薄膜分散法制备RGD脂质体
脂质体的制备方法
脂质体的制备方法
脂质体是一种由磷脂类物质构成的微小球形结构，可以用来包封各种水溶性和不溶性的药物。
以下是制备脂质体的一般方法，不包含标题及重复文字。
1. 选择适当的脂质组分：按照需要包封的药物性质（如极性、脂溶性）选择相应的磷脂类物质，常用的有磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰甘油（PG）、磷脂酰丝氨酸（PS）等。
2. 选择合适的方法：制备脂质体的常用方法有薄膜法、乳化法、脂肪酸分散法等。
根据药物特性和制备要求选择合适的方法。
3. 薄膜法制备脂质体：将L-α-磷脂酰胆碱和药物以适当比例
溶解于有机溶剂中（如氯仿），用旋转蒸发器除去溶剂，形成薄膜。
加入适量水溶液，通过超声波处理或机械震荡破碎薄膜，生成脂质体悬浮液。
4. 乳化法制备脂质体：将磷脂、药物和辅助乳化剂（如表面活性剂）溶解于有机溶剂中。
将该溶液滴加到含有乳化剂的水相中，并用机械手段（如超声波）进行乳化处理，形成脂质体。
5. 脂肪酸分散法制备脂质体：将药物与脂肪酸（如硬脂酸）按一定比例共熔，然后迅速冷却。
通过乳化剂或超声波等方法将该混合物乳化成脂质体。
6. 脂质体的后处理：根据需要可以对脂质体进行一些后处理步骤，如冻干、冻融法提高脂质体稳定性等。
综上所述，脂质体的制备方法可以根据实际需求选择薄膜法、乳化法或脂肪酸分散法。
制备时要选择适当的脂质组分，并根据需要进行后处理以提高脂质体的稳定性。
西药师考试综合辅导：脂质体的常用制备方法
1.注入法：将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物共溶于有机溶剂（多采用乙醚）中，然后在磁力搅拌条件下将此药液用注射器缓缓注入加热至50℃的磷酸盐缓冲液中，加完后不断搅拌至乙醚除尽，即制得大多孔脂质体。
2.薄膜分散法：将磷脂、胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶于氯仿或其它有机溶剂中，然后将氯仿溶液在一玻璃瓶中旋转蒸发，使在烧瓶内壁上形成一薄膜，然后将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液中，加入烧瓶中不断搅拌即得脂质体。
3.超声波分散法：先将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液，加入磷脂、胆固醇与脂溶性药物共溶于有机溶剂，搅拌蒸发除去有机溶剂，残液经超声波处理，然后分离出脂质体，再混悬于磷酸盐缓冲液中，制成脂质体混悬型注射剂。
4.高压乳匀法：系将各成分加入溶媒中通过高压乳匀机均匀分散成脂质体。
脂质体薄膜分散法
脂质体薄膜分散法脂质体薄膜分散法是一种常用的制备脂质体的方法。
脂质体是由磷脂等成分组成的微小球体，具有良好的生物相容性和生物可降解性，被广泛应用于药物传递、基因治疗、化妆品等领域。
脂质体薄膜分散法是制备脂质体的关键步骤之一，本文将详细介绍该方法的原理、步骤和应用。
一、原理脂质体薄膜分散法是通过将磷脂等脂质溶解在有机溶剂中，然后将药物或其他活性成分加入溶剂中，使其与脂质发生相互作用，形成脂质体。
该方法的原理是利用溶剂的挥发性，使脂质和药物分子在溶剂中相互混合，形成脂质体薄膜。
二、步骤1. 选择适当的脂质和有机溶剂。
常用的脂质有磷脂、甘油二酯等，常用的有机溶剂有氯仿、二氯甲烷等。
2. 将适量的脂质溶解在有机溶剂中，形成脂质溶液。
3. 将药物或其他活性成分加入脂质溶液中，充分混合。
4. 将混合溶液挥发干燥，使有机溶剂蒸发，形成脂质体薄膜。
5. 将脂质体薄膜重新溶解在适当的溶剂中，并进行进一步的处理，如超声处理、高压均化等。
三、应用脂质体薄膜分散法在药物传递、基因治疗和化妆品等领域具有广泛的应用。
1. 药物传递：脂质体薄膜分散法可以用于制备药物载体，将药物包裹在脂质体中，通过改变脂质体的性质和结构，实现药物的控释和靶向传递，提高药物的疗效和降低毒副作用。
2. 基因治疗：脂质体薄膜分散法可以用于制备基因载体，将基因包裹在脂质体中，通过改变脂质体的性质和结构，实现基因的传递和表达，用于基因治疗和基因疫苗的研究。
3. 化妆品：脂质体薄膜分散法可以用于制备化妆品的载体，将活性成分包裹在脂质体中，通过改变脂质体的性质和结构，实现活性成分在皮肤上的释放和渗透，提高化妆品的功效和渗透性。
四、总结脂质体薄膜分散法是一种常用的制备脂质体的方法，通过溶剂挥发干燥的方式，将脂质和药物相互作用，形成脂质体薄膜。
该方法具有简单、灵活、可控性强等优点，被广泛应用于药物传递、基因治疗和化妆品等领域。
未来，随着纳米技术的发展和应用，脂质体薄膜分散法将进一步得到优化和改进，为新型药物和化妆品的研发提供更好的载体和传递系统。
脂质体制备工艺流程
脂质体制备工艺流程脂质体是一种由磷脂和胆固醇等成分组成的小型纳米载体，具有良好的生物相容性和生物可降解性。
脂质体在药物递送和基因治疗方面具有广泛的应用前景。
下面将重点介绍脂质体的制备工艺流程。
一、磷脂选择脂质体的制备以磷脂为主要原料，常用的磷脂有卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸等。
选择适合的磷脂是制备高质量脂质体的重要因素。
二、制备方法1. 薄膜分散法将磷脂溶解在有机溶剂中制备成薄膜，再加入药物或基因，利用机械或超声分散制备脂质体。
该法制备的脂质体颗粒分布比较均匀，适合制备小型脂质体。
2. 溶剂挥发法将磷脂溶解在有机溶剂中，加入药物或基因，通过挥发有机溶剂制备脂质体。
该法可以制备大量的脂质体，但颗粒大小分布不如薄膜分散法。
3. 冻干法将磷脂溶解在水相中，加入药物或基因，通过冻干、再溶解、超声或机械处理制备脂质体。
该法制备的脂质体稳定性较好，适合制备高含药量的脂质体。
三、性质调节为了满足不同的应用需求，可以通过改变脂质体的表面性质、大小、药物包载量和脂质组分来调节脂质体的性质。
常用的方法有加入表面活性剂、多肽等改变脂质体表面性质，改变磷脂组分、添加胆固醇等调节脂质体结构和稳定性。
四、质量检测在脂质体制备过程中，应注意生产环境的净化和卫生，保证脂质体的质量安全。
脂质体质量的检测方法包括颗粒大小、分布、多分散性、药物包载量、稳定性等方面的指标测定。
综上所述，脂质体的制备工艺包括磷脂选择、制备方法、性质调节和质量检测。
通过合理选择磷脂和制备方法以及进行性质调节和质量检测，可以得到性质稳定、药物包载量高的高质量脂质体，为药物递送和基因治疗等领域提供了广阔的应用前景。
转铁蛋白与RGD共修饰脂质体用于脑胶质瘤靶向性研究
转铁蛋白与RGD共修饰脂质体用于脑胶质瘤靶向性研究邵云，俞向荣，吴一平，姚建社，羊正祥(214023江苏无锡, 无锡市人民医院神经外科)[通信作者]邵云，E-mail：[摘要]目的：构建转铁蛋白与整合素受体RGD共修饰脂质体并对其脑胶质瘤靶向性进行初步研究。
方法：采用薄膜分散法制备RGD修饰脂质体，采用后插入法制备转铁蛋白与RGD共修饰脂质体，观察其形态，粒径，电位。
并通过U87脑胶质瘤细胞摄取实验以及裸鼠脑组织离体成像实验考察脂质体的脑胶质瘤靶向性。
结果：所制备的双配体脂质体粒径在(120±8.5) nm，电位为（-5±1.15） mV。
体外细胞摄取实验表明，U87脑胶质瘤细胞对共修饰脂质体的摄取效率分别是转铁蛋白修饰脂质体和RGD修饰脂质体的2.1倍和2.7倍。
肿瘤球摄取实验以及裸鼠脑组织离体成像实验表明共修饰脂质体具有良好的肿瘤靶向性以及脑部肿瘤传递能力。
结论：转铁蛋白与RGD共修饰脂质体具有一定的脑胶质瘤靶向性，是一种潜在的脑胶质瘤给药系统。
[关键词]转铁蛋白；RGD；脂质体；脑胶质瘤Transferrin and RGD co-modified liposome for glioma targeting SHAO Yun,YU Xiang-rong,WU Yi-ping,YAO Jian-she,YANG Zheng-xiang (Department of Neurosurgery , Wuxi People's Hospital , Wuxi 214023 ,China)Abstract Objective: To prepare transferrin and RGD co-modified liposome and evaluate their glioma targeting efficiency in vitro and in vivo．Methods: The co-modified liposome was prepared byfilm-ultrasonic method. The appearance，particle size，Zeta potential were evaluated. The cellular uptake by U87 cells in vitro and vivo imaging were used to evaluate the targeting efficiency. Results: The particle diameter of the co-modified liposome was 120±8.5 nm with the Zetapotential of -5±1.15 mV. The result demonstrated that the co-modified liposome uptaken by U87 were 2.1, 2.7 times higher than that of transferrin modified liposome and RGD modified liposome, respectively. The evaluation of tumor spheroid penetration and in vivo imaging show the co-modified liposome has the strongest fluorescence intensity. Conclusion: The co-modified liposome might serve as a promising glioma delivery system of antitumor drugs.Key words: Transferrin; RGD; Liposome; Glioma原发性中枢神经系统肿瘤的发病率不断增加，其中，神经胶质瘤占总发病数的77%～80%左右，是颅内最常见的恶性肿瘤[1]。
薄膜均质分散法制备脂质体操作流程
薄膜均质分散法制备脂质体操作流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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1. 准备所需原料和仪器设备：脂质体制备所需的脂质、乳化剂、膜形成剂，以及均质机、离心机等实验设备。
薄膜分散法制备脂质体流程
薄膜分散法制备脂质体流程It is known that the preparation of liposomes using the thin film dispersion method is a popular technique in the field of pharmaceutical research.众所周知，在制备脂质体时使用薄膜分散法是药学研究领域中一种常用的技术。
This method involves the hydration of a lipid film to form liposomes, which can encapsulate drugs and deliver them to specific targets in the body.这种方法涉及将脂质薄膜水合成脂质体，脂质体能够封装药物并将其传递到体内特定的靶点。
One of the key advantages of the thin film dispersion method is the ability to control the particle size and encapsulation efficiency of the liposomes by adjusting various parameters such as lipid concentration and hydration media.薄膜分散法的一个重要优点是通过调整各种参数，如脂质浓度和水合介质，可以控制脂质体的粒径和封装效率。
Furthermore, this method allows for the incorporation of both hydrophobic and hydrophilic drugs into the liposomes, making it a versatile drug delivery system.此外，这种方法允许将疏水性和亲水性药物都纳入脂质体中，使其成为多功能的药物传递系统。
脂质体制备试验
实验十脂质体的制备及包封率的测定一、实验目的1．掌握薄膜分散法制备脂质体的工艺。
2．掌握用阳离子交换树脂法测定脂质体包封率的方法。
3．熟悉脂质体形成原理，作用特点。
4．了解“主动载药”与“被动载药”的概念。
二、实验指导脂质体是由磷脂与（或不）与附加剂为骨架膜材制成的具有双分子层结构的封闭囊状体。
常见的磷脂分子结构中有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团，将适量的磷脂加至水或缓冲溶液中，磷脂分子定向排列，其亲水基团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此相对缔和为双分子层，构成脂质体。
用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂、卵磷脂等；合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂酰胆碱等。
常用的附加剂为胆固醇。
胆固醇也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可制得稳定的脂质体，其作用是调节双分子层的流动性，减低脂质体膜的通透性。
其他附加剂有十八胺、磷脂酸等，这两种附加剂能改变脂质体表面的电荷性质，从而改变脂质体的包封率、体内外其他参数。
脂质体可分为三类：小单室（层）脂质体，粒径为20~50nm，经超声波处理的脂质体，绝大部分为小单室脂质体；多室（层）脂质体，粒径约为400~3500nm，显微镜下可观察到尤如洋葱断面或人手指纹的多层结构；大单室脂质体，粒径约为200~1000nm，用乙醚注入法制备的脂质体多为这一类。
脂质体的制法有多种，根据药物的性质或需要进行选择。
（1）薄膜分散法：这是一种经典的制备方法，它可形成多室脂质体，经超声处理后得到小单室脂质体。
此法优点是操作简便，脂质体结构典型，但包封率较低。
（2）注入法：有乙醚注入法和乙醇注入法等。
“乙醚注入法”是将磷脂等膜材料溶于乙醚中，在搅拌下慢慢滴于55~65℃含药或不含药的水性介质中，蒸去乙醚，继续搅拌1~2h，即可形成脂质体。
（3）逆相蒸发法：系将磷脂等脂溶性成分溶于有机溶剂，如氯仿中，再按一定比例与含药的缓冲液混合、乳化，然后减压蒸去有机溶剂即可形成脂质体。
该法适合于水溶性药物、大分子活性物质，如胰岛素等的脂质体制备，可提高包封率。
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with chemically modified dextran interact with human endothelial
cells[J ] . J Biomed Mater Res. 1999 ,44(2) :140 - 148.
[6 ]胡 俊 ,张 康 ,王筱榕. 一种新型脂质体的制作方法 [J ] .
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[5 ] Cansell ,M. ; Parisel ,C. ;Jozefonvicz ,J . ; et al. Liposomes coated
表 1 正交实验结果及其统计学处理
因素 A(mΠm) B (mg)
实验 1 实验 2 实验 3 实验 4 实验 5 实验 6 实验 7 实验 8 实验 9 均值 1 均值 2 均值 3 极 差
1 :1 1 :1 1 :1 2 :1 2 :1 2 :1 3 :1 3 :1 3 :1 321280 521393 381253 201113
作者简介 :齐 滨 (1978 - ) ,男 ,吉林市人 ,在读硕士研究生 。研究方向 :化学工程 。
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第24卷第2期 2008 年 4 月
长春中医药大学学报 Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
脂质体的制备有多种方法 ,从 RGD 是水溶性药 物的角度考虑 ,除了薄膜分散法之外 ,逆向蒸发法等 均适合其包封 。据文献报道[5 - 6] , 在一定比例范围
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内 ,胆固醇比例越大 ,包封率越高 ,因为胆固醇表面活 性剂作用使 WΠO 乳液能稳定形成 ;但胆固醇比例过 大时 ,组成脂质体的磷脂量太少 ,脂质体膜形成困难 , 而且不牢固 ,且由此形成的脂质体膜亲水性太强 ,膜 也容易破坏 。此外 ,油水比也影响包封效果 。油水比 小时 ,不能很好地形成较稳定的油包水型乳液 ;油水 比过高 ,则脂质体中包入的水溶性药物绝对量太少 。
[1 ]张登本. 白话通解黄帝内经[M] . 北京 :世界图书出版公司 ,
可解释 。肝为风木之脏 ,又为将军之官 ,内寄相火 ,体 阴而用阳 ,其性刚 ,动而难静 ,故又必须赖肾水以涵 之 ,血液以濡之 ,肺金下降之令以平之 ,中宫敦阜之土
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Vo1124 4 ,2008
溶解 。在旋转蒸发仪上减压蒸发 ,去除氯仿 。使溶液 在瓶 壁 上 形 成 均 匀 的 薄 膜 层 。另 外 称 取 适 量 的 RGD ,加入 pH 等于 714 的磷酸盐缓冲溶液中充分溶 解 ,将水相置于上述的旋蒸瓶中 ,混合均匀 ,然后搅拌 水化一定时间后 ,水溶超声一段时间 ,即可得到乳白 色的脂质体混悬液 。 212 形态学研究 取少量 RGD 脂质体制剂滴至载 玻片上 ,用 3 %磷钨酸进行负染 ,再滴至专用铜网上 , 自然挥干 ,使粒子在铜网上浓缩沉积 ,用透射电子显 微镜观察并照相 。 213 RGD 包封率的测定 21311 测定波长的选择 配制 015 mgΠmL 的 RGD 母液 ,稀释至 0102 mgΠmL ,在紫外光区 (UV) 与可见光 区 (VIS) 作全波长扫描 (190 - 500 nm) ,确定有最大吸 收的波长为 200 nm。 21312 标准曲线 精密称取 25 mg RGD 用 50 mL 容 量瓶定容 ,配成 015 mgΠmL 的母液 。用移液管分别移 取 011 、012 、014 、016 、018 、110 、112 mL 于试管里 ,再加 入磷酸盐缓冲液 ( PBS) 稀释至 10 mL ,其浓度分别为 01005 、0101 、0102 、0103 、0104 、0105 、0106 mgΠmL 。以 PBS 为空白 ,在最大吸收的波长下测定吸收值 ,将药 物浓度 (y) 与吸光度 (x) 进行直线回归 ,得回归方程为 y = 171407x + 010994 ,r = 019997 ,可信度较高 。 21313 脂质体包封率的测定 分别取 1 mL RGD 脂 质体及空白脂质体装入透析袋内 , 置于盛有 50 mL PBS 的烧杯中 ,磁力搅拌 ,透析 6 h 。取透析液按药物 含量测定中所述的采用紫外分光光度计测定 ,计算出 游离药物的含量 。包封率 = (总药量 - 游离药物含 量) Π总药量 ×100 %。据文献 [ 3 ] 对包封率有显著影 响的因素有卵磷脂和胆固醇的物质的量比 (A) ,RGD 质量 (B) ,水化时间 (C) 和超声时间 (D) ,现采用正交 分析的方法设计四因素三水平的实验对脂质体的制 备进行优化 ,分析结果见表 1 。
同程度的下降 。
参考文献 :
[1 ]陆 彬. 药剂学 [ M ] . 北京 : 中国医药科技出版社 ,2003 :
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实验结果 (包封率 %)
35125 31103 30156 40153 54162 62103 36125 38151 40100
温度和时间是影响脂质体稳定性的重要因
素[7] 。随贮存温度的升高 ,脂质膜流动性增加 ,药物 的渗漏加快 ,脂质体的稳定性降低 ;温度过低 ,又可能 使脂质体膜内外水相形成冰晶 ,增加双分子膜的渗透 能力 。此外 ,延长贮存时间使脂质体的稳定性产生不
第24卷第2期 2008 年 4 月
长春中医药大学学报 Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1124 4 ,2008
图3
脾胃为球心 ,不发生旋转 ,这与“脾胃不独主于 以培之 ,如此肝体刚劲之质 ,方能得缓和之用 007 - 11 - 12)
薄膜分散法制备 RGD 脂质体
齐 滨1 ,李 然1 ,刘 莉2 ,侯瑞珍1 (1. 长春工业大学 化学工程学院 ,吉林 长春 130021 ;2. 长春中医药大学 药学院 ,吉林 长春 130117)
摘 要 :目的 :探讨制备 RGD 脂质体 。方法 :采用薄膜分散法制备 ,以包封率为考察指标 ,采用正交设计优 化处方和制备工艺 。结果 :优化处方与工艺所得脂质体形态均匀 ,包封率为 62103 %。结论 :所得 RGD 脂质体 包封率较高 ,形态均匀 ,稳定性较好 。 关键词 :RGD ;脂质体 ;包封率 ;薄膜分散法 中图分类号 :R28516 文献标识码 :B 文章编号 :1007 - 4813 (2008) 02 - 0155 - 02
RGD 是一类含有 Arg , Gly 和 Asp 3 种氨基酸的 小肽 。RGD 三肽及其衍生物在抗肿瘤 、抗血栓 ,治疗 急性肾衰 、抗炎等方面的研究已有越来越多的报道 , 已经成为极具研究价值的生物活性肽之一 。脂质体 作为一种内层含有水相的封闭的圆球型双层膜 ,用于 药物释放系统 ,安全性可靠 。RGD 脂质体具有靶向 作用 ,能减少 RGD 用量 ,降低 RGD 的毒副作用 ,具有 缓控释作用等特点[1] 。 1 实验材料 111 药品与试剂 胆固醇 (Cholesterol) 购自北京鼎国 生物技术发展中心 ,磷脂购自北京美亚斯磷脂技术有 限公司 , 透析膜 (D25 ,Mr = 80002144000) 购自美国 ,
由表 1 可知 ,影响药物包封率的各因素的重要性 依次 递 减 为: A > C > B > D , 各 因 素 的 组 合 以 A2B3 C1D1 最佳 ,即卵磷脂Π胆固醇 (m :m) 比例为 1 :1 , RGD 24 mg ,水化时间为 2 h ,超声时间 3 min 。按此条 件重 复 实 验 , 做 3 批 样 品 , 测 包 封 率 62109 %、 62103 %、62180 % ,由结果可见 ,本实验制备的 RGD 脂 质体试验结果的重现性好 。 3 讨论
RGD 三肽由吉林大学生命科学学院酶工程实验室合 成 ,氯仿 、氢氧化钠 、磷酸氢二钠 、磷酸二氢钠等均为 国产分析纯 。
112 仪器 JJ21 型定时电动搅拌器 (上海申顺科技 有限公司) ,ESJ18024 电子天平 (沈阳龙腾电子称量仪 器有限公司) ,ZFQ85A 型旋转蒸发器 (上海申顺科技 有限公司) ,OPI24 型 UV250 紫外可见分光光度计 (岛 津 日本) , KQ2100 超声波清洗器 (昆山市超声仪器有 限公司) ,数控恒温浴锅 (上海申顺科技有限公司) 。 2 实验方法和结果 211 脂质体的制备 采用薄膜分散法制备[2] 。称取 卵磷脂和胆固醇适量放在旋蒸瓶中 ,加入适量的氯仿
10 16 24 10 16 24 10 16 24 371343 411387 441197 61854
C ( h)
2 4 6 4 6 2 6 2 4 451263 371187 401477 81076
D ( min)
3 5 7 7 3 5 5 7 3 431290 431103 361533 61752
时”相符 。理论上应α=α1 =α2 =α3 周而复始的摆动 , 气化不息 。但生命不可能不终止 ,气化之器亦有磨 损 ,这也是疾病的产生 ,故子午轴日渐右偏 ,最终 ,子 午轴被拉平 ,则气化熄 ,生命灭 。细细探究可发现 ,肝 脏在该过程中起决定性作用 。从脏腑学说的角度 ,亦