病理技术的发展与现状
中国病理学的发展和现状

中国病理学的发展和现状
中国病理学的发展和现状可以追溯到20世纪初。
在那个时候,中国的病理学家们在缺乏先进技术和设备的情况下,依靠自己的聪明才智和
勤奋工作,赢得了世界范围内的声誉。
随着时代进步,中国的病理学领域也取得了巨大进展。
目前中国的病
理学科已经日趋完备,各种诊断手段和技术设备也越来越先进,这在
一定程度上为医生们提供了更加精准的临床诊断。
中国病理学的发展得益于我国政府长期以来对医疗事业的投入和发展。
在相对成熟的医疗体制的支持下,我们的病理学家们已经成功地开展
了各种各样的研究和临床工作,包括诊断和治疗某些罕见疾病,如癌症、心脏病和肝脏疾病等。
与此同时,中国的病理学家们也在不断加强与国际同行的交流与合作。
多次参加国际病理学会议,积极与国际同行沟通,不断吸收外国先进
理念和技术,使我国的病理学领域逐步走向世界先进水平。
虽然我们的病理学科已经取得了很好的发展,但也存在一些问题。
例如,在一些地方,仍然存在病理学人力资源的短缺和技术设备不足的
情况,医患双方在病理学知识的了解和应用方面还存在差距,需要在
这些问题上逐渐完善。
总之,中国病理学的未来在于不断发展和完善。
我们的病理学家们将继续努力,尽可能地利用现代病理学的先进技术和知识,使病理学领域能够更好地服务于人民的健康。
动物病理学的发展历程和应用现状

动物病理学的发展历程和应用现状动物病理学是研究动物疾病的起源、发展和变化规律的科学。
它通过病理变化全面分析疾病的本质,为疾病的诊断和治疗提供依据。
本文将介绍动物病理学的发展历程和应用现状。
一、绪论动物病理学是一门综合性的学科,它的发展与人类医学和兽医学的发展密切相关。
早在古代,人们就开始对动物疾病进行观察和研究。
随着科学技术的进步,特别是显微镜的发明和应用,动物病理学得到了迅速发展。
二、动物病理学的发展历程1. 基础研究阶段在18世纪末19世纪初,人们开始通过解剖和组织学观察来研究动物疾病。
德国科学家鲁道夫·维尔弗(Audolf Virchow)提出了“细胞病变学说”,奠定了动物病理学的基础。
此后,显微镜被广泛应用于病理学研究,人们对动物疾病的认识大大提高。
2. 实验病理学阶段随着实验方法的引入,动物病理学正式成为一门独立的学科。
法国科学家路易·巴斯德(Louis Pasteur)通过对动物实验的研究,证明了细菌和病原微生物是引起动物疾病的主要原因。
这一阶段动物病理学的研究方法主要包括实验感染、组织切片、免疫组化等。
3. 分子病理学阶段随着生物化学、生物技术的发展,动物病理学进入了分子病理学阶段。
人们开始通过基因工程和基因表达技术来研究动物疾病的分子机制。
这一阶段的动物病理学研究更加深入,揭示了疾病的分子变化和分子诊断的新途径。
三、动物病理学的应用现状1. 动物疫苗研发动物病理学在动物疫苗的研发中起着重要的作用。
通过研究疫苗接种后的病理变化,可以评估疫苗的效果和安全性。
动物病理学也为疫苗的生产和质量控制提供了依据。
2. 动物疾病诊断动物病理学在动物疾病的诊断中发挥着重要的作用。
通过对动物组织进行病理学检查,可以确定疾病的类型和程度。
动物病理学还可以为动物疾病的预后评估和治疗方案制定提供参考。
3. 新药研发和安全评估动物病理学在新药研发和安全评估中也起着重要的作用。
通过观察药物给动物带来的病理变化,可以评估药物的疗效和毒性。
病理学研究的现状与前沿

病理学研究的现状与前沿病理学是医学的一门基础学科,主要研究疾病的发生机制、病因、病理变化以及与这些变化有关的生理和生化过程。
病理学不仅是医学诊断和治疗的重要依据,也是现代医学中最活跃的学科之一。
本文将探讨病理学研究的现状与前沿。
一、病理学研究现状1. 分子病理学研究分子病理学研究是病理学领域中的一项新进展。
它主要探究疾病与分子水平的关系,对疾病的发生、发展等各个方面做出深入的研究。
目前分子病理学已经成为病理诊断和治疗的重要方向,这和分子生物学技术的发展密切相关。
2. 免疫病理学研究免疫病理学研究是对疾病的免疫状况及其作用机制的研究,同时也是现代医学研究的一个热门方向。
在这个方向上,研究人员通过对免疫系统的深入研究,以及对免疫疾病和免疫治疗的研究,对各种疾病的诊断和治疗提出了新的方案,同时也不断为人类解决各种免疫系统相关的问题。
3. 神经病理学研究神经病理学研究是指主要研究神经系统疾病的形态学和分子生物学机制。
神经病理学是神经学和病理学的交叉学科。
神经病理学的研究主要关注神经疾病的辨别、鉴别诊断和定位诊断等方面,同时也对治疗和预后提供重要参考。
二、病理学研究前沿1. 生物信息学与病理学生物信息学是计算机科学、系统生物学、统计学、遗传学和分子生物学等多学科交叉的新兴领域。
它以分析大规模生物数据为核心,运用统计学、计算机科学和数学方法,研究生物大数据的存储、管理、分析和挖掘。
生物信息学与病理学的结合可以大大加强疾病的分子诊断和疗效预测。
2. 人工智能与病理学随着人工智能技术的发展,越来越多的应用进入了医学领域。
在病理学方面,人工智能可以帮助病理医师更好地理解组织学图像,提高精确性和效率,也可以通过机器学习和图像分析技术改善疾病的分类和诊断。
3. 新一代测序技术与病理学新一代测序技术是通过对DNA和RNA进行高通量测序,来获取分子生物学信息的一种新技术。
该技术能够高效地、大规模地获取基因组、转录组和表观组等分子生物学信息。
病理取材规范的现状与存在问题分析

病理取材规范的现状与存在问题分析病理学是医学中用于诊断疾病的一门学科,病理取材是病理学中最为基础和重要的环节之一。
病理取材的规范与否直接关系到病理诊断的准确性和临床治疗的效果。
本文将对病理取材规范的现状与存在的问题进行分析,以期提高临床病理工作的质量和效率。
1. 现状分析1.1 病理取材规范的推广度不高目前,国内病理科室中存在着一些技术水平不高或对病理取材规范不够重视的情况。
一些医院缺乏相关的培训机制,导致医务人员对病理取材规范的认识不够深入,执行不够规范。
1.2 取材环境存在改善空间病理取材一般在手术室进行,取材环境的干净、整洁和安静对病理标本的质量有着重要影响。
但是,一些医院的手术室设备老旧,卫生条件不够理想,存在噪音干扰等问题,影响了病理取材的规范性和质量。
1.3 病理医师的专业素养有待提高病理医师是进行病理取材的关键人员,他们不仅需要具备丰富的病理学知识和临床经验,还需要具备良好的技术操作能力和细致的耐心。
然而,一些病理医师的专业素养有待提高,导致取材时存在操作不当、病理标本获取量不足或者取材的部位不准确等问题。
2. 存在问题分析2.1 病理取材规范的培训不足由于缺乏相关的培训机制和规范标准,一些医务人员没有得到系统的病理取材规范培训,导致取材过程中存在操作不当、标本质量不合格等问题。
2.2 规范执行的监督不力监督与管理是保证病理取材规范性的关键环节,然而,一些医院对病理取材规范的监督存在不足。
缺乏有效的评估和考核机制,导致一些医务人员在实际操作中存在懈怠现象,不重视病理取材的规范性。
2.3 操作疏忽导致标本质量下降病理标本的质量是病理诊断的基础,但是存在操作疏忽导致标本质量下降的情况。
比如,取材时没有足够的耐心和细致,导致标本提取量不足或者取材位置不准确,影响了病理诊断的准确性。
3. 解决办法与建议3.1 加强病理取材规范的培训医院应建立完善的病理取材规范培训制度,定期开展病理取材规范的培训课程,提高医务人员的规范意识和操作水平。
肿瘤病理学的现状与未来发展方向

肿瘤病理学的现状与未来发展方向肿瘤病理学是研究肿瘤形态、组织学和分子生物学特征的学科,是肿瘤学的基础。
随着现代医学研究的深入,肿瘤病理学也在不断发展和更新。
本篇文章将从现状和未来两个角度来探讨肿瘤病理学的发展方向。
一、肿瘤病理学的现状1.肿瘤病理学的诊断肿瘤病理学的主要任务是对组织学样本进行分析、诊断。
肿瘤病理学诊断过程中,医生需要观察和比较许多肿瘤组织学特征,如细胞形态、组织构造、核特征、核仁、染色体异常等,从而制定出合理的治疗方案。
然而,在肿瘤病理学诊断中,仍然存在诊断误差和诊断困难等问题,需要不断通过新的技术手段和方法来提高病理学家的诊断准确率。
2.肿瘤病理学的研究肿瘤病理学是肿瘤学的基础,直接影响着肿瘤学的治疗。
例如,现在很多靶向治疗都是基于肿瘤病理学分子生物学特征实施的,广泛的病理学研究为这些新型治疗手段提供了合理的基础。
同时,肿瘤病理学对于理解肿瘤发生的机制和进程,对于指导临床治疗也有十分重要的意义。
3.肿瘤病理学的技术随着各种新的技术、方法的出现,在诊断和治疗领域得到了广泛的应用。
例如,单细胞分析和分子学方法都极大地推进了原位病灶的诊断、基因异常分析等。
同时,小肺癌的诊断技术的进步,也使得小肺癌的敏感性和特异性得到了提高。
这些新的技术方法不仅在病理诊断方面起到了不可替代的作用,而且对肿瘤发病机制和转移机理的研究也都有十分重要的意义。
4.肿瘤病理学的临床应用随着肿瘤病理学的不断发展,其在前沿医学领域的应用也越来越广泛。
例如,针对一些肿瘤生长因子的抗体是目前治疗方案的基础,而使用抗体准确诊断某些类型的肿瘤,也是临床病理学的成果之一。
二、肿瘤病理学的未来发展方向1.多学科协作是未来的发展趋势肿瘤病理学是与肿瘤学、临床医学紧密联系在一起的领域。
很多肿瘤病理学领域的问题都需要各个科学领域的人的协作,例如分子生物学、免疫学、临床医学等。
多学科协作将会是肿瘤病理学领域的未来发展趋势。
2.人工智能技术的应用人工智能技术在肿瘤病理学领域也得到了广泛的应用。
病理学技术的发展现状与未来趋势

病理学技术的发展现状与未来趋势随着科技的不断进步,医疗领域的病理学技术也在不断发展和演进。
病理学是诊断疾病的一个重要学科,通过对组织和细胞的研究,帮助医生准确诊断病情并制定相应的治疗方案。
本文将探讨目前病理学技术的发展现状以及未来的趋势。
一、数字化病理学的兴起数字化病理学是指将组织标本数字化,利用计算机和网络技术进行远程诊断和分享。
这项技术的兴起,极大地提高了病理学的工作效率和准确性。
传统的病理学工作需要医生通过显微镜观察组织标本,而数字化病理学可以将组织标本的数字图像传输给远程专家进行诊断,避免了时空限制。
未来,随着人工智能技术的不断进步,数字化病理学有望实现更加准确和自动化的诊断,成为病理学领域的重要发展方向。
二、基因组学的应用基因组学是研究基因组结构和功能的科学,而在病理学中,基因组学的应用正在成为研究疾病的重要手段。
通过对疾病相关基因的检测和分析,可以预测患者的疾病风险,指导临床治疗。
例如,通过对癌症相关基因的检查,可以准确判断患者的癌症类型和预后,并制定个体化的治疗方案。
未来,基因组学的应用将进一步扩大,包括个体化药物治疗和预测患者治疗反应等方面。
三、多组学的融合多组学是指将多种技术和方法结合起来研究疾病的一种方法,如基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学等。
这种融合多种组学技术的方法,可以更全面地了解和解析疾病的发生机制。
例如,通过同时研究基因组和转录组的数据,可以发现基因突变对基因表达的影响,从而揭示疾病的遗传基础和发展过程。
未来,多组学的融合将成为病理学研究的重要领域,有助于更好地理解疾病的复杂性。
四、液体活检技术的发展传统的病理学工作需要通过取得患者的组织标本进行诊断,但这种方式不仅操作繁琐,而且对患者有一定的创伤性。
相比之下,液体活检技术成为了一种更为便捷和无创的病理学技术。
液体活检技术通过对患者的体液中的肿瘤标记物进行检测,可以非侵入性地进行早期癌症的筛查和监测。
未来,液体活检技术将进一步发展,包括检测更多种类的生物标志物和提高其诊断准确性。
分子病理学的发展现状

分子病理学的发展现状分子病理学是一门研究生物分子在病理学中应用的学科,它将分子生物学和病理学相结合,通过研究细胞和分子水平的变化来揭示疾病的发生机理,诊断及治疗。
随着科学技术的不断发展,分子病理学在近年来取得了巨大的进展,为临床诊断、预后评估以及个体化治疗提供了新的思路和方法。
一、进展和应用:分子病理学的发展推动了临床病理诊断的现代化。
传统的组织学方法主要依赖组织构造和形态学特征来判断疾病种类,而分子病理学则通过检测基因、蛋白质、RNA等分子水平的变化来辅助诊断和预后评估。
例如,通过检测肿瘤标志物、基因突变、蛋白质表达等,可以更准确地诊断癌症的种类、分期和预后。
分子病理学在个体化治疗方面也取得了重要进展。
分子诊断技术为临床药物靶向治疗提供了重要依据。
通过检测肿瘤特异性基因突变,可以选择更有效的靶向药物,避免对药物的耐药性和副作用。
例如,EGFR基因突变在肺癌患者中的检测,可以指导是否应用EGFR抑制剂来治疗。
此外,分子病理学在预后评估方面也发挥了关键作用。
通过检测肿瘤细胞内的各种分子标记物,可以预测疾病的进展和转移风险,帮助医生选择最佳治疗方案和综合治疗策略。
二、技术及方法:分子病理学的发展得益于生物技术的飞速发展。
目前,包括PCR、免疫组化、原位杂交、质谱分析等在内的一系列分子生物学技术已经在病理学领域得到广泛应用。
此外,高通量测序技术的发展为分子病理学研究提供了更广阔的视野和更深层次的理解。
免疫组化技术是目前最常用的分子病理学方法之一、它通过检测组织中的特定蛋白质表达情况,为疾病的诊断和分期提供了依据。
PCR技术则可以检测疾病相关基因的突变、扩增或缺失,对肿瘤的分子类型和药物敏感性进行评估。
质谱分析技术可以检测体液中的代谢产物、蛋白质和核酸等,为疾病的早期诊断和治疗监测提供了新的途径。
三、挑战和展望:尽管分子病理学取得了显著的进展,但仍然面临着一些挑战。
首先,技术的标准化和质量控制仍然是一个重要问题。
病理科发展现状

病理科发展现状
病理科作为医学领域的重要一环,其发展现状与医疗技术的进步、人才队伍建设以及市场需求等多方面因素密切相关。
首先,从整体上看,病理科的发展正在逐步得到重视和加强。
随着医疗水平的提高,人们对疾病的认识越来越深入,病理诊断在疾病诊断和治疗中的作用也日益凸显。
因此,各级医院都在加强病理科的建设,提高病理诊断的准确性和可靠性。
病理学科在中国的发展还存在小、弱、散的特点,这与病理学科设置的“随意性”有关。
我国病理学科模式按照前苏联模式来设置,但临床又是按照欧美模式在管理。
医院行政设置有社区、县、地市/省
级四级,但设置上并未实现资源共配置。
国家在等级医院设置过程中,要求二甲以上医院必须有病理科,但这一系列问题导致了我国病理科在发展过程中路遇诸多尴尬。
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病理科相对于其他科室可以说几乎无灰色收入,近年来,医院里临床、外科、检验等几大热门科室呼声越来越高,而病理科却逐渐无人问津。
在医院层面得不到重视,也带来了人员配置参差不齐、人员短缺、设备陈旧、工作地点能简则简等一系列问题。
总的来说,病理科的发展现状是矛盾和挑战并存的,需要更多的关注和支持,以确保其能够满足日益增长的临床需求,并保持其在医学领域的重要地位。
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病理技术的发展与现状病理学是研究疾病发生的原因、发病原理和疾病过程中发生的细胞、组织和器官的结构、功能和代谢方面的改变及其规律。
研究方法病理学的研究方法多种多样,研究材料主要来自自患病人体(人体病理材料)和实验动物以及其他实验材料如组织培养、细胞培养等(实验病理材料)。
(一)尸体剖检对死亡者的遗体进行病理剖检(尸检)是病理学的基本研究方法之一。
尸体剖检(autopsy)不仅可以直接观察疾病的病理改变,从而明确对疾病的诊断,查明死亡原因,帮助临床探讨、验证诊断和治疗是否正确、恰当,以总结经验,提高临床工作的质量,而且还能及时发现和确诊某些传染病、地方病、流行病、为防治措施提供依据,同时还可通过大量尸检积累常见病、多发病、以及其他疾病的人体病理材料,为研究这些疾病的病理和防治措施,为发展病理学作贡献。
显然,尸检是研究疾病的极其重要的方法和手段,人体病理材料则是研究疾病的最为宝贵的材料。
(二)活体组织检查用局部切除、钳取、穿刺针吸以及搔刮、摘除等手术方法,由患者活体采取病变组织进行病理检查,以确定诊断,称为活体组织检查(biopsy),简称活检。
这是被广泛采用的检查诊断方法。
这种方法的优点在于组织新鲜,能基本保持病变的真像,有利于进行组织学、组织化学、细胞化学及超微结构和组织培养等研究。
对临床工作而言,这种检查方法有助于及时准确地对疾病作出诊断和进行疗效判断。
特别是对于诸如性质不明的肿瘤等疾患,准确而及时的诊断,对治疗和预后都具有十分重要的意义。
(三)动物实验运用动物实验的方法,可以在适宜动物身上复制某些人类疾病的模型,以便研究者可以根据需要,对之进行任何方式的观察研究,例如可以分阶段地进行连续取材检查,以了解该疾病或某一病理过程的发生发展经过等。
此外,还可利用动物实验研究某些疾病的病因、发病机制以及药物或其他因素对疾病的疗效和影响等。
这种方法的优点是可以弥补人体观察之受限和不足,但动物与人体之间毕竟存在种种差异,不能将动物实验的结果直接套用于人体,这是必须注意的。
(四)组织培养与细胞培养将某种组织或单细胞用适宜的培养基在体外加以培养,以观察细胞、组织病变的发生发展、如肿瘤的生长、细胞的癌变、病毒的复制、染色体的变异等等。
此外,也可以对其施加诸如射线、药物等外来因子,以观察其对细胞、组织的影响等。
这种方法的优点是,可以较方便地在体外观察研究各种疾病或病变过程,研究加以影响的方法,而且周期短、见效快,可以节省研究时间,是很好的研究方法之一。
但缺点是孤立的体外环境毕竟与各部分间互相联系、互相影响的体内的整体环境不同,故不能将研究结果与体内过程等同看待。
(五)病理学的观察方法随着学科的发展,病理学的研究手段已远远超越了传统的经典的形态观察,而采用了许多新方法、新技术,从而使研究工作得到了进一步的深化,但形态学方法(包括改进了的形态学方法)仍不失为基本的研究方法。
兹将常用的方法简述如下:大体观察:主要运用肉眼或辅之以放大镜、量尺、各种衡器等辅助工具,对检材及其病变性状(大小、形态、色泽、重量、表面及切面状态、病灶特征及坚度等)进行细致的观察和检测。
这种方法简便易行,有经验的病理及临床工作者往往能借大体观察而确定或大致确定诊断或病变性质(如肿瘤的良恶性等)。
组织学观察:将病变组织制成厚约数微米的切片,经不同方法染色后用显微镜观察其细微病变,从而千百倍地提高了肉眼观察的分辨能力,加深了对疾病和病变的认识,是最常用的观察、研究疾病的手段之一。
同时,由于各种疾病和病变往往本身具有一定程度的组织形态特征,故常可借助组织学观察来诊断疾病,如上述的活检。
细胞学观察:运用采集器采集病变部位脱落的细胞,或用空针穿刺吸取病变部位的组织、细胞,或由体腔积液中分离所含病变细胞,制成细胞学涂片,作显微镜检查,了解其病变特征。
此法常用于某些肿瘤(如肺癌、子宫颈癌、乳腺癌等)和其他疾病的早期诊断。
但限于取材的局限性和准确性,有时使诊断难免受到一定的限制。
超微结构观察:运用透射及扫描电子显微镜对组织、细胞及一些病原因子的内部和表面超微结构进行更细微的观察(电子显微镜较光学显微镜的分辨能力高千倍以上),即从亚细胞(细胞器)或大分子水平上认识和了解细胞的病变。
在超微结构水平上,还常能将形态结构的改变与机能代谢的变化联系起来,大大有利于加深对疾病和病变的认识。
组织化学和细胞化学观察:通过运用具有某种特异性的、能反映组织和细胞成分化学特性的组织化学和细胞化学方法,可以了解组织、细胞内各种蛋白质、酶类、核酸、糖原等等化学成分的状况,从而加深对形态结构改变的认识。
这种方法不仅可以揭示普通形态学方法所不能观察到的组织、细胞的化学成分的变化,而且往往在尚未出现形态结构改变之前,就能查出其化学成分的变化。
此外,随着免疫学技术的进步,还可运用免疫组织化学和免疫细胞化学的方法,了解组织、细胞的免疫学性状,对于病理学研究和诊断都有很大帮助。
除上述常用方法外,近数十年来陆续建立的还有放射自显影技术、显微分光技术、形态测量(图像分析)技术、分析电镜技术、流式细胞仪(FCM)技术、多聚酶链反应(PCR)技术以及分子原位杂交技术等一系列分子生物学技术,从而使常规的病理形态学观察,发展到将形态结构改变与组织、细胞的的化学变化结合志来进行研究,而且将历来的定性的研究发展到对病理改变进行形态的和化学成分的定量研究,从而获得了大量的更多更新的新信息,大大加深了疾病研究的深度。
病理技术(一)常规病理制片技术病理切片是将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理,使之固定硬化,在切片机上切成薄片,粘附在玻片上,染以各种颜色,供在显微镜下检查,以观察病理变化,作出病理诊断,为临床诊断和治疗提供帮助。
包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、封片等几个主要步骤。
1.取材此步骤在技术员协助下由病理医师完成。
2.固定通过添加固定剂让组织中的所有细胞及细胞外成分迅速死亡,避免细胞中溶酶体成分的破坏作用,保持离体组织细胞与活组织时的形态相似,并防止细菌繁殖所致的腐败,以保存蛋白质与核酸的基本结构。
病理标本的制作和组织切片都必须先进行固定。
常用固定剂:4%甲醛(10%福尔马林)水溶液、酒精等。
其中福尔马林对人体有害。
3.脱水利用脱水剂将组织内的水分置换出来,以利于有机溶剂的渗入。
脱水是否彻底,直接关系到组织是否能充分透明,而脱水过度容易造成组织变脆。
目前绝大多数医院组织脱水都是通过脱水机来完成,按一定的程序来进行,主要试剂为二甲苯和酒精。
4.包埋用包埋剂来支持组织的过程,最常用的是石蜡包埋法,包埋的关键一是平整,二是方位。
蜡的熔点应在56-58℃之间。
5.切片用切片机将包埋有组织的蜡块切成薄片。
切片厚度一般为4-6微米,切片的要求是完整、薄、均匀。
6.染色未经染色的组织切片和细胞涂片不能直接在光学显微镜下观察。
苏木素和伊红染色(HE)是细胞与组织学最广泛的染色方法。
7.封片切片滴中性树胶后,加盖玻片封片。
(二)特殊染色为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。
包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
(三)细胞制片细胞制片包括各种来源的样本的制备,比如宫颈脱落细胞样本、呼吸系统样本、体腔液样本、脑脊液脱落细胞样本、消化道脱落细胞样本等的制备;细胞固定;细胞染色等。
(四)免疫组化免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的方法。
免疫组化方法有直接法和间接法;按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等。
(五)分子诊断技术通过从分子水平上完成DNA、RNA或蛋白质检测,从而对疾病作出诊断的方法称为分子诊断技术,目前常用的方法有基因诊断和肿瘤标志物检测。
1.基因诊断用分子生物学的理论和技术,通过直接探查基因的存在状态或缺陷,从基因结构、定位、复制、转录或翻译水平分析基因的功能,从而对人体状态与疾病作出诊断的方法。
基因诊断不仅能对某些疾病作出确切的诊断,如确定某些遗传病,也能确定基因与疾病有关联的状态,如对疾病的易感性、发病类型和阶段的确定等。
基因诊断的主要技术有核酸分子杂交(原位杂交、southern杂交、Northern杂交、斑点杂交等)、PCR和生物芯片技术。
2.肿瘤标志物检测是指肿瘤细胞和组织由于相关基因或异常结构的相关基因的表达所产生的蛋白质和生物活性物质,在正常组织中不产生或产量甚微,而在肿瘤病人组织、体液和排泄物中可检测到。
此外,在病人机体中,由于肿瘤组织浸润正常组织,引起机体免疫功能和代谢异常,产生一些生物活性物质和因子,虽然这些物质和因子特异性低,但与肿瘤发生和发展有关,也可用于肿瘤辅助诊断。
肿瘤标志物分别有:原位性肿瘤相关物质、异位性肿瘤相关物质、胎盘和胎儿性肿瘤相关物质、病毒性肿瘤相关物质,癌基因、抑癌基因及其产物等。
肿瘤标志物测定方法包括:生物化学法、免疫组化法、单克隆抗体法。
(六)电镜技术由于电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把标本切成厚度小于0.1微米以下的薄片才能适用,这种薄片称为超薄切片,切片的制作过程基本上和石蜡切片相似。
组织从生物活体取下以后,如果不立即进行适当处理,会由于细胞内部各种酶的作用,出现细胞自溶现象,容易出现人为假象,此外,还可能由于组织干燥脱水、微生物污染等使细胞的超微结构受破坏。
因此标本取材时必须要做到快、小、冷、准等四大基本要求。
电镜分透射电镜和扫描电镜,两者标本的制备各有不同。