酶的生产工艺
酶的生产工艺
酶的生产工艺酶是一种生物催化剂，它在许多各行各业的应用中具有广泛的用途。
酶的生产工艺是指通过生物工程技术和发酵工艺来大规模生产酶的过程。
酶的生产工艺主要包括以下几个步骤：1. 酶基因的克隆和表达：首先需要从天然菌株或其他来源中获得酶的基因。
通过核酸技术，将酶基因从DNA中克隆并插入表达载体中。
然后将表达载体转化到宿主细胞中，使宿主细胞能够表达目标酶的基因。
2. 发酵培养：经过基因工程改造的细胞株能够在合适的培养条件下高效表达酶。
发酵培养是通过提供适宜的营养物质和环境条件来培养这些细胞的过程。
其中，培养基的选择、操作工艺的优化和控制等因素对酶的生产量和质量有重要影响。
3. 酶的提取和纯化：经过发酵培养后，酶可存在于细胞内、细胞外或培养液中。
提取和纯化酶的过程需要选择合适的方法，如加热处理、超声波溶解、离心、过滤、层析等。
目的是分离纯酶，并去除其他蛋白质、细胞碎片、有机物等杂质。
4. 酶的稳定化和保存：酶的稳定性对其储存和运输至关重要。
稳定化的方法包括添加保护剂、介质改良、冻干等。
此外，酶的保存过程中要注意严格的冷链管理，避免温度和湿度的变化。
5. 酶的应用：生产出的酶可用于各种行业，如食品加工、制药、酿酒、制革、纺织、洗涤剂等。
酶在这些行业中起到催化剂和增效剂的作用，提高生产效率，减少能源消耗，保护环境等。
总之，酶的生产工艺是通过基因工程技术和发酵工艺来实现大规模生产酶的过程，它涉及到酶基因的克隆和表达、发酵培养、酶的提取和纯化、稳定化和保存等多个步骤。
随着生物工程技术的不断发展，新的酶生产工艺也在不断涌现，为酶的生产提供了更多的选择和可能。
酶的生产和利用
酶的生产和利用一、微生物酶制剂的生产主要有以下步骤：1、目的酶生产菌株的分离筛选（1）从自然界分离筛选（2）用物理、化学因子处理诱变（3）用基因重组或细胞融合技术选育2、酶的生产（1）要选择好的培养方法，包括培养基组成配比、培养温度、pH 值、通气量等。
图:微生物在相当于三层楼高的发酵罐里生长繁殖，产生所需的酶（2）确定工业规模大量生产的一系列工程和工艺条件，以及培养罐的形式、大小、通气条件、温度和pH 值的控制等。
图：通过改变培养基类型、酸碱度、氧气浓度和温度，研究人员现了生产某种酶的微生物的最佳生长条件。
三、酶的提取、分离和纯化1、微生物酶制剂的工业提取步骤大致如下：如果是胞内酶，则首先要分离收集其菌体，使之破碎，将酶提取至液相中，此为出发酶液；如果是胞外酶，它的深层发酵液或固体培养物的抽提液则为出发酶液。
2、制取工业酶制剂的步骤：第一步——除去出发酶液中的悬浮固形物，获得澄清酶液，必要时再进行减压浓缩；第二步——根据质量要求和经济性采用适当方法（如用盐析法、有机溶剂沉淀法、丹宁沉淀法等）将酶沉淀分离；图：只有酶和水能通过转鼓式过滤机；培养基和微生物则被留在硅藻土上。
第三步——收集沉淀、干燥、研粉、加适当的稳定剂、填充剂、做成粉末制剂。
••酶粒是在大型连续运转的水平混合机内生产出来的。
提取的酶与盐、纤维素及其他成分混合形成0.5mm大小的粒状物。
然后用一种聚合体包裹，以防止酶尘在使用过程中可能引起的致敏危险。
图:用多聚体包裹酶以减少酶尘引起的致敏危险。
3、其他方法对于质量要求高可提取液中共存有妨碍目的酶工艺效果的其他酶时，常用一些特殊纯化方法将目的酶与其他酶和杂蛋分开，再分别沉淀制取。
常用的方法有：（ 1 ）蛋白质选择性变性法（ 2 ）分级盐析法•有机溶剂分级沉淀法•等电点法•柱层析法•电泳法•亲和层析法四、酶的化学修饰技术1、金属离子置换修饰2、大分子结合修饰3、肽链有限水解修饰4、侧链修饰图：微生物的基因经修饰能够产生所需的酶五、固定化酶和固定化细胞固定化酶是通过物理或化学的处理，使水溶性酶和固态的水不溶支持物（载体）相结合或被载体包埋，但仍保留酶活力。
酶的微生物生产工艺
27.1 酶生产概论
一、酶的定义和分类 二、酶的特性 三、酶的来源 四、酶的生产菌种
五、产酶菌株的制备和优化
27.1.1 酶的定义和分类
• 酶的定义----酶是生物体内具有特殊催化功能的 蛋白质。
Байду номын сангаас
• 酶的分类----分为6大类 1、氧化-还原酶 2、转移酶 3、水解酶 4、裂合酶 5、异构酶 6、连接酶（合成酶）
降低cAMP浓度 cAMP 使CAP呈失活状态
腺苷酸 环化酶 cAMP
抑制
CAP：降解物基因活化蛋白（catabolic gene activation protein）
5'-AMP
磷酸二酯 酶 激活
分解代 谢产物
27.2.2、提高酶产量的策略
（一）菌种选育（一劳永逸） 1.诱变育种
(1) 使诱导型变为组成型——选育组成型突变株
阻遏蛋白
蛋白质
诱导剂
调节基因(regulator gene)：
可产生一种组成型调节蛋白(regulatory protein) （一种变构蛋白），通过与效应 物(effector) （包括诱导物和辅阻遏物） 的特异结合而发生变构作用，从而改变它与 操纵基因的结合力。 调节基因常位于调控区的上游。
启动基因（promotor gene）（启动子）：
利用微生物生产酶制剂的优点
（1）能够生产酶的微生物 种类繁多，有较大的选择 余地。 • （2）微生物繁殖快、培 养周期短、培养方法简便， 培养过程容易控制， （3）微生物易变异，具有 较强的适应性，能够培育 出新的高产菌株。
发酵法生产酶的方式
• 1、固体培养法 • 固体培养法亦称麸曲培养法 ，该法是利用 麸皮或米糠为主要原料，另外视需要添加其它 谷糠、豆饼等，加水拌成含水适度的半固态物 料作为培养基 。一般适用于霉菌的生产。 • 2、深层液体培养法 • 液体培养法是利用液体培养进行微生物的 生长繁殖和产酶。根据通气（供氧）方法的不 同，又分为液体表面培养和液体深层培养两种。 是目前常用的方法。但无菌要求高。
a-淀粉酶的生产工艺
a-淀粉酶的生产工艺
淀粉酶是一类能够水解淀粉并将其转化为糖类的酶。
它广泛用于食品、饲料、纸浆、
发酵等行业中。
1. 酶菌的选育和培养
淀粉酶可由多种细菌、真菌和原生动物合成，其中最常用的是泌秀菌和枯草芽孢杆菌。
选用高产菌株和适合生产的菌株进行发酵，产生高效淀粉酶。
2. 发酵工艺
发酵工艺是淀粉酶生产的关键步骤。
其主要过程是菌种培养、接种、发酵、分离等。
泌秀菌的发酵条件为温度35℃-42℃，pH为6.0-7.0，培养液中含有可溶性淀粉、氮源、
矿物质以及适量的辅助物质，如表面活性剂等。
枯草芽孢杆菌的发酵条件为温度37℃-55℃，pH为6.5-7.5，培养液中含有可溶性淀粉、氮源和矿物质等。
3. 酶液的提取和纯化
对发酵液进行酶液的提取和纯化，可以采用离心、过滤、超滤、稳态层析等方法。
离
心可将大颗粒杂质和沉淀物去除。
过滤和超滤可去除小颗粒杂质和未溶解物质。
稳态层析
能够去除其他蛋白质等酶外蛋白。
为增强淀粉酶的稳定性，可以将其进行稳定化处理。
稳定化的方法包括添加保护剂、
离子交换、交联、酯化等。
保存时，应避免酶液暴露在空气中、光照下或高温中。
一般情
况下，淀粉酶的保存温度应低于0℃。
总之，淀粉酶的生产工艺涵盖了选育和培养酶菌、发酵、酶液的提取和纯化、稳定化
和保存等多个环节。
只有采取稳定的生产工艺和高效的酶菌，才能获得高质量的淀粉酶产品。
酶在啤酒生产中的工艺流程
酶在啤酒生产中的工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!酶在啤酒生产中的工艺流程主要包括以下几个步骤：1. 粉碎麦芽：首先将麦芽粉碎，使其更容易与水混合并提取其中的酶。
酶产品工艺流程
酶产品工艺流程
酶产品是一种广泛应用于工业生产中的高效催化剂。
酶产品可以通过提取、精制和纯化等工艺步骤进行制备。
下面将详细介绍酶产品的工艺流程。
首先是酶的提取步骤。
酶可以从多种来源中提取得到，如微生物、植物和动物等。
对于微生物来源的酶，可以通过培养微生物菌种，然后收集并离心获得菌体。
接着，通过破碎细胞壁、离子交换、凝胶过滤等操作，将酶从细胞中提取出来。
其次是酶的精制步骤。
在提取过程中，酶会伴随着其他杂质存在，需要通过精制步骤进行去除。
首先是固体分离，通过离心、滤网等操作将固体杂质去除。
然后是液体分离，通过超滤、溶液过滤等操作将液体杂质去除。
最后是浓缩和干燥，将酶溶液经过浓缩、喷雾干燥等工艺，得到酶的粗品。
最后是酶的纯化步骤。
粗品酶仍然存在一些不纯的成分，需要进行纯化以提高酶的纯度。
首先是蛋白质分离，通过离子交换、凝胶过滤等操作将酶与其他蛋白质分离。
然后是酶的活性测定与分析，通过比色法、荧光法等方法检测酶的活性。
接着是纯化酶，可以通过柱层析、电泳等操作去除其他杂质，提高酶的纯度。
最后是酶的活性修饰，通过酶的修饰剂，如金属离子、有机物等，来调节酶的活性和稳定性。
总之，酶产品的工艺流程主要包括提取、精制和纯化等步骤。
在整个工艺流程中，需要使用各种不同的设备和试剂来实现对
酶的提取和纯化。
通过这些步骤，可以得到高纯度和高活性的酶产品，用于各种工业生产中的催化反应。
生物酶制备方法
生物酶制备方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：生物酶是一种生物催化剂，能够加速化学反应的速率，降低反应所需的能量，提高反应的效率。
生物酶在生物技术、制药和食品工业等领域起着至关重要的作用。
生物酶的制备方法有多种，包括基因工程法、筛选法、提取法等。
下面就来详细介绍一下生物酶的制备方法。
一、基因工程法基因工程法是目前生物酶制备的主要方法之一。
通过改造目的基因，将其插入到细胞内，使细胞具有产生特定酶的能力。
基因工程法的步骤可以分为以下几个部分：1.选择目的基因：首先需要确定想要制备的酶的基因序列，包括编码蛋白质的DNA序列。
2.构建表达载体：将目的基因插入到表达载体中，通常是一个质粒或病毒基因组，以便将其导入到宿主细胞中。
3.转染宿主细胞：将构建好的表达载体导入到宿主细胞中，使其具有表达目的基因的能力。
4.培养发酵：将转染宿主细胞进行培养和发酵，使其产生目的酶。
5.酶的纯化：通过离心、过滤、色谱等方法对酶进行分离和纯化。
基因工程法制备生物酶不仅可以大幅提高酶的产量，还可以实现对酶性质的精确调控，提高了生物酶的工业应用价值。
二、筛选法筛选法是一种通过筛选高产酶菌株的方法，主要包括自然选择和人工筛选。
1.自然选择：利用自然环境对酶产生菌株进行筛选，比如在含有特定底物的培养基上培养细菌，通过检测培养基的变化来筛选高产酶株。
2.人工筛选：通过改造细菌菌株，使其表达高效的酶，然后通过培养和筛选找到高产酶株。
筛选法制备生物酶虽然效率较低，但可以利用自然选择或人工筛选的方法获得具有特定性能的酶，是一种简单有效的制备方法。
三、提取法提取法是将含有酶的细菌或真菌通过破碎、搅拌等方式分离出酶，然后通过离心、过滤等方法对酶进行纯化。
1.破碎细胞：首先需要将含有酶的微生物体进行破碎，打破细胞壁，释放出酶。
2.提取酶：将破碎后的微生物体经过离心、过滤等方式分离出酶。
提取法虽然效率较低，但较为简便，适用于小规模制备生物酶的情况。
酶工程 第三章酶的发酵生产 第三节发酵工艺条件及控制
第三节 发酵工艺条件及控制
无机元素是通过添加无机盐来提供的，一般采用水溶 性的硫酸盐、磷酸盐或盐酸盐等。有时也使用硝酸盐，在 提供无机氮的同时，提供无机元素。
4．生长因素 生长因素是指细胞生长繁殖所必不可缺的微量有机化 合物主要包括各种氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素，以及动 植物生长激素等。各种氨基酸是蛋白质和酶的组分；嘌呤 和嘧啶是核酸和某些辅酶的组分；维生素主要起辅酶作用； 动植物生长激素则分别对动物细胞和植物细胞的生长、分 裂起调节作用。有的细胞能够自己合成各种生长因素，而 有的细胞则缺少合成一种或多种生长因素的能力，需由外 界供给，才能正常生长繁殖，这样的细胞称为营养缺陷型。
第三节 发酵工艺条件及控制
在酶的发酵生产中，通常在培养基中加进玉米浆、酵 母膏等，以提供各种必需的生长因素。有时，也加进纯化 的生长因素，以供细胞生长繁殖之需。
现举例几种酶发酵培养基： （1）枯草杆菌BF7658α—淀粉酶发酵培养基：玉米粉 8%，豆饼粉4%，磷酸氢二钠0.8%，硫酸铵0.4%，氧化钙 0.2%，氯化铵0.15%。 （2）枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶发酵培养基：玉米 粉4%，豆饼粉3%，麸皮3.2%，米糠1%，磷酸氢二钠0.4%， 磷酸二氢钾0.03%。 （3）黑曲霉糖化发酵培养基：玉米粉10%，豆饼粉4%， 麸皮1%（PH4.4—5.0）。
第三节 发酵工艺条件及控制
不同细胞生长繁殖的最适PH有所不同。一般细胞和放 线菌的生长最适PH为中性或微碱性（PH6.5—8.0）；霉菌 和酵母的生长最适PH为偏酸性（PH4.0—6.0）；植物细胞 生长的最适PH为5—6。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
精制工艺
生产食品级产品需要进行提取和精制处 理。提取的精制设备是板框压滤机和超 滤器。使用板框压滤机除去发酵液中的 菌体和杂质，得到较纯的酶液滤饼，含 水量要求小于45 %含酶小于100U。将 得到的酶液再进行防腐和调配处理便成 为产品。
二、脂肪酶
• 三酰基甘油基水解酶，可水解三酰甘油 酯为甘油和脂肪酸 • 广泛存在于动植物和微生物内 • 微生物脂肪酶的种类很多，广泛存在于 细菌，酵母和霉菌
（三）发酵方法—固体发酵
固体发酵法以植物秸杆为主要原料，工艺简单，产品价格低廉。 (1)菌种 绿色木霉 (2)培养基 通过对其固态发酵条件进行单因素优化试验来确定 发酵培养基的最佳碳、氮源种类及添加量为:稻草粉与麸皮的 质量比为9 : 1 ，NH4N03 0.5% (3)发酵培养 最适培养条件为:固液比1 : 3，接种量1mL，pH自 然，培养温度30°C. 培养时间96h。 (4)酶的提取 目前生产厂家只能采用直接干燥粉碎得到固体酶 制剂或用水浸泡后压滤得到液体酶制剂，产品外观粗糙，成品 质量不稳定，杂质含量高。因此，随着液体发酵酶工艺的发展 及菌种性能的提高，采用液体发酵法生产纤维素酶是必然趋势。 （5）工业上生产酶制剂的主要方法为盐析法，盐析剂为硫酸铵。 首先以pH4.8的乙酸缓液与酶按体积1 : 2的比例稀释酶液，在 4°C、硫酸铵饱和度为70%的条件下提取16h，5000r/min离心 20min得到沉淀，即为粗纤维素酶。
2.发酵工艺
（1）培养基
米曲霉的培养基:豆饼粉7. 5%， (NH4)2S04 0.8%，水40%，KH2P04 0.25%，麸皮51. 45%。黑曲霉的培养基(g/L) :新鲜麸皮8.25，米糠 4.5，豆饼粉1. 5， (NH4)2S04 O. 3，K2HP04 O. 06，CaCl2 0.075，水8. 6mL， pH5.5。
思考题
•固体发酵和液体发酵的特点 •蛋白质分离提取技术有哪些
（二）培养基
1、试管斜面培养基:将菌种接种于5g/dL麸 皮汁斜面培养基上，28°C 培养3d后使用或 4°C保存。 2、起始摇瓶培养基:麸皮2g/dL， LAvicel 19/dL， KH2P04 0.2g/dL，蛋白胨0.4g/dL， 酵母粉0.02g/dL，其他各种微量元素，自来 水配制成100mL，自然pH。 3、优化瓶培养基:麸皮335g/dL， LAvicel134g/dL，KH2P04 0.2g/dL，蛋白胨 0.4g/dL，酵母粉0.02g/dL，其他各种微量 元素，自来水配制成100mL，自然pH。
3.发酵过程
（二） α-淀粉酶的提取工艺
1.生产工艺流程 2.提取工艺 3.精制工艺
提取工艺
1）热处理 工业上发酵结束后，在搅拌下 加人无水CaClO. 8% (W /V)，升温至5055°C，保温0.5h，冷至35-38°C ，并调 pH6. 7-6. 8，加(NH4 )2S04或Na2S04盐 析，静置数小时，即可压滤收集酶饼。 2)盐析 热处理后可以直接加中性盐盐析， 也可以将发酵液经压滤除去菌体和培养基 残渣后再盐析。 3)干燥 滤饼一般先经烘房干燥，再用气 流干燥而得成品。
4.酶的质量测定
酶性质的测定:将一定量冷冻干燥 后的酶粉溶于pH 3.0乳酸缓冲溶液 中，制成酶溶液，测定酶的最适温 度和pH，通过Sephadex-G75凝胶过 滤层析及SDS-PAGE蛋白质电泳 分 析，此蛋白酶的分子质量范围为 55-60kDa。
四、纤维素酶
1、纤维素酶种类繁多，来源很广，不同来源的 纤维素酶其结构和功能相差很大，广泛存在于生 物体中，但人和大部分动物体内没有，而反刍动 物体内有纤维素酶。用于生产纤维素酶的菌有木 酶属、曲霉属和青霉属等。产生纤维素酶的菌种 容易退化，导致产酶能力降低。 2、纤维素酶应用广泛，在进行酒精发酵时，纤 维素酶的添加可以增加原料的利用率，并可提升 酒质。由于纤维素酶难以提纯，实际应用时还含 有半纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶等。 3、自然界中的很多真菌都能分泌纤维素酶，由 许多具有高协同作用的酶组成。习惯上将纤维素 酶分成三类:内切葡聚糖酶(Cx)、外切葡聚糖酶 (Cl)和伊葡萄糖昔酶(β G)。
（一）生产菌
1.基础菌种 产纤维素酶的微生物主要是霉菌， 有木霉属、曲霉属和青霉属，此外，反刍动物瘤 胃菌、嗜纤维菌、产黄纤维单胞菌、蒙古细菌、 梭状芽抱杆菌等也能产生纤维素酶。 2.选育菌种 菌种选育是纤维素酶生产的重要基 础性工作，国内外许多专家进行了大量研究。以 绿色木霉木10、绿色木霉5n-91014、康氏木霉 NT-IS、黑曲霉XX-ISA为出发菌株，采用了紫 外线、亚硝基胍等理化因素诱变，获得了高产菌 株NTlS-H、NTlS-HLXT-lSH、XT-lSHl。 其 中木霉NT-ISH固体培养活力经轻工部食品质量 监督检测中心南京站检测表明，滤纸活力为 3670U/g，Cl活力24460U/g， Cx活力 1800U/g，已达到国际先进水平。
（五）酶活力的测定
用滤纸方法测定酶活(FPA) ，取适当稀释的酶液0.5mL，加人到 1.5ml pH4. 8、 0.05mol/L柠檬酸缓冲溶液中，再加入1条1cmX 6cm新华定量滤纸，50℃保温1h，加人 1.5mL DNS试剂终止酶反 应，沸水浴5min，冷却后加水稀释到25mL，用分光光度计在 520nm处测还原糖OD值。纤维素酶活力单位的定义:50℃下，每 小时水解底物生成1µmol 葡萄糖所对应酶活定义为1个酶活国际 单位U[lU/(mL· h)]。 酶学性质研究结果表明:耐碱芽孢杆菌III-3-A的CMC酶反应以 pH9.0、反应温度45℃左右为宜，在pH6-1l和50℃以下酶活性稳 定，且具有耐金属离子和表面活性剂等特性，Ca2+对酶的最适 反应温度和热稳定性有显著影响，添加5mmol/L CaCl2可使最适 酶反应温度和稳定性分别提高至50℃和55℃。该酶其有耐热、 耐金属离子、耐碱及高比活力等特点，在棉织品的水洗整理及 洗涤剂工业中具有良好的应（1）菌种 康氏木霉Trichoderma koningii P12菌株; 绿色木霉、里氏木霉。 （2）培养基 斜面培养基采用麦芽汁琼脂培养基。基本 发酵培养基组成为(g/L) :稻草粉30，麦麸15， (NH4)2S04 8，KH2P04 O. 5， MgSO4 • 7H2O O. 5， 酵母膏1，自来水配制，初始pH5.0，装液量35mL。 （3）发酵培养 发酵培养条件为:取种子培养5-6d，离 心上清液即为粗纤维素酶液。确定最佳发酵条件为: 当装液量为56.5mL、稻草粉浓度为37.4g/L和麦麸浓 度为11. 3g/L时，纤维素酶产量达到 63. 32U/mL。
（一）发酵工艺
1.菌种选择 2.培养基
我国用发酵法生产淀粉酶的常用菌种 为枯草芽孢杆菌，如BF-7658菌株。 枯草芽孢杆菌BF-7658的诱变菌株Ning作 为试验菌株，在10L发酵罐中，采用的培养基组成为: 玉米粉7%，豆饼粉5%，磷酸氢二钠0.5%，硫酸铵 0.4%，氯化钠0.15%。培养条件为:温度(37士1)·C， 罐压0.05MPa，转速360r/min，风量1 : (l-1.2)， 培养时间28h ，获得酶活力为397.2U/mL的α -淀粉 酶。 种子培养和发酵培养
1. 生产菌 2. 发酵工艺
3. 提取工艺
4. 酶的质量测定
1.生产菌
蛋白酶分布广，但由于动植物资源有 限，工业上生产蛋白酶制剂主要利用 细菌和霉。 酸性蛋白酶(最适pH2-5) 产生菌主要是黑曲霉、米曲霉、根霉 等;中性蛋白酶(最适pH7-8)产生菌主 要是枯草芽孢杆菌、米曲霉、栖土曲 霉、灰色链霉菌等;碱性蛋白酶(最适 pH9-11)主要产生菌为枯草芽孢杆菌、 蜡状芽孢杆菌等。
主讲：卢昂
组员：牛志鹏、朱聪、陈超英、 李东根、王振立
酶类生产工艺
一．产酶细胞应具备的条件： 二．酶的产量高 三．容易培养和管理 四．产酶性能稳定 五．利于酶产品的分离纯化 六．安全可靠
第一节
一．淀粉酶 二．脂肪酶 三．蛋白酶 四．纤维素酶
工业用酶
一、淀粉酶
淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类的总 称，广泛应用于饴糖生产、各种发酵 生产的糖化工序、纺织工业的退浆工 序、医药和造纸等方面。根据其作用 方式的不同可分为：α -淀粉酶、β 淀粉酶、异淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。 其中以α -淀粉酶最常用。
（四）酶的提取
通过离子交换和凝胶过滤两步层析法，从耐碱芽孢杆菌III-3 的培养液中分离到分子质量约为89kDa、比活力高达420U/mg的 碱性纤维素酶。具体工艺如下。 1.粗提 将皿-3菌株的48h发酵液以14000r/min的转速冷冻离心 20min，所得上清加入4倍体 、pH8.0的Tris-HCI缓冲液，即得 粗酶液。 2.离子交换层析 使用φ 216cmX 30cm DEAE Sepharose CL 6B层 析柱。缓冲液体系采用pH8.0的 Tris-HCl缓冲液，洗脱液为含 NaCl、pH8.0的Tris-HCl缓冲液。 3.凝胶过滤层析 使用的介质为Hiload 16/60 Superdex200pg预 装柱。缓冲液体系采用pH8.0的TrisHCl缓冲液。
（2）工艺流程 （3）发酵条件
装料量30g/250mL三角瓶，采用变 温培养， 32℃堆积培养48h，进行翻 料，将温度调 至28℃继续培养至120h。
3.提取工艺
取发酵原料，以缓冲溶液浸提后，离心获得粗酶粉。 浓缩酶制备工艺流程为:发酵液→絮凝→离心→活性炭脱色→纸板过滤→ 超滤浓缩。 （1)絮凝 取刚下罐的发酵液100mL，加人质量分数为0.1%的絮凝剂 NaAl02 ，室温 搅拌10min，然后倒人100mL量筒中观察沉降情况，并 记录清液出现时间为分层时间，每隔 5min测定清液高度，至120min 为止。 (2)离心 将发酵液装人离心管中，在4℃条件下8000r/min离心。 (3)脱色 选择中颗粒活性炭进行发酵液脱色，用量为1%。 (4)纸板过滤 过滤纸板由孔径30-50µm的棉花纤维、石棉和硅藻土组成， 纸板过撞机的压力为0.3MPa。 (5)膜浓缩 由于蛋白酶的分子质量为28kDa，因此选用聚丙烯膜的MMCO(截 留分子质量)为20kPa，操作压力为0.05MPa，温度控制在lO℃左右。