2015-2016学年高中生物选修一课后习题 2.2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.doc
高中生物选修1学案5：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[学习目标]研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。
[学习重点与难点]1．对土样的选取和选择培养基的配制。
2．对分解尿素的细菌的计数。
[知识链接]尿素[CO(NH2)2]最初是从人的尿液中发现的，后来也是人工合成的第一个有机物，广泛存在于自然界中。
尿素是一种有机态氮肥，经过土壤中细菌将尿素分解成氨之后才能被植物吸收利用。
[新知预习]一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的氮肥，农作物________直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为________和CO2，才能被植物利用，这是因为土壤中的这些细菌能合成________。
因此，利用这一特点，可以将这些细菌从土壤中筛选出来。
(1)实验室中微生物的筛选的原理：人为提供有利于________生长的条件(包括营养、________、pH等)，同时________或________其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
2．统计菌落数目常用来统计样品中活菌数目的方法是______________。
当样品的________足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中________。
通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数。
这种方法统计的菌落数比活菌的实际数目________。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是________个菌落。
因此，统计结果一般用________而不是活菌数来表示。
除此之外，________________也是测定微生物数量的常用方法。
另外，细菌的数目还可以通过________法来测定，例如，测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将________的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到________培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现________色，通过计数得出水样中大肠杆菌的数量。
【人教版】高二选修一生物：2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》同步测试(含答案).doc
高中生物专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习新人教版选修1一、选择题1．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水[答案] A[解析] 根据题意可知，该培养基中必须要有尿素，故可排除B、D；而培养基中必须含有有机物作为碳源，又可排除C，故只有A符合题意。
2．某同学在101、102、103倍稀释液的平均菌落数为2760、295、和46，则菌落总数(个/mL)为( ) A．2.76×104B．2.95×104C．3.775×104D．4.6×104[答案] C3．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
A同学的结果产生原因可能有( )①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③ B．②③④C．①③④ D．①②③④[答案] A4．请选出下列正确的步骤( )①土壤取样②称取10g土壤放入盛有90g无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①→②→③→④ B．①→③→②→④C．①→④→②→③ D．①→②→④→③[答案] D二、非选择题5．自然界中的微生物往往是混杂生长的。
人们在研究微生物时一般要将他们分离提纯，然后进行数量的测定。
下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
步骤如下：A．制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液B．为了得到更加准确的结果，你选用________(稀释混合平板法、稀释涂布平板法)接种样品C．适宜温度下培养结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，再对应稀释倍数的106的培养基，得到以下几种统计结果，正确可信的是A．一个平板，统计的菌落数是23B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24C．三个平板，统计的菌落数是21、5和52，取平均值26D．四个平板，统计的菌落数是21、30、24和25，取平均值25(2)一同学在稀释倍数的106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(0.2mL)________。
高中生物选修1课时作业13：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1. 在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是（）A. 加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基B. 加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基C. 加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基D. 加入唯一碳源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基2. 测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（）A. 细菌个体小，真菌个体大B. 细菌易稀释，真菌不易稀释C. 细菌在土壤中的含量比真菌高D. 随机的，没有原因3.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．①③⑤⑧C．②④⑥⑧D．①④⑥⑦4.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的（）A.将土壤用无菌水稀释，制备10﹣3～10﹣5土壤稀释液B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株5.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。
下列与该实验相关内容的叙述中不正确．．．的是（）A．实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基B．通过图中I、Ⅱ过程目的是增加目标微生物的数量C．统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数D．在⑤处培养基上能生长的一定是能降解对羟基苯甲酸的微生物6.下列叙述不正确的是( )A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C．如果得到了多个菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功D．牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落7.选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。
高中生物选修1课时作业23：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、单选题1．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48 小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300 以上的实验组平板进行计数2．下列有关微生物培养的叙述，不正确的是（）A．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行菌落计数B．在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌C．酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源3．在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
下列有关叙述，出现科学性错误的是A．甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题B．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C．将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误D．B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则4．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因5．在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。
利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌6．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是( )A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒7．在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10-6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
高中生物选修1课时作业2：2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[基础巩固]1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做() A．鉴别培养基B．加富培养基C．选择培养基D．基础培养基[解析]选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。
[答案] C2．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是() A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D．都会在培养基表面形成单个的菌落[解析]平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。
平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。
[答案] D3．本课题以土壤中的细菌为研究对象，要达到的目的是()①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②从土壤中分离出能够分解氨的细菌③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌④统计所取土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌A．①③B．②④C．①②D．③④[解析]从土壤中分离分解尿素的细菌并对其计数，统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌，用公式“每克样品中菌落数＝(C/V)×M”进行推测，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积/(mL)，M代表稀释倍数。
[答案] A4．产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是() A一个细菌、液体培养基B．许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基D．许多细菌、固体培养基[解析]在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，肉眼都是看不见的。
在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是看不见的。
当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围内时，肉眼可见。
而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，所以肉眼可见。
高中生物选修1课时作业11：2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．下列哪项不是菌落的特征（）A．大小和形状B．光泽度和透明度C．颜色和硬度D．气味和PH2．下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源3．能合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分别是（）A．CO2和N2B．葡萄糖和NH3C．CO2和尿素D．葡萄糖和尿素4．统计细菌数目的方法有（）①涂布平板法②直接计数法③滤膜法A．①②B．①③C．②③D．①②③5．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是()A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出能分解尿素的细菌6．关于测定土壤中细菌的数量，正确的叙述是A．一般选用103～107倍的稀释液分别涂布B．测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释D．当第一次测量某种细菌的数量时，可以将104～106倍的稀释液分别涂布到平板上培养7．在本课题的实验中，下列关于土壤取样的叙述，错误的是（）A．土壤取样时应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁边称取土壤8．用稀释涂布夹板法测定同一土壤样品中的细菌数，大对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（）A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了3 个平板，统计的菌落数分别是21、212、256，取平均值163D．涂布了3 个平板，统计的菌落数分别是210、240、250，取平均值2339．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其它同学只选择出50个菌落。
2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
是
分离 只生长 尿素 尿素细
养基
细菌 菌
对照组
牛肉膏蛋 白胨培养
基
判断该培 生长多
是
养基有无 种微生 选择性 物
㈡.统计菌落数目：
1、显微镜直接计数：
利用血球计数板(血细胞计数板），在显微镜下计算一定 容积里样品中微生物的数量。
优点： 设备简单、能观察微生物的形态特征
缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
DNA多聚酶链式反应（PCR）是一种在体外将少量DNA大量复制 的技术，而此项技术的实施必须使用耐高温（93℃）的DNA聚合酶。
or ?
水生栖热菌Taq
Taq酶
因为热泉温度为70～800C，淘汰了绝大多数微生物只有
Taq细菌被筛选出来。
1.启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境要求，到相应的 环境中去寻找。
每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培 养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
菌落的特征：形状、大小、隆起程度和颜色等。
三、操作提示
[一]无菌操作 1、取土用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。 3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。 [二]做好标记 注明培养基种类、培养日期、平板培养样品 的稀释度等。 [三]规划时间
石油分解菌
纤维素分解菌 尿素分解菌
2、实验室中微生物的筛选原理：
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，
同时抑制或阻止其他微生物生长。
3.选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微 生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培 养基。
20152016学年人教版生物选修1专题2《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课后习题
【优化设计】2015-2016学年高中生物专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课后习题(含解析)新人教版选修1课时演练·促提升1、将硝化细菌接种到下列培养基中,其中可以长出硝化细菌菌落的就是( )A、无氮培养基,试管密闭B、无氮培养基,试管口用棉塞塞住C、含氮培养基,试管密闭D、含氮培养基,试管口用棉塞塞住解析:硝化细菌需要氮源,因此培养硝化细菌需要含氮的培养基;硝化细菌就是需氧型微生物,因此试管口用棉塞塞住以便于通气。
答案:D2、下表资料表明在各种培养基中细菌的生长,S、C、M为简单培养基;U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质。
该细菌不能合成( )培养基生长状态S、C、M -S、C、M+V+Z -S、C、M+U+Y +S、C、M+Z+X -S、C、M+V+Y +S、C、M+U+X -S、C、M+Y+Z +A、UB、VC、YD、Z解析:该细菌在简单培养基上不能生长,但只要在简单培养基中含有Y物质,细菌就能正常生长,因此该细菌无法合成Y物质。
答案:C3、下列方法可以鉴定出分解尿素的细菌的就是( )A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B、以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析:分解尿素的细菌能分解尿素,产生氨,氨能使pH升高,酚红指示剂变红。
答案:A4、某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数就是(涂布平板时所用稀释液的体积为0、1 mL)( )A、2、34×108B、2、34×109C、234D、23、4解析:根据计算方法“每克样品中的菌落数=(C÷V)×M”,则(234÷0、1)×106=2、34×109。
答案:B5、下列关于微生物分离与培养的叙述,错误的就是( )A、微生物培养前,需对培养基进行消毒B、测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C、分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D、分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不就是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法而一般不用活菌计数;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30~300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源。
【人教版】高一生物选修一：2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学案(含答案)
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．研究培养基对微生物的选择作用。
2．进行微生物数量的测定。
一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的农业____肥，但不能直接被农作物吸收利用，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成______。
（1）实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的______生长的条件（包括营养、______、pH等），同时______或______其他微生物生长。
（2）选择培养基：在微生物学中，将允许________的微生物生长，同时______或______其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目统计的菌落数往往比活菌的实际数目____。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用________来表示。
（2）____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）细菌的数目还可以通过______法来测定。
例如，测定饮用水中大肠杆菌的数目，可将________的水过滤后，将滤膜放到________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现____色，可以根据培养基上________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。
3．设置对照（1）设置对照的主要目的是排除实验组中__________对实验结果的影响，提高实验结果的________。
（2）对照实验是指除了________的条件以外，其他条件都______的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
二、实验设计实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的________以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样土壤中的微生物70%～90%是_____，绝大多数分布在距地表______ 的近____性土壤中。
高中生物选修1学案1：2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[教学目标]研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。
[重点难点]重点：对土样的选取和选择培养基的配制。
难点：对分解尿素的细菌的计数。
读书指导法、启发式教学[教学流程]一、基础知识：自主预习1．尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
2．以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：⑴；⑵。
3．PCR（）是一种在体外将。
此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。
思考：怎样找耐高温的酶呢？4．实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于生长的条件（包括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
5．选择培养基是指。
6．常用来统计样品中活菌数目的方法是。
即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
另外，也是测定微生物数量的常用方法。
7．比较教材中两位同学的操作方法，哪位同学的结果接近真实值？你认为这两位同学的实验需要改进呢？如需要，如何改进？8．一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目。
这是因为。
因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。
9．设置对照实验的主要目的是，提高实验结果的可信度。
10．对照实验是。
11．实验设计包括的内容有：、、和，具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
12．不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。
在实验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以。
13．无菌操作应注意什么问题？⑴⑵⑶14．在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是。
思考：应标记哪些内容？怎样操作更有利于实验的进行？15．对所需的微生物进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，要对分离的菌种进行一步的鉴定，还需要借助的方法。
思考：有哪些方法可以对菌种进行鉴定？[疑难点拨]1．选择培养基选择培养基的含义是：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。
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1.将硝化细菌接种到下列培养基中,其中可以长出硝化细菌菌落的是()A.无氮培养基,试管密闭B.无氮培养基,试管口用棉塞塞住C.含氮培养基,试管密闭D.含氮培养基,试管口用棉塞塞住解析:硝化细菌需要氮源,因此培养硝化细菌需要含氮的培养基;硝化细菌是需氧型微生物,因此试管口用棉塞塞住以便于通气。
答案:D2.下表资料表明在各种培养基中细菌的生长,S、C、M为简单培养基;U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质。
该细菌不能合成()A.UB.VC.YD.Z解析:该细菌在简单培养基上不能生长,但只要在简单培养基中含有Y物质,细菌就能正常生长,因此该细菌无法合成Y物质。
答案:C3.下列方法可以鉴定出分解尿素的细菌的是()A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析:分解尿素的细菌能分解尿素,产生氨,氨能使pH升高,酚红指示剂变红。
答案:A4.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)()A.2.34×108B.2.34×109C.234D.23.4解析:根据计算方法“每克样品中的菌落数=(C÷V)×M”,则(234÷0.1)×106=2.34×109。
答案:B5.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()A.微生物培养前,需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法而一般不用活菌计数;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30~300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源。
答案:A6.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应时,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天,结果如图所示。
从实验结果分析,下列叙述不正确的是()A.链霉素能阻止结核菌的生长B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒解析:由图可知,链霉素对伤寒菌没有抑制作用,因此不能用于治疗伤寒。
答案:D7.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。
原因是()A.平板上的一个菌落就是一个细菌B.菌落中的细菌数是固定的C.此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D.此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同解析:用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌,但偶尔也能来自两个或多个细菌,所以此方法统计的菌落数可能比活菌的实际数偏小。
答案:C8.统计菌落数目的方法有()①稀释涂布平板法②重量法③直接计数法④比浊法⑤生理指标法⑥膜过滤法A.①②③⑥B.③④⑤⑥C.①D.①③解析:各种方法均可反映细菌数目的多少,但能形成菌落的只有稀释涂布平板法。
答案:C9.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是()A.涂布了一个平板,统计的菌落数是230B.涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238C.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163D.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233解析:在设计实验时,一定要涂布至少3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以A、B两项不正确。
C项虽涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另两个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,此时,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。
答案:D10.下列关于微生物培养和利用的叙述,不正确的是()A.利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D.用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少解析:稀释涂布平板法既可以分离微生物,同时也可以对微生物进行计数。
答案:A11.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的()A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104,105,106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 hD.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析:在细菌计数时,为保证结果准确,一般选择菌落数目在30~300的平板进行计数。
答案:D12.幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。
在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。
实验基本步骤如下:(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有,它能以尿素为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现色环带。
(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是灭菌。
A.高压蒸汽B.紫外灯照射C.70%酒精浸泡D.过滤(3)步骤X表示。
在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液到培养基平面上。
菌液稀释的目的是获得菌落。
(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在中。
(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的分解为NH3和14CO2。
解析:(1)幽门螺杆菌含有脲酶,能分解尿素为菌体提供氮源,因此在配制培养基时要加入尿素;加入酚红指示剂的目的是检验是否有Hp存在,若有Hp存在,它会分解尿素,培养基pH会升高,酚红指示剂将变红。
(2)由于尿素在高温下会分解,所以对尿素溶液的灭菌要采用G6玻璃漏斗过滤的方法。
(3)在实验操作过程中要先灭菌、倒平板,再进行接种。
接种时先将菌液稀释,以获得单菌落,再涂布到培养基平面上。
(4)培养时需将培养皿倒置并放在恒温箱中培养,倒置培养的目的也是获得单一菌落。
(5)如果人体感染了Hp,能将尿素分解为NH3和CO2,因而标记尿素中的C,可通过呼吸产物CO2来判断是否感染Hp。
答案:(1)脲酶红(2)D(3)接种涂布单(4)恒温培养箱(5)尿素13.为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。
培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。
请分析回答下面的问题。
(1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理。
(2)培养基中加入尿素的目的是筛选,这种培养基属于培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和,实验中需要振荡培养,目的是。
(4)转为固体培养基时,常采用接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行处理后,才能倒掉。
解析:尿素是培养基中的唯一氮源,因此原则上只有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长。
由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH升高,故在以尿素为唯一氮源的培养基中加入的酚红指示剂将变成红色;这种培养基属于选择培养基,可筛选目的菌。
目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的尿素和葡萄糖。
振荡培养的目的是提供氧气。
固体培养基培养时的接种方法常用稀释涂布平板法或平板划线法。
倒掉培养基之前应对其进行灭菌处理。
答案:(1)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH升高,使酚红指示剂变为红色(2)目的菌选择(3)尿素葡萄糖为目的菌提供氧气(4)稀释涂布平板法(或平板划线法)(5)灭菌14.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。
某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。
请回答下列问题。
(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入作为碳源,②中不同浓度碳源的培养基(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要测定②中活细菌数量,常采用法。
(2)④为对照,微生物在④中不生长,在⑤中生长,④与⑤培养基的主要区别在于;使用法可以在⑥上获得单菌落。
采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是。
(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染?。
解析:根据微生物对营养的需求,在培养基中加入或不加某些物质以达到促进目的菌生长,抑制或阻止其他杂菌生长的目的,然后再用稀释涂布平板法、平板划线法或其他方法筛选出单个目的菌落,再接种培养即可获得纯目的菌。
为防止培养基中水分蒸发形成的水珠落入培养基中影响菌体生长,要将培养皿倒置。
在设计实验中要注意单一变量原则和对照原则,操作中要严格进行无菌操作。
答案:(1)苯酚A稀释涂布平板(2)④的培养基没有加入苯酚作为碳源,⑤的培养基加入苯酚作为碳源稀释涂布平板(或平板划线)防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基(3)培养基灭菌,接种环灭菌,接种过程无菌操作。