虾夷马粪海胆CYP51基因cDNA的克隆及其SNPs分析

合集下载

虾夷马粪海胆致病菌强壮弧菌的PCR检测方法

ｇｙｒＢ基因是普遍存在于细菌内编码ＤＮＡ促旋酶中Ｂ亚单位蛋白的基因，与ｒｐｏＤ、ｒｐｏＢ、ｇｒｏＥ等基因相比，ｇｙｒＢ基因对相近物种具有很高的分辨率，在定量分析技术上可以弥补１６ＳｒＤＮＡ基因保守性过高 ¨ 及ＤＧＧＥ图谱中易对微生物多样性造成假象等一系列缺陷，因此，常用其作为区分亲缘较近种的靶基因。目前，ｇｙｒＢ基因已应用于多重ＰＣＲ技术、ＰＣＲ—ＡＬＦＰ技术等多种方法的研究中¨ 。本研究中，作者基于ｇｙｒＢ基因结合ＰＣＲ快速检测技术，根据强壮弧菌高度变异
提取ＤＮＡ模板。１．２．２引物设计在ＧｅｎＢａｎｋ上分别查找强壮弧菌及与其亲缘关系相近的灿烂弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌等细菌的ｇｙｒＢ基因，利用Ｂｌａｓｔ软件进行比对分析，选择高度变异区序列，
１．２方法
１．２．１细茵基因组的提取将细菌于２２１６Ｅ培养基上划线分离，于２８℃下培养１８～２４ｈ，挑取单菌落悬浮于无菌水中并稀释至１０ｃｆｕ／ｍＬ，用细菌基因组提取试剂盒（天根生物科技有限公司生产）
收稿日期：２０１２—０４—２５基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０９７２２６９）；辽宁省 “百千万人才工程” 资助项目（２００８９２１０５９）；国家海洋局海洋公益项目
第２７卷第４期２０１２年８月

虾夷马粪海胆LRCH2-Like基因的克隆与表达特征分析

虾夷马粪海胆LRCH2-Like基因的克隆与表达特征分析邹惠冬;白莉;刘圣美;陈亚东;周淑红;仇雪梅;刘洋【期刊名称】《海洋科学前沿》【年(卷),期】2018(005)002【摘要】本实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得了一条虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus inter-medius)LRCH2-like基因的全长cDNA序列。

SiLRCH2-like基因全长为2446 bp,其中编码区为1644 bp,3’-UTR为609 bp,5’-UTR为193 bp,编码548个氨基酸,预测的蛋白分子量为59.9 KDa,理论等电点为4.07,为酸性蛋白,有1个Na-Ca-ex-superfamily结构域和7个LRR结构域。

我们采用实时定量PCR技术分析了SiLRCH2-like基因在各组织中的表达情况。

他在所有检测的组织中均有表达,在雌性性腺中表达量最高,其次是肠道、管足,体腔细胞和围口膜中表达量较少,在雄性性腺中几乎检测不到表达。

我们也检测了该基因在强壮弧菌(Vibrio fortis)、脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、葡聚糖(WGP)、聚肌胞苷酸(polyI:C)五种病原刺激后的体腔细胞中的表达情况。

SiLRCH2-like基因在PGN处理后在12 h出现了表达高峰,在WGP处理后出现了表达下调,而其他病原处理后表达上调不明显。

研究结果表明,SiLRCH2-like基因参与了虾夷马粪海胆的NLR信号通路,它在海胆的天然免疫系统中发挥了重要的作用。

【总页数】11页(P18-28)【作者】邹惠冬;白莉;刘圣美;陈亚东;周淑红;仇雪梅;刘洋【作者单位】[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连;[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连;[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连;[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连;[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连;[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连;[1]大连海洋大学,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁大连【正文语种】中文【中图分类】S9【相关文献】1.虾夷马粪海胆硬脂酰辅酶A去饱和酶和蛋白酪氨酸磷酸酶基因的克隆与表达 [J], 丁君;孙巍;常亚青2.虾夷马粪海胆硬脂酰辅酶A去饱和酶和蛋白酪氨酸磷酸酶基因的克隆与表达 [J], 丁君;孙巍;常亚青;3.虾夷马粪海胆溶菌酶基因全长cDNA的克隆与表达分析 [J], 姬南京;杨芸菲;丁君;常亚青4.虾夷马粪海胆谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆与表达分析[J], 丁君;常亚青;孙巍5.虾夷马粪海胆TNFAIP3基因的克隆与表达分析 [J], 刘圣美;陈亚东;常亚青;王秀利;仇雪梅;刘洋;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

凡纳滨对虾Peroxinectin基因部分cDNA序列的克隆及表达分析

关键词：凡纳滨对虾；血细胞黏连因子；克隆；表达分析
中图分类号：Ｓ９４５．１文献标识码：Ａ
．
ＣｌｏｎｉｎｇｏｆＰａｒｔｉａｌＳｅｑｕｅｎｃｅａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｌＡｎａｌｙｓｉｓｉｎ
虾和中国明对虾相似性达到９０％，而与锯缘青蟹有８７％的相似性。通过荧光定量ＰＣＲ技术检测ＩＨＨＮＶ感染前后血细胞黏连因
子基因表达量的变化，发现血细胞黏连因子基因在病毒感染后的表达量明显升高。血细胞黏连因子基因的病毒感染诱导表达模式说明该基因可能参与了对虾的先天免疫过程。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆＬｉｔｏｐｅｎａｅｕｓｖａｎｎａｍｅｉｐｅｒｏｘｉｎｅｃｔｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｆｔｅｒｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｒｏｌｅｏｆｐｅｒｏｘｉｎｅｅｔｉｎｉｎｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍ
ＬｉｔｏｐｅｎａｅｕｓｖａｎｎａｍｅｉＰｅｒｏｘｉｎｅｃｔｉｎＧｅｎｅ
ＺＨＡＯＹｏｎｇ — ｚｈｅｎ，ＣＨＥＮＸｉｕ－ｌｉ，ＹＡＮＧＣｈｕｎ— ｌｉｎｇ，ＰＥＮＧＭｉｎ，ＨＥＰｉｎｇ — ｐｉｎｇ，ＣＨＥＮＸｉａｏ－ｈａｎ
ｌｙｚｅｄｂｙｒｅａｌ — ｔｉｍｅｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＰｅＲ．Ｉｎｈｉｔｓｓｔｕｄｙ．ａｐａｒｔｉａｌｅＤＮＡｆｏＬｉｔｏｐｅｎａｅｕｓｖａｎｎａｍｅｉｐｅｅ￣ｎｒｅｃｔｉｎｗａ８ｃｌｏｎｅｄ．ＴｈｅｅＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｗａｓ１５２９ｂｐ．Ｔｈｅ３’ｅｎｄｃｏｎｔａｉｎｄｅａ３１９ｂｐ — ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄｅｇｒｉｏｎａｎｄｅｎｃｏｄｅｄ４０２ｐｕｔａｔｉｖｅａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ｗｈｉｃｈｅｘｈｉｂｉｔｄｅａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｓｉｍｉ－

马粪海胆不同地区群体形态学比较研究

马粪海胆不同地区群体形态学比较研究刘成龙;曾晓起【期刊名称】《中国海洋大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(045)004【摘要】运用单因子方差分析、主成分分析、聚类分析3种方法,对大连、威海、青岛、嵊泗和南麂5个地区的马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)群体(125只)的13个特征进行了比较分析.单因子方差分析结果显示,大连、威海、青岛地区的马粪海胆样品13组数据特征比值参数与另外2个地区的均差异显著(P＜0.05);主成分分析结果显示,贡献率最大的3种主成份的累计贡献率为75.599％;聚类分析结果显示,大连、威海和青岛地区马粪海胆聚为一支,南麂地区的马粪海胆与嵊泗地区的聚为一支;根据Mayr等提出的75％原则,大连、威海、青岛地区的马粪海胆和南麂、嵊泗地区的马粪海胆的形态差异属种内不同群体间的差异,未到亚种水平.【总页数】6页(P40-45)【作者】刘成龙;曾晓起【作者单位】中国海洋大学水产学院,山东青岛266003;中国海洋大学海洋生物多样性与进化研究所,山东青岛266003;中国海洋大学水产学院,山东青岛266003;中国海洋大学海洋生物多样性与进化研究所,山东青岛266003【正文语种】中文【中图分类】S917【相关文献】1.虾夷马粪海胆F_3代群体数量性状相关性与通径分析 [J], 沈妍;丁君;张伟杰;常亚青;2.虾夷马粪海胆F3代群体数量性状相关性与通径分析 [J], 沈妍;丁君;张伟杰;常亚青3.虾夷马粪海胆F_2代群体体尺、性腺性状及营养成分的分析 [J], 沈妍;常亚青;刘平晋;张伟杰;丁君4.虾夷马粪海胆F_2代群体体尺、性腺性状及营养成分的分析 [J], 沈妍;常亚青;刘平晋;张伟杰;丁君5.4种免疫促进剂对2种虾夷马粪海胆群体免疫影响 [J], 赵新亚;常亚青;丁君;张伟杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

虾夷马粪海胆F_3代群体数量性状相关性与通径分析

（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭａｒｉｃｕｌｔｕｒｅ＆ＳｔｏｃｋＥｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｉｎＮｏａｈＣｈｉｎａＳＳｅａ，Ｍｉｎ￣ｔｙｒｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＰＲＧＤａｌｉａｎＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０２３，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
的含量相关显著。营养成分性状与壳高、壳径和体重的相关性均不显著（０．０５），且多为负相关，在选
择育种时应分别考虑。研究结果为虾夷马粪海胆选育潜力评估和下一步选种提供依据，为富含高不饱
和脂肪酸虾夷马粪海胆培育奠定理论基础。
（大连海洋大学／农业部北方海水增养殖重点实验室，辽宁大连ｌ１６０２３）
摘要：为更全面地分析虾夷马粪海胆Ｆ，代的生长与性腺品质，研究测量了虾夷马粪海胆Ｆ］代群体１２个
家系８２枚海胆的体尺性状和性腺主要营养成分，其中体尺性状包括壳性状（壳高、壳径、壳湿重、壳干重），７器性状（１口器高、口器宽、口器重），体重和性腺湿重；营养成分性状包括性腺中的总脂肪含量、总蛋白含量和４种高不饱和脂肪酸含量（Ｃ２０：４、Ｃ２０：５、Ｃ２２：５、Ｃ２２：６）。计算了代虾夷马粪海胆不同性别体尺性状、营养成分的均值、标准差和变异系数，并对数量性状间的相关关系进行了分析。结果显示：虾夷马粪海胆Ｆ，代群体各性状中，雌性群体各性状指标略优于雄性群体，但不同性别间均无显著性差异（０．０５）。Ｆ代虾夷马粪海胆各体尺性状之间均存在极显著的相关一ｔ￣－（Ｐ＜Ｏ．０１），其中壳径与体重之间相关性最大（０．８７８），而口器性状与体重的相关性相对较小。营养成分方面，Ｃ２０：４（ＡＡ）和Ｃ２０：５（ＥＰＡ）之间相关性极为显著（０．Ｏ１）；Ｃ２２：５和Ｃ２２：６（ＤＨＡ）之间显著相关（Ｐ＜０．０５），即同碳原子数的不饱和脂肪酸

虾夷马粪海胆TLR基因cDNA克隆及表达分析

摘要：采用同源克隆和ｅＤＮＡ末端快速扩增（ＲＡＣＥ）技术克隆获得一条虾夷马粪海胆Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｃｅｎｔｒｏｔｕｓｉｎ－
ｔｅｒｍｅｄｉｕｓＴＬＲ基因的全长ｅＤＮＡ序列ＳｉＴＬＲ一１（ＧｅｎＢａｎｋ：ＨＱ２５９１１０），并采用实时定量ＰＣＲ技术分析了其
文章编号：２０９５－１ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ３８８（２０１４）４— ００３２９ — ０７
虾夷马粪海胆ＴＬＲ基因ｃＤＮＡ克隆及表达分析
王轶南，于卓，刘洋，刘学伟，王姣姣，常亚青
（大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室，辽宁大连１１６０２３）
钠盐、ＩＰＴＧ、Ｘ— ＧＡＬ、Ｔｒｙｐｔｏｎｅ、ＹｅａｓｔＥｘｔｒａｃｔ均购自于上海生工生物工程有限公司。
１．２方法
栉孔扇贝Ｃｈｌａｍｙｓｒｒｅ
Ａｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ等的ＴＬＲ基因。海胆属棘皮动物门，在系统进化中占据特殊位置，有关海胆的免疫学研究越来越受到重视。对紫球海胆Ｓｔｒｏｎｇｙ — Ｉｏｃｅｎｔｒｏｔｕｓｐｕｒｐｕｒａｔｕｓ的测序研究发现，其存在大量免疫受体基因，包括ＴＬＲ＿８基因家族等，但有关

虾夷扇贝UROS基因的全基因组鉴定、序列特征及表达分析

虾夷扇贝UROS基因的全基因组鉴定、序列特征及表达分析杭雲娜;王怡颖;孙红妍;范志越;王许波;田莹;郝振林;毛俊霞;常亚青【期刊名称】《水产科学》【年(卷),期】2024(43)2【摘要】为探明尿卟啉原Ⅲ合酶(UROS)基因在贝类壳色形成中的分子功能,利用生物信息学和实时荧光定量PCR等方法,进行虾夷扇贝UROS基因的全基因组鉴定、序列特征及其在不同壳色个体中的表达分析。

结果显示,在虾夷扇贝全基因组范围内鉴定获得1个单拷贝的UROS基因,将其命名为PyUROS基因。

PyUROS基因的序列全长为68808 bp,包括9个外显子、8个内含子,共编码298个氨基酸。

在PyUROS蛋白质序列中预测到1个HemD保守功能域,表明本试验中所鉴定的PyUROS基因为UROS基因。

PyUROS基因在虾夷扇贝成体各组织中广泛表达,表明其在虾夷扇贝生命活动中发挥重要作用。

PyUROS基因在虾夷扇贝不同外套膜区域及不同壳色个体间显著差异表达,推测其在虾夷扇贝壳色形成中发挥重要功能。

本试验结果为贝类壳色形成分子机制研究提供了重要参考,为贝类壳色遗传育种工作奠定了理论基础。

【总页数】8页(P273-280)【作者】杭雲娜;王怡颖;孙红妍;范志越;王许波;田莹;郝振林;毛俊霞;常亚青【作者单位】大连海洋大学水产与生命学院【正文语种】中文【中图分类】S786【相关文献】1.MyDNMT1基因克隆及虾夷扇贝胚胎发育时期全基因组甲基化的变化（英文）2.虾夷扇贝选育群体与野生群体基因组DNA甲基化的MSAP分析3.虾夷扇贝β-actin基因的克隆和序列分析4.基于高通量测序的虾夷扇贝基因组微卫星特征分析5.虾夷扇贝Smad基因家族的鉴定及表达分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一种具有抗菌作用的新型虾夷马粪海胆抗菌肽[发明专利]

专利名称：一种具有抗菌作用的新型虾夷马粪海胆抗菌肽专利类型：发明专利
发明人：刘洋,周淑红,刘圣美,陈亚东
申请号：CN201911363061.3
申请日：20191226
公开号：CN110964092A
公开日：
20200407
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种新型虾夷马粪海胆抗菌肽Strongylocin2基因，该基因的序列为SEQ ID NO:1，编码的蛋白为SEQ ID NO:2，本发明提供的基因与免疫抗病相关，其表达量与病原菌刺激相关，其体外重组表达的蛋白能够明显抑制革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的增殖，本发明提供了一种新型的抗菌肽基因Strongylocin2，具有重要用途的基因Strongylocin2基因序列及由含有虾夷马粪海胆抗菌肽基因Strongylocin2完整基因序列，及由该基因构建的重组表达载体
pEASY‑E1‑Strongylocin2；还提供了一种可生产该类肽的工程菌株；还提供了一种虾夷马粪海胆抗菌肽Strongylocin2肽的制备和纯化方法。

因此，在虾夷马粪海胆病害防治、饲料添加剂及杀菌剂等方面有应用价值。

申请人：大连海洋大学
地址：116000 辽宁省大连市沙河口区黑石礁街2-52
国籍：CN
代理机构：青岛海昊知识产权事务所有限公司
代理人：曾庆国
更多信息请下载全文后查看。

文蛤HDAC1基因克隆、时空表达及生长相关SNP位点筛查

文蛤HDAC1基因克隆、时空表达及生长相关SNP位点筛查高晓艳;董迎辉;姚韩韩;林志华【期刊名称】《水生生物学报》【年(卷),期】2016(040)003【摘要】为探索HDAC1基因在文蛤生长发育中的作用,研究通过已构建的文蛤转录组文库,利用SMART RACE技术扩增得到文蛤HDACl (Mm-HDACl)基因的cDNA全长序列,分析了其生物信息学、组织及发育阶段表达特征,并用直接测序法在外显子中筛查生长相关的SNP位点.结果显示,Mm-HDAC1基因的cDNA全长3065 bp,开放阅读框1599 bp,编码532个氨基酸;氨基酸序列比对发现,文蛤与其他物种同源性为74.3％-78.7％.荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,Mm-HDAC1基因在文蛤6个组织中均有表达,其中外套膜中的表达量相对最高,并与其他组织间有极显著差异(P＜0.01);不同发育时期的表达差异结果表明,MmHDAC1基因在壳顶幼虫期表达量最高,显著高于其他发育时期p＜0.05).SNP位点筛查结果表明,在MmHDAC1基因的外显子区域发现了19个SNP位点,其中有3个SNP位点(627A＞T、924T＞C和1266T＞C)与文蛤生长相关.【总页数】8页(P601-608)【作者】高晓艳;董迎辉;姚韩韩;林志华【作者单位】浙江万里学院,浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室,宁波315100;浙江万里学院,浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室,宁波315100;浙江万里学院,浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室,宁波315100;浙江万里学院,浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室,宁波315100【正文语种】中文【中图分类】Q785;S968.3【相关文献】1.缢蛏生长因子受体结合蛋白2基因克隆、时空表达及SNP筛查 [J], 赵家熙;崔宝月;董迎辉;姚韩韩;林志华2.文蛤Smad1/5基因克隆、时空表达及生长相关SNP位点筛查 [J], 池秋蝶;董迎辉;姚韩韩;林志华3.文蛤粪卟啉原Ⅲ氧化酶基因克隆及与壳色性状的相关性分析 [J], 詹艳玲;董迎辉;何琳;阮文斌;高晓艳;林志华4.文蛤生长因子受体结合蛋白2(GRB2)基因克隆、时空表达及SNP位点筛查 [J], 高晓艳;董迎辉;施沈佳;姚韩韩;阮文斌;赵家熙;林志华5.结直肠癌患者DNMT1、HDAC1表达及与临床病理特征和预后的相关性分析[J], 阮勇;张彬;杨康因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

虾夷马粪海胆谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆与表达分析

隆出来。
谷胱甘肽硫转移酶（ｕａｈｏｅＳｔａｓｅａｅ，Ｔ）一种小分子的水溶性蛋白，ＧｌｔｔｉｎｒｎｆｒｓｓＧｓ是普遍存在于各种生物组织的胞液中。研究表明ＧＳＴ在体内表达水平的高低是决定细胞对一些有毒化学物质的敏感性的关键因素。ＧＳ的主要功能是催化某些内源性或外来有害物质的亲电子基团与还原型谷胱甘肽的巯基结合，Ｔ增加其疏水性使其易于排出体外，而达到解毒的目的［从１。迄今为止，在人ＧＳＴ家族中共发现至少８类同工酶。研究内容主要涉及组织分布ｌ训、ｌ同工酶类型＿以及结构基因研究等等。２。虾夷马粪海胆又称中间球海胆（￡０ｇｚｃｒｉｔｒｄｕ）是我国北方最重要的经济海胆，ＳｒＤＰ￡Ｄｎｅｍｅｉｓ，随着养殖生产的高密度、约化发展，集使虾夷马粪海胆的养殖也频繁发生各种病害。对其免疫系统及相关免疫因
因在脂多糖（Ｐ）激后不同时间的表达差异情况进行了研究。谷胱甘肽过氧化物酶基因（Ｘ）ｃＮＡ全长ＬＳ刺ＧＰ的Ｄ１０２ｂ，中开放间读框含有６７ｂ，码２９个氨基酸残基，跨膜结构，４ｐ其５ｐ编１无无信号肽，为胞内蛋白。实时定量ＰＲＣ检测发现Ｇｘ基因在ＬＳ刺激９ｈ时，达量最高为对照组的４４ＰＰ表．７倍（＜Ｏ０）刺激３Ｐ．１，２ｈ时，表达量恢复到刺激

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

基酶是甾醇合成过程中的关键酶之一＿。该酶的５Ｊ
主要功能是催化甾醇前体１ａ甲基羟基化的反应，４一生成的终产物在动物中为胆固醇，在真菌中为麦酵素，在植物和原生动物中为多种２－４烷基化和烯烃化甾醇。在哺乳动物体内，１ｃ一甲基酶的直。４ｔ去接产物Ｆ — Ａ，不仅是胆固醇合成过程的中间产ＦＭＳ物，吏是被确定为促减数分裂甾醇（ｉｓ —ｅｉｍｅｉａｔｏｓ — ｖｆｇｓｒｌａｎｔｏ，ＭＡ）。减数分裂是动物有性繁殖ｉｅＳ
有限公司；ｒｏ试剂盒购自美国Ｉｖｔｇｎ公司。Ｔｉｌｚｎｉｏｅｒ
控对性腺的发育分化，甚至整个个体生长发育的影
响极有可能更为突出。虾夷马粪海胆Ｓｒｎｙｃｎｔｇｌｅ— ｏｏ
收稿日期：０２０ — ７２１－３２
关键词：虾夷马粪海胆；Ｙ５基因；隆；单核苷酸多态性ＣＰ１克
中图分类号：￥１９７
文献标志码：Ａ
细胞色素Ｐ５４０基因家族编码的酶系在内源性
ｔｔｔｍｄｕｒｕｉｅｅｉｏｓｎｒｓ又称中间球海胆，原产于日本北
海道及俄罗斯萨哈林岛等地，因其性腺色泽好、味甜、经济价值高、国际市场需求量高，中国于
１８９９年从１本引进了该品种。目前，虾夷马粪海３
胆已经成为中国重要的经济海胆之一，发展前景良好。本研究中作者首次克隆了虾夷马粪海胆的ＣＰ１因，并进行了该基因的单核苷酸多态性Ｙ５基（ｉｇｕｌｔｅｐｌｏｐｉｓｌｎｃｅｉｏｍｒｈｓｎｅｏｄｙｍ，ＳＰ）与壳高、Ｎｓ
基金项目：辽宁省自然科学基金资助项目（０００３；辽宁省 “ ２１２４）百千万人才工程”项目（００２０３２１９１９）作者简介：仇雪梅（９４）１６一，女，博士，教授。Ｅｍｉ：ｘ－ａｌｍ￣ｕｌｕｅｕＧ＠ｄ．ｄ．ｎｏ
摘要：采用Ｒ — Ｃ、ＰＲＳＣ等分子生物学技术和关联分析等方法对虾夷马粪海胆ＳｏｇｌｅｒｕｉＴＰＲＣ —ＳＰｔｎｙｃｔｔ — ｒｏｎｏｓｎ
ｔｍｄｕＹ５基因的ｅＮｅｅｉＣＰ１ｒｓＤＡ序列进行了克隆和单核苷酸多态性分析。结果表明：虾夷马粪海胆的ＣＰ１Ｙ５
第２７卷第４期
２０１２年８月 Байду номын сангаас
大连
海洋大
学学报
Ｖ０．７Ｎｏ４Ｉ２．Ａｕｇ．２０１２
ＪＵＲＮＦＤＩＥＯＡＬＯＡＬＡＮＯＣＡＮＵＮＩＲＳＴＶＥＩＹ
文章编号：０５３８２１）４０９ — ６２９ —１８（０２０ — ２４０
过程中生成单倍体配子的关键步骤，因此，Ｓ在ＭＡ
壳径、性腺质量、体质量等生长性状的关联性分析，为进一步明确ＣＰ１基因的功能，以及为虾Ｙ５夷马粪海胆的分子标记辅助育种提供参考。
１材料与方法
１１材料．
性腺中的合成、分布及其与单倍体配子生成的关系
已经成为ＣＰ１因研究的一个热点。Ｙ５基
试验动物：虾夷马粪海胆由大连海洋大学农业
部北方海水增养殖重点实验室提供，２６月龄，共
１０个。８
与其它物种相比，棘皮动物ＣＰ１基因的研ｙ５
物质（如激素）和外源性物质（如药物、环境化合物）的代谢过程中起着重要作用 … 。ＣＰ１基Ｙ５
因是Ｐ５基因家族重要的成员，它是Ｐ５４０超４０家族中唯一广泛分布于各种真核生物，甚至是一些原核
生物中的成员￣４。ＣＰ１基因编码的１ａ一甲２］Ｙ５－４去
究并不是很深入。而对于海胆这种以性腺为主要经济性状的动物来说，生殖细胞形成、成熟过程的调
主要试剂：ｒａＮ聚合酶、ｄＴｓＭ— ＴｑＤＡＮＰ、
ＭＬＶ反转录酶、ＲＡ酶抑制剂、ＰＴ１ＮＭＤ一９载体、ＤＡ切胶回收试剂盒等均购自宝生物工程（Ｎ大连）
虾夷马粪海胆ＣＰ１基因ｃＮＹ５ＤＡ
的克隆及其ＳＰ分析Ｎｓ
仇雪梅，吴领知，郭晓黎２，张伟杰，丛玉婷，
常亚青，宋坚，刘洋，王秀利
（．大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室，辽宁大连１６２；．大连海洋大学水产与生命学院，辽宁大连１６２）１０３２１０３１
基因包括一个ｌ４１ｂ９ｐ的开放阅读框，编码４６个氨基酸；其开放阅读框的第１１９６个核苷酸处存在１个单核苷酸多态性，即核苷酸发生了Ａ —Ｇ突变。关联分析结果表明，该单核苷酸多态性与虾夷马粪海胆的体
质量、性腺质量之间存在显著相关性（＜．５。本研究中首次克隆了虾夷马粪海胆ＣＰ１基因的ｅＮＰ００）ＹＳＤＡ序列并进行了ＳＰ分析，研究结果可为虾夷马粪海胆的分子标记辅助育种提供参考。Ｎｓ