实验二 紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量
紫外吸收光谱法测定水中的苯酚
大学学生实验报告开课学院及实验室：化学化工学院室2013年月日学院化学化工学院年级、专业、班姓名学号实验课程名称分析化学实验成绩实验项目名称紫外吸收光谱法测定水中的苯酚指导老师一、实验目的1．学会使用UV1100型紫外分光光度计。
2．学会并掌握紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。
二、实验原理通过紫外分光光度计测定苯酚的紫外吸收光谱图，以确定苯酚的λmax。
在仪器设置的λmax下，用1cm石英比色皿，以蒸馏水作空白对照，测定苯酚标准浓度系列溶液的吸光度值，根据A=εbc，绘制苯酚水溶液的标准工作曲线。
在相同条件下，测得待测苯酚溶液的吸光度值，以确定试样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．仪器UV1100型紫外分光光度计（附1cm石英皿1套），25mL容量瓶7个，10mL吸量管1支，10mL 移液管1支，洗耳球，烧杯，洗瓶，镜头纸。
2．试剂⑴1g·L-1苯酚标准溶液⑵100mg·L-1苯酚标准溶液⑶苯酚水样。
四、实验步骤1．绘制吸收光谱曲线和选择测量波长⑴用吸量管取5.00mL苯酚标准溶液（100mg·L-1）1份，于25mL容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
⑵以蒸馏水为参比溶液，在UV1100型紫外分光光度计上，选择波长扫描，波长范围设置225～300nm，获得苯酚的吸收曲线，求得苯酚最大吸收波长λmax。
2．绘制标准曲线用吸量管分别吸取1.50、3.00、4.50、6.00、7.50mL苯酚标准溶液（100mg·L-1），分别放入25mL 容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度线定容后，混匀。
此苯酚标准溶液系列对应的浓度分别为6.0、12.0、18.0、24.0和30.0 mg·L-1。
同样以蒸馏水为参比溶液，在苯酚最大吸收波长λmax处，按浓度从低到高依次测定对应的苯酚标准溶液系列的吸光度值，并记录。
以苯酚标准溶液的含量（mg·L-1）为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定无机和有机物质的浓度。
在本实验中，我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。
下面是实验步骤。
实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰，根据它的吸收峰特征可以测定其含量。
在本实验中，我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。
实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器：紫外可见分光光度计试剂：苯酚、甲醇玻璃仪器：比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。
实验步骤步骤1：制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中，加入约30 mL甲醇并混合均匀，然后用甲醇稀释到50 mL。
最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。
步骤2：制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL，在紫外可见分光光度计中，设置检测波长为240 nm，然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中，取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液，然后用甲醇稀释成10 mL。
最后，利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。
步骤3：测定未知样品将待测样品取5 mL，加甲醇稀释成50 mL，然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。
根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。
注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候，要充分混合均匀，防止苯酚沉淀。
2.操作过程中，不可碰触紫外光管等易损部件。
3.实验前，应进行紫外可见分光光度计的预热操作，以保证测试准确性。
实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线，通过计算未知样品的吸光度，即可求出其苯酚含量。
对测量的结果进行分析，可以了解到此方法的准确性和可行性。
总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。
通过本实验的学习，不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点，还能够提高实验技巧，从而为今后的实验研究奠定基础。
紫外分光光度法测定苯酚的含量
紫外分光光度法测定苯酚的含量2011-01-24紫外分光光度法测定苯酚的含量2011-01-19紫外分光光度法测定苯酚的含量【测试目的】一、掌握紫外光谱法举行事物定性、定量分析的基本原理。
二、学习UV8500型紫外--可见分光光度计的施用方法。
【测试原理】含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特性吸收。
事物结构不同对紫外及可见光的吸收曲线不同。
其中,最大吸收波长λmax、摩尔吸收系数εmax 及吸收曲线的形状不同是举行事物定性分析的依据。
由于在λmax处吸光度A有最大值,在此波长下A随浓度的变化最为明显,方法的灵敏度最大,故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液(试液)的吸收光谱曲线,再由曲线上找出λmax,据此对事物举行定量分析。
用紫外分光光度计举行定量分析时,若被分析事物浓度太低或者太高,可以使透光率的读数扩大10倍或者缩小10倍,有利于低浓度或者高浓度的分析,其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。
【仪器与试药】⑴主要仪器：岛津UV1700型紫外-可见分光光度计；1cm石英吸收池二个；25mL容量瓶7支；5mL、10mL移液管各1支；100mL、250mL烧杯各一个；吸耳球一个。
(2)试药：苯酚标准溶液：100mg/L；样品溶液(未知浓度)【测试内部实质意义与步骤】一、定性分析⑴、分析溶液的配合制造取5支25mL的容量瓶,用移液管分别准确加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL浓度为100mg/L的苯酚标准溶液,用去离子水稀释至25mL刻度,摇匀。
测试数据记录于标准表中。
(2)、确定最大吸收波长苯酚未知液的配合制造：取A或者B溶液1mL于25mL的容量瓶中,蒸馏水定容,浓度大约为0.003mol/L,取稀释后的苯酚标准溶液,在UV1700型紫外-可见分光光度计上,用1cm石英吸收池,去离子水作参比溶液,在200~330nm波长规模内举行扫描,绘制苯酚的吸收曲线。
在曲线上找出λmax一、λmax2。
紫外分光光度法测定水样中的苯酚
0.9 0.8 0.7
a
A
0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 220
A
b
240
260
280
300
320
(nm)
三氯苯酚（a）和苯酚（b）的紫外吸收曲线
a Aa b ' A1a' A2 ' a (k1a k 2 ) ca
k a ca
Aa b ' Aa b ' ca a a k1' k2' k a
注：须满足两个基本条件 • 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点
• 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大
特点：
使用时来回拉动吸收池 →移动误差 • 对光源要求高 • 比色池配对
•
图4
单光束分光光度计基本结构示意图
特点：
不用拉动吸收池，可以减 小移动误差 • 对光源要求不高
• •
可以自动扫描吸收光谱
图5 双光束分光光度计结构示意图
特点： •
•
利用吸光度差值定量 消除干扰和吸收池不 匹配引起的误差
消除a的影响测b
a 选 a 的等吸收点1和2 A1a A2
A
a b
A A
b 1
b 2
b (k1b k 2 ) cb
kb cb Aa b Aa b cb b b k1 k2 k b
消去b的影响测a
b 选 b 的等吸收点1' 和2' A1b' A2 '
a b a A2 k2 ca cb b k2
3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定
（1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法
紫外测苯酚实验报告
一、实验目的1. 熟悉紫外分光光度法的基本原理和操作方法。
2. 掌握苯酚在紫外光区域的吸收特性。
3. 通过紫外分光光度法测定水样中苯酚的含量。
二、实验原理紫外分光光度法是一种利用物质在紫外光区域吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。
苯酚分子中含有共轭双键，在紫外光区域具有特定的吸收峰，通过测定苯酚溶液在特定波长下的吸光度，可以计算出苯酚的浓度。
实验原理如下：1. 根据比尔定律，吸光度A与溶液的浓度c和光程L成正比，即A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。
2. 通过绘制苯酚标准溶液的吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数。
3. 测定水样中苯酚的吸光度，根据吸光度-浓度曲线计算苯酚的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、石英比色皿、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。
2. 试剂：苯酚标准溶液（浓度为 1.00mg/mL）、蒸馏水、无水碳酸钠、氢氧化钠、硫酸、盐酸等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6个50mL容量瓶，分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度线。
（2）将标准溶液置于石英比色皿中，在270-295nm波长范围内，每隔10nm测定一次吸光度。
（3）以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线。
2. 样品测定（1）取适量水样于50mL容量瓶中，加入适量无水碳酸钠和氢氧化钠，使水样pH 值调节至碱性。
（2）加入适量硫酸，使水样pH值调节至酸性。
（3）加入适量盐酸，使水样pH值调节至中性。
（4）按照标准曲线绘制步骤，测定水样中苯酚的吸光度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数为ε = 1.85×10^4 L·mol^-1·cm^-1。
2. 样品测定测定水样中苯酚的吸光度为0.576，根据吸光度-浓度曲线计算得到苯酚浓度为0.012mg/L。
(整理)紫外光度计测苯酚含量方案2
用紫外可见分光光度计测废水中的苯酚含量项目实施方案学校：绵阳职业技术学院指导老师：石建屏组长：高晓宇组员：刘世樑、汤效飞刘彦汝、齐丽君胡楚卿、邓素容目录一、仪器工作原理二、仪器结构1、光源2、分光系统3、吸收池4、检测显示系统三、仪器使用方法四、工作曲线法测苯酚含量（一）溶液的制备1、容器的洗涤2、溶液的配制（二）样品的测定1、绘制吸收光谱曲线，确定最大吸收波长2、绘制苯酚溶液工作曲线，计算未知样品浓度3、实验完毕五、结果记录及实验数据处理一、仪器工作原理含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。
物质结构不同对紫外及可见光的吸收具有选择性。
其中，最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。
由于在λmax处吸光度A有最大值，在此波长下A随浓度的变化最为明显，方法的灵敏度最大，故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液（试液）的吸收光谱曲线，再由曲线上找出λmax，据此对物质进行定量分析。
用紫外分光光度计进行定量分析时，若被分析物质浓度太低或太高，可使透光率的读数扩展10倍或缩小10倍，有利于低浓度或高浓度的分析，其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。
二、仪器组成紫外分光光度计由光源、分光系统、吸收池、检测显示系统等四大部分组成，其组成框图见下图。
1、光源光源的作用是提供符合要求的入射光。
分光光度计对光源的要求是：在使用波长范围内提供连续的光谱，光强应足够大，有良好的稳定性，使用寿命长。
紫外光光源多为气体放电光源，如氢，氘，氙放电灯等。
其中应用最多的是氢气灯及同位素氘灯，其使用波长范围为185～357nm。
为了保证发光强度稳定，也要用稳压电源供电。
氘灯的光谱分布与氢灯相同，但光强比同功率氢灯大3～5倍，寿命比氢灯长。
2、分光系统分光系统是紫外可见分光光度计的核心部分。
它主要由入射狭缝、准直镜、光栅、物镜和出射狭缝组成。
入射狭缝起着限制杂散光进入的作用, 它一般处在准直镜的焦点上；准直镜将从入射狭缝射进来的复合光变成平行光；光栅用来分光。
紫外分光光度法测定水中苯酚的含量
92. 92.1 实验目的
(1) 学习紫外分光光度法的基本原理及定量分析方 法。 掌握紫外(2) 掌握紫外-可见分光光谱仪的基本结构和一般操 作。
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 中 苯 酚 的 含 量
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紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 中 苯 酚 的 含 量
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3. 最大吸收波长的测定 移取苯酚标准溶液2 mL于 mL容量瓶中 定容， 容量瓶中， 移取苯酚标准溶液2.00 mL于 25 mL容量瓶中，定容，摇 取适量倒入石英比色皿中，以蒸馏水为参比溶液， 匀，取适量倒入石英比色皿中，以蒸馏水为参比溶液，在波 长 200～ 400 nm范围内进行扫描 ， 得到吸收曲线， 由吸收曲 200 ～ nm 范围内进行扫描， 得到吸收曲线 ， 范围内进行扫描 线确定最大吸收波长（ 线确定最大吸收波长（λmax）。 4. 标准曲线及样品的测定 mL容量瓶中 分别加入0 容量瓶中， mL、 mL、 在 6 个 25 mL 容量瓶中 ， 分别加入 0.50 mL 、 1.00 mL 、 2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL的苯酚标准溶液， 用 mL、 mL、 mL、 mL的苯酚标准溶液， 的苯酚标准溶液 处测定各溶液的吸光度值， 蒸馏水定容。 蒸馏水定容。在λmax处测定各溶液的吸光度值，同时测定含 苯酚水样（调整至合适浓度且溶液澄清）的吸光度值， 苯酚水样（调整至合适浓度且溶液澄清）的吸光度值，由仪 器打印出标准曲线及样品的测定结果。 器打印出标准曲线及样品的测定结果。
紫外分光光度法测定水中总酚的含量
紫外分光光度法测定水中总酚的含量苯酚是工业废水中一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检验饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。
一、实验目的1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。
2．熟悉紫外分光光度计的基本操作技术。
二、方法原理具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的第一类取代基(致活基团)使吸收更强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，其吸收程度与苯酚的含量成正比，因此可用紫外分光光度法，根据Lambert—Beer定律直接测定水中总酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外分光光度计；2．苯酚标准溶液，250mg/L：准确称0.0250g苯酚于250 mL烧杯中，加去离子水20 mL使之溶解，移入100mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
四、内容与步骤1、标准系列溶液的配置取5支25ml比色管，分别加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀待测。
2．吸收曲线的测量取上述标推系列溶液中任一溶液，用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，在220～350 nm波长范围内，每5nm测量一次吸光度。
3．标准曲线的测量在苯酚的最大吸收波长(λmax)下, 用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，测量标准系列溶液的吸光度。
4．水样的测定与测量标准系列溶液的相同条件下，测量水样的吸光度五、数据记录与处理1．列表记录不同波长下同一标准溶液的吸光度值，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制吸收曲线，找出λmax，计算其 max。
2．列表记录标冶系列溶液与水样的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准系列溶液浓度为纵坐标，绘制标推曲线；根据水样的吸光度查找出其相当的标准溶液的浓度并算出水样中苯酚的含量(g／L)。
六、问题与讨论1．紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同?部件有何异同?。
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实验二紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量
苯酚是工业废水中一种有害污染物质，需对水中酚含量控制。
苯酚在270-295nm波长处有特征吸收峰，其吸光度与苯酚的含量成正比，应用Lambert－Beer定律可直接测定水中总酚的含量。
一、实验目的
1．学会使用Cary50型紫外-可见分光光度计
2．掌握紫外-可见分光光度计的定量分析方法
二、原理简介
紫外-可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生，同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁，因此吸收光谱具有带宽。
紫外-可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律，被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比，即：
其中A是吸光度，I、分别为透过样品后光的强度和测试光的强度，为摩尔吸光系数，b为样品厚度。
由于苯酚在酸、碱溶液中吸收波长不一致（见下式），实验选择在碱性中测试，选择测试的波长为288nm左右，取紫外-可见光谱仪波长扫描后的最大吸收波长。
Cary50是瓦里安公司的单光束紫外-可见分光光度计。
仪器原理是光源发出光谱，经单色器分光，然后单色光通过样品池，达到检测器，把光信号转变成电信号，再经过信号放大、模/数转换，数据传输给计算机，由计算机软件处理。
三、仪器与溶液准备
1、Cary50型紫外-可见分光光度计
2、1cm石英比色皿一套
3、25 ml容量瓶5只，100 ml容量瓶1只，10ml移液管二支
配置250 mg/L苯酚的标准溶液：准确称取0.0250 g苯酚于250 mL烧杯中，加入去离子水20 mL使之溶解，加入0.1M NaOH 2mL，混合均匀，移入100 mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
取5只25 mL容量瓶，分别加入1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀，作为标准溶液系列。
将溶剂，标准溶液，待测水样依此装入石英比色皿。
按测试程序的提示，依次放入样品室中进行测试。
四、测试过程
1、确认样品室内无样品
2、开电脑进入Window 系统
3、点击进入Cary50 主菜单
4、双击Cary-WinUV图标
5、在Win-UV 主显示窗口下，双击所选图标“SCAN”以扫描测定吸收曲线：取上述标准系列任一溶液装进1cm石英比色皿至4/5，以装有蒸馏水的1cm石英比色皿作为空白参比，设定在220－350 nm波长范围内扫描，获得波长-吸收曲线，读取最大吸收的波长数据。
6、在Win-UV 主显示窗口下，双击图标“Concentration”进入定量分析主菜单
7、设定测试分析步骤:
（l）单击Setup功能键，进入参数设置页面。
在Wavelength处填入由步骤5获取的波长数据。
（2）按Cary Control 、Standards、Options、Samples、Reports、Auto store顺序，分别设置好菜单中每页的参数。
按OK回到“Concentration”界面主菜单。
（3）单击View莱单，选择需要显示的内容。
例如基本选项Toolbar，buttons，Graphics，Report。
（4）单击Zero，提示“Load blank press OK to read” (放空白按OK读)，放入空白蒸馏水到样品室内，按OK测试，测完取出样品。
（5）单击Start, 出现标准／样品选择页。
选Selected for Analysis（选择分析的标准和样品）。
此框的内容为准备分析的标准和样品。
（6）按OK进行分析测试。
依Presentstdl的提示：放入标准1然后按OK键进行读数。
放标准2按OK进行读数。
直到全部标准读完。
（7）出现“Present Samplel Press OK to read”提示框，根据提示，放入样品1按OK开始读样品，直到样品测完。
（8）可点击Save Method AS保存此方法，以后可以从Open Method调用此方法。
从标准曲线读出水样中苯酚的含量（g／L），测试数据采用点击Save Data AS 保存。
五、实验数据处理
打印报告，读取待测样品的苯酚含量。
六、问题与讨论
1、为什么紫外-可见光谱定量分析的准确度比红外光谱高？
2、为获得准确数据，在使用分光光度计时，哪些操作必不可少？
参考文献
1、陈培榕,邓勃. 现代仪器分析实验与技术, 清华大学出版社，1999.12
2、CARY 50/100/300操作手册，美国瓦里安中国有限公司分析仪器服务部，2003。