误差大、灵敏度差，只能在很小的范围内加以采用[10-12]。
本工作通过乙醇提取桑椹果实中的多酚化合物，以没食子酸为标准物采用福林-酚法测定桑椹中多酚类物质的含量，分别研究最佳吸收波长、显色剂、显色时间和温度，并对分析方法的精密度实验、稳定性实验和加标回收率等进行评价，以期寻找操作简单、分析准确度高、速度快的桑椹多酚的分析方法，为桑椹果的开发利用提供得科学依据。
1 材料与方法1.1 材料与试剂桑椹于2008年采摘于西北农林科技大学桑蚕研究所，分装于保鲜袋中，放置于-30℃冰箱中保藏。
测定的指标和方法3-31
1、总酚含量的测定（FoLin-CiocaLteu试剂刘老师买了，2-3天回来；到时候咱们用点就行了。
自己配的话很麻烦）采用福林-酚法检测提取物的总酚含量准确吸取0.2ml提取液于10ml试管中，加入1ml 1N的福林-酚试剂，摇匀，静置5min，加入4ml饱和的Na2CO3溶液，然后以双蒸水定容至10ml，在室温下避光放置2h，以空白为对照在760nm处测定其吸光值，重复测定3次。
总酚含量分别表示为每克中草药粉末干重和提取物干重相当的没食子酸的量（mg）。
没食子酸标准曲线的绘制：精密称取没食子酸标准品10.00mg，以双蒸水溶解并定容至100ml，摇匀，配成浓度为100mg/L的标准品溶液。
精密吸取没食子酸标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml于10 ml试管中，分别加入1 ml1N 的福林-酚试剂，摇匀，静置5min，加入4ml饱和的Na2CO3溶液，然后以双蒸水定容至10ml，在室温下避光放置2h，以空白为对照在760 nm处测定其吸光值。
以没食子酸含量（mg）为横坐标，吸光值A760为纵坐标，进行线性回归得标准曲线方程Y=1.0477x+0.0438,R2=0.9964，FoLin-CiocaLteu试剂的配制（你们也再查查）：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。
滤液呈微绿色。
吸取10 mL 1 moL/ mL的Na0H溶液，放入100 mL锥形瓶内，加入2滴酚酞指示剂，用上述滤液滴定。
当溶液的颜色由绿经紫红到紫灰，到突然转变成墨绿色即为滴定终点。
总黄酮总酚含量测定方法
太行菊的抗氧化活性试验计划1. 实验内容对太行菊的甲醇提取物的乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水共六种萃取物进行总酚、总黄酮含量的测定，分析实验结果，选择总分和总黄酮含量比较高的两个层分进行抗氧化能力测定，分析其抗氧化能力强弱，判断其有无研究价值。
用Folin-Denis法测定太行菊甲醇提取物各萃取层组分的总酚含量，以没食子酸作为标准品进行对照。
用三氯化铝法测定太行菊各萃取层组分的总黄酮含量，以槲皮素作为标准品进行对照。
根据实验结果，选择总酚和总黄酮含量较高的萃取层组分进行抗氧化能力测定，包括DPPH自由基清除能力测定，羟基自由基清除能力测定，还原能力测定。
2.实验步骤将太行菊用甲醇溶液回流提取其有效成分，旋转浓缩后用水溶解，然后分别用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取、水层，得相应层的馏分。
2.1总酚含量测定：在试管中分别加入不同层样品（1mg/ml）0,25ml +Folin-Denis 试剂0.5ml ，5min后，再加入Na2CO3饱和溶液0.5ml,并做三组重复。
对照组中样品和Folin-Denis试剂用DW代替，其他不变。
空白组中Folin-Denis试剂用DW代替，其他不变。
在760nm紫外光下测定吸光度。
对实验结果处理后做标准曲线，以没食子酸为标准品。
以没食子酸的微克数表示总酚含量:吸光度=0.0069 μg没食子酸－0.042。
Folin-Denis试剂的配制：在2L烧瓶中加入750ml蒸馏水，再加入100g钨酸钠和20g磷钼酸，再加入50ml正磷酸回流2h, 冷却后装入1L容器内置于暗处实验组*3:体积Folin-Denis的体积Na2CO3MEOH层0.25ml 0.5ml 0.5mlH层0.25ml 0.5ml 0.5mlCH层0.25ml 0.5ml 0.5mlEA层0.25ml 0.5ml 0.5mlBUOH层0.25ml 0.5ml 0.5mlW层 1 2 2对照组*3：DW DW Na2CO3体积0.25ml 0.5ml 0.5ml空白组*3：体积DW的体积Na2CO3MEOH层0.25ml 0.5ml 0.5 mlH层0.25ml 0.5ml 0.5 mlCH层0.25ml 0.5ml 0.5mlEA层0.25ml 0.5ml 0.5mlBUOH层0.25ml 0.5ml 0.5 mlW层0.25ml 0.5ml 0.5ml2.2总黄酮含量测定：在试管中分别加入不同层样品(1mg/ml) 0.5ml + 1M CH3COOK溶液0.1ml + DW 2.8ml + 95%乙醇 1.5ml + 10% AlCl3·6H2O溶液0.1ml，并做三组重复。
冰糖草中总酚酸的含量测定
冰糖草中总酚酸的含量测定目的：建立冰糖草水提液中总酚酸的含量测定方法。
方法：采用分光光度法，以没食子酸为对照品，0.6%FeCl3-0.9%K3[Fe（CN）6]（1∶0.9）混合液为显色剂，在720nm波长处进行冰糖草中总酚酸的含量测定。
结果：所测定总酚酸的线性相关系数为0.9995，精密度≤0.99%，平均回收率为99.4%，RSD≤2.31%，重现性好。
结论：该方法简便快、准确、稳定，可作为冰糖草总酚酸含量测定的方法。
标签：冰糖草；总酚酸；含量测定；分光光度法Determination of Total Phenolic Acid in Scoparia dulcisCHEN LizhenAI ZhaohuiCAI LanjieLI JuanZHAI RuiruiFU YurongDepartment of Pharmacy，Hainan Medical College，Haikou 571199，Hainan，P. R. ChinaAbstract：[WTHZ]Objective[WTBZ] To establish the methods for detection of total phenolic acid in Scoparia dulcis. [WTHZ]Methods[WTBZ] Total phenolic acid was analyzed by spectrophotometry at 720nm. Gallic acid as a reference，the colour reaction agent was the mixture solution of 0.6%FeCl3-0.9%K3[Fe（CN）6]（1∶0.9）. [WTHZ]Results[WTBZ] The linear correlation coefficient of total phenolic acid was 0.9995. The precisions were less than 0.99%；the average recovery was 99.4% with RSD of less 2.31%. [WTHZ]Conclusion[WTBZ] The method was proved to be fast，simple，accurate and reliable for the quality control of gallic acid and total phenolic acid in Scoparia dulcis.Keywords：Scoparia dulcis；Total Phenolic Acid；Quantitative method；Spectrophotometry冰糖草为玄参科植物野甘草Scoparia dulcis L.的全草，为多年生草本植物，主要分布于我国广西、海南、广东、福建、台湾及东南亚地区等，别名假甘草、假枸杞、通花草、热痱草、米碎草等[1]。
北方主要越橘栽培品种果实品质及抗氧化能力的比较1)
北方主要越橘栽培品种果实品质及抗氧化能力的比较1)周丽萍;朱良玉;张悦【摘要】以北方主要越橘栽培品种为材料,进行了果实品质、抗氧化物质及其能力的比较分析。
结果表明,6个品种中北蓝(Northblue)果形最大,蓝丰(Bluecrop)果实总糖含量最高,美登(Blomidon)果实的可溶性固形物和总酸含量最高。
越橘果实的主要抗氧化物质为花色苷、酚类和类黄酮化合物,其中,北蓝果实的花色苷和总黄酮含量最高,北陆(Northland)的多酚含量最高,伯克利(Berkeley)的花色苷、总黄酮和多酚含量均最低。
通过总还原力、DPPH 和清除超氧自由基的检测,蓝丰、北蓝、北陆的抗氧化能力较强,伯克利的抗氧化能力最弱。
% The fruits of cowberry cultivars cultivated in North China were selected as material ,and the fruit quality ,sugar and acid composition ,antioxidant properties and activity were analyzed in this experi-ment .The results showed that of the 6 cultivars ,Northbule produced the biggest fruit ,Bluecrop had the highest sugar content ,Blomidon had the highest soluble solids and total acid content .Anthocyanins , phenolics and flavonoids were the main antioxidant compounds and Northblue had the highest total antho -cyanin and total flavone content ,Northland had the highest polyphenols content ,while Berkeley had the lowest anthocyanins ,total flavone and polyphenols content .As measured by assays of total reduction ca-pacity ,1 ,1-diphenyl-2-picrylhydraz scavenging (DPPH) ,superoxide free radicals scavenging ,Bluecrop , Northbule and Northland had showed higher antioxidant activity than the other cultivars ,while Berkeley had the lowest antioxidant activity .【期刊名称】《中国林副特产》【年(卷),期】2012(000)005【总页数】3页(P4-6)【关键词】越橘;果实品质;抗氧化能力【作者】周丽萍;朱良玉;张悦【作者单位】黑龙江省科学院自然与生态研究所,哈尔滨 150040;黑龙江省科学院自然与生态研究所,哈尔滨 150040;黑龙江省科学院自然与生态研究所,哈尔滨150040【正文语种】中文越橘属于杜鹃花科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium spp.）植物。
采收期对苹果多酚和抗氧化能力的影响
届毕业生毕业论文采收期对苹果多酚和抗氧化能力的影响姓名学号学院专业班级导师日期目录摘要 (1)Abstract (2)1 材料和方法 (5)1.1 试验材料 (5)1.2 试验方法 (5)1.2.1 酚类物质的提取 (5)1.2.2 总酚含量的测定 (5)1.2.3 总黄酮含量的测定 (6)1.2.4 DPPH法测定抗氧化性 (6)1.2.5 游离多酚的测定 (7)1.3 数据处理与分析 (7)2 结果与分析 (7)2.1 标准曲线 (7)2.1.1 苹果总黄酮标准曲线 (7)2.1.2 苹果总酚标准曲线 (8)2.1.3 苹果游离多酚色谱图 (8)2.1.4 DPPH的标准曲线 (9)2.2 苹果总黄酮含量分析 (9)2.3 苹果总酚含量分析 (10)2.4 苹果游离多酚分析 (10)2.5 苹果果实抗氧化性分析 (12)2.6 果实酚类物质含量及抗氧化性的相关性分析 (12)3 结论 (13)参考文献 (15)致谢 (17)采收期对苹果多酚和抗氧化能力的影响摘要：以红富士苹果为试材，自9月12日起每隔3d采果1次，即从9月12日共分8期采收，对其多酚及抗氧化能力的进行分析，研究采收期对苹果多酚和抗氧化能力的影响。
试验结果表明：在总黄酮方面，采收期对苹果的影响较大，随着采收期日期的延后，苹果果肉和果皮总黄酮含量逐渐下降，果肉总黄酮最高为2.02±0.08a mg RE /g FW，果皮总黄酮含量最高为7.08±0.22a mg RE /g FW；在总酚方面，采收期对苹果的影响较大，随着采收期日期的延后，苹果果肉和果皮总酚含量逐渐下降，果肉总酚最高为0.87±0.11a mg GAE /g FW，果皮总酚含量最高为4.03±0.18a mg GAE /g FW，果皮总酚远高于果肉总酚；在游离多酚方面，绿原酸和表芦丁是红富士苹果中主要的游离多酚，果肉的绿原酸最高为25.66±0.68a µg /g FW，果皮的绿皮素为138.44±6.64a µg /g FW。
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Folin－ Cioealteu 比色法( FC酚法）
一、仪器
UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;
超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型) ;
恒温水浴锅
二、试剂
没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。
1.3 福林试剂的配制
在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水，85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL，充分混匀，以小火回流10h，再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水，开口继续煮沸15min，待双氧水完全挥发，呈亮黄色。
冷却后移入250mL 容量瓶中，定容置于棕色试剂瓶中，放入冰箱中备用。
1.4 溶液的配制
称取40gNa CO3, 溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%的溶液。
二、方法与结果
1.对照品溶液的制备并绘标准曲线
精密称取没食子酸标准品0.0110g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，得浓度为0.11mg /mL 的标准液。
准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中，加蒸馏水至6.0mL，然后分别加入FC 试剂0.5mL，混匀，在0.5～8min内加入1.5mL20% 的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定三次。
2、供试品溶液的制备
样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中，加入9.5mL 蒸馏水，摇匀，再加入0.5mL 福林试剂，混匀，在0.5 ～8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液，充分混合后定容， 30℃避光放置0.5h，以没食子
酸标准液为空白对照， 760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度）。
4、以没食子酸在反应体系中的质量浓度C为横坐标，吸光度值A为纵坐标，绘制标准曲线。