显微镜的使用和微生物的形态观察
实验一显微镜的使用及微生物形态的观察
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果 • 实验总结
01 实验目的
掌握显微镜的使用方法
掌握显微镜的基本操作
包括调整焦距、照明调节、移动载玻片等。
了解显微镜的保养和清洁
定期清洁显微镜，保持其良好的工作状态。
熟悉不同倍率下的观察效果
04
原生动物属于真核生物，根据形态和运动方式可分为鞭毛虫、变形虫、 纤毛虫等。
微生物在自然界中的作用和意义
分解有机物
微生物在自然界中起到分解有机物的作用，将动 植物残体和排泄物等有机物分解成简单的无机物 ，如二氧化碳和水，为其他生物提供营养。
促进植物生长
一些微生物能够促进植物的生长和发育，如根瘤 菌能够与豆科植物共生形成根瘤，为植物提供氮 素营养；菌根真菌能够与植物根系形成共生关系 ，为植物提供磷素营养等。
03 实验步骤
显微镜的准备
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02
03
清洁显微镜
使用柔软的湿布擦拭显微 镜的表面，确保显微镜干 净无尘。
检查显微镜部件
确保显微镜的目镜、物镜、 载物台等部件完好无损， 没有损坏或松动。
调整光源
打开显微镜的光源，确保 光源亮度适中，没有闪烁。
样本的制备
选择样本
选择要观察的微生物样本，如细菌、藻类、原生 动物等。
详细地观察。
观察和记录微生物形态
观察记录
在观察过程中，注意记录不同微生物的形态特征，并 绘制简单的显微镜图像或使用相机拍摄记录。
分析结果
根据观察记录，分析微生物的种类、数量和分布情况， 并得出实验结论。
整理器材
实验结束后，清洁并整理好显微镜和相关器材，以便 下次使用。
实验一显微镜的使用及微生物形态的观察
四、器材
显微镜、细菌三型涂片、霉菌和放线菌 的永久玻片等。
五、操作步骤
（ 1 ）置显微镜于平稳的实验台上，镜座距 实验台边沿约 3-4 ㎝，镜检者姿势要端正， 一般用左眼观察，右眼便于绘图或记录，两 眼必须同时睁开，以减少疲劳，亦可练习左 右眼均能观察。
（ 2 ）调节光源、光线较强的天然光源宜用 平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源宜 用凹面镜。
聚光器（condenser）：光源射出的光线通过聚光器汇聚成光锥照射 标本，增强明度和造成适宜的光锥角度，提高物镜的分辨力。聚 光器由聚光镜和虹彩光圈（iris diaphragm）组成，聚光镜由透 镜组成。虹彩光圈由簿金属片组成，中心形成圆孔，推动把手可 随意调整透进光的强弱。调节聚光镜的高度和虹彩光圈的大小， 可得到适当的光照和清晰的图像。
三、基本原理
1、 细菌的个体形态是指细菌细胞的大小， 形状等特征，利用观察个体形态对细菌 进行初步识别和鉴定。
2、 放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体 的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多 能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培 养基内生长的叫基内菌丝，基丝生长到一 定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，并 进一步分化产生孢子丝及孢子。
显微镜是由机械装置和光学系统两大部分组成。
1．机械装置
镜座（base）和镜臂（arm） 镜座位于显微镜底部 , 呈马蹄形，它支持全镜。镜 臂有固定式和活动式两种，活动式的镜臂可改变角 度。镜臂支持镜筒。
镜筒（body tube） 是由金属制成的圆筒，上接目镜，下接转换器。镜 筒有单筒和双筒两种，单筒又可分为直立式和后倾 式两种。而双筒则都是倾斜式的，倾斜式镜筒倾斜 45 °。双筒中的一个目镜有屈光度调节装置，以备 在两眼视力不同的情况下调节使用。
1.实验一 光学显微镜的操作及微生物形态观察
实验一光学显微镜的操作及微生物形态观察一、实验目的与要求1、了解普通光学显微镜的构造与功能，学习与掌握显微镜观察微生物的方法。
2、观察根霉、毛霉、草履虫等真核微生物的个体形态，学会绘制微生物的形态结构图。
二、显微镜的基本结构：机械部分和光学部分。
1、机械部分：镜座、镜筒、转换器、载物台、移动尺、粗动螺旋、微动螺旋等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、内置光源或反光镜、光圈等。
三、显微镜的性能1、数值孔径：也叫做镜口率（或开口率），简写为N.A，数值孔径是物镜和聚光器的主要参数，也是判断它们性能的最重要指标。
NA=n·sinα/2，n—物镜与标本之间的介质析射率；α—物镜的镜口角2、分辨率：D可用下式表示：D=0.61·λ/NA，可通过减低波长、增大折射率、增大镜口角来提高分辨率。
物镜分辨力的高低与物象的清晰度密切相关，目镜没有这种性能。
3、放大倍数：目镜放大倍数与物镜放大倍数之积。
四、显微镜的操作及微生物形态观察1、显微镜的拿取：一手握镜臂，一手托镜座，平稳拿取。
2、对光：转换器上的槽孔与弹簧片吻合即表示物镜正对通光孔。
3、视野亮度的调节：调光旋钮（或反光镜的平面与凹面）、聚光镜、光圈。
4、低倍镜观察：低倍镜视野较大，易于发现目标。
在载物台上放置装片，用压片装置固定，调节移动尺，使被观察的标本处在物镜正下方，从侧面观察，上升载物台，使物镜接近装片，用目镜观察并同时下降载物台，直至物像出现，再用细调节旋钮使物像清晰为止。
用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。
5、高倍镜观察换上高倍镜后从目镜观察，调节光照，使亮度适中，缓慢调节细调节旋钮调至物像清晰为止，找到需观察的部位，并移至视野中央进行观察。
6、将各部分还原，物镜头不与通光孔相对，而是成八字形，将载物台下降至最低，降下聚光器，将内置光源调至最低亮度后关灯或将反光镜与聚光器垂直。
最后用柔软纱布清洁载物台等机械部分，然后将显微镜放回柜内或镜箱中。
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告一、引言显微镜是一种用来观察微小物体的仪器，它可以放大物体的细节，使我们能够看到肉眼无法观察到的细节。
在生物学中，显微镜被广泛应用于研究细胞和微生物等微小生物体的结构和功能。
本报告将介绍显微镜的使用方法以及如何观察细菌形态结构。
二、材料和方法1. 显微镜：本次实验使用的是光学显微镜。
2. 细菌样本：从实验室中获取了多种不同类型的细菌样本。
3. 玻片和盖玻片：用于制作样品载玻片。
4. 意式染色剂：用于染色处理，增强对细菌形态结构的观察。
三、显微镜使用方法1. 调整光源：打开显微镜后，在透明底座上放置一个白色纸片，调整光源位置和亮度，使得纸片上呈现均匀明亮的白色。
2. 调整目镜：将目镜对准眼睛，调节焦距，使得目视舒适且清晰。
3. 调整物镜：选择合适的物镜，将其转至位置，并调节焦距，使得样品清晰可见。
4. 调整聚光镜：根据需要调整聚光镜的大小和位置，以增强样品的亮度和对比度。
四、细菌形态结构观察方法1. 制作载玻片：在干净的玻片上挤出一滴细菌悬液，在另一个玻片上盖上一张盖玻片，轻轻压紧。
2. 意式染色处理：将制作好的载玻片浸泡在意式染色剂中，静置5-10分钟。
3. 洗涤处理：用蒸馏水洗涤载玻片数次，直到洗涤后水不再有颜色。
4. 干燥处理：将载玻片放置在通风处晾干。
五、结果与讨论1. 观察细胞形态结构：通过显微镜观察，可以看到不同类型的细菌具有不同的形态结构。
如球菌呈圆形或半球形，链状菌呈长条状等等。
通过染色处理后观察可以更加清晰地看到这些形态特征。
2. 观察细胞大小：通过显微镜观察，可以测量细菌的大小。
不同类型的细菌大小也不同，如球菌直径一般在0.5-1微米之间，链状菌长度则在数十到数百微米之间。
3. 观察细胞结构：通过显微镜观察，可以看到一些特殊的结构，如某些细菌具有鞭毛、纤毛或胞外多聚物等附属结构。
这些结构对于细菌的运动和生长有着重要的作用。
六、实验注意事项1. 实验过程中要注意卫生和安全。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
3-2
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
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3．革兰氏染色法：
革兰氏染色法将细菌分为G＋和G- ，这由两类细菌细胞 壁结构和组成不一样而决定。用结晶紫初染后，全部细菌都 染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘 复合物，增强了染料与菌体结协力。用乙醇脱色处理时，两 类细菌脱色效果是不一样。G＋细菌细胞壁主要由肽聚糖形 成网状结构组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细 胞壁脱水、网状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫— 碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染依然 保持初染剂蓝紫色。G-细菌则不一样，因为其细胞壁肽聚糖 层较薄，类脂含量高，所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解， 细胞壁通透性增大，使结晶紫—碘复合物比较轻易被洗脱出 来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂颜色。
总菌数 A 16104 B 32000A B（个 / ml） 5
4-3
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
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2. 区分酵母菌死活细胞基础原理 美蓝是一个无毒性染料，它氧化型呈蓝色，
还原型是无色。用美蓝对酵母菌活细胞进行染 色时，因为细胞新陈代谢作用，细胞内含有较 强还原能力，能使美蓝由蓝色氧化型变成无色 还原型。所以，含有还原能力酵母活细胞是无 色或淡蓝色，而死细胞或代谢作用衰老细胞则 呈蓝色，借此即可对酵母菌死细胞和活细胞进 行判别。
微生物实验显微镜的使用及微生物形态观察
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四. 试验内容
1. 酵母菌形态观察及死活细胞判别 (1) 在载玻片上加半滴美蓝染液，在染液上 滴一滴菌液。取一块盖玻片，先将一边与菌液 接触，然后慢慢将盖玻片放下盖在菌液上。
(2) 将标本片放3分钟后，先用低倍镜然后用 高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况，并依据颜
实验三__显微镜油镜的使用及细菌形态观察
5.油镜使用结束后，物镜用擦镜纸擦三遍：第一遍擦去多余的香柏 油；第二遍擦镜纸蘸上二甲苯再擦镜头；第三遍再用干净的擦 镜纸擦去多余的二甲苯。 6.显微镜应存放在阴凉用擦镜纸擦干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐 蚀镜片。
三.显微镜油镜观察操作方法
在高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区域后，然后 将油镜转到工作位置。在待观察的样品区域滴加香柏
油，从侧面注视，用粗调节器使油镜浸在镜油中并几
乎与标本相接。然后用细调节器调节，在目镜下找到 最合适的观察点。
油镜使用毕后：上升镜筒，取下载玻片，用擦镜纸拭
去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯（香柏 油溶于二甲苯）擦去镜头上残留的油迹，最后用干净
的擦镜纸擦去残留的
而革兰氏阴性菌由于细胞壁的肽聚糖层较薄、类脂含 量高，所以当脱色处理时类脂被乙醇溶解，细胞壁透
性增大，结晶紫—碘复合物被洗脱，复染时细胞被染
上复染剂的颜色（红色）。
葡萄球菌
大肠杆菌
三、革兰氏染色的操作方法
涂片
干燥
固定
染色
水洗
干燥
镜检
无菌操作
（1）涂片：先在载玻片上滴一滴生理盐水，再在菌平
板上取一小环培养24小时的大肠杆菌和金黄色葡萄球 菌菌体于生理盐水中涂片（，分别于斜面上挑取少许
养由对应学号的同学负责。实验过程中如果所用显微 镜不能使用，自行与其他同学调节。但显微镜如果出 现问题，由对应学号的同学承担责任。
（二）细菌形态的观察
一、实验目的 进一步熟悉使用油镜观察微生物的方法，初
步认识细菌的基本形态和特殊结构特征
二、观察内容
基本形态：杆菌，球菌（注意大小、染色性、
排列）
特殊结构：鞭毛，芽胞，荚膜（先找到菌体， 再仔细观察特殊结构）
显微镜观察微生物形态的实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除显微镜观察微生物形态的实验报告篇一：微生物实验报告：微生物形态观察实验一微生物形态观察一、实验目的1．巩固显微镜的使用方法，重点练习油镜的使用；2．认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构；3．练习手绘微生物图片。
二、实验原理1．细菌基本形态细菌是单细胞生物，一个细胞就是一个个体。
细菌的基本形态有3种：球状，杆状和螺旋状，分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。
球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。
杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等，是细菌中种类最多的。
螺旋菌分为弧菌和螺菌。
除此之外，还有一些特殊形态的细菌。
2．细菌特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。
荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质，具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。
鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体，具有运动功能，在菌体上的着生位置、数目因菌种而异。
菌毛（又称纤毛）是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬，且数量较多的丝状体，与细菌吸附或性结合有关。
芽孢又称内生孢子，是某些细菌生长到一定阶段，在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体，具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。
3．真菌的结构特征菌丝是构成真菌营养体的基本单位，是一种管状细丝。
可伸长并产生许多分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。
根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。
为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要，许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态，这些特化的形态称为菌丝变态。
比如吸器、假根、子实体。
4．放线菌的结构特征放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞生物。
链霉菌是典型的放线菌，其细胞呈丝状分枝，菌丝直径很小，在营养生长阶段，菌丝内无隔，故一般呈多核的细胞状态。
当其孢子落在固体基质表面并发芽后，就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展，形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝，同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝，这就是气生菌丝。
实验指导_实验一、显微镜的使用和微生物形态的观察
实验一显微镜的使用和微生物形态的观察一、目的要求1、熟悉普通光学显微镜的构造及其使用方法。
2、了解油镜的原理，并掌握其使用方法。
3、观察各种染色标本，认识微生物的基本形态和特殊结构。
二、基本原理显微镜包括普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。
微生物个体微小，难于用肉眼观察形态结构，只有借助显微镜，才能对其进行研究和利用。
普通光学显微镜是一种精密的光学仪器，是观察微生物最常用的工具。
细菌等原核细胞型微生物个体微小，一般需要使用油镜观察其形态结构。
而油镜头晶片极小，投入光线少，从载玻片透过光线，又被空气折射（空气折光广率1.00、玻璃折光率为1.52），更不易射入镜头内，致使光线较弱物像不清。
当在镜头和载玻片之间滴加香柏油后，由于香柏油折光率为1.515，与玻璃相近，可消除光线通过玻璃与物镜间空气时发生折射现象，避免光线损失，使亮度和清晰度都得到了提高，几乎可以看清所有细菌。
三、实验材料及仪器（1）标本及试剂：微生物标本片、香柏油、二甲苯。
（2）仪器及其他用具：普通光学显微镜、擦镜纸等。
四、实验步骤1.普通光学显微镜的构造及使用方法。
1）普通光学显微镜的构造。
普通光学显微镜有机械部分和光学部分组成。
A．显微镜的机械部分。
包括镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、推动器、粗调节器（粗调螺旋）和细调节器（微调螺旋）等部件（图1-1）普通光学显微镜机械部分各部件的构造与功能见表1-1B．显微镜的光学系统。
由反光镜、聚光镜、物镜、目镜、虹彩光圈等组成，光学系统使标本物像放大，形成倒立的放大物像。
表1-2普通光学显微镜光学系统的构造与功能2）普通显微镜的使用①取镜。
从镜箱中取镜时，一手握镜臂，一手托镜座，保持镜体直立，以防反光镜及目镜脱落被摔坏，将显微镜放置于平稳的实验台上。
端正坐姿，镜检时两眼同时睁开，单目显微镜一般用左眼观察，用右眼帮助绘图或做记录。
双目显微镜用双眼观察。
②使低倍镜与镜筒呈一直线，调节反光镜，让光线均匀照射在反光镜上，电光源显微镜打开照明光源，并使整个视野都有均匀的照明。
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实验内容
1、显微镜的使用 2、微生物的形态观察
普通光学显微镜的结构
由一组光学放大系统、调 节系统及机械支持系统组成。
1、机械系统部件：镜座、 载物台、物镜转换器、镜 筒和调节器等。
2、光学放大系统部件：反 光镜、聚光器、物镜和目 镜等。
显微镜的使用
用显微镜观察肉眼看不到的微生 物，但大多数微生物用高倍镜也看 不清，需要用油镜（100×）观察。 用油镜观察时，镜头必须浸入香柏 油里 。
杆状细菌代表1-大肠杆菌
螺旋菌的典型代表-钩端螺旋体
细菌的特殊结构-鞭 毛
微生物第二大类-放线菌
❖ 放线菌菌丝
放线菌轮生菌丝
螺 旋菌丝
放线菌菌丝及孢子丝
微生物的第三大类：霉菌 霉菌菌丝的典型结构-1.无隔菌丝和
有隔菌丝
霉菌菌丝的典型结构-2。根霉的假根 及孢子囊孢子
霉菌菌丝的典型结构3.青霉的青霉穗
菌落形态
菌落是由某一微生物的单个细胞或 孢子在培养基表面繁殖后形成的肉眼 可见的集落。
菌落形态在一定程度上是个体细胞 形态结构在群体上的反映。
菌落形态特征
从菌落的大小、气味、颜色、表 面有无光泽，是否透明、干燥程度、 粘稠度、菌落隆起情况、边缘是否 整齐等角度描述四大类型菌群的菌 落形态特征
观察要求
霉菌菌丝的典型结构3.曲霉的足细胞
足细胞
分生孢子
霉菌菌丝的典型结构4. 毛霉的孢子
微生物的第四大类：酵母菌
假丝
❖ 酿酒 酵母
实验要求
❖ 每位同学必须观察的涂片为： 细菌三型涂片、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、
四联球菌、八叠球菌、金黄色球菌、放线菌、 酿酒酵母、青霉、曲霉、匍枝根霉
观察并描绘每种菌的镜下形态
注意事项
1、观察标本应先用低倍镜找到视野，再 用高倍镜观察。
2、使用低倍镜时，由于视野较大，光线 应调暗些。换高倍镜和油镜时，光线要 逐渐增至最强。
3、转换物镜时，要侧面观察，避免镜头 与玻片相撞，损伤镜头。
注意事项
4、注意标本片应正面朝上。
5、低倍镜和高倍镜不能浸入香柏油中。 6、使用完油镜后，要低少许乙醇将镜
❖ 仔细观察菌落形态，并对每种菌落形态予以 描述
❖ 细菌（大肠杆菌、四联球菌、枯草芽孢杆 菌），
❖ 酵母（酿酒酵母、红酵母） ❖ 放线菌（不产色素、产红色脂溶性色素及产
蓝色水溶性色素） ❖ 霉菌（曲霉、根霉、青霉）
放线菌菌落（产水溶性色素）
放线菌菌落（产脂溶性色素）
放线菌菌落（产脂溶性色素）
❖红 酵 母
显微镜的使用示意图
打开开关
调节光源
置标本片
（正面朝上）
低倍镜 观察
擦镜头 还原
油镜 观察
高倍镜 观察
实验内容
1、显微镜的使用 2、菌、 和酵母菌四大类群的个体形态， 并画出。
2、肉眼观察它们的菌落形态, 列表 说明各菌落特征。
个体形态
细菌：有球状、杆状、螺旋状三种 放线菌：丝状菌，菌丝分为基内菌丝、气
生菌丝和孢子丝（轮生和螺旋） 霉菌：丝状菌，有假根、足细胞、青霉穗
等。 酵母菌：椭圆形，有时形成假丝。
细菌的三种典型形态
球状
❖ 自然界 中细菌 的混居 状态
螺旋状
杆状
球菌的典型形态-金黄色葡萄球菌
球菌的典型形态-四联球菌
球菌的典型形态-八叠球菌
头和玻片檫拭干净。 7、注意观察各类微生物的特征形态。
8、注意比较各类菌落形态的区别
思考题
1、在使用油镜时为什么要浸入香柏油中？ 2、显微镜用完后的处理？ 3、如何区别四大类型微生物类群的个体形态和
菌落特征？
在线显微镜